肖娟；曹谊林；范华骅；邹萍；崔磊；刘伟；高峰；陆华中
目的探讨体外筛选及鉴定人角朊干细胞(KSC)的方法. 方法利用KSC对细胞外基质的快速黏附性,选择不同时间黏附的细胞分为5、20和60分钟3组,并以不进行筛选的细胞作对照组.体外培养扩增后,以KSC的相对特异性标识分子β1整合素、角蛋白19(Ck19)的单克隆抗体,免疫组织化学方法对各组细胞进行鉴定,利用图像分析系统测平均灰度值.并用流式细胞仪、透射电镜对各组细胞进行检测. 结果各组细胞在10～14天均有克隆形成,组间比较5分钟组细胞生长较慢,但形成克隆较大,细胞体积较小.免疫组织化学β1整合素、Ck19在各组都有表达,各组平均灰度值统计学分析显示,β1整合素在5分钟组的表达与另3组间有统计学意义(P<0.05),Ck19的表达在5分钟组与20分钟组间无差异(P>0.05),60分钟组与对照组间差异不显著,而前两组与后两组之间比较有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测提示5分钟组细胞大部分处于G1期,与其它3组有区别.透射电镜显示5分钟组细胞体小,核浆比大,细胞器不成熟. 结论利用细胞外基质筛选的5分钟组细胞处于幼稚状态,并有强克隆形成能力,符合预期的KSC特点,可利用KSC对细胞外基质的快速黏附性对其纯化筛选,同时利用β1整合素、Ck19的单抗加以鉴定.
作者：董蕊；金岩；刘源 刊期： 2003年第05期
目的探讨分娩性臂丛神经损伤的手术治疗时机与方法. 方法 1997年10月～2001年4月对32例分娩性臂丛神经损伤进行早期显微手术治疗,术时年龄3个月～2岁,平均10个月,6个月以内19例,大于6个月13例.手术方法:臂丛神经松解12例,臂丛神经瘤切除端端缝合或神经桥接移植7例,膈神经移植于上干前股或肌皮神经7例,肋间神经移植于肌皮神经(经神经移植)6例.神经松解及神经吻合均应用显微器械操作,用7/0或9/0无损伤缝合线缝合. 结果术后30例患儿获随访1～3年5个月,平均1.9年.疗效评定标准:肱二头肌肌力达4级以上为优14例;3级者为良9例;2级以下者为差或无效7例.优良率为76.7%,其中年龄小于6个月的19例为84.2%(16/19);大于6个月的11例为63.6%(7/11). 结论分娩性臂丛神经损伤患儿,出生后3～6个月无明显屈肘功能恢复者即应行显微手术治疗,神经松解和神经吻合效果优于神经移植术,根据术中探查的具体情况选择恰当的术式是提高疗效的关键.
作者：陈清汉；陈德松；方有生；苑壮；张明生；马希峰 刊期： 2003年第05期
目的观察磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)和c-Jun蛋白在增生性瘢痕组织中的表达特征及其影响瘢痕形成和成熟的机制. 方法取16例住院的增生性瘢痕患者的瘢痕组织,并将其分为生长活跃期组(形成时间在1年以内,含1年者)、生长稳定期组,每组各8例;另取正常皮肤8例.所有取材均未经任何治疗.用免疫组织化学方法和常规病理技术检测磷酸化P38MAPK和c-Jun 两种蛋白,在增生性瘢痕组织和正常皮肤组织中的表达和分布规律. 结果正常皮肤组织中,磷酸化P38MAPK主要分布于表皮基底层细胞的胞浆和胞核内,c-Jun蛋白则主要定位于表皮细胞和内皮细胞中,两种蛋白的阳性细胞率分别为21.3%±3.6%和33.4%±3.5%.在处于生长活跃期的增生性瘢痕组织中,磷酸化P38MAPK和c-Jun的阳性信号主要定位于表皮细胞和部分成纤维细胞内,阳性细胞率分别上升至69.5%±3.3%和59.6%±4.3%,明显高于正常皮肤组织(P＜0.01);而在成熟稳定的增生性瘢痕中,两种蛋白表达有所下降,但仍高于正常皮肤组织. 结论增生性瘢痕的形成和成熟可能与激活P38MAPK信号传递通路,影响c-Jun蛋白表达有关.
