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骨髓间充质干细胞经蛛网膜下腔移植治疗大鼠脊髓损伤及其对T细胞亚群影响的研究

吴佳奇;冯大雄;杨天府;刘洋

关键词:脊髓损伤, 骨髓间充质干细胞, 蛛网膜下腔移植, T细胞亚群, 大鼠
摘要:目的 将异体骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)移植至脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠蛛网膜下腔,探讨其治疗效果以及对T细胞亚群的影响.方法 取6周龄SD大鼠10只,采用密度梯度离心法进行细胞分离及培养,传至第6代后收集细胞.雌性8周龄SD大鼠60只,采用重物打击法制备SCI模型,从BBB后肢功能评分为0的存活大鼠随机取40只分为两组,每组20只.实验组(A组):经蛛网膜下腔注入经BrdU标记的细胞浓度为2×106/ml的MSCs细胞悬液1 ml;对照组(B组):注入等量L-DMEM.另取20只正常雌性8周龄SD大鼠作为空白组(C组).于第1、2和3周行BBB后肢功能评分,并采外周血经流式细胞仪检测T细胞亚群;第3周时,A、B组大鼠取损伤处脊髓,行组织切片观察.结果 A组BBB后肢功能评分第3周优于B组,但仍低于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)CD4+T细胞在第1、2和3周均较B、C组少,CD8+T细胞在第2、3周较B、C组少,CD4+/CD8+T细胞比值在第1周较B、C组少,上述差异均有统计学意义(P<0.05);但CD4+/CD8+T细胞比值在第2、3周与B、C组比较差异无统计学意义(P>0.05).组织学观察,A组第3周脊髓损伤处空泡缩小,有组织长入,较B组有轻微改善,但未明确见到BrdU阳性标记的MSCs.结论 MSCs经蛛网膜下腔移植对SCI有一定治疗作用,且在一定时间内不引起机体排斥反应,在第1周对T细胞亚群的抑制更为明显,为临床利用MSCs治疗SCI及其他疾病提供了免疫学实验依据.
中国修复重建外科杂志相关文献
  • 自发性硬脊膜外血肿的临床特点及预后影响因素分析

    目的 探讨自发性硬脊膜外血肿(spontaneous spinal epidural hematoma,SSEH)的临床特点以及预后影响因素.方法 1998年9月~2006年10月,收治SSEH患者23例.男10例,女13例;年龄10~69岁.神经功能障碍按ASIA分级:A级7例,B级2例,C级4例,D级9例,E级1例.发病至出现明显神经功能障碍时间:<12 h 12例,12~24 h 2例,24~48 h 3例,>48 h 6例.均经MRI检查或病理学检查确诊.17例采用手术治疗,6例采用以甲基强的松龙(80~100 mg/d)为主的非手术治疗.回顾患者病史、实验室检查、放射学诊断、病理学检查结果及治疗方法,分析以上因素对患者预后的影响.结果 23例随访3个月,恶化1例,无进展8例,改善9例,痊愈5例.性别对预后影响无统计学意义(P>0.05);病程进展越快,血肿所覆盖的脊髓节段越多,患者的预后越差(P<0.05);神经损害越轻,预后越好(P<0.01).手术治疗17例中,预后评分为1分1例,2分5例,3分6例,4分5例;手术前时间与预后的相关系数为0.056(P>0.05).非手术治疗6例中,预后评分2分及3分各3例.结论 SSEH是一种罕见疾病,其预后受患者神经功能状态、病程进展时间、脊髓是否合并水肿及硬膜外血肿体积等因素影响.此病以手术治疗为主,且宜早期进行,防止脊髓功能进一步恶化.非手术治疗只适用于脊髓功能在早期恢复的患者.

