学术投稿

NEP1-40基因克隆及蛋白的原核表达和纯化

宫福良;王坤正;余鹏博;党晓谦;王春生;时志斌;杨佩

关键词:基因克隆, NEP1-40, 蛋白表达, 脊髓损伤
摘要:目的通过基因工程手段从大鼠脊髓中获取Nogo-66、NEP1-40基因并实现其蛋白的体外表达. 方法从幼年大鼠的脊髓组织中,通过RT-PCR技术获得Nogo-66、 NEP1-40基因,将目的基因通过基因连接反应与T载体连接,重组质粒进行基因序列测序,构建PQE30-GST和目的基因的高表达质粒,异丙基-β-D-硫代半乳糖(isopropylthiogalactoside,IPTG)诱导表达,Ni柱纯化,Western-blot法检测纯化的目的蛋白. 结果成功获得大鼠Nogo-66、 NEP1-40基因,加上两端的酶切位点和保护性碱基,大小分别为215 bp和137 bp.序列测序显示基因突变率为0,表达质粒构建双酶切(BamH Ⅰ和Hind Ⅲ)可见目的基因的条带,经IPTG诱导表达,获得带GST标签的融合蛋白Nogo-66和NEP1-40,相对分子质量分别为33.2×103和30.3×103.蛋白纯化结果理想,经Western-blot分析证实抗原性正确.结论 Nogo-66、NEP1-40蛋白可通过基因工程手段获得体外高效表达,这将对其功能的研究及脊髓损伤疫苗的研究提供基础.
中国修复重建外科杂志相关文献
  • 带血管髂骨瓣游离移植修复跖骨及周围软组织缺损

    目的探讨应用髂骨瓣游离移植修复跖骨及其周围软组织缺损的临床效果. 方法 1999年10月~2003年12月,采用带血管髂骨游离移植修复4例跖骨与软组织缺损.患者均为男性,年龄26~47岁,受伤至手术时间1~5个月.其中跖骨、跗骨胫侧皮肤缺损及第1跖骨感染外露3例,均为非负重区;足背瘢痕畸形愈合、跖骨跗骨缺损1例.骨缺损长度4~7 cm,皮肤缺损范围5 cm×3 cm~9 cm×5 cm.手术取髂骨瓣5.0 cm×2.5 cm~9.0 cm×2.5 cm. 结果术后1周,皮片全部成活3例,大部分成活1例,但移植骨瓣亦成活;术后1个月X线片示髂骨瓣与受区断端间有少量骨痂形成;4个月拔除克氏针.获随访5~24个月.局部无溃疡, 行走和负重良好, 外形及功能满意. 结论带血管髂骨游离移植修复术一次手术即可使跖骨及周围组织达到满意的解剖塑形及良好功能.

    作者:吴克俭;张伟佳;侯树勋;郑小勇;李威 刊期: 2006年第01期

  • 手感探路法在腰椎滑脱椎弓根植钉中的应用

    在腰椎滑脱的治疗上,椎弓根内固定系统能同时复位与稳定滑脱椎体,矫正脊柱矢状位对线,而准确植入椎弓根螺钉是手术成功的关键.由于腰椎滑脱骨结构的改变,易导致椎弓根螺钉植入点和植入角度的错误.2002年9月~2003年10月,我科对22例腰椎滑脱患者采用手感探路法植入椎弓根螺钉120枚,效果良好.报告如下.

