高波;张磊;韩颖
目的 探索表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)二维内标校准方法,解决SELDI-TOF-MS的准确度和重复性较差的技术瓶颈.方法 采用人工合成纯化的多肽分子促肾上腺皮质激素(ACTH,MW:2 465.75Da)作为内标物质,加入待测样品中进行SELDI-TOF-MS检测,通过内标物质在质谱图中横坐标(质荷比)和纵坐标(丰度)响应值校准,消除因操作条件的波动对分析结果产生的影响,以提高结果的准确度和重复性.结果 加入终浓度为4.055 μmol/L的ACTH对血清蛋白质谱图无明显影响;加入内标物浓度和其质谱峰丰度呈直线关系(R=0.976 3); 分子量检测变异系数平均降低5.36倍(P<0.001);质谱峰丰度检测平均变异系数降低5.19倍(P<0.001).结论 二维内标法显著提高了SELDI-TOF-MS测定蛋白分子量和丰度的准确度和重复性,是该技术进行质量控制和标准化的有效措施.
作者:丁银环;胡琼英;姜伟;郭建红;周明术;梁双花;严莉;王开正 刊期: 2009年第03期
目的 通过测定血浆中乳酸浓度对蓝球运动员的训练进行指导评价,提高训练成绩.方法 用全自动生化分析仪分别测定蓝球运动员的训练前、中、后及健康人群中乳酸浓度.结果 健康人群中血浆中的乳酸含量为1.02±0.57 mmol/L,蓝球运动员训练前、中、后血浆中的乳酸含量为1.12±0.48,6.26±0.61及2.39±0.49 mmol/L.结论 血浆乳酸是反映运动能力的一种生化指标,该项目对蓝球运动员训练具有指导和评价作用,也是现代运动训练科学化的指标之一.血浆乳酸测定可以为教练员安排训练强度提供客观依据.
作者:郭小林;郝万鹏 刊期: 2009年第03期
美国雅培AXSYM化学发光仪是目前应用较为广泛的免疫分析仪之一,性能稳定可靠.其标准曲线校标方式分为Master Cal(主校标或称两点校标)和Standard Cal(标准校标或称六点校标)方式,较标比较容易通过.
作者:黄忠团;杨琦;曹春晓;尹红 刊期: 2009年第03期
Ac.T Diff2 是美国Backman Coulter公司生产的三分群血细胞分析仪,它能快速准确地测出WBC,RBC,HB,PLT等18项参数,其结果稳定,重复性好,故障率低.
作者:赵亚娟;屈跃军;何理;付亚玲 刊期: 2009年第03期
目的 探讨血清可溶性P-选择素水平和全血血小板数变化在监测老年冠心病的病情及与冠状动脉病变程度的关系.方法 238例老年冠心病患者,按临床诊断分为三组:急性心肌梗死(AMI)80例、不稳定性心绞痛(UAP)80例、稳定性心绞痛(SAP)78例和对照组80例.用酶联免疫吸附试验检测各组血清可溶性P-选择素的水平,并比较各组间的差异.并对冠心病患者的外周全血血小板总数变化及其与血清可溶性P-选择素水平进行直线相关分析.结果 AMI组、UAP组及SAP组的血清可溶性P-选择素水平比对照组高(P<0.05);AMI组、UAP组可溶性P-选择素水平和SAP组相比,其值增加明显;AMI组和UAP组结果相似;冠心病患者血清可溶性P-选择素水平与外周全血血小板总数变化呈正相关.结论 血清可溶性P-选择素可能是老年冠状动脉粥样硬化的标志,参与了冠心病的发病过程,其值与冠状动脉病变程度密切相关.
作者:龙显科;唐任光;黄照河;王春芳;韦叶生 刊期: 2009年第03期
目的 探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血树突状细胞CD11c+,CD123+亚群与疾病活动性、肾脏损伤及血清抗ds-DNA抗体产生的关系.方法 选定SLE疾病组51例、疾病对照组30例(类风湿关节炎、舍格伦综合征患者各15例)和正常对照组30例,采用流式细胞术检测上述指标.结果 ①SLE患者外周血树突状细胞CD11c+,CD123+亚群比例均显著低于正常对照组(P<0.01),而疾病对照组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05).②疾病活动期SLE患者外周血树突状细胞CD123+亚群比例显著高于稳定期患者(P<0.01),而两者CD11c+亚群比例之间差异无统计学意义(P>0.05).③SLE肾病组外周血树突状细胞CD123+亚群比例显著高于非肾病组患者(P<0.01),两者CD11c+亚群比例之间差异无统计学意义(P>0.05);ds-DNA+组SLE患者外周血树突状细胞CD11c+,CD123+亚群比例均显著低于ds-DNA-组(P<0.05).结论 树突状细胞CD11c+,CD123+亚群的变化可能是SLE发病机制中的关键环节之一.
