张妍;王薇;何法霖;钟堃;王治国
目的 研究氟达拉滨(Fludarabine,FDB)联合丙戊酸(valproic acid,VPA)对慢性粒细胞白血病(chronic myeloidleukemia,CML)细胞株K562增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 慢性粒细胞白血病细胞株K562,单独使用不同浓度的FDB(1,5,10μmol/L)或VPA(1,2.5,5 mmol/L),或联合使用FDB和VPA处理K562细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况,并观察其有效的作用浓度;流式细胞仪检测K562细胞周期变化;western blot检测凋亡相关蛋白及组织蛋白酶B的表达变化.结果 单独使用FDB或VPA均可明显抑制K562细胞的增殖,呈剂量依赖性,并使K562细胞停滞在G0/G1期,联合使用VPA能增强FDB对K562细胞的凋亡诱导作用.同时检测到FDB和VPA能诱导溶酶体中组织蛋白酶B的表达.结论 联合使用FDB和VPA可诱导K562细胞溶酶体中组织蛋白酶B的表达及活性,从而启动溶酶体介导的细胞凋亡过程,明显抑制K562细胞的增殖,并促进K562细胞的凋亡,提高治疗效果,为临床抗肿瘤治疗提供新的指导方向.
作者:苗玉迪;魏绪仓 刊期: 2014年第03期
目的 研究改良Trizol-SiO2法在咽拭子及疱疹液EV71-RNA提取中相对于目前常用的Trizol-氯仿-二氧化硅提取法的优势.方法 选取2010年6月~2013年1月传染科及发热门诊300例手足口病患儿咽拭子和(或)疱疹液拭子标本分别采用Trizol-氯仿-二氧化硅提取法和改良Trizol-SiO2法进行实验结果统计学分析.结果 采用Trizol-氯仿-二氧化硅提取法的232例EV71-RNA阳性标本,采用改良Trizol-SiO2法所获得的定性结果均为阳性;采用Trizol-氯仿-二氧化硅提取法的68例EV71-RNA阴性标本,采用改良Trizol-SiO2法所获得的定性结果均为阴性,两种方法差异无统计学意义(P=0.993).同时所获的EV71-RNA在进行荧光定量PCR扩增后的扩增曲线Ct值,两种方法差异无统计学意义(P=0.874).结论 与目前实验室常用的提取EV71-RNA Trizol-氯仿-二氧化硅法相比较,改良Trizol-SiO2法剔除了氯仿试剂并延长了SiO2吸附核酸物质的时间,此方法实现了EV71-RNA的快速提取,适用于大样本量的操作,具有很好的临床应用价值.
作者:王威;冯艾;惠凌云;王亚文 刊期: 2014年第03期
目的 探讨西安市体检人群中高尿酸血症(HUA)患病率及相关危险因素.方法 以5 380名体检人员为研究对象,其中男性2 731人,女性2 649人.分为三组:<45岁为青年组,45~59岁为中年组,≥60岁为老年组.体检内容包括:身高、体质量、血压、心率、血常规、生化指标等,并计算体重指数(BMI).应用SPSS17.0软件包进行统计分析,两组间计量资料均值比较用t检验,计数资料比较采用x2检验,危险因素采用二分类非条件logistic回归分析.结果 HUA患病率为12.7%,其中男性为18.0%,女性为7.3%.HUA组患者的年龄,BMI,SBP,DBP,FBG,TC,TG,LDL-C水平均高于非HUA组,HDL-C低于非HUA组,两组比较差异有统计学意义(t=3.582~16.879,P值均<0.01).青、中年组男性HUA患病率(20.8%,15.2%)明显高于同年龄组女性患病率(2.3%,6.8%),差异有统计学意义(x2值分别为209.076,28.108,P值均为0.000).而老年组女性HUA患病率(19.3%)高于同年龄组男性患病率(15.3%),但差异无统计学意义(x2=3.284,P=0.070).老年组总的HUA患病率(17.2%)高于中、青年组(10.8%,12.0%),差异有统计学意义(x2值分别为23.536,18.000,P值均为0.000).logistic回归分析显示,男性、年龄、BMI、高血压、高TG血症及LDL-C与HUA呈正相关,而高FBG及HDL-C与HUA呈负相关关系.结论 西安市体检人群HUA患病率为12.7%,男性、年龄、BMI、高血压、高TG血症及LDL-C是HUA的独立危险因素,而高FBG及HDL-C是HUA的保护因素.