    作者:刘展;焦庆芳;王翔;李三中;游潮 刊期: 2007年第05期

  • 人胶质源性神经生长因子真核表达载体构建及在大鼠脊髓组织中的表达

    目的 探索人胶质源性神经生长因子(human glial derived neurotrophic factor,hGDNF)真核表达载体,体内直接转染SD大鼠脊髓组织治疗急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的可能性.方法 基因重组和限制性内切酶酶切构建真核表达载体pcDNA3-hGDNF,经脂质体DOTAP介导质粒转染SD大鼠脊髓组织,作为实验组;对照组大鼠直接注射空载体脂质体混合物.14 d后取材,RT-PCR及Western blot检测hGDNF mRNA及蛋白表达.结果 重组真核表达载体pcDNA3-hGDNF经限制性内切酶Hind Ⅲ和Xba-Ⅰ酶切后,电泳显示400 bp hGDNF目的片段和5 400 bp pcDNA3载体片段.转染大鼠脊髓组织后14 d,RT-PCR检测出目的基因mRNA,Western blot检测出hGDNF的蛋白表达.结论 构建的真核表达载体pcDNA3-hGDNF能在转染的大鼠脊髓组织中表达,可为基因治疗修复急性SCI奠定基础.

    作者:李琦;曾炳芳;徐建广;孔维清 刊期: 2007年第05期

  • 胚胎干细胞移植修复脊髓损伤的实验研究

    目的 观察胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)诱导的神经前体细胞移植,对小鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响.方法 取由上海市发育生物学重点实验室提供的ES进行细胞培养和体外诱导,收集ES衍生细胞.并进行RT-PCR检测.将50只C57/BL6J小鼠制备为T9、10脊髓半横断模型,将存活的28只小鼠随机分为三组.假手术组(A组):9只,未作任何处理;手术/细胞组(B组):10只,于距损伤区域以远约1 cm的椎管内注射2~3 μl制备的ES衍生细胞,总细胞数为9×105个;手术/DMEM组(C组):9只,按B组方法注射2~3 μl DMEM.术后1、2、4、6和8周采用BBB后肢功能评分观察小鼠神经功能恢复情况,取损伤脊髓进行X-gal染色和免疫组织化学染色观察.结果 ES经体外诱导培养,呈圆形或椭圆形小集落生长,有1个或多个核仁.RT-PCR检测,ES细胞诱导后表达巢蛋白及微管相关蛋白,但未表达胶质纤维酸性蛋白.小鼠实验,BBB后肢功能评分显示术后各时间点A组与B、C组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).B组与C组比较,1、2和4周时,差异有统计学意义(P<0.01);6、8周时,组间差异无统计学意义(P>0.05).X-gal染色观察,B组呈阳性染色,A、C组均为阴性.免疫组织化学染色观察,B组在损伤脊髓部位,表达兔抗神经微丝蛋白,未表达胶质纤维酸性蛋白.结论 将ES培养诱导分化为神经前体细胞移植后,能够存活、迁移,并分化为神经元,但未明显改善神经功能.

    作者:杨建华;李长德;翟饶生;王裕 刊期: 2007年第05期

  • 肝细胞生长因子对移植小肠通透性及细菌易位的作用

    目的 探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对移植小肠通透性及细菌易位的作用.方法 以Wistar大鼠20只为受体,SD大鼠20只为供体行异位全小肠移植,并以环孢素A(6 mg/kg·d)肌注抑制排斥反应.HGF组(n=10)用微量输液泵持续均匀输入HGF(150 μg/kg·d),对照组(n=10)输入等量生理盐水,随机选取同批正常Wistar大鼠作为正常基准(n=10).第7天两组实验动物均分别以乳果糖/甘露醇液2 ml(含乳果糖100 mg、甘露醇50 mg)行移植小肠灌注,采集24 h尿液检测乳果糖、甘露醇含量及乳果糖/甘露醇比值;第8天采集移植小肠肠系膜淋巴结及门静脉血行细菌培养,小肠组织学观察.结果 对照组尿液中乳果糖含量为0.093 1%±0.008 5%,乳果糖/甘露醇比值为0.132±0.021,与正常基准0.015 0%±0.002 0%和0.020±0.005比较,差异均有统计学意义(P<0.05);HGF组乳果糖含量为0.039 6%±0.009 0%,乳果糖/甘露醇比值为0.056±0.013,与正常基准比较差异均有统计学意义(P<0.05),且低于对照组(P<0.05).HGF组移植小肠肠系膜淋巴结细菌阳性率为10%,对照组为60%,差异有统计学意义(P<0.05).HGF组门静脉血细菌阳性率为10%,对照组为20%,差异无统计学意义(P>0.05).两组移植小肠组织学观察仅见少量炎性细胞浸润.结论 HGF能够降低同种移植小肠的通透性及细菌易位率,改善小肠黏膜屏障功能.

