石钢;牛晓宇;郗明容;容俊;许文
目的建立人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMC)原代、传代培养的佳方法,并初步建立其永生株.方法采用人脐动脉血管中膜组织块贴壁法原代培养,比较不同培养基对原代及传代细胞增殖的影响;选择标记为新霉素(G418)的带有端粒酶催化亚基(hTERT)基因的重组质粒导入人脐动脉血管平滑肌细胞.结果经α-肌动蛋白鉴定,组织块贴壁法可获得高纯度的HUASMC.原代培养的HUASMC 1~4代细胞增殖能力强、生长旺盛,此后细胞的增殖能力逐渐降低,到第10代几乎丧失增殖力.原代培养以MCDB131为佳培养基.hTERT转染细胞克隆由长梭形变为短梭形,接触抑制消失,生长速度快,目前已传至20代,增殖能力与第1代无差别.转染前后平滑肌特异的α-肌动蛋白表达阳性.结论 hTERT转染的HUASMC保留了HUASMC的基本生物学特征,能保持较强的增殖能力持续传代.
作者:李胜富;田佳;刘瑾;万琳;卢晓风;冯莉;孙明菡;樊瑜波;步宏;李幼平 刊期: 2003年第02期
目的探讨十二指肠胃反流(DGR)的症状与胃内胆红素含量的相关性.方法采用胃内胆红素检测仪Bilitec 2000,监测18例伴有烧心、上腹痛、恶心、呕吐4项症状中的一项或一项以上的功能性消化不良患者胃内24 h胆红素,观察患者症状与胃内胆红素之间的关系.结果 DGR症状出现的时间与Bilitec 2000监测到的胃内胆红素高峰时间十分吻合,且症状的程度与反流的程度具有良好的相关性. 结论用Bilitec 2000诊断DGR,检测时间可不必长达24 h.为获得DGR的客观证据,可在患者自述症状较重时检测数小时.此检测时间的改进有利于在临床试验中提高患者依从性.
作者:古赛;唐承薇;刘纯伦 刊期: 2003年第02期
目的探讨3种白细胞介素(IL-4、IL-6、IL-8)对慢性支气管炎急性期(慢支炎急性期)的诊断意义.方法对慢支炎急性期患者48例,非慢支炎患者29例,进行IL-4、IL-6、IL-8的诱导痰、痰、血清检测.结果三种标本的三种白介素的诊断比值比(DOR)均大于3,95%可信区间的下限均大于1.结论诱导痰、痰和血清标本中,以诱导痰及痰中的IL-4和IL-8诊断价值较好,可用于慢支炎急性期的诊断.
作者:杨恂;杨建南;钱少平;蒋永威;刘燕;官和立;杨滢 刊期: 2003年第02期
目的研究骨痂软骨细胞在骨折愈合中增殖变化的规律.方法采用二期骨折愈合模型,骨痂组织常规HE染色和细胞周期蛋白(Cyclin D3,Cyclin E,Cyclin A)、5-溴尿嘧啶核苷(BrdU)、细胞核增殖抗原(PCNA)免疫染色,观测不同时期骨痂组织形态及其细胞增殖的变化.结果组织学上可将骨痂组织分为四个区域,即静息区(RZ)、增殖区(PZ)、成熟区(MZ)和肥大区(HZ).各区的界限不如发育骨生长板中的清晰,细胞排列较紊乱,规则的软骨细胞柱少见.各区的细胞增殖可因处于不同愈合时期而变化,骨折后第1周以RZ软骨细胞增殖、分化为主;第2、3周PZ软骨细胞增殖活跃,而此时RZ软骨细胞已无明显增殖.第4周时各区软骨细胞增殖活动减弱,细胞以成熟、肥大表现为主.结论在二期骨折愈合模式中,骨痂软骨细胞增殖变化与骨修复密切相关.