    作者:顾晓晖;杨惠林;唐天驷;洪天禄;陈亮;张志明;刘凌 刊期: 2006年第01期

  • 逆行腓肠神经营养血管岛状皮瓣感觉重建的解剖研究

    目的研究应用股后皮神经主干重建逆行腓肠神经营养血管岛状皮瓣感觉功能的解剖学依据. 方法 30只成人尸体下肢标本,4%甲醛固定,手术放大镜下解剖股后皮神经主干于小腿后部的分布、分支及其与小隐静脉的关系,记录直径0.1 mm以上的神经分支,测量其长度及直径. 结果在小腿后窝处,股后皮神经主干下行进入浅筋膜,与小隐静脉伴行,70%位于小隐静脉内侧,30%位于小隐静脉外侧.股后皮神经主干全程有营养血管伴行.根据神经的分布范围,将股后皮神经分为3型:Ⅰ型,分布于小腿后部上1/4,占33.3%,神经干于窝中点直径为0.5±0.1 mm;Ⅱ型,分布于小腿后部上1/2,占43.3%,神经主干于窝中点的直径为1.0±0.4 mm,在小腿后部中上段(即:逆行腓肠神经营养血管岛状皮瓣的常用供区)发出分支2.0±0.8支,分支直径0.3±0.2 mm,分支长度3.5±2.7 mm,分支末端与小隐静脉之间的距离为0.8±0.6 mm;Ⅲ型,分布于小腿后部上3/4,占23.3%,神经主干于窝中点的直径为1.2±0.3 mm,在小腿后部中上段发出3.7±1.7支分支,分支直径0.4±0.1 mm,分支长度3.7±2.6 mm,分支末端与小隐静脉之间的距离为0.8±0.4 mm.在小腿后部中上段,未发现腓肠内侧皮神经发出分支进入浅筋膜. 结论通过股后皮神经主干与受区感觉神经分支吻合,股后皮神经(66.6%,Ⅱ型与Ⅲ型)可以用于重建逆行腓肠神经营养血管岛状皮瓣的感觉功能.

    作者:黄汉伟;林建华;郑和平;张发惠;叶君健 刊期: 2006年第01期

  • 骨肉瘤合并病理性骨折的近期保肢治疗二例

    目的骨肉瘤合并明显移位病理性骨折保肢治疗的近期疗效观察. 方法 2002年10月~2003年1月,2例骨肉瘤合并明显病理性骨折患者,行动脉化疗泵埋置、肿瘤活检术后即开始化疗, 5次化疗后行人工关节假体置换保肢手术,术后继续化疗. 结果术后无感染,假体无松动,患肢功能恢复良好.分别获随访24个月和21个月,肿瘤无复发、转移. 结论原发性骨肉瘤合并病理性骨折患者在有效、敏感的化疗及综合治疗下,保肢治疗并非其禁忌证.

    作者:李鼎锋;崔秋;王磊;张平;周举;隋加虹 刊期: 2006年第01期

  • 骨延长区组织愈合过程中胶原变化的偏光显微镜观察

    目的观察骨延长区骨组织修复过程中胶原变化特点及规律. 方法健康新西兰白兔27只,制成左胫骨中段骨延长模型,于术后第5天以1.5 mm/d延长,共延长14 d.于延长结束时,延长结束后7、14、21、30、40、50、60和70 d分批处死动物,取材(n=3).石蜡包埋切片,饱和苦味酸天狼星红染色,偏光显微镜观察新骨组织的胶原变化. 结果延长区胶原变化主要有以下特点:①在延长结束时及延长结束后的早期纤维组织中,除Ⅲ型胶原外,还含有大量Ⅰ型胶原;②在软骨组织中有Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型胶原;③假性生长板中存在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型胶原;④骨延长区新骨再生与修复的后期Ⅰ型胶原占绝对优势. 结论骨延长区的骨组织修复是在牵张应力下进行的,其胶原变化显示出与骨折愈合不同的特点;饱和苦味酸天狼星红染色后,在偏光显微镜下可清晰地区分Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型胶原,为研究骨组织修复过程中胶原变化的分型提供了新的方法.

    作者:邹培;李峻辉;李主一;周中英;林月秋;阮默 刊期: 2006年第01期

  • 异体骨的临床应用

    目的了解异体骨移植相关临床应用的现状和趋势. 方法广泛回顾近5年国内外异体骨移植的临床应用. 结果异体骨可加工成小块骨、大段骨、颗粒骨及骨环等生物特性各异的移植材料,广泛应用于骨缺损填充、假体翻修、肿瘤切除保肢和关节融合等领域,并获得良好效果;但大块异体骨结构性移植带来的各种并发症不容忽视. 结论异体骨移植的主要优点是能够与宿主骨整合并塑形,可替代自体骨移植,实现骨结构和功能重建.如何加速整合、塑形及减少并发症将是其临床应用急需解决的重要课题.

