毛达勇;喻飞;张吉才
目的 建立一种快速、直观地检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶菌株的纸片表型检测法,尽快为临床提供准确药敏结果.方法 采用K-B法,对药敏纸片进行合理布局,观察待检菌株耐药表型.采用头孢西丁(FOX)纸片检测法对耐三代头孢菌素且FOX抑菌圈≤18 mm的83株大肠埃希菌和50株肺炎克雷伯菌进行AmpC 酶的检测,并对检测结果进行回顾性分析.结果 共检出107株同时产ESBLs和AmpC酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌.回顾性分析发现,对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,在三代头孢菌素耐药的同时,头孢西丁(FOX)抑菌圈≤11 mm的菌株,均为产AmpC酶株;或12 mm≤FOX抑菌圈≤14 mm,同时伴有TZP,SCF,CTX/C中任意一个或多个的抑菌圈≤17 mm的菌株,亦为产AmpC酶株.结论 该室分离的致病菌株的耐药性呈明显上升趋势;用该室方法对药敏纸片进行布局,有利于对产ESBLs和AmpC酶菌株的联合检测,该法简便、快速,缩短了对产酶株的检测时间,为重症感染患者的抢救争取了时间,可在临床实验室推广应用.
作者:孙晓红;帅丽华;谢福生;胡志坚;苏占营;周会祥 刊期: 2011年第04期
目的 探讨免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用.方法 采用血清蛋白电泳技术、血清免疫固定技术(IFE)检测107例MM患者血清M蛋白.结果 107例MM患者中97例血清蛋白电泳检出M蛋白,107例免疫固定电泳均检出M蛋白.M蛋白IFE分型结果为IgG型63例,其中IgG κ型29例,IgG λ型34例;IgA型25例,其中IgA κ型11例,IgA λ型14例;IgM型3例,其中IgM κ型1例,IgM λ型2例;单纯轻链型15例,其中κ型2例,λ型13例.60例MM患者中有39例检出尿本-周氏蛋白,其中,12例为κ型,27例为λ型.三种方法中血清免疫固定电泳的检出率高,血清蛋白电泳次之,尿液本周氏蛋白电泳检出率低(P<0.01).结论 采用免疫固定电泳技术,操作简单、快速,灵敏度高,沉淀带容易识别,是鉴定各类型M蛋白的较准确、直观的有效方法.
作者:刘玉梅;赵有利;石翀;李光迪 刊期: 2011年第04期
为了优化输血流程管理,保证输血安全.广东省中医院自2008年开始建设输血科管理系统,2009年正式投入使用,在使用一年多的时间里,应用该输血科信息管理系统对血液入库、交叉配血、发血、血液库存管理等流程进行信息化的管理.既能提高工作效率,同时大大减少人为差错的发生,为该院的输血安全提供有效的保障.
作者:梁铮;周厚全;高云龙;徐建华;吴新忠 刊期: 2011年第04期
目的 探讨HBV-LP(乙肝病毒大蛋白)阳性患者CD4+CD25+Treg细胞数量的变化规律及其意义.方法 将HBV感染者标本,采用ELISA方法检测HBV-LP,PCR方法检测HBV-DNA,按照HBV-LP阴、阳性患者及正常血清共170例,其中男87例,女83例,平均年龄43(23~61)岁.分成四个实验组,第一组为HBV-LP阳性46例,第二组为正常组(非HBV感染者)50例,第三组为HBV-LP阴性及HBV-DNA阴性HBV感染者43例,第四组为HBV-LP阴性而HBV-DNA阳性的HBV感染者31例.各组之间在性别、年龄上分布均衡,差异无统计学意义.各组分别采用淋巴细胞分离液梯度离心法分离研究对象外周血,FCM术检测CD3+T,CD4+T,CD8+T,CD4+CD25+Treg细胞数量,进行分析.结果 ①各实验组之间CD3+T,CD8+T细胞数量无显著性差异,各组CD3+T分别为(65.38±4.85)%,(67.07±5.04)%,(64.94±5.26)%,(63.58±4.81)%(P>0.05),CD8+T分别为(53.41±4.28)%,(54.71±5.05)%,(54.09±5.13)%,(52.59±4.88)%(P>0.05).②结果以CD4+CD25+Treg来评价:HBV-LP阳性组(5.22±1.81)%分别高于正常对照组(3.13±1.12)%,HBV-LP阴性及HBV-DNA阴性组(3.24±1.22)%,HBV-LP阴性而HBV-DNA阳性组(3.23±1.61)%(P<0.01),而HBV-LP阳性组CD4细胞数量(32.63±3.93)%却低于其他三个实验组(39.32±5.55%),(37.53±4.72)%,(34.03±5.71)%,差异有统计学意义(P<0.05),③值得注意的是,HBV-DNA阳性而HBV-LP阴性组的各项指标几乎与正常组十分接近,之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 HBV-LP阳性的HBV感染者外周血CD4+CD25+Treg细胞水平明显增高,CD4+CD25+Treg细胞的过度表达在乙肝的发病机制及病程的转归中可能起着重要的作用.