作者:李华;张旻;王凡;李瑞祥;王松 刊期: 2003年第02期
目的比较p53基因的突变在食管癌前期病变和正常食管上皮中的差异,了解癌前期病变细胞中p53基因的突变与癌变的关系.方法应用PCR-SSCP方法和PCR-RFLP方法对四川盐亭县1982年施行食管癌普查的食管拉网脱落细胞,进行p53基因第5外显子及第7外显子的突变检测.结果 48例标本p53基因检测均获得成功;食管上皮重度不典型增生细胞中发现有5例突变发生,均为p53基因第7外显子,而第5外显子未发现突变.检测到的5例突变中,有3例分别在普查后10年、12年和14年后转变为食管癌.正常食管上皮拉网脱落细胞中均未发现突变.结论 p53基因保持正常状态是食管上皮维持正常的前提条件;p53基因的突变使食管上皮癌前期病变细胞具有了癌变趋势.
作者:寇瑛琍;张俭荣;陈国弟;伍伫;杨俊杰;蒋光亮;赵雍凡 刊期: 2003年第02期
目的从人子宫颈粘液分离纯化新的抗菌多肽. 方法用5%乙酸提取人子宫颈粘液可溶物,经电泳凝胶琼脂糖弥散法抗菌试验发现,子宫颈粘液酸溶性提取物有一条主带对大肠杆菌耐氨苄株ML-35P有强抗菌活性,命名为HCP.应用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术及洗脱电泳技术得到构成该主带的混合物,后应用反相高效液相色谱技术分离纯化多肽.经Tricine-SDS-PAGE鉴定其相对分子质量,并运用琼脂糖弥散法鉴定其抗菌活性.结果从子宫颈粘液酸溶性提取物中纯化出一多肽,相对分子质量约为14×103,命名为HCP-1,具有抗耐药性大肠杆菌和绿脓杆菌的活性. 结论 HCP-1可能是宫颈粘液天然免疫机制中的新的效应分子.
作者:杨华蓉;潘小玲;黄宁;吴琦;冯云;王伯瑶 刊期: 2003年第02期
目的探讨绿茶对60Coγ射线诱发小鼠辐射损伤的保护作用.方法将小鼠35只随机分为正常对照组、辐射对照组、三个饮茶试验组,饮茶试验组动物分别饮用 1.25%、2.5%、5%绿茶水浸液两周后,除正常对照动物组外,其余各组均以5Gy60Coγ射线进行一次全身照射,并继续饮茶一周后处死全部动物,测定小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力、股骨骨髓细胞DNA含量、有核细胞数及胸骨骨髓嗜多染红细胞微核率.结果三个饮茶试验组小鼠血清MDA含量、骨髓嗜多染红细胞微核率显著低于辐射对照组(P<0.05), 血清SOD活力、骨髓细胞DNA含量和有核细胞数明显高于辐射对照组(P<0.05).结论绿茶对辐射损伤具有一定的防护作用.
作者:王舟;曾令福;肖元梅;吕素玲;高翔 刊期: 2003年第02期
目的分析阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者骨髓正常细胞(CD59+)及异常克隆细胞(CD59-)的细胞构成.方法骨髓有核细胞免疫荧光标记后用流式细胞术分析.结果①PNH患者骨髓正常细胞及异常克隆的细胞组成在有核细胞水平是显著不均衡的,正常的CD59+细胞以淋巴细胞窗内细胞为主,异常的CD59-细胞则以粒细胞窗及原始细胞窗内细胞为主.②PNH患者骨髓CD59+正常细胞群所含CD34+ 细胞总数较异常者显著减少,淋巴细胞窗及粒细胞窗内CD34+细胞均较异常者显著减少,前者减少更为显著.结论 PNH患者骨髓正常细胞及异常克隆的细胞构成在有核细胞水平及CD34+ 细胞水平都有显著差异,正常造血呈衰竭状态.因此,在考虑用患者自体骨髓体外净化去除异常克隆后回输给患者重建造血时,应对正常造血细胞作进一步处理,否则正常造血细胞可能不具备重建造血的能力.