    作者:宋会平;王志强 刊期: 2006年第01期

  • 邻近非主干血管蒂皮瓣移位修复足跟部皮肤缺损

    目的探讨足跟部皮肤缺损皮瓣修复的优化选择及临床效果. 方法 2000年2月~2004年4月,应用4种邻近非主干血管蒂皮瓣移位修复足跟部皮肤缺损30例,其中男19例,女11例,年龄8~65岁.致伤原因:车轮绞伤19例,重物压伤5例,电锯伤3例,骨髓炎2例,足跟部鳞状细胞癌1例.皮肤缺损6.0 cm×5.5 cm~16.5 cm×11.0 cm者14例,均合并足后跟或足底皮肤缺损,采用腓肠神经营养血管远端蒂皮瓣及隐神经营养血管远端蒂皮瓣修复,皮瓣切取范围6.0 cm×5.0 cm~18.0 cm×12.0 cm;皮肤缺损2.5 cm×2.0 cm~5.5 cm×4.5 cm者16例,采用足外侧皮瓣及足底内侧皮瓣修复,皮瓣切取范围4.0 cm×3.0 cm~8.0 cm×7.0 cm.供区采用全厚或中厚皮片移植覆盖. 结果术后皮瓣均成活.获随访6~12个月,皮瓣外观良好,无破溃,2例出现胼胝.皮瓣痛觉或触觉部分或完全恢复,两点辨别觉恢复至1.0~3.2 cm.供区外观恢复良好. 结论采用邻近非主干血管蒂皮瓣移位修复足跟部皮肤缺损,具有切取简便、损伤少、不影响患肢血供、可选择性高和可操作性强等优点,是足跟皮肤缺损修复的一种较好选择.

    作者:林松庆;张发惠;徐皓;张朝春 刊期: 2006年第01期

  • 食指背侧岛状皮瓣修复手背皮肤软组织缺损

    食指背侧岛状皮瓣常用来修复拇指或虎口皮肤缺损.1999年4月~2004年8月,我们采用食指背侧岛状皮瓣修复手背皮肤软组织缺损12例,效果满意.报告如下.

    作者:李国京;王峻岭;李秀丽;杨志海 刊期: 2006年第01期

  • 足部逆行岛状皮瓣修复前足及足趾软组织缺损

    前足及足趾的皮肤缺损常由外伤引起,部分由神经损伤或糖尿病足所致.皮肤缺损常伴肌腱、关节和骨骼外露,植皮难以成活;小腿带蒂皮瓣移位术难以达到跖趾关节水平;而传统的交腿皮瓣移位修复难于被患者接受;治疗结果常为截趾或截足.1998年7月~2004年7月,我科采用多种足部逆行岛状皮瓣移位修复前足皮肤缺损,效果满意.报告如下.

    作者:张志新;丁健;马南;路来金 刊期: 2006年第01期

  • 小腿后侧远端筋膜蒂皮瓣修复踝及跟部皮肤缺损

    踝及足跟部皮肤缺损是临床常见而棘手的问题.骨、关节及肌腱外露,皮片移植不易成活,一般需要皮瓣修复.常用的皮瓣有足底皮瓣、足背皮瓣、小腿内侧及外侧皮瓣、交腿皮瓣和游离皮瓣等.这些皮瓣因为可切取面积小、牺牲主干动脉、手术显露困难及操作技术难度高等缺点难于在基层推广.

    作者:袁风;田俊;甘莉娟 刊期: 2006年第01期

  • 小切口微创治疗(足母)外翻

    目的探讨小切口微创治疗(足母)外翻的有效方法. 方法 2002年8月~2004年6月,采用小切口微创手术和术后弹性外固定治疗(足母)外翻136例263足.其中男7例,女129例.年龄19~84岁.按Coughlin分型,轻度24例,中度63例,重度49例.263足均伴不同程度疼痛、足内弓塌陷和扁平足.经随访观察,对症状、体征及X线片测量结果进行疗效评定. 结果术后伤口均Ⅰ期愈合.本组获随访8~26个月,平均19个月.(足母)外翻畸形完全矫正, 足疼痛完全消失, 无骨不愈合及骨坏死征象,足内弓塌陷平均改善5°,跖趾关节功能及皮肤感觉基本正常;X线片示(足母)外翻角<12°、第1、2跖骨间角<9°及胫侧籽骨半脱位矫正<50% 105足,基本矫正158足.足疗效评定:优84例,良48例,中3例,差1例,优良率为97%. 结论小切口微创治疗(足母)外翻是一种损伤小、痛苦少、矫正彻底及不易复发的较理想治疗方法.