作者:熊建辉;付汉维;王贵萍 刊期: 2011年第04期
目的 为实际工作中既定参考区间的转换以及已建立参考区间的验证提供帮助和建议.方法 参考国外相关领域文献,结合中国实际情况完成该次研究.结果 参考区间的转换和验证是实验室确定所用参考区间的两种推荐方法.参考区间转换的明显优点是不需要分析参考个体样本,但只适用于相关参考区间已使用的机构.当一家实验室想要采用生产商提供的或具有相同或相似分析系统的另一家实验室所使用的参考区间时,可以对已建立的参考区间进行验证.如果经过充分调查研究及进一步验证后无法采用该参考区间,建议实验室应该考虑建立自己的参考区间.结论 大多数实验室没有能力也没有必要建立自己的参考区间,可以通过转换和验证其他参考区间来达到目的.
作者:钟堃;王治国;王薇;李少男;白玉 刊期: 2011年第04期
目的 对荧光法同型半胱氨酸测定试剂盒进行初步临床应用评价.方法 依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)颁布的EP5-A,EP6-A,EP7-A 分别对杏恩公司生产的荧光法同型半胱氨酸测定试剂盒进行了精密度评价、线性评价、抗干扰试验,并依据EP9-A2与高效液相色谱法进行了对比试验.结果 高浓度水平(Hcy 20.0 μmol/L)的批内精密度和总精密度分别为1.88%和3.71%,低浓度水平(Hcy 10.0 μmol/L)的批内精密度和总精密度分别为2.76%和3.98%;在0~ 60.0 μmol/L 范围内,测定结果线性良好;胆红素在500.0 μmol/L,三酰甘油在15.0 mmol/L,维生素C在10 mmol/L以内,血红蛋白在16.0 g/L内,干扰相对偏差小于5%,对实验结果无明显干扰;荧光法与高效液相色谱法测定的同型半胱氨酸结果差异无统计学显著性意义(P>0.05),相关性良好(r2=0.976 1).结论 荧光法同型半胱氨酸检测试剂盒在测定精密度、线性范围、抗干扰等方面的性能可以满足临床检测的需要.
作者:邵坤宁;杨丽娟;张海燕 刊期: 2011年第04期
目的 通过微柱特异性凝胶和传统试管法在直接抗球蛋白试验中的比较,探讨确认微柱凝胶技术直接抗人球蛋白试验的可靠准确性.方法 采用试管法和微柱特异性胶试剂对56例血液标本进行直接抗球蛋白试验,微柱法阳性32例,试管法阳性30例.结果 微柱法直接抗球蛋白试验阳性:抗-IgG13例;抗-IgG,抗-IgA同时存在1例;抗-IgG,抗-IgA,抗-IgM同时存在2例;抗-IgG,C3d同时存在10例;C3d 6例;C3c 0例.试管法直接抗球蛋白试验阳性:抗-IgG 14例,抗-IgG,C3d同时存在10例;C3d 6例.结论 微柱法操作简便结果可靠,值得在临床推广应用.