    作者:李可洲;李宁;黎介寿;鲍扬;李幼生 刊期: 2007年第05期

  • 骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究现状

    目的 综述有关骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗脊髓损伤(spinal cordinjury,SCI)的新进展.方法 广泛查阅近年来国内外相关文献,对MSCs生物学特性、移植治疗SCI的实验研究、移行机制、治疗机制和存在的问题进行讨论和分析.结果 动物实验和临床研究表明,MSCs移植治疗SCI已有很大进展,移植治疗后,移植细胞能向损伤部位移行,并能分化为神经样细胞和分泌神经营养物质,具有促进损伤脊髓修复和神经功能恢复的作用,但也存在许多问题.结论 MSCs移植治疗SCI是一种行之有效的方法,但仍有许多问题有待解决.

    作者:陈少强;林建华 刊期: 2007年第05期

  • 细胞治疗对脊髓前角运动神经元保护作用的实验研究

    目的 研究注射不同的异体细胞于大鼠失神经靶肌肉对脊髓前角运动神经元的保护作用.方法 雌性6周龄SD大鼠36只,体重120~150 g;随机分为四组,每组9只.无菌条件下切断左侧坐骨神经,一期神经外膜缝合.术后即于小腿三头肌处注射相应细胞,7 d注射1次,共4次.A组注射1×106/ml单纯雪旺细胞1 ml、B组注射1×106/ml雪旺细胞加成肌细胞1 ml(雪旺细胞∶成肌细胞为1∶1)、C组注射1×106/ml混合细胞提取液1 ml(雪旺细胞∶成肌细胞∶肾内皮细胞为1∶1∶1)、D组无血清培养液1 ml作对照.术后3个月进行脊髓前角运动神经元内C-Jun表达及酶组织化学观察.结果 术后3个月,A、B及C组的C-Jun阳性表达脊髓前角运动神经元的形态均较D组好,神经元数目明显多于D组.各组脊髓前角运动神经元内C-Jun活性表达:A组128.591±0.766,B组116.729±0.778,C组100.071±2.017,D组144.648±2.083;D组与A、B及C组比较,差异有统计学意义(P<0.01);A、B组间及B、C组间比较,差异均有统计学意义(P<0.01).脊髓前角运动神经元内酶组织化学观察:A、B及C组神经元胞体轮廓清楚,胞体饱满,D组神经元胞体轮廓模糊,胞浆和细胞核界限不清晰.各组脊髓前角运动神经元酶活性比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 雪旺细胞、雪旺细胞加成肌细胞、混合细胞提取液均有保护脊髓前角运动神经元的作用,混合细胞提取液优于雪旺细胞及雪旺细胞加成肌细胞.

    作者:刘明辉;杨志明;唐洁;金连宏;贾继峰;李秀群 刊期: 2007年第05期

  • 皮神经营养血管皮瓣的临床运用

    目的 探讨吻合神经的手背皮神经营养血管皮瓣的临床应用疗效.方法 2003年1月~2006年3月,采用拇指桡侧、尺侧、虎口背侧支皮神经营养逆行岛状皮瓣修复拇指末节创面39例.男28例,女11例;年龄16~53岁.冲压伤11例,电锯伤23例,切割伤5例.皮瓣切取范围3.3 cm×2.6 cm~5.6 cm×3.5 cm.术后予石膏制动、抗凝、解痉、预防感染等处理,2周后拆石膏行功能锻炼.结果 术后患者获随访6~12个月,平均9个月.根据赵书强手功能评定标准改进标准进行临床疗效评定,优31例(79.5%),皮瓣成活,两点辨别觉4~7 mm,对掌、对指功能恢复正常;良7例(17.9%),皮瓣远端皮肤边缘性坏死,两点辨别觉5~9 mm,对掌、对指功能恢复接近正常;差1例(2.6%),皮瓣坏死,改行腹股沟皮瓣修复.结论 该皮瓣手术切取成活率较高,术后外观及功能恢复优良,是修复拇指末节创面的一种有效方法.