作者:高宁;许楠;李小珍;李妙羡;何谦;王香玲 刊期: 2014年第03期
真性红细胞增多症(PV)为慢性进行性克隆性造血干细胞增殖性疾病,主要累及红系、粒系和巨核系,也可增生引起红细胞量绝对增多,血红蛋白增高,常伴白细胞和血小板增多及脾大[1]106.PV在病程中可发生各种转化,向急性白血病转化的比例为1.3%[2],转化成急性白血病亦以急性粒系或粒单系统白血病为主,转化为巨核细胞白血病的未见报道.近来我院诊断了一例患PV 6年的病人转变为急性巨核细胞白血病的病例.现报道如下.
作者:刘艳丽;冉向阳;李玮;李芳;张然 刊期: 2014年第03期
血流感染(bloodstream infection,BSI)是严重的感染性疾病.血液培养被认为是诊断血液感染的金标准,但是要花费数日鉴定出病原体.能够快速、准确地鉴定血流感染的病原体,可以明显改善病人预后.随着技术进步,分子诊断与临床实验室诊断关系愈加密切,能够为血流感染提供快速、准确的诊断.文章对分子诊断学在细菌和真菌性血流感染检测中的作用进行综述.
作者:王铁山;苏建荣 刊期: 2014年第03期
目的 研究人脐血来源树突状细胞(DC)和同源细胞因子激活的杀伤细胞(CIK),共孵育后,获得的DC CIK细胞对恶性肿瘤细胞的杀伤效应.方法 获取脐血单个核细胞,用不同细胞因子分别诱导DC及CIK细胞.按1:5比例将DC和CIK细胞一起培养.且以单独培养的脐血CIK细胞为对照.采用流式细胞技术分析检测细胞免疫表型,细胞扩增倍数用台酚蓝染色方法计算,杀伤率测定采用MTT法,细胞因子IL 12,IFN γ,TNF-α用ELISA方法检测.结果 来源于脐血CIK细胞扩增倍数低于同源DC CIK细胞(P<0.05);混合培养物DC CIK细胞中,CD3 CD8,CD3+ CD56+双阳性免疫细胞数量较单纯CIK细胞明显增高(P<0.05);脐血DC,CIK细胞共培养3天,其上清液中细胞因子(IL 12,IFN γ及TNF-d)含量比CIK细胞上清液中高(P<0.01,<0.05,<0.05);当效靶比为2.5∶1~20∶1时,DC-CIK细胞对HL60,K562白血病细胞、U266多发性骨髓瘤细胞株及SMMC 7721肝癌细胞杀伤率均高于CIK细胞(均P<0.05).结论 脐血DC可增强同源CIK细胞的增殖活性和抗肿瘤效应.该研究为脐血DC CIK细胞的免疫治疗提供了实验和理论依据.
作者:韩秀蕊;杨娣娣;赵园;张丽洁;李艳春;王九菊;翟欣辉;魏绪仓 刊期: 2014年第03期
目的 探讨甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)改良法在梅毒筛查中的应用.方法 选取梅毒患者血清标本71例,其中55例TRUST滴度在1∶2及以上,16例滴度为1∶1,阴性样本29例.实验室5名工作人员分别用传统方法进行检测,同时用全自动酶免仪加样到稀释板中,然后加入TRUST试剂,震荡30 min后,判读结果.结果 阴性样本两种方法检测均为阴性,滴度在1∶2及以上的阳性标本两种方法的检出率均为100%,滴度在1∶1的阳性标本传统方法的检出率为66%,而改良方法的检出率为74%.与传统方法相比,改良方法检测阳性率略有提高,但差异无统计学显著性意义(x2=0.494,P=0.31).结论 改良方法可以借助全自动酶免仪加样,实现半自动化操作,较传统法简便,特别适合大批量样本,改良方法可以代替传统方法.