作者:刘定华;李永哲;胡朝军;佟大伟;张蜀澜 刊期: 2009年第03期
目的 评价血清胆固醇常规方法对常见胆固醇参考物质的基质效应和常规方法的校准偏差.方法 用高效液相色谱测定血清总胆固醇的方法为对比方法,用胆固醇氧化酶法的6种常规测定系统为待评方法,测定30个新鲜冰冻人血清和37种制备物的总胆固醇.将两法测定新鲜人血清的结果作直线回归,求得Y预测值双侧95%的允许区间,评价制备物的基质效应.通过分析新鲜冰冻人血清样品常规方法和对比方法结果的差异,评价测定系统的校准偏差.结果 胆固醇制备物的基质效应依品种而异,冰冻血清几乎没有基质效应,冻干血清表现为负基质效应,乙醇基质校准液呈正基质效应.所有系统新鲜冰冻血清测定值同对比方法测定结果均呈较好的直线相关.A,B,E系统显负偏差,C,D,F系统显正偏差,但偏差大多处于临床可接受的范围内,可满足临床需求,个别测定系统需进行改进.结论 在我国血清胆固醇测定系统上,制备物的基质效应普遍存在,部分常规系统存在校准偏差.为实现检验结果的准确性和实验室间的可比性,临床标准化工作势在必行.
作者:赵海建;周伟燕;张传宝;马嵘;陈忠余;张天娇;谢洁红;张江涛;胡翠华;王冬环;汪静;闫颖;曾洁;崔瑞芳;陈文祥;申子瑜 刊期: 2009年第03期
目的 比较血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C)、肌酐(Scr)和改良后的肾病预后膳食改良试验(modifica tion of diet in drsease,MDRD)方程估算肾小球滤过率(eGFR)对糖尿病肾功能损害的诊断价值.方法 Cystatin C采用颗粒增强免疫透射比浊法,Scr采用碱性苦味酸动力学法.结果 247例糖尿病患者,各期Cystatin C,Scr随eGFR的下降逐渐升高,各期水平差异显著.Cystatin C,Scr与eGFR的相关系数分别为-0.8539,-0.7409,二者间差异有统计学显著性意义(P<0.01).ROC曲线下面积(AUC)分别为0.962,0.987,差异无统计学意义(P=0.10),Cystatin C佳诊断点为1.39 mg/L.结论 Cystatin C是反映糖尿病肾病肾功能损害的良好指标,敏感度高于Scr,如与eGFR结合,可作为早期诊断的依据.MDRD方程适用于Scr正常及增高患者eGFR的估算.
作者:赵金玲;周宏博;刘立峰;郑慧丽 刊期: 2009年第03期
目的 研究金黄色葡萄球菌耐药基因及致病因子中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)基因和杀白细胞毒素 (PVL) 基因的分布特征及致病性.方法 收集临床分离的80株金黄色葡萄球菌,PCR法检测毒素基因TSST-1,PVL和 mecA耐药基因.结果 80株金黄色葡萄球菌经PCR法,mecA基因检出率为56.3%(45/80),其中2006年为65.8%(25/38),2007年为47.6%(20/42),2007年的mecA基因检出率低于2006年.PVL+菌株的分离率为30.3%,PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为13株(13/45,28.9%),金黄色葡萄球菌(MSSA)为11株(11/35,31.4%),差异无统计学意义(P>0.05).TSST-1基因检出率为6.3%(5/80),MSSA中未检出TSST-1基因.结论 产PVL和TSST-1的MRSA致病力更强,增加了临床治疗的难度,对MRSA引起的感染应加强控制,防止其在医院播散流行.