    作者:陈佳;龙兴敬;王国寿;赵万正;周茂;尹烈;周围 刊期: 2007年第05期

  • 间充质干细胞移植治疗椎间盘退变疾病的研究进展

    目的 综述间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗椎间盘退变疾病的研究现状.方法 查阅近年来有关MSCs移植治疗椎间盘退变疾病的国内外相关文献,进行回顾及综合分析.结果 椎间盘移植MSCs在一定的条件下能表达类软骨细胞表型,增加基质合成,缓解椎间盘退变.结论 MSCs移植治疗椎间盘退变疾病是一种很有前途的方法.

    作者:梁涛;刘浩 刊期: 2007年第05期

  • 腓肠神经营养血管逆行岛状筋膜皮瓣修复儿童足踝部软组织缺损

    目的 探讨应用腓肠神经营养血管逆行岛状筋膜皮瓣修复儿童足踝部软组织缺损的临床效果.方法 2001年3月~2004年10月,采用腓肠神经营养血管逆行岛状筋膜皮瓣修复16例儿童足踝部软组织缺损.男11例,女5例.年龄6~12岁.软组织缺损部位:足跟部6例,外踝部5例,内踝部4例,足跟合并内踝部1例.皮瓣切取范围6 cm×4 cm~9 cm×5 cm.结果 术后15例皮瓣全部成活,1例出现远端皮瓣部分坏死,经换药植皮治愈.16例获随访6个月~3年6个月.皮瓣外观、血运、弹性良好,无溃疡或磨损,踝关节活动良好,未影响下肢生长发育.其中10例皮肤感觉有不同程度恢复,两点辨别觉5~12 mm.结论 腓肠神经营养血管逆行岛状筋膜皮瓣解剖恒定,成活率高,简便易行,是修复儿童足踝部软组织缺损的一种理想皮瓣.

    作者:程安源;田小运;李瑞平;牛志强 刊期: 2007年第05期

  • 生物医学期刊的统计学方法应用情况分析

    目的 了解统计学方法在医学文献中的正确使用情况.方法 选取8种医学期刊1998年~2005年发表的544篇论著进行统计学方法应用情况分析.结果 136篇论著中有明显的统计学错误,错误率为25.00%.主要错误类型及构成依次为:资料处理方法不当占61.76%,图表错误占14.71%,未作统计学处理占8.82%,率、比混淆占8.82%,其他错误占5.88%.结论 统计学方法的正确应用应引起高度重视,在审稿过程中,稿件除应送同行专家审阅外,同时还应建立统计学家审阅制度.