作者:徐敬轩;夏毅;彭文红;张春芳;赵仙华;钱云芳;王佳丽;储磊;谢而付 刊期: 2014年第03期
目的 应用实验数据验证行业标准的适用性.方法 使用按照仪器说明书验证合格的血液分析仪为例,依照行业标准(WS/T 406-2012)规定的性能验证方法和分析质量要求,对仪器性能进行验证.结果 WBC,RBC,Hb和Plt本底计数大值均为0,携带污染率范围为(0~0.08)%,线性回归斜率范围为0.980 4~1.003 5,相关系数平方值范围为0.999 7~1.000 0;全血细胞计数8个项目批内精密度变异系数范围为(0.5~2.2)%,低、中、高三浓度水平质控品日间精密度变异系数分别为(0.8~3.4)%,(0.5~2.1)%和(0.5~1.3)%,正确度验证结果偏倚范围为(-1.0~2.2)%,准确度验证结果偏倚范围为(-2.7~3.7)%;WBC,RBC,Hb,Hct,MCV和Plt在手动与自动模式下检测结果的相对偏差范围为(-1.7~3.5)%;WBC,RBC,Hb,Hct和Plt可比性验证结果的相对偏差范围为(-8.9~9.3)%;所有项目的验证结果均符合行业标准的要求.结论 行业标准对验证方法和分析质量要求有明确的规定,便于临床实验室的操作;行业标准的规定是血细胞计数分析质量的基本要求,多数验证项目(如本底计数、携带污染率和精密度等)的质量要求比企业标准低,当所用仪器的企业标准较严时,临床实验室应使用企业标准判断仪器性能.
作者:陆红;李臣宾;周文宾;高倩;崔皓园;彭明婷 刊期: 2014年第03期
鼻病毒(HRV)是引起呼吸道感染的重要病原体,与上呼吸道感染以及慢性肺病、哮喘加重均密切相关.针对鼻病毒的实验室诊断方法有细胞培养方法、免疫检测法和核酸检测法等,掌握这些方法的原理和优缺点对鼻病毒的诊断具有重要意义.
作者:高珺;陆学东 刊期: 2014年第03期
目的 分析陕西省临床输血异地血费报销政策实施过程中遇到的问题,为制定改进措施提供依据.方法 统计分析2012年9月1日开始实施临床输血异地报销政策至2013年10月31日期间陕西省10个地市采供血机构临床输血异地血费报销情况.结果 全省10家采供血机构共完成异地报销204人次,占报销总人次的3.27%;报销血量635.5 U,占报销总血量的3.04%.结论 目前应该加强临床输血异地报销政策宣传力度;统一信息管理平台;完善科学合理的血费报销政策,优化服务环境,为献血者提供更加便捷、高效的服务.
作者:兰琳;刘云云;肖利涛;陈纲;曹丽;袁玉 刊期: 2014年第03期
目的 探讨咸阳地区阴沟肠杆菌的产酶现状及其抗菌药物的应用.方法 收集2012年6月~2013年5月临床分离无重复的100株阴沟肠杆菌,采用KB琼脂扩散法检测超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和通过改良三维试验检测AmpC,碳青霉烯酶的检测采用亚胺培南+ EDTA法,MIC检测采用微量倍比稀释法,按CLSI法规进行.结果 在100株阴沟肠杆菌中,产ESBLs酶的为49%,产AmpC酶的为29%,碳青霉烯酶的为0%,同时产ESBLs和AmpC酶为29%.药敏结果是哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、美洛培南、头孢吡肟、环丙沙星、阿米卡星和头孢他啶的抑菌率分别为64.7%,58.8%,100%,70.6%,70.6%,64.7%,41.1%.联合药物头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦与阿米卡星对阴沟肠杆菌的协同及相加作用分别为(17.64~41.18)%,(11.76~47.06)%,(5.88~52.94)%和(0~58.83)%.联合药物头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦与环丙沙星对阴沟肠杆菌协同及相加作用分别为(11.76~23.54)%,(5.88~11.77)%,(11.77~47.06)%和(5.88~17.65)%.结论 产酶的阴沟肠杆菌在该地区处于一个相对较高的水平,因此临床医师应根据药敏结果选用抗菌药物.