    作者:曲家富;曹立海;刘志权;王志伟;高建华;李绍光;杜晓健;孙洋;彭义 刊期: 2006年第01期

  • 手部屈曲挛缩畸形的修复

    目的总结手部屈曲挛缩畸形的病因、诊断及手术治疗方法. 方法 1997年5月~2004年6月,对212例手部屈曲挛缩患者,采取切除瘢痕、彻底松解挛缩、植皮、Z字成形术或双V-Y或四边V-Y成形术、掌背动脉皮瓣移位或髂腹股沟皮瓣移位修复继发创面.其中男163例,女49例,年龄3~61岁.左手85例,右手54例,双手73例.挛缩部位:手指117例,手掌32例,手掌合并手指63例.畸形原因:烧伤及爆炸伤29例,掌腱膜挛缩127例,车祸及机器挤压伤31例,电击伤5例,术后不正确外固定14例,其它6例.病程2~24个月. 结果术后149例获随访4~30个月.1例因术后强行出院,手指远端坏死,行残端成形术;7例发生二次屈曲挛缩畸形,其中3例术后皮肤坏死瘢痕愈合,2例患儿因惧怕疼痛功能锻炼欠佳,2例断层皮片移植者皮片挛缩;其余患者疗效满意. 结论明确挛缩病因及程度,选择合适的手术时机,彻底松解挛缩,正确的修复方法及术后早期、有效的功能锻炼,是取得良好疗效的重要因素.

    作者:刘彬;路来金;刘志刚;张志新;于家傲 刊期: 2006年第01期

  • 吻合指固有神经背侧支的邻指皮瓣修复手指远端掌侧软组织缺损

    目的探讨采用吻合指固有神经背侧支的邻指皮瓣修复手指远端掌侧软组织缺损的疗效. 方法 1996年10月~2004年6月,25例(32指)伴肌腱或骨组织外露的手指远端掌侧软组织缺损患者,其中男18例,女7例,年龄13~45岁.切割伤6例,冲压伤8例,机器绞伤11例.损伤部位:拇指2例,食指8例,中指5例,环指3例,小指2例,食、中指2例,中、环指2例,食、中、环、小指1例.缺损范围:1.5 cm×1.0 cm~4.0 cm×2.1 cm.损伤至就诊时间30 min~48 h.急诊行清创,采用带蒂邻指皮瓣修复,术中同时将指固有神经的背侧支与指神经残端吻合重建皮瓣感觉,术后3周断蒂.供区中厚皮片游离植皮. 结果术后皮瓣及供区均成活,创面Ⅰ期愈合.获随访6~26个月,手指指腹饱满,色泽正常,感觉恢复,两点辨别觉为5~8 mm,均无功能障碍. 结论采用吻合指固有神经背侧支邻指皮瓣修复手指远端掌侧软组织缺损不仅能修复缺损皮肤,且能重建皮瓣感觉,术式操作简便.

    作者:王加宽;葛卫宝;李俊;陆士 刊期: 2006年第01期

  • 跟骨丘部植骨重建距下关节融合治疗跟骨关节内陈旧骨折

    目的探讨跟骨丘部自体骨植骨重建距下关节融合术治疗陈旧性跟骨关节内骨折的手术方法及适应证. 方法 2000年7月~2003年10月,对11例跟骨陈旧性骨折患者行自体髂骨植骨丘部重建距下关节融合的方法进行治疗.其中男9例,女2例,年龄21~48岁;均为单侧足.跟骨外侧改良L形切口,全部取髂骨植骨重建跟骨丘部高度,髂骨块平均为3.0 cm×2.5 cm×1.8 cm,跟骨外膨的外侧壁均切除. 结果 11例获随访3~18个月,平均11.5个月.重建丘部骨10~12周愈合,术后8周部分负重,平均13.2周完全负重行走.根据张铁良跟骨关节内骨折评分标准:优4例,良5例,可2例.X线片示Bhler角、跟骨宽度以及跟骨丘部高度基本恢复正常. 结论自体髂骨植骨、跟骨丘部高度重建及距下关节融合术是治疗陈旧性跟骨骨折的一种有效方法,可矫正跟骨畸形,并恢复外形及功能.