    作者:沈进;苟莉;汤洁;张谦;余琳;俞军 刊期: 2007年第05期

  • 大鼠脊髓圆锥损伤后膀胱逼尿肌及其神经肌肉接头形态学变化的研究

    目的 初步探讨大鼠脊髓圆锥损伤后膀胱逼尿肌及其神经肌肉接头(neuromuscular junction,NMJ)组织形态学的变化规律.方法 成年SD大鼠48只随机分为六组,每组8只.分别为正常对照组,脊髓圆锥损伤术后4、6、8、10及12周组,依次记作A~F组.采用L4、5平面锐性横断性脊髓圆锥损伤的动物模型.分别于术后相应时间点取材,先作膀胱逼尿肌HE染色,以观测肌纤维截面积的变化规律;同时制作电镜标本,观察膀胱逼尿肌及其NMJ超微结构的变化规律;后将逼尿肌行Masson三色染色,计算平滑肌及结缔组织所占的百分比.结果 HE染色观察,大鼠逼尿肌肌纤维截面积在E、F组与A组间差异有统计学意义(P<0.05);透射电镜观察,B~F组逼尿肌细胞外形、大小不一致,分布不均匀,排列走行紊乱;间质中大量排列紊乱的胶原纤维,粗面内质网明显扩张,线粒体水肿,且程度逐渐加重.逼尿肌NMJ透射电镜观察,B、C及D组可见其形态结构类似于A组,但线粒体及突触小泡的数量略少;E组可见明显退变的NMJ,突触小泡含量明显减少,伴有线粒体等细胞器减少;F组NMJ进一步退变,突触小泡含量进一步减少甚至缺如,细胞器减少或消失,并可见退变小体.Masson三色染色可见逼尿肌中结缔组织所占的比例在E、F组与A组间差异有统计学意义(P<0.05);且E、F组间差异亦有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠圆锥脊髓损伤术后10周可作为逼尿肌及其NMJ发生变化的时间节点,神经修复手术宜在此前完成.

    作者:侯春林;郑宪友;陈爱民;张伟;钟贵彬;徐镇;王剑火 刊期: 2007年第05期

  • 成骨细胞参与骨髓造血微环境的构建及发挥调控作用

    目的 对成骨细胞参与骨髓造血微环境的构建并在其中发挥调控作用的研究进展进行综述.方法 广泛查阅近年国内外相关文献,对成骨细胞作为骨髓造血微环境的主要成分、对破骨细胞、造血干细胞细胞周期和相关黏附因子,以及细胞因子的调控研究进展进行回顾性总结与分析.结果 成骨细胞是成熟个体中骨髓造血微环境的关键构成成分.成骨细胞通过细胞受体-配体的信号传导、细胞因子、细胞黏附及对其他参与构建骨髓造血微环境中的细胞的调控作用,将原始造血干细胞维持在静止状态,保持了其自我更新,多向分化的干细胞特性.结论 对成骨细胞与骨髓造血微环境相互作用的进一步研究,为造血干细胞的临床移植应用提供了更好的理论基础.

    作者:智伟;邓力;杨志明;李训虎;李次会 刊期: 2007年第05期

  • 气管假体重建气道的研究进展

    目的 对气管假体的基础与临床应用研究进展进行综述.方法 广泛查阅近年国内外气管假体方面的文献,并对其目前的研究成果进行回顾与综合分析.结果 气管病变可以手术切除并实施原位重建,但存在长度的限制,对病变段气管实施假体置换不失为一种有效可行的方法.结论 组织工程气管、气管移植及新型材料人工气管在内的新技术的出现,为气管外科的发展开辟了新的途径,极大推动了这一领域的发展.

    作者:徐洪;史宏灿;陈慧敏 刊期: 2007年第05期

  • 骨髓间充质干细胞经蛛网膜下腔移植治疗大鼠脊髓损伤及其对T细胞亚群影响的研究

    目的 将异体骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)移植至脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠蛛网膜下腔,探讨其治疗效果以及对T细胞亚群的影响.方法 取6周龄SD大鼠10只,采用密度梯度离心法进行细胞分离及培养,传至第6代后收集细胞.雌性8周龄SD大鼠60只,采用重物打击法制备SCI模型,从BBB后肢功能评分为0的存活大鼠随机取40只分为两组,每组20只.实验组(A组):经蛛网膜下腔注入经BrdU标记的细胞浓度为2×106/ml的MSCs细胞悬液1 ml;对照组(B组):注入等量L-DMEM.另取20只正常雌性8周龄SD大鼠作为空白组(C组).于第1、2和3周行BBB后肢功能评分,并采外周血经流式细胞仪检测T细胞亚群;第3周时,A、B组大鼠取损伤处脊髓,行组织切片观察.结果 A组BBB后肢功能评分第3周优于B组,但仍低于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)CD4+T细胞在第1、2和3周均较B、C组少,CD8+T细胞在第2、3周较B、C组少,CD4+/CD8+T细胞比值在第1周较B、C组少,上述差异均有统计学意义(P<0.05);但CD4+/CD8+T细胞比值在第2、3周与B、C组比较差异无统计学意义(P>0.05).组织学观察,A组第3周脊髓损伤处空泡缩小,有组织长入,较B组有轻微改善,但未明确见到BrdU阳性标记的MSCs.结论 MSCs经蛛网膜下腔移植对SCI有一定治疗作用,且在一定时间内不引起机体排斥反应,在第1周对T细胞亚群的抑制更为明显,为临床利用MSCs治疗SCI及其他疾病提供了免疫学实验依据.