作者：陈伟；付小兵；孙同柱；杨银辉；赵志力；盛志勇 刊期： 2003年第05期
目的对受伤超过12小时以上的头皮撕脱伤治疗作回顾和总结. 方法 1992年10月～2001年7月对7例头皮撕脱在12小时以上,撕脱面积达2%体表面积,头部创面和头皮伴不同程度污染,同时分别伴有休克和颅脑外伤者,通过将撕脱的头皮制成条状中厚皮片游离回植,覆盖头部创面. 结果术后4例回植头皮片90%以上成活,3例回植头皮片80%以上成活,直径在4 cm以上颅骨裸露区覆盖的头皮片中央有小面积坏死,需行外板钻孔植皮. 结论治疗只要处理适当,可考虑放宽头皮游离回植的条件,为患者节约自体皮肤,延长撕脱头皮再利用的时限.
作者：刘诚；廖农 刊期： 2003年第05期
目的探讨软骨细胞体外培养过程中凋亡发生以及caspase-3的表达. 方法采用Annexin Ⅴ和TUNEL法检测第1～4代软骨细胞在体外正常培养体系中第3天和第7天的凋亡率;RT-PCR和Western blot分析caspase-3表达水平;ELISA检测caspase-3蛋白酶活性. 结果第1～4代软骨细胞在体外培养过程中均存在不同程度的凋亡现象,各代次软骨细胞第7天的凋亡率15.7%±0.3%,明显高于第3天的8.9%±0.6%,有统计学意义(P＜0.01).caspase-3 mRNA和蛋白质在整个培养过程中都有表达,随着时间延长表达上调,第7天的表达水平高于第3天.体外培养7天后caspase-3被激活,可检测到分子量为20 ku的裂解片段.caspase-3蛋白酶活性随着培养时间延长也逐渐增高,与细胞凋亡程度基本一致. 结论软骨细胞在体外培养过程中存在凋亡,caspase-3参与了凋亡事件并发挥着重要作用.
作者：肖娟；曹谊林；范华骅；邹萍；崔磊；刘伟；高峰；陆华中 刊期： 2003年第05期
开放性胫腓骨骨折并软组织严重缺损是骨科常见的创伤,处理不当常造成骨不连、骨髓炎及骨外露,甚至截肢等严重后果.1996年8月～2001年10月,我们应用游离背阔肌肌皮瓣结合多功能单臂外固定器治疗严重软组织缺损的胫腓骨开放性骨折17例,取得了比较满意的效果,报告如下.
作者：张景贵；王文己；王建民 刊期： 2003年第05期
1995年6月～1999年6月我科共收治5例儿童特发性髋外展肌挛缩症,采用臀中、小肌起点松解术进行治疗,取得较好疗效,报告如下.
作者：兰玉平；赫荣国；顾章平 刊期： 2003年第05期
手指中节或拇指近节指骨1/3以远处离断再植为末节断指再植术.由于末节断指的血管较细小,吻合困难,需精细的吻合技术,其静脉不易吻合成功.我们自1997年～2002年,对末节断指吻合指动脉再植27例,取得较好效果,报告如下.
作者：韦阁；蒙云飘；覃刚；蒙宾 刊期： 2003年第05期
目的研究距骨颈骨折新的手术治疗方法. 方法 1996年4月～2001年3月,采用足内侧途径加内踝截骨显露距骨颈骨折,利用可吸收螺钉对骨折行内固定治疗9例移位的距骨颈骨折.术后膝下石膏管型固定6～12周,骨折有明显愈合迹象后,患者每日定时在短石膏靴外进行一定范围内活动. 结果 9例均获随访15～60个月,平均28个月,骨愈合时间20～42周.按AOFAS足部评分标准,功能优良率77.8%(7/9).术后1例伤口表浅皮肤感染并皮缘部分坏死,为HawkinsⅢ型.术后随访2例并发距骨体缺血性坏死,1例为HawkinsⅡ型,系5周即扶拐负重,评分为中;1例HawkinsⅢ型,经保守治疗无效后行踝关节融合术,评分为差. 结论以足内侧途径为入路,应用可吸收拉力螺钉固定治疗距骨颈骨折是一种新手术方法,辅以严格的术后处理可获得良好的临床治疗效果,值得推广使用.
作者：刘立峰；蔡锦方；梁进 刊期： 2003年第05期
目的探讨脱细胞骨细胞外基质(AECM)的制备,并对其进行有机成分分析. 方法采用低渗和除垢剂脱细胞方法制备AECM.使用HE、Mallory-Heidenhain氏快速一步法染色和阿利新蓝染色观察形态学改变;免疫组织化学检测纤维连接蛋白(FN)和层连接蛋白(LN). 结果 HE、Mallory-Heidenhain氏快速一步法染色后镜下可见AECM胶原纤维排列规则,骨陷窝空虚;阿利新蓝染色可见AECM骨陷窝周边染色呈不同程度蓝绿色;免疫组织化学染色可见FN和LN的抗体染色阳性部位在细胞外基质(ECM). 结论低渗和除垢剂二步法脱细胞是AECM制备的有效方法.脱细胞过程中去除了细胞成分,保留了天然的胶原纤维分布及ECM主要支架成分蛋白多糖、FN和LN.