作者:钟月华 刊期: 2011年第04期
目的 通过该实验室不同血细胞分析仪新鲜全血样本检测结果的分析比较,了解不同仪器对同一样本检测结果的可比性.方法 按EP9-A文件要求,以Beckman Coulter LH-750型血细胞分析仪为比对仪器,以Sysmex XE-2100型及XS-800i型血细胞分析仪为实验仪器,采集患者新鲜全血样本对WBC,RBC,HB,PLT四参数进行检测,计算相关参数与回归方程,计算比对仪器与实验仪器间的相对偏差(SE%),以美国临床实验室修正法规(CLIA'88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断不同仪器间测定结果的可比性.结果 新鲜全血样本各检测仪器间测定结果的相关系数均r>0.975,部分检测系统的HB,PLT在低值医学决定水平处相对偏差超过可接受范围,仪器调整后,检测结果相对偏差在允许范围内.结论 同一实验室不同血细胞分析仪需定期进行比对,保证同一样本检测结果在同一实验室具有可比性.
作者:迟林;李昊淼;韩秀英 刊期: 2011年第04期
目的 调查来临潼疗养院查体的空军机务人员幽门螺旋杆菌(Hp)的感染情况.方法 用14C呼气试验检测临潼疗养院空军机务人员的Hp感染状况,对照组为其他单位查体人员.结果 其他单位查体人员Hp感染率为42%,空军机务人员Hp感染率为63.6%,显著高于一般查体人员,差异有统计学意义(P<0.01).结论 初步认为空军机务人员Hp感染率明显高于普通人群,可能与其职业压力、精神紧张、集体就餐等情况有关.
作者:刘学芳;吴薇 刊期: 2011年第04期
目的 在已知烟草节杆菌02181肌酸酶基因部分序列的基础上,从烟草节杆菌02181基因组DNA中克隆得到肌酸酶全基因.方法 根据已得到的肌酸酶部分序列,利用基因组步移技术,分别克隆得到肌酸酶基因已知部分序列的上、下游序列,再将3段序列拼接,得到肌酸酶全基因,并在NCBI上检索证实.结果 得到的烟草节杆菌02181肌酸酶基因的全长序列,在NCBI上检索后证实为一新基因,该基因全长1 254 bp(含终止密码子TAA),为一完整的开放读码框架(ORF),编码417个氨基酸,理论分子量为46 377 Da,并与多种不同来源的肌酸酶有着较高的同源性.其中,与Arthrobacter sp.FB24来源的肌酸酶氨基酸序列的一致性达到了80%(332/417),同源性则达到了87%(365/417).结论 成功地克隆了烟草节杆菌02181肌酸酶基因,为今后的基因表达奠定了基础,也为肌酐测定试剂的国产化迈出了坚实的一步.
作者:智强;胡川闽;易维京;周玉;侯小平 刊期: 2011年第04期
血栓弹力图(thromboelastograph,TEG)通过动态监测血小板聚集、凝血、纤溶等过程,全面地分析血液凝固及纤溶的全过程,该文旨在通过介绍TEG原理及结果分析,并结合一例经血栓弹力图仪检测发现阿司匹林/氯吡格雷抵抗的病例报道,强调其对临床诊断、治疗的重要指导作用.
作者:王克迪;孔玉华;康熙雄 刊期: 2011年第04期
目的 设计马内菲青霉菌特异性引物,探讨马内菲青霉菌病早期诊断的方法及抗生素治疗的药物选择.方法 马内菲青霉菌按常规方法放在25℃和37℃进行真菌培养;参照NCCLS M27-A,M38-P对3株马内菲青霉菌的酵母相和菌丝相进行小抑菌浓度(MIC)测定;PCR的鉴定采用马内菲青霉菌18S rRNA的特征序列,设计内引物Pm1,Pm2和外引物FSF,FSR进行巢式-PCR扩增,并对产物进行产物鉴定.结果 马内菲青霉菌为双相性真菌,25℃为青霉相,在沙保弱琼脂平板上产生具有特征性的红色色素,37℃为酵母相,无色素产生;微量稀释法比较马内菲青霉菌在25℃菌丝相和37℃酵母相时的MIC值,结果显示伊曲康唑敏感性强,其次是酮康唑、5-氟胞嘧啶和氟康唑,弱的为二性霉素B;3株马内菲青霉菌经巢式-PCR扩增后大约有400 bp片段,其他真菌如白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、曲霉菌则没有.结论 巢式-PCR可以快速鉴定马内菲青霉菌,48 h培养的单个菌落、10 h可以鉴定出结果,而培养则需4~7 d,巢式-PCR对马内菲青霉菌病早期诊断有重要的临床指导意义.医生应结合临床症状及早应用抗真菌药物.