作者:李强;张之南 刊期: 2003年第02期
目的研究部分去背根及针刺对背根神经节神经元胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响.方法制作猫备用背根模型并针刺备用根支配区的两组穴位,足三里和悬钟,伏兔和三阴交.针刺7 d后取备用背根节用GDNF抗血清(1∶1000)行免疫组织化学染色.分别计数各组大、中、小阳性神经元的数量.结果非手术组GDNF阳性神经元数量为55%,其中大神经元为25%,中神经元为14%,小神经元为16%;术后非针刺组,阳性神经元总数为35%,较非手术组明显下降(P<0.05),主要为大神经元(5%)数量减少,而阳性中(13%)、小神经元(17%)数量变化不明显,但染色明显加深.针刺组GDNF阳性神经元数量又明显增加至90%,其中阳性大神经元28%,中神经元17%,小神经元45%. 结论背根节GDNF阳性大神经元数量在去部分背根术后7 d显著下降,而针刺可逆转这种变化.GDNF阳性中、小神经元数量在术后7 d并无明显变化,但针刺后表达显著增加.
作者:袁源;王廷华;杨志敏;刘芬 刊期: 2003年第02期
目的调查D4S1647、D6S2414基因座在中国汉族、蒙古族、藏族群体中的遗传分布规律.方法采集308份血及唾液标本应用PCR技术,扩增产物用非变性聚丙酰胺凝胶电泳分离,银染显色分析.结果两位点各群体基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡,每一位点等位基因频率分布在各群体间均无显著差异;通过对10个汉族家系的遗传模式分析,证实了两位点等位基因传递遵循孟德尔遗传规律. 结论 D4S1647、D6S2414基因座在中国汉族、蒙古族、藏族群体均具有高度遗传多态性.
作者:汤智育;廖淼;胡羽;梁伟波;张林;陈国弟 刊期: 2003年第02期
患者刘××,女,48岁,因发现下腹部包块4个月于2002年8月21日入院.患者自行触及下腹部包块,无腹痛,感腹胀,食欲减退,低热.4年前于外院行子宫大部切除术及右卵巢切除术,术后病理示子宫肌壁结核及子宫内膜结核.查体:贫血貌,腹部包块如孕5个月大小,界限不清,无压痛.妇科检查阴道宫颈未见异常.辅助检查:血沉70 mm/h,HB 78 g/L,CA125为179.09 U/ml,B超见盆腔16 cm×11.9 cm×17 cm不均质弱回声团,边界清晰,不规则.
作者:姚红霞;罗国林;王红静 刊期: 2003年第02期
目的分析下颌第一磨牙全瓷冠受载时的应力状况,考察全瓷冠不同形态设计的应力特征,旨在为全瓷冠的临床修复设计提供依据. 方法三维有限元法. 结果全瓷冠受载时产生的张应力及剪切应力因其牙合面厚度不同而有差异,当牙合面厚度为1.0 mm时,应力值大:张应力23.35 MPa、剪切应力30.76 MPa. 结论临床制作全瓷冠时,冠的牙合面厚度宜在1.5 mm 以上,以提高全瓷冠的抗折能力.
作者:程碧焕;赵云凤;王华容;张剑 刊期: 2003年第02期
目的结合溶胶凝胶制膜法和光纤传导技术制备性能良好的氧传感器.方法采用四乙氧基硅烷(TEOS)和甲基-三乙氧基硅烷(MTEOS)共水解制膜,并对制膜方法进行优化,结合Stern-Volmer曲线的绘制及样品的测定,对方法进行整体的验证. 结果制备的光纤氧传感器在较大的浓度范围内(气态氧0%~100%、溶解氧0.55~33.1 mg/L,29℃),测定结果有良好的线性相关(r>0.9990),且响应迅速(T95<20 s),抗干扰能力强,稳定性较好.通过与碘量法对比,发现两种方法的测定结果无显著性差异.结论为在复杂、恶劣的测定环境中在线连续监测气态氧或溶解氧提供了一种较好的手段.