作者:王凤玲;冯秀河;刘静;张竟宇 刊期: 2009年第03期
Access 2是Beckman Coulter公司生产的全自动微粒子化学发光免疫分析系统,具有高灵敏度、高准确度、检测项目多、24 h待机等特点.
作者:吴刚珂 刊期: 2009年第03期
化学发光免疫分析是以化学发光物质为示踪物,具有灵敏度高、速度快等特点.主要试剂包括氧化剂、发光剂和催化剂等,测试中不使用有害的试剂,因此成为非放射性免疫分析法中有前途的方法之一.i2000SR具备实现完全自动化和不污染环境等优点,特别是能在较短的时间内得到实验结果,而对该仪器的维护、保养及故障排除尤为重要.
作者:刘检;邓海峰;陆明洋;李敏;徐斌;郑晓;蒋敬庭 刊期: 2009年第03期
目的 实验评估异型输血产生的危害,为异型输血提供实验依据.方法 建立模拟供者受者血液,受者进行ABH分泌型和非分泌型分类,混合后检测红细胞发生凝集的强度,测定血清中K+含量和血红蛋白含量以评价溶血程度.结果 非分泌型受者红细胞凝集强度强于分泌型受者,K+浓度和血红蛋白含量随着输入的异型血液越多发生溶血的程度越高.结论 异型输血后会发生红细胞凝集溶血现象,ABH非分泌型受者红细胞凝集强度强于分泌型受者,激活补体发生溶血的程度无明显差异,分泌型受者血清中的血型物质不能减轻异型输血发生的溶血,输入的异型血液越多,溶血越严重,不主张临床异型输血.
作者:何子毅;邹文涛;刘景春;唐斯 刊期: 2009年第03期
HIV耐药性的产生可能是病毒自发突变和药物压力选择的结果,但已成为维持高效抗逆转录病毒疗法(Highly active antiretroviral therapy,HAART)长期疗效的主要障碍.耐药病毒的出现促进了耐药检测方法的发展,而耐药检测的目的 在于帮助医师根据患者的个体状况选择合适的有效治疗方法.目前,中国HIV-1流行毒株的耐药产生现状不容乐观.
作者:钟敏;杨绍敏 刊期: 2009年第03期
目的 探讨血小板平均体积(MPV)在预示肿瘤患者骨髓造血功能恢复方面的意义.方法 采用Sysmex SF-3000全自动血液分析仪动态观察50例肿瘤患者化疗前后的白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)、血小板平均体积(MPV).结果 在化疗后6 d左右WBC,PLT,MPV先后明显低于化疗前(P<0.05).在化疗后10 d左右MPV回升,与化疗前相比差异无统计学显著性意义(P>0.05),而WBC,PLT与化疗前相比差异仍有统计学显著性意义(P<0.05).结论 MPV比WBC,PLT在评价骨髓造血功能恢复方面更有意义,MPV可以优先作为评价骨髓造血功能恢复的指标.
作者:葛艾莉;任广利 刊期: 2009年第03期
目的 探讨运动疗法对糖耐量减低(IGT)患者胰岛素抵抗的影响.方法 将60例糖耐量减低患者随机分为两组,一组常规给予饮食控制治疗作为对照组,另一组在此基础上同时强化运动疗法,各组患者观察治疗,并随访至24 w末.在治疗前及治疗后第12 w,24 w末进行血糖(BG)、血浆胰岛素(INS)、糖化血红蛋白(HbA1c) 、血脂(TG、TC)及体质量指数(BMI)的检测.结果 将两组患者治疗前血糖、血浆胰岛素、糖化血红蛋白、血脂及体质量指数分别进行t检验,差异无统计学显著性意义(P>0.05);治疗后12 w,24 w治疗组与对照组以上各种测评数值比较,经t检验差异有统计学意义(P<0.05).结论 糖耐量减低患者在饮食控制基础上结合持续运动疗法能有效改善患者胰岛素抵抗状态.
作者:齐彬;任刚;张维 刊期: 2009年第03期
目的 探讨一次成浆与二次成浆法对制备出来的血浆中凝血因子Ⅷ活性含量的影响.方法 对新鲜采集的全血离心分离血浆并在8 h内冻结成块,然后在37℃水浴中复溶后测定两种方法制备的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的含量.结果 一次成浆法制备的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的含量为0.70±0.16 IU/ml,二次成浆法制备的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的含量为0.84±0.16 IU/ml.结论 两种方法制备的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的含量差异有统计学意义(P<0.05),二次成浆法比一次成浆法制备出来的新鲜冰冻血浆中凝血因子Ⅷ的活性含量要高,值得推广使用.