    作者:吴佳奇;冯大雄;杨天府;刘洋 刊期: 2007年第05期

  • 重建后方韧带复合体的颈椎单开门桥式植骨椎板成形术对术后轴性症状和颈椎曲度的影响

    目的 观察评价重建后方韧带复合体的颈椎单开门桥式植骨椎板成形术,在降低术后轴性症状发生和减少颈椎曲度丢失中的作用.方法 2000年6月~2005年10月,对138例脊髓型颈椎病患者行重建后方韧带复合体的颈椎单开门桥式植骨椎板成形术.选取其中2003年10月前78例行此手术且随访资料完整患者(改良单开门,A组),与同期69例行常规单开门手术的患者(传统单开门,B组)进行对比分析.记录手术时间、术中出血量、轴性症状及JOA评分,根据X线片计算颈椎总活动度(ranges of motion,ROM)和颈椎曲度指数. 结果 A组患者均获随访24~44个月,平均33个月.B组患者均获随访24~53个月,平均35个月.手术时间:A组114±20 min,B组70±25 min,差异有统计学意义(P<0.05);术中出血量:A组280±72 ml,B组210±80 ml(P>0.05);JOA评分:A组恢复率为67.0%±17.3%,B组为65.0%±21.4%(P>0.05);A组9例(12%)、B组35例(51%)术后发生轴性症状或加重,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).A组术后ROM为术前的88.0%±10.1%,B组为术前的64.0%±16.3%(P<0.05);A组曲度指数术前15.3±8.2,术后13.5±9.3,差异无统计学意义(P>0.05);B组术前17.2±13.5,术后11.1±5.7,差异有统计学意义(P<0.05).结论 重建后方韧带复合体的颈椎单开门桥式植骨椎板成形术,可大限度保留并重建颈椎后方结构,有利于早期功能锻炼,减少轴性症状的发生和颈椎曲度的丢失,提高了后路手术对颈椎病的治疗效果.

    作者:李雷;王欢;崔少千;李建军;段景柱;金国鑫 刊期: 2007年第05期

  • 动力髋螺钉结合拉力螺钉治疗股骨转子间骨折

    目的 探讨动力髋螺钉(dynamic hip screw,DHS)结合拉力螺钉治疗股骨转子间骨折的疗效.方法 1996年4月~2005年5月,采用DHS结合拉力螺钉治疗股骨转子间骨折78例.其中男42例,女36例;年龄30~90岁,平均65岁.骨折按Tronzo-Evans分类:Ⅰ型2例,Ⅱ型51例,Ⅲ型16例,Ⅳ型6例,Ⅴ型3例.伤后3~12 d行手术.结果 术后患者切口均Ⅰ期愈合.72例获随访6个月~4年,平均2年.X线片检查示骨折断端对位对线良好,8~14个月骨折线消失,骨折愈合.根据黄公怡疗效评定标准,优29例,良36例,可6例,差1例,优良率90.2%.结论 DHS结合拉力螺钉治疗股骨转子间骨折具有固定确切、抗旋转等优点,是一种治疗股骨转子间骨折的有效方法.

