学术投稿

2种重组真核蛋氨酸酶原核体系表达及活性比较

田腊梅;任小丽;胡振良;曾红静;田长富

关键词:肿瘤, 蛋氨酸酶, 基因治疗
摘要:目的 构建2种真核L-蛋氨酸γ-裂解酶(MGL1 MGL2)的高效原核表达载体,诱导表达及纯化,比较活性差异.方法 通过分子克隆技术构建2种重组表达质粒pGEX-4T-1-MGL1,pGEX-4T-1-MGL2;重组质粒转化感受态大肠杆菌Dh5α,诱导表达纯化蛋氨酸酶.结果 构建了高效表达载体pGEX-4T-1-MGL1,pGEX-4T-1-MGL2;pGEX-4T-1-MGL1表达的酶纯度为82.5%,活性为0.505 2 IU/mg,pGEX-4T-1-MGL2表达的酶纯度为81.4%,活性为0.305 2 IU/mg.结论 pGEX-4T-1-MGL1,pGEX-4T-1-MGL2都能表达蛋氨酸酶;pGEX-4T-1-MGL1表达的蛋氨酸酶纯度比较高,酶活性比较高.
昆明医科大学学报杂志相关文献
  • 肾细胞癌的CT影像特点及病理分型

    目的 结合病理分型分析肾细胞癌的CT影像特点以提高诊断的准确率.方法 收集昆明医科大学第二附属医院手术病理证实的36肾细胞癌,术前均做CT检查(平扫、动态增强扫描),回顾性分析CT影像特点并与病理结果对照.结果 25例透明细胞癌,1例颗粒细胞癌,2例多房囊性肾细胞癌,4例乳头状癌,3例嫌色细胞癌,1例集合管癌.新的病理分型将颗粒细胞癌和多房囊性肾细胞癌均归入透明细胞癌,此类型血供丰富,增强扫描后明显强化;而乳头状癌和嫌色细胞癌相血供相对较少,强化程度低于透明细胞癌.结论 各型肾细胞癌的CT影像表现的特异性不强,终分型仍依靠病理,仔细分析肾癌的CT影像特点与病理之间的关系有助于诊断和鉴别诊断.

    作者:袁道明;郝金钢;李卫东 刊期: 2012年第05期

  • 部分脾栓塞治疗难治性特发性血小板减少性紫癜16例临床观察

    目的 探讨部分脾栓塞(PSE)治疗难治性原发血小板减少性紫癜(RITP)的临床疗效.方法 对16例经内科治疗无效的RITP患者行PSE术治疗后的临床资料进行回顾性分析.结果 16例RITP患者PSE术后血小板均较术前发生了显著改变.PSE治疗RITP短期有效率100%,近期总有效率87.6%,远期总有效率75.0%.结论 PSE达到了与切除脾脏相似的效果,同时保留了部分脾组织,使其免疫功能得以保存,其疗效与脾切除无湿著性差异,是一种治疗RITP安全、简便的手段.

    作者:路萍;宫喜翔;王永志;朱桂华 刊期: 2012年第05期

  • 2011年云南省食源性疾病监测情况分析

    目的 探讨云南省2011年1~12月食源性疾病的发病规律和特点,为制定预防和控制措施提供依据.方法 对云南省2011年报告的食源性疾病资料建立数据库,并按时间、场所、致病因素、原因等进行统计分析.结果 共报告食源性疾病163起,均为食物中毒,发病2 625人,死亡35人.4~7月为发病高峰,报告起数和发病人数占全年总数的63.80%、60.80%;野生蕈中毒报告起数和死亡人数,分别占总数的43.56%和40.00%;微生物性食物中毒发病人数,占总数的44.23%.发病场所以农村家庭的报告起数、发病人数和死亡人数多,分别占总数的57.67%、50.55%和77.14%;学校食常发生的食源性疾病波及人数多,平均每起发病31人.结论 应加强农村家宴和学校食堂的卫生监管,有针对性地开展预防野生蕈和微生物性食物中毒知识宣传教育.