作者:周俊英;涂建成;郭清莲 刊期: 2011年第04期
目的 研究聚合酶链式反应-特异性序列引物(PC-SSP)基因分型技术在ABO疑难血型鉴定中的应用.方法 收集8例来自广东省肇庆市无偿献血者的ABO疑难血型样本,采用正反定型实验、吸收放散试验等一系列血型血清学方法进行检测;提取基因组DNA,并用PCR-SSP基因分型技术,特异性扩增ABO基因片段,根据有无PCR产物以及产物长度,判断样本的基因型.结果 通过凝胶电泳检测PCR反应的特异性产物,判断样本1~6号ABO基因型为A/O型,样本7,8号为B/O型.8例疑难ABO基因分型结果与其血型的血清学分型结果吻合.结论 ABO疑难血型定型的解决是一个复杂的难题,而PCR-SSP基因分型是一种方便、快速、可靠的技术,对于解决ABO疑难血型鉴定非常有用.
作者:陈志忠;廖扬勋;陈尚良;余文潮;梁剑锋;车京霞 刊期: 2011年第04期
目的 为了解广州地区健康儿童鼻咽部金黄色葡萄球菌的带菌情况及耐药性.方法 用鼻咽拭子法采集1 052名3~5岁广州市幼儿园健康儿童鼻咽分泌物进行金黄色葡萄球菌分离培养,采用K-B法检测178株金黄色葡萄菌对替考拉宁、头孢西丁、阿米卡星、环丙沙星、头孢唑啉、氨苄/舒巴坦、青霉素、红霉素、克林霉素、庆大霉素、头孢他啶、四环素、复方新诺明等13种抗菌药物的耐药性;用E-Test法检测178株金黄色葡萄菌对万古酶素的耐药性.结果 健康儿童鼻咽部金黄色葡萄球菌带菌率为16.9%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为0%,对万古霉素、替考拉宁、头孢西丁、氨苄/舒巴坦、阿米卡星、头孢唑啉和复方新诺明的耐药率均为0%,对青霉素、红霉素、克林霉素、头孢他啶、四环素、庆大霉素的耐药率分别为91.1%,74.3%,25.7%,25.7%,4.3%和2.9%.结论 健康儿童鼻咽部金黄色葡萄球菌带菌率不高,其中MRSA比例及对14种药物的耐药性明显低于上呼吸道感染患儿所带金黄色葡萄球菌.
作者:李彩金;邓秋连;谢永强;黄勇;钟玉葵 刊期: 2011年第04期
目的 探讨单独或联合检测血清IL-6,CA19-9和CA242在胰腺癌诊断中的价值,分析3项肿瘤标志物血清水平与胰腺癌临床分期的关系.方法 分别检测83例胰腺癌患者、78例慢性胰腺炎患者和80例健康者血清中IL-6,CA19-9和CA242水平,分析3种指标对胰腺癌诊断的临床价值及其与临床病理因素之间的关系.结果 在胰腺癌病人中,3种标志物血清浓度均显著高于慢性胰腺炎组和对照组;并且与肿瘤的浸润程度、淋巴结转移以及远处转移相关.3种标志物平行法联合检测可使诊断的灵敏度提高至95.2%,系列法联合检测则使特异度提高至97.5%.结论 血清IL-6,CA19-9和CA242水平对胰腺癌的诊断和临床分期具有重要意义,联合检测可提高诊断灵敏度和特异度.