    作者:周旭军;曹盛俊;廖瑛;宁建君 刊期: 2007年第05期

  • 基质金属蛋白酶组织抑制因子3基因转染血管平滑肌细胞移植对急性心肌梗死后早期心肌重塑的影响

    目的 研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor-3 of matrix metalloproteinases,TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后早期心脏结构变化的影响,并探讨其可能的机制.方法 取Wistar大鼠胸主动脉采用组织块贴壁法培养VSMCs.另取61只Wistar雌性大鼠建立左冠状动脉远端结扎的AMI动物模型,将存活的54只大鼠模型随机分为三组,每组18只.于冠状动脉结扎后立即向缺血部心室壁内注射含有1×106个TIMP-3基因转染VSMCs(A组)、1×106个VSMCs(B组)或不含细胞的PBS液(C组)各0.5 ml.术后1周,进行心脏形态学检测观察大鼠心脏结构变化,免疫组织化学染色验证TIMP-3基因转染VSMCs在缺血心肌中的存活情况,Western blot法测定大鼠缺血心肌TIMP-3蛋白和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)蛋白的含量. 结果成功分离、培养VSMCs,纯度达98%,TIMP-3基因成功转入VSMCs中.术后1周,A组大鼠梗死心肌面积占左室游离壁面积的百分比为28.73%±1.56%,小于B组39.63%±1.84%和C组46.32%±2.16%(P<0.01);B组小于C组(P<0.01).A组大鼠左室容积指数为5.27±0.21 mm3/g,小于B组6.69±0.34 mm3/g和C组9.67±0.88 mm3/g(P<0.01);B组小于C组(P<0.01).免疫组织化学染色见TIMP-3基因转染VSMCs被成功植入缺血心肌并在其中存活.Western blot法示A组大鼠缺血心肌TIMP-3蛋白含量为300 704.8±3 692.8,高于B、C组的195 548.8±3 014.2及177 991.1±2 502.1(P<0.01);B组高于C组(P<0.01).A组MMP-9蛋白含量为594 827.4±5 708.5,低于B、C组的921 461.4±8 887.4及1 044 445.0±8 788.6(P<0.01);B组低于C组(P<0.01). 结论将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制AMI后早期心肌重塑.

    作者:贾智博;田海;刘开宇;孙露;蒋树林;李仁科 刊期: 2007年第05期

  • 胶原膜联合自体骨髓基质细胞及富血小板血浆修复牙槽骨缺损的实验研究

    目的 初步探讨胶原膜与骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)、富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)复合后修复牙槽骨缺损的应用潜能.方法 将犬BMSCs与BME-10X(R)胶原膜复合培养.取3只雄性杂种犬,拔除双侧上下颌第1、2前磨牙,保留唇舌侧牙槽嵴,制备一近远中向15 mm×5 mm,冠根向8 mm的骨内缺损,随机分为四组.A组(空白对照组):直接缝合牙龈;B组:缺损区上覆盖Bio-Gide(R)胶原膜;C组:缺损区植入BMSCs胶原膜复合物后覆盖Bio-Gide(R)胶原膜;D组:缺损区注入PRP,覆盖Bio-Gide(R)胶原膜.分别于术后4、8、12周进行大体、X线片和组织学观察.结果 BMSCs与胶原膜复合培养1 d,细胞近似圆形或短梭形,3 d左右可见多数细胞有突起,呈多边形及长梭形.大体观察:术后4周A组见骨缺损中央有明显凹陷,骨缺损区内见明显血肿机化物;B、C及D组骨缺损区主要为新生骨样组织充填,间杂少量血肿机化物.8周A组见骨缺损区凹陷基本长平,骨缺损顶部为纤维组织,血肿机化物被新生骨组织所取代;B、C及D组膜边缘破裂,与深面组织稍粘连,针头均不能刺入骨缺损表面.12周各组骨缺损区凹陷完全长平,A组牙槽嵴顶部纤维组织较其他组厚.X线片观察:各组骨质均长满骨缺损区;A、B、C及D组灰度值,4周分别为68、50、56及49,8周时为46、30、24及30,12周时为24、17、15及20.组织学观察:术后4周,A组缺损区可见大量纤维结缔组织及及新生血管形成的肉芽组织,未见明显新骨生成;B、C及D组膜的胶原结构均存在,其内侧面有新骨生成.8周A组缺损区新生骨小梁呈团灶状、网状;B、C及D组膜的胶原结构不完整,多个骨岛和少量纤维结缔组织连接整个骨缺损区.12周各组骨缺损区均被新生骨充填. 结论使用胶原膜引导骨再生(guided bone regeneration,GBR)技术可促进牙槽骨缺损区成骨,将骨修复时间缩短为8周,但单独应用GBR的成骨作用与胶原膜复合BMSCs或PRP的成骨作用差异不明显,提示二者与GBR的联合应用还有待进一步研究.