作者：王昊；柏树令 刊期： 2003年第05期
目的研究电刺激对失神经支配骨骼肌萎缩的影响. 方法选用SD大鼠16只,建立双侧下肢失神经支配腓肠肌的实验模型, 电刺激右侧腓肠肌为实验侧,左侧不作电刺激为对照侧,术后2、4周分别观察肌肉的组织学, 超微结构, 纤颤电位波幅及Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性变化. 结果实验侧术后2、4周肢体肌细胞直径及截面积较对照侧下降速度明显减慢;电刺激能延缓肌细胞的线粒体, 肌质网退变,但对肌肉纤颤电位波幅无明显影响;实验侧术后2、4周Na+-K+-ATP酶活性下降速度比对照侧分别慢15.59%和27.38%;实验侧术后2、4周Ca2+-ATP酶活性下降速度较对照侧分别慢4.83%和21.64%. 结论电刺激对失神经支配骨骼肌的组织学、电生理及酶组织化学的各项指标均有保护作用,是延缓肌肉萎缩的有效方法.
作者：徐建广；屠永全；顾玉东；李继峰 刊期： 2003年第05期
目的追溯近年有关小肠黏膜下层(SIS)的制备及其特性的研究与进展. 方法广泛查阅自1995年以来的相关文献,对SIS的制备及特有的性质,其中包括免疫原性、抗微生物活性、生物力学性质及生物相容性等进行综合分析. 结果 SIS来源方便,易于制备,有良好的生物相容性,能促进血管生成,并具有部位特异的组织再生能力. 结论 SIS是一种可广泛用于血管、肌腱、膀胱和腹壁等组织工程的良好生物衍生材料.
作者：罗静聪；杨志明 刊期： 2003年第05期
目的寻求使处于生长停滞期的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖寿命延长的方法. 方法将体外转录质粒pcDNA3-hTERT用BamHI酶切使之线性化,经T7 RNA聚合酶催化以转录合成hTERT mRNA.用脂质体法将hTERT mRNA导入处于生长停滞期的HUVEC.检测hTERT mRNA导入后细胞端粒酶活性表达与细胞生长增殖情况. 结果导入hTERT mRNA后,细胞有端粒酶活性的暂时表达,增殖寿命较单纯用脂质体处理的对照细胞延长了7代. 结论 hTERT mRNA导入细胞能可控地、瞬时地重建细胞端粒酶活性,可望广泛应用于人体细胞增殖寿命延长的尝试.
作者：屈艺；王正荣；黄翔；魏大鹏；杨春蕾；解慧琪；杨志明 刊期： 2003年第05期
目的探索尿道黏膜上皮细胞体外培养的技术和方法,为进一步采用组织工程技术构建尿道黏膜组织奠定基础,并为尿道黏膜的生理、药理、毒理学及微生态研究提供实验模型. 方法取刚离乳的雄性新西兰幼兔尿道黏膜组织,分别以DispaseⅡ消化液和混合消化液消化成单细胞悬液,以差速贴壁法排除成纤维细胞,接种后以L929细胞为滋养层细胞进行培养,定期换液,细胞生长、增殖至80%～90%融合时传代.细胞进行常规HE染色、流式细胞仪检测,以扫描电镜、透射电镜观察其超微结构.再分别设立实验组(n=20)、阳性对照组(正常尿道黏膜组织石蜡切片,n=20)及阴性对照组(成纤维细胞铺片,n=20)行免疫组织化学染色. 结果原代培养10天左右细胞逐渐生长融合成片,如铺路石状,细胞大小均一.上皮细胞为二倍体细胞,生长期内均为单一的上皮细胞,无成纤维细胞混杂生长,细胞可传11～13代,成活50～60天. 结论新西兰幼兔尿道黏膜上皮细胞可在体外进行培养,在一定时间内保持增殖活力,为构建组织工程化尿道奠定了基础,且为尿道黏膜的体外研究提供了实验模型.