作者:扈会整;刘婧;吴斌艳;刘汉芳;任超杰;任伟娟;林赞 刊期: 2014年第03期
目的 探讨隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞中micorRNA-31表达情况及与疾病的相关性.方法 收集2007年9月~2012年8月期间,在上海长海医院和上海长征医院确诊的隐球菌脑膜炎患者和同期健康对照各30例,使用密度梯度离心法,分离30例隐球菌脑膜炎患者和30例健康对照外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),采用实时荧光定量PCR检测microRNA-31(miR-31)的表达,并分析其与患者临床特征(血清中IgG,IgA,IgM)和细胞因子(IL-4,IL-10,IFN-γ,TNF-α)的相关性.结果 与健康对照相比,隐球菌脑膜炎患者PBMCs中miR-31表达(0.856±0.231 vs 0.470±0.242)增高,差异有统计学意义(t=6.320,P<0.001)且与血清IL-4水平正相关(r=0.644,P<0.001),与IgG,IFN-γ负相关(r=0.645, 0.671;P值均<0.001).结论 提示miR-31可能通过调节炎症性细胞因子的产生,参与了隐球菌脑膜炎的发病机制,这为进一步研究隐球菌脑膜炎患者的表观遗传学调控提供了新的线索.
作者:张蕾;陈明坤;石磊;谷明莉;张薇薇;邓安梅 刊期: 2014年第03期
目的 探讨血浆微小RNA-375(miR-375)和微小RNA-126(miR-126)在2型糖尿病(T2DM)患者血浆中的变化及临床意义.方法 选取30例T2DM患者和30例糖耐量正常者作为研究对象,所有研究对象均行75g葡萄糖耐量检测(OGTT),根据1999年WHO的糖尿病诊断标准,将研究对象分为T2DM组和糖耐量正常的对照组.以RNU6为内参基因,采用实时荧光定量PCR方法检测miR-375和miR 126的相对表达水平.结果 miR-126在对照组的表达量为0.191(0.129,0.270),T2DM组表达量为0.252(0.119,0.418).miR-375在对照组表达量为0.042(0.004,0.132),T2DM组表达量为0.386(0.160,0.560).进行非参Mann-Whitney U检验,miR-126在T2DM和对照组中表达差异无统计学意义(U=169,P=0.318),miR 375在T2DM中表达上调(U=99.5,P<0.001).结论 血浆miR-126在两组表达量无统计学差异,miR-375在T2DM组表达上调,对T2DM诊断具有潜在应用价值.
作者:鲁双艳;吕志华;谭璐;王顺 刊期: 2014年第03期
目的 探讨肿瘤标志物检测对原发性肝癌早期诊断的价值.方法 从门诊和住院患者当中选择原发性肝癌患者95例,检测AFP,CEA,CA199,CA125,CA724,FERR和NSE等肿瘤标志物.结果 原发性肝癌患者AFP,CEA,CA199,CA125,CA724,FERR和NSE的单项检出异常率分别为64.2%,19.6%,75.9%,78.0%,4.1%,43.7%和22.2%;AFP阳性和AFP阴性时,原发性肝癌患者FERR,CA199和CA125都有较高的阳性率;三种不同组合的肿瘤标志物对原发性肝癌患者检测的异常率分别为85.6%,89.4%和91.5%.结论 肿瘤标志物阴性时不能排除原发性肝癌,但组合检测可提高原发性肝癌的诊断率.