作者:叶柱江;刘赴平 刊期: 2009年第03期
目的 研究罕见Rh,Kidd血型系统复合抗体引起的速发性溶血性输血反应血清学特征,调查其在输血医学中的临床意义.方法 对1例已进行5次9 U红细胞输注后发生溶血性输血反应患者的血样,分别在盐水介质、间接抗球蛋白介质中分析其抗体的特异性;并用血清学与PCR-SSP基因分型法鉴定其Rh与Kidd血型;运用微柱凝胶法(MGT)与抗球蛋白试管法(IAT)进行患者与捐血者相容性试验.结果 患者为RhE抗原阴性,Kidd血型为罕见Jk(a-b-)型,患者体内含有IgM抗E与IgG抗Jkb抗体,患者血清与28个E抗原阴性的捐血者微柱凝胶法交叉配血相合,抗球蛋白试验法只有4个捐血者相合.结论 罕见Rh,Kidd血型系统复合抗体在临床引起速发性溶血性输血反应.MGT法漏检Jkb抗体,对临床有重大意义.
作者:蓝欲晓 刊期: 2009年第03期
目的 研究血站无偿献血者血液筛查开展HBcAb检测的必要性.方法 对114份HBsAg灰区可疑样本(0.8≤S/CO<1)及1 000份HBsAg阴性初次献血者样本(S/CO<0.8,无溶血、脂血等外观异常)做HBV-M五项(HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb)检测,对HBcAb阳性样本做荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV-DNA,对HBV-DNA阳性样本再做HBcAb滴度测定.结果 114份HBsAg灰区可疑样本,HBcAb阳性37例;37例HBcAb阳性样本中HBV-DNA阳性21例;21例HBV-DNA阳性样本HBcAb滴度测定2例为1∶64,其余19例均≥1∶128.1 000份HBsAg阴性初次献血者样本中,HBcAb阳性51例;51例HBcAb阳性样本中HBV-DNA阳性2例;2例HBV-DNA阳性样本HBcAb滴度测定1例为1∶64,1例≥1∶128.结论 血站HBsAg检测应加设灰区(0.8≤S/CO<1),去除灰区可疑样本;再对HBsAg检测阴性样本进行HBcAb筛查,淘汰HBcAb阳性高滴度样本,才能确保输血安全.
作者:蔡红军;袁克宇;任红红;杨恬;黄劲华 刊期: 2009年第03期
目的 探讨血清中M蛋白对氧化酶法测定胆红素产生干扰的可能原因.方法 通过比较反应曲线,观察反应过程,分析试剂成分及反应环境,以及用其他方法测定,探讨干扰产生的原因.结果 氧化酶法测定富含M蛋白血清胆红素出现异常反应曲线,样本与试剂混合产生白色混浊,将患者血清稀释后不能完全消除干扰,应用其他测定方法验证了干扰的存在.结论 某些血清中高浓度的M蛋白能干扰胆红素氧化酶法的测定,应引起日常检验工作者的重视.
作者:赵兴波;李京华;李江;鄢盛恺 刊期: 2009年第03期
目的 通过受试者工作特征曲线(riceiver operating characteristic curve,ROC)对Beckman-Coulter LH 750血液分析仪VCS数值进行分析和临床诊断试验评价,建立佳报警阈值.方法 经显微镜检查确认为异型淋巴细胞超过20%,但仪器未有报警提示样本30例;同时收集对照样本30例,进行LH750自动上样测定及显微镜检查,评价VCS两组间差异,并通过ROC曲线计算VCS诊断价值.结果 异型淋巴细胞组VCS值与正常淋巴细胞组VCS值比较,体积较大、电导升高并散射增强,差别具有显著性;体积值AUC为0.412;电导AUC为0.849,cutoff值为122,特异度为86.3%,敏感度为80.0%;光散射AUC为0.765,cutoff值为53,特异度为92.2%,敏感度为66.7%.结论 VCS数值可在无白细胞分类异常情况下提示异型淋巴细胞存在.
作者:王小林;苑腾;胡晓舟 刊期: 2009年第03期