    作者:苗卫东;王明君;曹湘豫;张韶民;王斌;柴充;张长江 刊期: 2006年第01期

  • 三关节融合术治疗跟骨骨折远期并发症的疗效评价

    目的评价采用三关节融合术治疗跟骨骨折远期并发症的临床疗效. 方法 1990年~2001年,采用距下、距舟和跟骰三关节融合术治疗12例跟骨骨折并发症患者,均行Ollier足外侧切口,其中2例行腓骨肌腱松解术,1例行胫神经减压和移位术.本组男7例,女5例,年龄29~64岁.于骨折后5~22个月,平均18个月,出现疼痛、畸形等并发症.术前后足功能评分、腓骨远端至跟骨中心距离、Bhler角、患足与正常足距骨前倾角之差和跟骨高度分别为40.00±5.22分、0.41±0.03 cm、12.00±3.40°、17.00±3.32°和4.12±0.35 cm. 结果术后获随访3~13年,平均7年.术后后足功能评分、腓骨远端至跟骨中心距离、Bhler角、患足与正常足距骨前倾角之差和跟骨高度分别为75.00±6.46分、0.73±0.02 cm、31.00±5.61°、9.00±3.15°和6.75±0.62 cm,各指标与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05). 结论对跟骨骨折并发后足疼痛和畸形,进行病因评估及采用适当的手术方式是极其重要的;恢复后跟高度和跟骨的解剖关系是手术成功的关键.

    作者:胡怀建;沈惠良;冯明利;雍宜民 刊期: 2006年第01期

  • 垂直微创切口皮肤软组织扩张器置入术

    皮肤软组织扩张器的应用使烧(创)伤后畸形的整复产生了革命性的变化.既往皮肤软组织扩张器的置入多选用平行于扩张器长轴的切口,这一术式缺点主要在于首次扩张时间晚、周期长、切口张力大及易发生扩张器外露等并发症.2002年5月~2004年5月,我们采用垂直微创切口埋置扩张器140个,效果良好.报告如下.

    作者:宋慧锋;柴家科;陈敏亮;陈宝驹;许明火;京萨;吴焱秋;梁黎明 刊期: 2006年第01期

  • 人工骨传导材料的研究进展

    目的综述人工骨传导材料基础与临床应用研究进展. 方法广泛查阅近年国内外相关文献进行回顾与综合分析. 结果人工骨传导材料的基础与临床应用研究已取得明显进展,并已成为骨组织工程研究的热点之一.部分人工骨传导材料已进入临床应用阶段,并取得良好临床效果. 结论人工骨传导材料在骨组织工程中具有广阔的应用前景,它为临床治疗骨缺损提供了新的方法.如何改善人工骨传导材料的微观结构、宏观形状、导入骨诱导机制以及加速新骨形成将是今后研究的重点,复合人工骨材料将是新的研究热点.

    作者:李冀;王志强;张育敏;原林 刊期: 2006年第01期

  • 侧副韧带和跖板对跖趾关节屈曲功能的影响

    目的探讨侧副韧带、跖板对跖趾关节屈曲功能的影响. 方法取成人尸体第2~4足趾,共24趾.按切断双侧侧副韧带和跖板的不同顺序均分为A、B两组(n=12),A组先切断双侧侧副韧带,再切断跖板薄弱部分,B组按相反顺序切断,观察不同顺序切断前后相同负荷下跖趾关节屈曲角度的变化.并于1994年5月~2000年7月,应用第2足趾游离跖趾关节复合组织移植重建第2和第3掌指关节11例,其中2例行跖板切除术,另9例行跖板+双侧侧副韧带切除术. 结果 A组,术前跖趾关节屈曲角度为37.30±5.42°,切断双侧侧副韧带后屈曲角度增加11.29±2.36°,达48.60±2.98°,与切断前比较差异有统计学意义(P<0.01);再次切断跖板后,屈曲角度增加5.30±1.59°,达53.35±2.76°,与切断前比较差异有统计学意义(P<0.01).B组,术前跖趾关节屈曲角度为34.59±5.32°,切断跖板后屈曲角度增加6.29±2.98°,达40.89±2.36°,与切断前比较差异有统计学意义(P<0.01);再次切断双侧侧副韧带后,屈曲角度增加9.71±1.94°,达50.60±2.01°,与切断前比较差异有统计学意义(P<0.01).切断双侧侧副韧带与切断跖板比较,前者更能增加跖趾关节的屈曲角度(P<0.01),二者切断的先后顺序对总屈曲角度改变影响无统计学意义(P>0.05).临床应用后随访显示,仅切断跖板者经2个月随访,屈曲角度为15~45°;切断跖板+双侧侧副韧带者经26.3个月随访,屈曲角度为10.3~58.4°. 结论切断双侧侧副韧带及跖板可增加跖趾关节屈曲角度.