作者：翟弘峰；李森恺；刘红；李养群；徐军 刊期： 2003年第05期
包皮过长的传统手术方法有两种术式,即经阴茎头部或体部的包皮环切术,两种术式各有其优缺点.我们根据微创修复重建外科的技术原理,自2000年以来,采用经阴茎根部的包皮短缩整形术.治疗包皮过长、包茎患者32例,疗效优于传统的包皮环切术,报告如下.
作者：董长举 刊期： 2003年第05期
目的采用生物可降解材料与非降解材料复合制成人工食管,诱导自身食管组织爬行再生与生物材料降解相匹配,终再生食管完全替代人工食管. 方法将长50 mm、内径20 mm的医用聚氨酯内管表面覆盖海绵状胶原蛋白壳聚糖膜,体外制成人工食管,通过手术替换Ⅰ组(5只犬)和Ⅱ组(10只犬)颈段5 cm食管缺损,术后给予营养支持,禁食2周或4周后通过内镜分别取出Ⅰ、Ⅱ组聚氨酯内管,通过组织学及电镜等检测、观察新生食管上皮化过程. 结果禁食2周后取出Ⅰ组聚氨酯内管的5只实验犬,新生食管上皮再生不完全;术后4周内均出现进行性狭窄无法吞咽,致全身衰竭死亡.Ⅱ组禁食4周后取出聚氨酯内管的10只实验犬, 新生食管完全上皮化;12周时黏膜全层结构完整再生;24周时食管肌层部分再生,有3只犬生存8个月以上. 结论由聚氨酯内管提供暂时通道和支撑,海绵状胶原蛋白壳聚糖膜提供适宜细胞爬行再生的三维支架,维持4周的降解时间能够重建犬颈段5 cm长食管缺损.
作者：秦雄；徐志飞；赵学维；史宏灿；周建华；孙康；高向阳 刊期： 2003年第05期
1980年1月～2000年11月我们对53例桡神经损伤实施肌腱移位术,重建伸腕、伸指及伸拇功能,效果满意,报告如下.
作者：周强；阚世廉；宫可同；费起礼 刊期： 2003年第05期
目的探讨异体巩膜移植替代睑板重建眼睑的临床效果. 方法 1986年5月～2001年1月对45例部分眼睑缺损患者,采用异体巩膜替代睑板行眼睑重建.其中男31例,女14例.上睑18例,下睑27例;累及上或下眼睑内眦部9例,外眦部7例.眼外伤22例,眼睑肿瘤23例.眼睑缺损不超过眼睑总长度的1/2.术后观察重建眼睑的外观、功能及并发症. 结果 45例移植异体巩膜行眼睑重建均获成功.术后随访11～38个月,平均19.7个月.重建的眼睑完整,双侧眼睑长度及高度差值均小于2 mm.眼睑开闭及上提功能基本正常,对视功能无影响. 结论异体巩膜是替代睑板行眼睑重建的理想材料.
作者：郭波；郭祥文；罗清礼 刊期： 2003年第05期
目的探讨苯丙酸诺龙对烧伤后成纤维细胞α1(Ⅰ)型前胶原蛋白mRNA表达的影响及其作用机制. 方法 Wistar 大鼠32只,制成20%TBSA深Ⅱ度烧伤模型,随机分为苯丙酸诺龙治疗(NP)组和对照组,于4、7、14和21天分别取创面肉芽组织,测定其成纤维细胞中雄激素受体及α1(Ⅰ)型前胶原蛋白mRNA含量,分析比较两组间成纤维细胞雄激素受体和α1(Ⅰ)型前胶原蛋白mRNA的表达及其相关关系. 结果 NP组在7、14和21天α1(Ⅰ)型前胶原蛋白mRNA的表达均高于同期对照组,两组间比较有统计学意义(P＜0.05).NP在4、7、14和21天成纤维细胞雄激素受体的表达均明显高于同期对照组,有统计学意义(P＜0.05).雄激素受体的表达与胶原蛋白基因的表达之间有相关关系,且有统计学意义. 结论 NP能促进Ⅰ型前胶原蛋白mRNA和成纤维细胞雄激素受体的表达,二者间存在正相关关系,NP在转录水平促进胶原蛋白的合成,这种作用与改变成纤维细胞雄激素受体的含量有关.
作者：岑瑛；刘宁；罗旭松；刘晓雪 刊期： 2003年第05期
1987年～2000年,我院共收治颈外侧区淋巴结活检致副神经损伤5例,现就特点、治疗及术后随访进行总结.
作者：严旭；庞锡琴；邵擎东；江伦发；魏延云；陈德松 刊期： 2003年第05期
中国修复重建外科杂志
主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
主办：中国康复医学会,四川大学
