邵圣文；张志智；顾红光；王文琴
目的 建立一种硫酸链霉素的含量分析方法.方法 应用高效液相色谱.蒸发光散射检测法分析硫酸链霉素的含量.色谱条件:Waters XTerra C18色谱柱,规格:250mm×4.6mm,5μm;流动相:0.1mol/L三氟乙酸水溶液-0.1%(v/v)甲酸水溶液(40:60);检测器条件:汽化温度为105℃,雾化温度为50℃,气体流速1.90SLM.结果 硫酸链霉素样品中主成分与相邻杂质分离良好,主成分峰型及进样峰面积重现性良好,在选定进样量范围内线性良好.结论 本方法操作简单,方法的准确性、重现性均能很好的满足质量控制的要求.
作者：张雷 刊期： 2009年第03期
核苷类抗生素是一类生物活性多样,主要来源于微生物的重要次级代谢产物,应用潜力巨大.一些核苷类抗生素生物合成基因簇的相继克隆及其基因功能的深入研究从分子水平揭示出此类抗生素独特的生物合成途径与调节机制,为今后利用代谢工程手段实现核苷类抗生素的定向改造提供了丰富的研究材料与理论基础.
作者：陈文青；邓子新 刊期： 2009年第03期
头孢菌素类的结构改造常需要含不同侧支链的头孢菌素母核,本文以7-ACA为原料,一锅法制备7位与4位均有保护基的3.羟甲基头孢菌素中间体.该工艺具有反应条件温和、操作简便且产品纯度好、收率高的优点,适于工业化生产.
作者：周晓靓；王浩；吕茜茜；施培基 刊期： 2009年第03期
从链霉菌060524菌株的发酵液中共分离得到了12个化合物,以K562细胞检测细胞毒性实验,其中1-H-3-吲哚羧酸和1-H-3-吲哚羧酸甲酯2个化合物具中等强度细胞毒活性(10μg/ml≤IC50≤20μg/ml);茴香霉素(anisomycin)和脱乙酰茴香霉素(deacetylanisomycin)2个化合物具有很强细胞毒活性(IC50≤10μg/ml).另外,以HL-60作细胞凋亡实验,1-H-3-吲哚羧酸和脱乙酰茴香霉素在90μg/ml时显示了细胞凋亡作用.
作者：胡申才；谭仁祥；庄令；闫莉萍；洪葵 刊期： 2009年第03期
温度敏感原位凝胶可随温度变化发生凝胶反应,从而缓慢持久地释放药物,提高药物的生物利用度,是一种很有开发价值的新型药物传递系统.本文主要对温度敏感原位凝胶中聚合物的种类及应用,以及该剂型在眼部给药系统中的应用进行了综述.
作者：高琳雁；李桂玲；邓丽娟；丁维明；李眉 刊期： 2009年第03期
目的 建立用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定注射用氨苄西林钠舒巴坦钠有关物质.方法 色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱(UltimateTM AQ-C18,4.6mm×250mm,5μm),检测波长为254nm,采用A相[12%乙酸溶液:0.2mol/L磷酸二氢钾溶液:乙腈:水(0.5:50:50:900)]-B相[(12%乙酸溶液:0.2mol/L磷酸二氢钾溶液:乙腈:水(0.5:50:400:550)]为流动相进行梯度洗脱(A相起始比例为90%,保持15min,25min内下降至0,保持该比例10min),流速为1.0ml/min,柱温为25℃,进样量为20μl.结果 舒巴坦的碱性降解产物(舒巴坦青霉胺)、舒巴坦、氨苄西林的碱性降解产物、氨苄西林、头孢拉定和氨苄西林二聚物等相关物质在本色谱条件下均能实现较好分离,杂质相对检出率较高.结论 本法基线稳定,重现性好,准确度高,可同时测定氨苄西林钠舒巴坦钠的有关物质.
作者：周明昊；胡楚楚 刊期： 2009年第03期
目的 采用基因组扫描的手段发现新型还原性多肽合成酶基因,并指导具有新型结构的还原性多肽抗生素的发现.方法 根据NRPS的PCP和RE结构域的保守氨基酸序列设计引物,采用PCR扩增的方法克隆还原性多肽合成酶潜在基因.结果 成功地克隆了与抗肿瘤抗生素阿嗪霉素B生物合成相关的NRPS基因I;对实验室保存的15株不同细菌菌株进行了基因组扫描,获得了5个新型的还原性多肽合成酶潜在基因.结论 建立了一种特异性克隆还原性多肽合成酶基因的PCR方法.
作者：张华；赵群飞；虞沂；陆大年；刘文 刊期： 2009年第03期
目的 定量分析铜绿假单胞菌临床分离株生物被膜形成能力.方法 采用平板培养结合结晶紫染色法建立生物被膜定量检测法,用该法对56株铜绿假单胞菌临床分离株的生物被膜形成能力进行分析.结果 平板培养结合结晶紫染色法可对铜绿假单胞菌生物被膜形成能力进行定量检测.在所检测的56株铜绿假单胞菌中,46株(82.1%)具有生物被膜形成能力,其中生物被膜形成能力弱者为16株(28.6%),生物被膜形成能力强者为30株(53.6%);10株菌(17.9%)不能形成生物被膜.结论 绝大多数铜绿假单胞菌临床分离株具有生物被膜形成能力,半数以上菌株具有较强的生物被膜形成能力.
作者：杨维青；刘晓峰；黄震 刊期： 2009年第03期
基于比浊法测定抗生素体外抑菌活性原理,以红霉素发酵液为研究对象,采用96孔微孔板培养检定菌,直接用酶标仪检测各孔的光密度,定量分析发酵液中红霉素含量,并与管碟法比较.本文建立的抗生素生物效价检测方法具有快速、高效、样品和试剂用量少、结果可靠等优势,适合在有检测大量样品和快速获取结果的工作中推广.