作者:李芒会;张利侠;李亚娥 刊期: 2014年第03期
目的 比较酶联免疫法(ELISA)对无偿献血者血液HBsAg/抗HCV/HIV/Ag/Ab阳性检出率及核酸分析技术(NAT)对HBV/HCV/HIV阳性检出率,为优化血液安全检测方案提供依据.方法 采用A方案(用两种不同生产厂家的ELISA试剂盒检测HBsAg/抗HCV/HIV/Ag/Ab,无反应性样本再进行NAT HBV/HCV/HIV检测)对2011年1月~2013年7月采集的198 783例无偿献血者血样进行检测;采用B方案(用1种ELISA试剂盒检测HBsAg/抗HCV/HIV/Ag/Ab,无反应性样本再进行NAT HBV/HCV/HIV检测)对2013年8月~12月采集的34 577例无偿献血者血样进行检测,运用统计学方法分析A,B两种检测方案的阳性检出率.结果 A方案的ELISA阳性检出率(1.32%)高于B方案的ELISA阳性检出率(0.76%)(x2=75.291,P<0.05);A方案的总阳性检出率(1.45%)高于B方案的总阳性检出率(0.92%)(x2=61.016,P<0.05);A方案ELISA检测的阳性检出率(1.32%)高于B方案总体阳性检出率(0.92%)(x2=38.986,P<0.05).结论 采用A方案对无偿献血者血液感染HBV/HCV/HIV进行检测的阳性检出率较高,能够较好地保证血液安全,但会增加检测成本和工作量.
作者:费亚涛;何子毅;王德文;黄志森;陈庆恺 刊期: 2014年第03期
目的 检测2011~2012年深圳市南山区某医院及环境样本中金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SA)耐药基因,对SA进行蛋白A基因多态性分型(single locus DNA-sequencing of the repeat region of the Staphylococcus protein Agene,Spa)研究.了解SA耐药基因分布情况以及Spa分型特点.方法 采用PCR技术检测SA的12种耐药基因,对SA蛋白A基因进行扩增,PCR产物测序,序列上传数据库进行比对.结果 27株菌分离自院内病人样本,13株检出mecA基因.其中15株菌检出2种以上耐药基因,3株菌未检出任何耐药基因.16株菌分离自环境样本,未检出mecA基因.15株菌检出ant(4',4")基因,仅1株菌检出Aac(6')/aph(2")基因,其余耐药基因未检出.43株SA分为15种Spa型,t091型为优势型别,检出率为27.9%(12/43),此型别在所有类型的样本中均有检出.结论 院内样本中,不同样本分离菌株携带耐药基因存在差异,院内病人样本分离菌株呈多重耐药.Spa分型,利于深圳市SA分子分型数据库的建立,对于疾病溯源有着重要意义.
作者:袁梦;袁月明;俞慕华 刊期: 2014年第03期
目的 分析临床标本分离的白色念珠菌生物膜形成情况,探讨其与耐药的关系,为临床诊疗白色念珠菌感染提供可靠依据.方法 用黑马鉴定板和全自动细菌鉴定仪鉴别白色念珠菌120株,电镜下观察白色念珠菌生物膜形成,用M-H琼脂培养基进行药敏试验.结果 白色念珠菌生物膜的阳性率为75.0%(90/120).白色念珠菌有生物膜者对抗真菌伊曲康唑、氟康唑、酮康唑、伏立康唑、制霉菌素和两性霉素B药物的耐药率分别为83.3%,77.8%,61.1%,84.4%,44.4%和38.9%.而无生物膜者对抗真菌药物的耐药率分别为33.3%,26.7%,20.0%,36.7%,16.7%和10.0%.白色念珠菌有生物膜者对抗真菌药物的耐药率明显高于无生物膜者,两者比较差异有统计学意义(x2=7.41~27.23,P均<0.01).有生物膜的白色念珠菌对制霉菌素和两性霉素的耐药率均明显低于其它唑类抗真菌药物(x2=8.21~26.37,7.49~26.87,P均<0.01).对酮康唑的耐药率明显低于其它唑类(x2=3.48~5.24,P均<0.05).结论 白色念珠菌的生物膜形成率较高,致使其对抗真菌药物的耐药性增加,可首选两性霉素B治疗.