    作者:万蓉;王晓雯;李娟娟 刊期: 2012年第05期

  • 抗神经生长因子抗体对大鼠慢性坐骨神经压迫损伤模型的脊髓胶质细胞激活的抑制作用

    目的 研究抗神经生长因子抗体(anti-NGF)蛛网膜下腔应用对大鼠坐骨神经病理性疼痛模型痛阈的影响,并观察其对该模型星形胶质细胞激活的影响.方法 手术制作大鼠慢性坐骨神经压迫损伤(chronic constriction injury,CCI)模型.实验大鼠采用随机数字表法分为4组:CCI+anti-NGF组(n=8):手术后第7天开始每天单次腹腔注射anti-NGF(10 mg/kg)、CCI模型+生理盐水组(n=8):手术后第7天开始每天单次腹腔注射生理盐水、假手术给anti-NGF组(n=8)和假手术盐水组(n=8).各组均在术后隔天测定大鼠痛行为学观察术后15 d内大gqt械和热痛阈的变化.各组在手术后15 d,使用4%多聚甲醛灌流后,进行免疫组化染色,观察大鼠脊髓L4-5节段星形胶质细胞标记物GFAP表达情况.结果 手术盐水对照组的机械和热痛阈在3 d后出现明显下降,在术后第7天达到高峰期.术后第7天单次给予anti-NGF能短时间内拮抗CCI大鼠的机械和热痛阈下降,连续给予anti-NGF 7 d后可以使大鼠的机械和热痛阈持续显著高于CCI+盐水组.15 d时CCI+anti-NGF组大鼠脊髓L4-5节段的GFAP表达显著低于CCI+生理盐水组.结论 腹腔注射anti-NGF能有效拮抗CCI大鼠模型机械和热痛阈的下降.连续注射anti-NGF可以显著的持续改善CCI大鼠模型的机械和热痛阈的下降.CCI+anti-NGF组脊髓GFAP表达显著低于CCI+生理盐水组,这可能与anti-NGF持续改善大鼠的痛行为有关.

    作者:李棋;麻伟青;王慧明;董发团;杨云丽;李文锋 刊期: 2012年第05期

  • 前入路绕肝提拉法右半肝切除术18例临床应用体会

    目的 探讨前入路绕肝提拉法的临床应用.方法 自2009年1月至2011年9月昆明医科大学第一附属医院肝胆外科对18例行右半肝切除的患者应用前入路绕肝提拉法,钝性分离肝后下腔静脉前间隙,建立隧道,放置提拉带,悬吊提拉后采用前入路切除右半肝.结果 18例患者均成功建立肝后隧道放置绕肝提拉带,未出现因此操作所引起的严重并发症,均成功切除.术中平均出血量(718±364)mL;术后3 d总引流量平均为(589±285)mL.结论 难切的右半肝切除时前入路绕肝提拉法既安全又快捷.

    作者:李江;刘斌;杨世昆 刊期: 2012年第05期

  • 多层螺旋CT在膀胱癌术前分期中的应用价值

    目的 探讨多层螺旋CT检查在膀胱癌术前分期中的应用价值.方法 收集经手术后病理证实的38例膀胱癌患者,术前均行多层螺旋CT检查(平扫、动态增强扫描),将CT影像特点与病理分期进行对比.结果 CT对膀胱癌术前检查的结果与病理对照符合率为76.3%,其中T1期5例,T2a期10例,T2b期11例,T3期8例,T4期8例;病理T分期:T1期4例,T2a期8例,T2b期14例,T3期11例,T4期5例.结论 CT对膀胱癌的术前分期有较高的准确性,可作为膀胱癌术前常规检查.

    作者:孙立辉;郝金钢;黄芩 刊期: 2012年第05期

  • 克拉霉素治疗FESS后鼻窦黏膜迁延性炎症的临床研究

    目的 研究长期(>12周)小剂量的克拉霉素(250 mg/d)对功能性内窥镜鼻窦术后迁延不愈的鼻窦黏膜炎症的临床疗效.方法 2009年9月至2010年4月在头颈外科经鼻窦内窥镜手术治疗后1a以上长期迁延性鼻窦黏膜炎症、疗效评估未愈者9人.在原有的药物治疗(局部糖皮质类固醇激素,黏膜除排剂,中成药)基础上,口服克拉霉素,每天250 mg,连续口服超过12周.采用慢性鼻-鼻窦炎视觉模拟量表(VAS)及鼻内镜检查量化评估(Lund-Kennedy评分法),对治疗前后的疗效采用相关样本作参数检验.Wilcmon Ranks Test Signed统计学分析.结果 治疗前后的VAS和Lund-Kennedy评分皆有统计学意义(P<0.05);停药后半年以上未复发;9例患者无明显的副作用,肝肾功能在正常范围.结论 长期低剂量的克拉霉素对顽固的持续存在的鼻窦黏膜炎症有较为明显的临床治疗效果,且效果稳定;克拉霉素有较好临床安全性及患者的良好的依从性,适合长期服用.