作者：谭俊；高勇生；郝玉有；庄英萍；储炬 刊期： 2009年第03期
GCLE是合成头孢类抗生素的重要中间体,通过青霉素开环物的苯磺酸酯氯代、环合而合成的GCLE经HPLC分析含有三个主要杂质.本文采用定向合成和正相HPLC分离制备方法获得了三个主要相关杂质单体,并通过NMR对它们进行了结构确证.经解析确认:杂质Ⅰ为GCLE的△3-异构体;杂质Ⅱ为3位甲基相关物;杂质Ⅲ为2位保护基上3'氯取代相关物.
作者：戎晓娟；肖丹；王炜；张春然；杨红 刊期： 2009年第03期
目的 对放线菌1356菌株进行初步的分类鉴定,并对该菌株产生的抗真菌活性成分进行分离纯化和结构鉴定.方法 采用16S rDNA序列分析法进行菌株的初步鉴定,制备型高效液相色谱(HPLC)分离纯化活性成分;通过紫外、红外、高分辨率质谱、1H核磁共振谱和13C核磁共振谱研究其化学结构.结果 放线菌1356初步鉴定为灰色产色链霉菌的一个亚种,其抗真菌活性成分KZJ-1鉴定为鲁丝霉素.结论 本论文首次利用二维核磁共振技术对鲁丝霉素的碳、氢信号进行了全归属,纠正了文献中对这类化合物C16～C19化学位移归属的错误.
作者：姜其华；郭婷婷；李宁；李文；张怡轩；何建勇 刊期： 2009年第03期
本文对代谢工程改造红色糖多孢菌ZL1004进行了摇瓶发酵试验,摇瓶发酵结束时重组菌红霉素生物效价与工业生产菌HL3168相比提高20%.红霉素A组分比例由84%提高到94%,红霉素A浓度3.98mg/ml,相比出发菌3.25mg/ml提高22%,重组菌中红霉素B、C与出发菌相比分别减少了51%和58%,实现了红霉素组分的优化.对重组菌摇瓶发酵过程生理代谢进行了初步的研究,表明重组菌生理代谢特性与原出发菌没有明显差异.对重组菌发酵过程中红霉素组分的变化规律进行分析,发现红霉素A、B、C组分的变化规律与eryK和eryG基因转录水平能较好地对应.
作者：李学志；钱江潮；陈云；杭海峰；储炬；庄荚萍；张嗣良 刊期： 2009年第03期
目的 观察小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)分子干扰铜绿假单胞菌群体感应系统后,对铜绿假单胞菌生物膜的影响.方法 首先针对lasR、rhlR和rhlI基因设计4条siRNA分子,分别是si-asr1、si-hlr1、si-hlr2和si-hli1,体外转录法制备上述siRNA分子.将50nmol/L siRNA分子与4μl脂质体混合,然后转染铜绿假单胞菌成熟期生物膜,应用平板菌落计数法检测siRNA转染后96h内生物膜活细菌数目;siRNA转染生物膜48h后,应用1%复红染色法光学显微镜观察生物膜形态改变,同时应用RT-PCR法检测生物膜弹性蛋白酶B基因lasB表达量.结果 si-hlr1、si-hlr2和si-hli1分别转染铜绿假单胞菌生物膜48h,生物膜出现解体,生物膜内活细菌数目无明显改变.si-asr1转染铜绿假单胞菌生物膜48h后,生物膜形态及生物膜内活细菌数目无明显改变.si-asr1、si-hlr2和si-hli1分别转染铜绿假单胞菌生物膜48h,生物膜lasB基因表达量分别下调了49%、21%和18%.si-hlr1转染生物膜48h后,lasB基因表达量无明显改变.结论 应用siRNA分子干扰铜绿假单胞菌群体感应系统的lasR、rhlR和rhlI三个关键性基因,可以促进生物膜解体,同时能部分抑制生物膜lasB基因表达,但是不能减少生物膜内活细菌数.
作者：邵圣文；张志智；顾红光；王文琴 刊期： 2009年第03期
目的 制备恩诺沙星(ERLX)的多克隆抗体,以期建立通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测恩诺沙星抗体的效价和优化快速检测方法.方法 将牛血清白蛋白(BSA)和鸡血清白蛋白(OVA)偶联成功的恩诺沙星完全抗原(BSA-ERLX和OVA-ERLX)免疫新西兰家兔得到的血清分别保存在4、-20和-70℃半年后,用ELISA方法确定抗原包被的适浓度、血清(一抗)的效价、一抗的适稀释倍数及二抗的适稀释倍数.首先将抗原包被浓度分为三组:20、10和5μg/ml,确定适包被浓度,并在此基础上确定血清的效价和血清的适稀释倍数.结果 不同温度下保存的BSA-ERLX和OVA-ERLX抗体的适抗原包被浓度均为10μg/ml.在4、-20和-70℃保存的BSA-ERLX的抗体效价分别为12800、25600和25600:一抗的适稀释倍数分别是:800、800和1600,二抗适稀释倍数为1000.OVA-ERLX的效价在4、-20和-70℃分别为3200、6400和6400;一抗的适稀释倍数分别为800、1600、1600,二抗的适稀释倍数均为1000.结论 不同温度下保存的BSA-ERLX比OVA-ERLX抗体效价均高,综合考虑认为,-20℃保存的BSA-ERLX抗体,更加适合于进行ELISA检测.
作者：张庆华；熊清明；高建忠；严骏骢 刊期： 2009年第03期
中国抗生素杂志
主管:中国医药集团总公司
主办：中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所,中国医学科学院医药生物技术研究所