    作者:刘璠;顾施辉;刘军汉 刊期: 2006年第01期

  • NEP1-40基因克隆及蛋白的原核表达和纯化

    目的通过基因工程手段从大鼠脊髓中获取Nogo-66、NEP1-40基因并实现其蛋白的体外表达. 方法从幼年大鼠的脊髓组织中,通过RT-PCR技术获得Nogo-66、 NEP1-40基因,将目的基因通过基因连接反应与T载体连接,重组质粒进行基因序列测序,构建PQE30-GST和目的基因的高表达质粒,异丙基-β-D-硫代半乳糖(isopropylthiogalactoside,IPTG)诱导表达,Ni柱纯化,Western-blot法检测纯化的目的蛋白. 结果成功获得大鼠Nogo-66、 NEP1-40基因,加上两端的酶切位点和保护性碱基,大小分别为215 bp和137 bp.序列测序显示基因突变率为0,表达质粒构建双酶切(BamH Ⅰ和Hind Ⅲ)可见目的基因的条带,经IPTG诱导表达,获得带GST标签的融合蛋白Nogo-66和NEP1-40,相对分子质量分别为33.2×103和30.3×103.蛋白纯化结果理想,经Western-blot分析证实抗原性正确.结论 Nogo-66、NEP1-40蛋白可通过基因工程手段获得体外高效表达,这将对其功能的研究及脊髓损伤疫苗的研究提供基础.

    作者:宫福良;王坤正;余鹏博;党晓谦;王春生;时志斌;杨佩 刊期: 2006年第01期

  • 骨形成蛋白2基因修饰的老年大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化能力的研究

    目的观察年龄因素对骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)成骨分化能力的影响;了解基因治疗对老年大鼠MSCs成骨分化能力的影响. 方法 1月龄(幼年组)、9月龄(成年组)及24月龄(老年组)雄性Wistar大鼠各6只,取MSCs经体外分离、培养及携带骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)基因的腺病毒载体(Ad-BMP-2)转染后,定量检测BMP-2、碱性磷酸酶(alkaline phosphate,ALP)表达,以及成骨细胞标志性蛋白:Ⅰ型胶原、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和骨桥素(osteopontin, OPN)的表达.将转染的各组MSCs分别与磷酸三钙(tricalcium phosphate, TCP)复合后植入裸鼠体内,3周后取材,比较各组诱导异位成骨能力. 结果 ELISA检测表明BMP-2基因修饰的MSCs可以有效表达BMP-2,且表达量在各年龄组间差异无统计学意义(P>0.05);各组ALP于诱导后第9天达高峰,但组间差异均无统计学意义(P>0.05);诱导后第7天,RT-PCR半定量检测示各组均有成骨细胞特征性蛋白,即:Ⅰ型胶原、OPN及BSP的明显表达,表达量在各组间差异无统计学意义(P>0.05);BMP-2基因转染的MSCs与TCP复合后可诱导裸鼠体内异位成骨,各组成骨量差异无统计学意义(P>0.05). 结论 BMP-2基因修饰的老年大鼠MSCs可以恢复成骨分化能力,基因治疗可能为老年性骨骼疾病提供一种新的治疗途径.

    作者:岳冰;陈燕飞;汤亭亭;陆斌;郁朝锋;楼觉人;戴戎 刊期: 2006年第01期

中国修复重建外科杂志

中国修复重建外科杂志

主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会

主办:中国康复医学会,四川大学