    作者:陈江;杨进;黄文秀;赵欣;闫福华 刊期: 2007年第05期

  • 骨盆骨折及股骨颈骨折合并股骨头盆腔内脱位一例

    目的 总结骨盆骨折、股骨颈骨折合并股骨头盆腔内脱位的临床特点及治疗方法.方法 患者,男,29岁.髋部压砸伤致骨盆骨折、右股骨颈骨折合并股骨头盆腔内脱位,髋臼骨折Letournel分型C型,骨盆骨折Tile分型C1.2型,股骨颈骨折Garden Ⅳ型.伤后7 d行切开复位内固定术,3枚空心钛钉固定股骨颈骨折,重建钛板固定骨盆骨折.结果 术后3个月X线片示左侧髂骨、双侧耻骨支坐骨支骨折愈合.术后随访1年右股骨颈已部分愈合,无股骨头坏死征象.按照美国矫形外科研究院髋关节疗效评定标准,功能恢复良.结论 骨盆骨折、股骨颈骨折合并股骨头盆腔内脱位为少见而严重的高能量损伤,手术治疗是稳定骨折、恢复关节功能的一种有效方法.

    作者:郝东升;尹芸生;李栋;刘巍;苏钟毅;武春文;王彰勇;王廷勇 刊期: 2007年第05期

  • 瘤椎全切与重建治疗胸腰椎肿瘤伴神经功能障碍

    目的 探讨瘤椎全切与重建,治疗胸腰椎肿瘤伴神经功能障碍的手术适应证及临床疗效.方法 1999年1月~2005年12月收治胸腰椎肿瘤伴神经功能障碍16例.男10例,女6例;年龄16~62岁,平均31.5岁.原发肿瘤10例,其中骨巨细胞瘤4例,软骨肉瘤3例,动脉瘤样骨囊肿术后复发2例,骨肉瘤1例;转移瘤6例.肿瘤侵犯T53例,T6、T6.7、T9、T11、L2、L4及L5各1例,T8、L1及L3各2例.Tomita外科分型:4型9例,5型6例,6型1例.Frankel神经功能分级:A级1例,B级4例,C级7例,D级4例.采用前后路联合手术,行瘤椎彻底切除,椎管减压,植骨重建.术后根据肿瘤病理类型行相应的辅助治疗.结果 术后16例获随访10~63个月,平均27.5个月.患者疼痛均完全缓解,术后神经功能恢复至D级5例(其中1例术前为A级),E级11例.10例原发肿瘤中,1例骨肉瘤术后18个月双肺转移死亡,余9例均无瘤生存.6例转移瘤中,2例全身转移死亡,1例术后10个月肺部带瘤无症状生存,3例均无瘤生存.16例随访期内手术部位均无肿瘤复发.结论 瘤椎全切与重建是治疗胸腰椎肿瘤伴神经功能障碍的一种安全有效的手术方法,可缓解疼痛,改善神经功能,减少肿瘤局部复发.手术适用于胸腰椎原发恶性肿瘤,有复发倾向的侵袭性肿瘤及Tomita外科分型为3~5型的胸腰椎单发转移瘤.

    作者:曾建成;刘浩;宋跃明;龚全;李涛;刘立岷;屠重棋;胡云洲;裴福兴 刊期: 2007年第05期

中国修复重建外科杂志

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主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会

主办:中国康复医学会,四川大学