作者:钟善传;董凤珍;刘涤瑕;王丽;涂晖;陈金超 刊期: 2011年第04期
目的 报告1例潜在Angleman综合征风险妊娠的产前遗传学诊断.孕妇曾生育过15q11-13缺失的Angleman综合征患儿.该妇女再次受孕,要求产前诊断.方法 孕妇于妊娠26周时在常规B超引导下,经羊膜腔穿刺抽取胎儿脐带血进行细胞培养,染色体核型分析,并用15号染色体含有15q11-13的特异位点的双色探针进行荧光原位杂交.结果 胎儿染色体核型为47,XX,+mar与母亲核型相同,双色荧光原位杂交结果提示15q11-13没有缺失.孕妇于40周时剖腹产一个健康女婴,现孩子生长发育正常.结论 对潜在染色体病风险胎儿进行产前诊断非常重要,以避免染色体病孩子的出生.
作者:张静;崔英霞;范晓博;陈颖皓;周洋;夏欣一;李晓军 刊期: 2011年第04期
目的 研制与临床样品基质相似的冰冻人血清HDL-C和LDL-C标准物质.方法 按国家标准物质技术规范,选择身体健康、年龄和性别适当、无传染病的志愿者采取空腹静脉血,离心分离血清,以不同胆固醇水平分成3组,分别混合、除菌过滤和分装.检验血清HDL-C和LDL-C的均匀性和稳定性.分别用DCM法和UC/HPLC法为HDL-C和LDL-C定值.评估不确定度.应用不同分析系统测定三种血清的HDL-C和LDL-C.结果 ①三种血清HDL-C和LDL-C均匀性检验方差分析P值均>0.05,说明均匀性良好.②稳定性研究结果显示血清HDL-C和LDL-C在-80℃保存至少可稳定1年.③三种血清HDL-C和LDL-C的定值±不确定度(mmol/L)分别为1.640±0.028,1.652±0.027,1.184±0.022和4.577±0.097,2.492±0.072,1.788±0.041.④16家临床实验室以各自分析系统测定3种冰冻血清与新鲜血清反应趋势基本一致,HDL-C和 LDL-C均值与定值偏差分别为3.24%,2.7%,4.63%和-2.64%,0.64%,1.08%.结论 3种冰冻人血清均匀、稳定,定值可靠,在常规分析系统中互通性良好,已被国家质量监督检验检疫总局批准为国家一级标准物质(GBW 09178,GBW 09179,GBW 09180).
作者:李红霞;国汉邦;周伟燕;赵海舰;张传宝;董军;王抒;闫颖;陈文祥;申子瑜 刊期: 2011年第04期
目的 研究血清铁调素(Hepcidin)和炎症介质因子细菌脂多糖(LPS)白细胞介素(IL)、肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素(IFN)等细胞因子在癌症患者中的表达特点以及与癌症相关性贫血(癌性贫血)发生发展之间的关系.方法 应用双抗夹心生物素-亲和素-酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)检测190例癌症患者的血清Hepcidin和LPS,IL-1β,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12,IFN-β,IFN-γ,TNF-α以及TNF-β水平,并分析Hepcidin与贫血、IL-6以及LPS等细胞因子之间的相关关系.以同期的30名健康献血员为对照组.结果 ①癌症患者的血清Hepcidin,LPS,IL-6,TNF-α,TNF-β和IFN-β分别为40.67±7.98 μg/L,66.57±46.36 μg/L,17.99±47.56 ng/L,8.43±6.02 ng/L,94.39±61.68 ng/L和8.42±4.61 ng/L均明显高于对照组23.17±5.21 μg/L,49.01±18.95 μg/L,7.89±9.62 ng/L,6.12±2.57 ng/L,65.00±23.45 ng/L和6.04±2.26 ng/L(分别为P<0.01和P<0.05),而IL-1β,IL-8,IL-10,IL-12和IFN-γ则两组差异无统计学意义(均为P>0.05).②癌症贫血患者的血清Hepcidin为51.99±32.56 μg/L明显高于无贫血患者的36.63±31.99μg/L(P<0.01);LPS和 IL-6分别为75.33±62.63 μg/L和39.36±82.60 ng/L,均高于无贫血患者的63.43±38.76 μg/L和10.38±22.00 ng/L(P<0.05);IL-10为4.88±9.25 ng/L,高于无贫血患者的2.44±2.72 ng/L(P<0.01).其余7种细胞因子则贫血与无贫血患者之间无显著差异(均为P>0.05).③癌症患者的Hepcidin与LPS呈正相关关系(r=0.248,t=3.507 8,P<0.01);与IL-6也呈正相关关系(r=0.216,t=3.018 2,P<0.01);而Hepcidin与IFN-β呈负相关关系(r=-0.284,t=4.305 71,P<0.01),与TNF-β也呈负相关关系(r=-0.456,t=7.037 0,P<0.01).但与其他细胞因子无相关关系.④癌症患者的血红蛋白值与Hepcidin,IL-6和IFN-β三者呈负相关关系(分别为r=-0.165,-0.152和-0.180,均为P<0.05);而与LPS等其他细胞因子均不相关.结论 癌性贫血患者高表达Hepcidin,LPS和IL-6,Hepcidin与LPS和IL-6均呈正相关关系;它们在癌性贫血的发生发展过程中起重要的作用.