作者:冉良骥;吕太平;向仕学 刊期: 2003年第02期
目的观察生长抑素对急性胰腺炎时血中抗炎性细胞因子IL-10及TGF-β1的影响并探讨其意义. 方法实验用雄性SD大鼠分为正常对照组(n=6)、胰腺炎组(n=8)和生长抑素组(n=6)3组.胰腺炎组采用开腹胰胆管注射5%牛黄胆酸钠0.6 ml/kg制成胰腺炎模型;生长抑素组于胰腺炎诱导成功后,皮下注射生长抑素3 μg/(kg*h),12 h重复一次.分别于2 h、6 h、24 h处死动物,抽血查IL-10和TGF-β1,同时检测胰淀粉酶和胰腺湿重,血白细胞记数. 结果在急性胰腺炎后2、6 h IL-10及TGF-β1 无明显变化,但在急性胰腺炎后24 h血中的IL-10及TGF-β1 则显著增高(P<0.05);生长抑素组上述细胞因子较胰腺炎组明显下降(P<0.05).3组动物24 h血淀粉酶分别为374.2±92.84 U/L,1682.25±459.35 U/L,1497.40±225.9 U/L,胰腺湿重分别为0.53±0.09 g, 1.53±0.13 g, 1.68±0.15 g.对比生长抑素治疗前后发现,反映胰腺炎病情严重性的胰腺湿重和淀粉酶两项指标均无明显好转(P>0.05). 结论生长抑素在急性胰腺炎后期抑制抗炎性细胞因子IL-10及TGF-β1 的升高是生长抑素不能有效缓解胰腺炎病情的重要因素之一.
作者:吴浩;陈晓理;邓一芸;黄兴兰;张正 刊期: 2003年第02期
目的评价甲泼尼龙治疗颅内肿瘤瘤周水肿的临床疗效和安全性.方法 58例具有不同程度瘤周水肿的颅内肿瘤患者随机分为试验组和对照组,两组患者术前、术后分别静脉给予常规等效剂量甲泼尼龙和地塞米松治疗3~5 d,观察两组患者在术前治疗过程中临床神经症状及体征的改善程度,在术前治疗前后作KPS评分,并观察两组患者在治疗过程中可能出现的副作用.结果试验组30例中有19例的临床症状得到改善,有效率为63%,其中9例有明显改善,显效率为30%,对照组28例中有17例的临床症状得到改善,有效率为60.7%,其中4例有明显疗效,显效率为14.3%.两组比较,有效率无明显差别,但显效率比较则有显著性差别(P<0.05).治疗期间,两组均无明显副作用发生. 结论甲泼尼龙可有效地减轻颅内肿瘤所致的瘤周水肿,且无明显副作用.
作者:丁新民;毛伯镛;鞠延;刘艳辉 刊期: 2003年第02期
目的评价微卫星DNA序列在人-鼠脐血异种移植中的应用价值.方法采用PCR扩增短串联重复序列(PCR-STR)技术及克隆形成细胞体外培养方法,观察移植后受鼠体内的造血细胞植入情况、造血生长因子对其的影响.结果①静脉输注1~5×107个MNC/只鼠可使受鼠体内表达供者DNA,而经腹腔注射不能建立人-鼠移植模型.②人脐血细胞移植SCID小鼠可以重建小鼠造血功能,其表达水平与外源细胞因子的使用无关.结论STR-PCR分析可以从分子水平对移植物植入状态进行微量和准确的鉴定,该方法为人-鼠脐血移植模型的鉴定提供了简便、快捷的手段.