作者:米热尼沙·热米吐拉;甄雅惠;张路漫 刊期: 2014年第03期
目的 探讨血浆(1,3)β D葡聚糖检测(G试验)在侵袭性真菌感染(IFI)早期诊断中的价值.方法 选择2012年1月~12月间在新疆医科大学第一附属医院住院的疑似IFI患者204例,根据IFI诊断标准,将研究对象分为IFI组和非IFI组,应用MB-80微生物动态快速检测系统定量检测血浆(1,3)-β-D葡聚糖(BDG)的含量,比较两组BDG的阳性率,及不同真菌感染者BDG浓度的差异,用ROC曲线法确定BDG的佳诊断值,并评价G试验对IFI早期诊断的价值.结果 204例患者中血浆BDG阳性117例,总阳性率为57.4%,其中ICU病房阳性率高,为90.7%.204例患者中,临床诊断IFI患者99例,真菌培养阳性标本主要来源于呼吸道,占75.8%.其中白假丝酵母菌感染者BDG高于曲霉菌感染者(t=2.514,P<0.05).以厂家给定的值10 pg/ml为诊断界值,IFI组BDG阳性率明显高于非IFI组(x2=127.069,P<0.01).BDG用于IFI诊断的灵敏度和特异度分别为98.0%和80.8%.ROC曲线法确定的佳诊断界值为16.2 pg/ml,以该值为阈值,特异度可提高到81.7%,ROC曲线下面积为0.920.结论 血浆BDG葡聚糖检测可用于IFI的早期诊断.以16.2 pg/ml为阈值可适当提高诊断效率.
作者:阿曼古丽·牙生;顾挺;孟存仁 刊期: 2014年第03期
目的 探讨孕早期服用叶酸与随后先兆子痫发生危险性的关系.方法 选取2012年10月~2013年5月在渭南市妇幼保健院就诊单胎先兆子痫患者69例,按照孕早期是否服用叶酸分为药物干预组(36例)及未干预组(33例),于孕32~35周检测其血清叶酸含量.结果 ①通过比较药物干预组与未干预组患者进食含有叶酸的食物(绿叶蔬菜、水果、谷类食物、奶、肉、蛋等)对叶酸值检测的影响,结果表明两组叶酸差异无明显统计学意义(9.75 ng/ml vs 9.68 ng/ml,t=0.54,P=0.37).②采用Logistic回归分析,调整了体重指数、年龄、饮食习惯、教育程度等混合因素后,服用叶酸对预防先兆子痫发生的危险因子OR=1.17(95%置信区间1.08~1.33).结论 孕早期口服叶酸不能降低先兆子痫发生的危险性.
作者:李黎;王绒;郭进京 刊期: 2014年第03期
目的 探讨血浆抗凝血酶Ⅲ活性和纤维蛋白原水平在冠心病患者中的临床应用.方法 测定急性心肌梗死(AMI)组、不稳定型心绞痛(UA)组、稳定型心绞痛(SA)组和健康对照组血浆抗凝血酶Ⅲ活性和纤维蛋白原水平,并进行比较.结果 AMI组、UA组及SA组血浆AT-Ⅲ活性(%)分别为89.04±13.32,86.64±11.07和102.33±9.39.AMI组、UA组及SA组血浆AT-Ⅲ活性与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).AMI组、UA组及SA组血浆Fib含量(g/L)分别为3.93±1.42,3.83±1.12和3.20±0.73.AMI组和UA组血浆Fib水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);AMI组和UA组血浆AT-Ⅲ活性较SA组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 AT-Ⅲ活性及Fib水平的变化是鉴别各种冠心病发生的敏感性指标.
作者:尹栩芳;沈霞 刊期: 2014年第03期