作者:潘湘涛;陆晔;程旭;王金湖;李蓉;严敏;仇慧珠;左二冬 刊期: 2011年第04期
目的 观察沙利度胺联合化疗治疗急性白血病的临床疗效及其对血浆血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)水平的影响.方法 急性白血病患者36例,随机分为实验组及对照组各18例.每组均予以常规化疗方案标准剂量化疗,实验组同时长期口服沙利度胺100 mg/d.治疗前及治疗后8周分别采集外周血用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆VEGF和VEGFR含量.结果 实验组与对照组的有效率分别为88.9%和77.8%,差异有统计学意义(χ2=4.103,P<0.05).血浆VEGF水平实验组与对照组治疗前结果(389.78±249.94 pg/ml,318.54±125.78 pg/ml)分别与健康组(132.91±26.66 pg/ml)相比差异有统计学意义(t=3.141,t=3.024,P<0.01,P<0.01);实验组与对照组治疗后结果(211.74±36.72 pg/ml,288.02±31.77 pg/ml)分别与健康组相比差异有统计学意义(t=2.413,t=2.324,P<0.05,P<0.05);实验组与对照组治疗前相比差异无统计学意义(t=1.384,P>0.05);实验组与对照组治疗后相比差异有统计学意义(t=2.793,P<0.05).血浆VEGFR水平实验组与对照组治疗前结果(2 490.75±1 695.9 pg/ml,2 322.78±1 105.87 pg/ml)分别与健康组(1 134.98±378.45 pg/ml)相比差异有统计学意义(t=2.914,t=2.783,P<0.01,P<0.01);实验组与对照组治疗后结果(1359.71±390.24 pg/ml,1753.89±337.04 pg/ml)分别与健康组相比差异有统计学意义(t=2.572,t=2.447,P<0.05,P<0.05);实验组与对照组治疗前相比差异无统计学意义(t=1.276,P>0.05);实验组与对照组治疗后相比差异有统计学意义(t=2.486,P<0.05).直线相关分析发现血浆VEGF及VEGFR水平与临床疗效间具有一定的相关性(r=0.613,r=0.575,P<0.05).结论 沙利度胺联合化疗可提高急性白血病患者的缓解率,其作用机制可能通过抑制血浆VEGF及其受体水平的表达而发挥其抗血管增殖的抗白血病作用.
作者:翟欣辉;魏绪仓;王一;连小赟;赵园;张玎;苗玉迪 刊期: 2011年第04期
目的 改进手工制备浓缩血小板方法,提高血小板制备质量.方法 ①全血经特定程序进行离心,利用全自动血液成分分离机分离白膜,白膜解聚后进行二次轻离心.②经白细胞滤器滤除血小板中的白细胞,然后进行细胞计数.结果 10份按该法制备的浓缩血小板(10U/袋),其血小板计数、残余红细胞数、白细胞数分别为(3.8±0.3)×1011/袋,(4.0±0.4)×108/袋,(0.5±0.3)×106/袋,容量250 ml~350 ml.结论 该法制备的手工浓缩血小板含量高,残余红细胞、白细胞数量低.质量指标达到国家质量要求,适宜血站推广应用.
作者:党娥;陈晨;张蕾;刘晶;贾登;穆士杰;张献清 刊期: 2011年第04期