作者:刘兴会;潘小玲;黄宁;彭芝兰;吴谨 刊期: 2003年第02期
目的探讨部分背根切断术及针刺对背根节(DRG)c-jun表达的影响.方法将成年雄猫15只,分假手术组,手术组和术后针刺组,每组5只.手术组动物行单侧备用根术,术后针刺组动物经单侧备用根术后,针刺后肢手术侧L6脊神经分布区中的两组穴位:足三里和悬中;伏兔和三阴交, 每天一次,每次30 min,连续针刺7 d.通过免疫组化ABC法,用c-jun特异抗体(1∶1000,Santa Cruz) 对切片进行染色,DAB呈色.观察并测量DRG中c-jun阳性神经元的分布、数量及反应强度.结果在假手术组DRG中,只有部分神经元染色.手术组c-jun阳性神经元的数量较假手术组显著增多(P<0.05),其免疫反应水平较假手术组,显著上升(P<0.05).术后针刺组较手术组的c-jun免疫反应强度增强,而阳性神经元的数量没有显著差异.结论部分背根切断后备用DRG神经元中c-jun的表达增加,针刺促使c-jun的表达进一步上调.
作者:柯青;王廷华;李朗;于建云;郭泽云 刊期: 2003年第02期
目的评价腺苷脱氨酶和结核抗体对鉴别恶性腹水和结核性腹水的临床价值.方法采用改良的Martineck法和金标免疫斑点法(DIGFA)对35例结核性腹水,31例恶性腹水的腹水腺苷脱氨酶(ADA)和结核性抗体(PPD)水平进行了检测.结果结核性腹水ADA和PPD水平明显高于恶性腹水,以ADA>45 U/L作为阳性标准,其对结核性腹水的敏感性为100%,特异性为97.1%,准确性为98.5%,腹水结核抗体对结核性腹水的敏感性为93.5%,特异性为94.3%,准确性为95.38%.结论腹水ADA和PPD检测对鉴别恶性腹水和结核性腹水有重要的临床价值,腹水ADA水平升高和PPD阳性支持结核性腹水,反之,则支持恶性腹水诊断.
作者:杨正兵;向丹沙;傅明建 刊期: 2003年第02期
目的研究脑源性神经营养因子(BDNF) 对过氧化氢(H2O2)诱导人动脉平滑肌细胞(SMC)凋亡的作用.方法 BDNF基因经脂质体介导转染SMC,Ⅰ型胶原基因调节元件(COLIA1)驱动该基因在SMC中异位表达,用MTT法检测细胞增殖,吖啶橙(AO)荧光染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,琼脂糖电泳检测DNA图谱.结果 100~800 μmol/L浓度的H2O2明显抑制SMC增殖,200 μmol/L H2O2作用24 h后,可见典型的细胞凋亡形态学及生物化学改变即胞浆固缩、核染色质断裂、DNA电泳呈梯形条带;经BDNF基因修饰的SMC则未显示上述改变.结论 H2O2能有效诱导SMC凋亡, 转BDNF基因的SMC对H2O2 诱导凋亡具有明显的拮抗作用.
作者:陈建业;刘戟;王若菡;刘智敏;李忌;陈俊杰 刊期: 2003年第02期
目的系统研究C57鼠、mdx鼠、dystrophin/utrophin基因双敲除(dko)鼠运动功能、生化、病理等方面的差异,为假肥大型肌营养不良症(DMD)的进一步研究提供可靠依据.方法取8~9周龄的C57鼠、mdx鼠、dko鼠,对其做运动生理测定以及血肌酸激酶(CK)、肌肉组织病理、肌肉组织免疫组化检测.结果 dko鼠的3 min牵引实验坠落次数、10 min转棒实验坠落次数以及血清CK分别为 15.83±3.06、10.83±2.64和1570.50±237.79(U/L),与C57鼠的4.33±2.73、1.83±1.33和233.83±77.45及mdx 鼠的3.67±2.73、1.33±0.67和868.17±127.92比较,其检测结果均有显著差异.mdx鼠与C57鼠比较,病理、生化有差异,运动功能无差异.结论dko鼠与mdx鼠比较,病情重,更接近DMD的疾病特性,是研究DMD行为学较理想的模型.
作者:陈松林;张成;刘晓蓉;高铃;张为西;黄文;卢锡林;王展航 刊期: 2003年第02期