    作者:李玉晓;何晓光;陈冬;刘凡理;陈琳 刊期: 2012年第05期

  • 宫颈癌术前子宫动脉化疗栓塞治疗的临床疗效观察

    目的 探讨术前子官动脉化疗栓塞在宫颈癌治疗方面的临床价值.方法 对12例官颈癌患者在手术前行子宫动脉化疗栓塞,观察症状缓解的程度、疗效和近期不良反应.化疗栓塞后3~4周行子宫根治术及盆腔淋巴结清扫术.结果 宫颈癌患者临床症状明显缓解,近期疗效观察有效10例,无效2例,各期次疗效没有显著差别.不良反应经对症处理后均缓解.2例Ⅱ期根治手术后阴道切除缘癌细胞阳性,3例ⅠB期清扫下的淋巴结中发现转移.结论 宫颈癌术前子宫动脉化疗栓塞是治疗宫颈癌安全有效的的治疗官颈癌安方法,值得临床进一步推广使用.

    作者:刘惠谨;廖红云;张素仙 刊期: 2012年第05期

  • SD大鼠髁状突颈部骨折对大鼠髁状突软骨细胞增殖与凋亡的影响

    目的 研究发育期SD大鼠髁状突颈部骨折对下颌髁状突软骨细胞增殖和凋亡活性的影响.方法 18只4周龄SD大鼠,分为髁状突骨折组及空白对照组,分别于术后1周、3周、5周时脱颈处死,取骨折组手术侧、非手术侧及空白对照组髁状突软骨,分别采用免疫组织化学染色和TUNEL染色,观察髁状突软骨细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数和凋亡细胞数.结果 在各时间点,手术侧、非手术侧的PCNA阳性细胞数存在统计学差异(P<0.01).术后3、5周,空白组与手术侧PCNA阳性细胞数有统计学差异(P<0.01);术后3周,非手术侧大鼠髁突软骨中凋亡细胞数明显增多,手术侧凋亡细胞数随时间推移明显降低;术后1周,手术侧的凋亡细胞数明显多于非手术侧(P<0.01);术后3周,非手术侧的凋亡细胞数明显多于手术侧(P<0.01);术后1、5周,空白组与手术侧凋亡细胞数有显著性差异(P<0.01).结论 一侧髁状突颈部骨折导致两侧髁状突所受应力失衡,影响两侧髁状突软骨细胞增殖与凋亡的平衡,进而影响下颌骨及颌面部的发育.

    作者:夏英杰;陈建中 刊期: 2012年第05期

  • 输尿管结石合并息肉的治疗(附35例报告)

    目的 探讨输尿管结石合并息肉的处理方法.方法 2010年1月至2010年6月,采用输尿管镜钬激光碎石对35例输尿管结石合并息肉患者进行治疗,26例行单纯碎石,9例行息肉样组织浅表烧灼.双J管4周后拔除.结果 32例术后随访6~12月,结石完全排净,28例肾积水消失,4例肾脏仍有轻度积水,无输尿管狭窄.结论 在处理输尿管结石合并息肉时,重点是将结石清除,应避免对息肉过度治疗.

    作者:田子阳;李炯明;陈戬;刘建和;闫永吉;姜永明 刊期: 2012年第05期

  • 针管回缩式静脉留置针在防针刺伤中的应用

    针刺伤是医护人员临床工作中常发生的意外事件,多种病原体能通过针刺伤传播,并可产生严重后果,所以采用安全性能好的医疗器械,有效地保护医护人员是关键.对桂林医学院附属医院2009年1月至2011年12月来采用回缩式静脉留置针(实验组)与常规静脉留置针(对照组)相比较,实验组有效地降低了针刺伤发生率,现报道如下.

    作者:陈石桂;唐忠秀;廖秀兰;唐京京;胡琰艳 刊期: 2012年第05期

  • 芒果苷代谢产物1,3,6,7-四羟基三口酮的全合成

    目的 全合成芒果苷的一个主要代谢产物1,3,6,7-四羟基三口酮.方法 以2,4,5-三甲氧基苯甲酸为原料,参考文献方法,全合成1,3,6,7-四羟基三口酮.结果 成功合成1,3,6,7-四羟基三口酮,全合成总产率达25.73%.结论 以2,4,5-三甲氧基苯甲酸为原料,通过5步反应可成功合成1,3,6,7-四羟基三口酮,总产率较理想.

    作者:徐镇平;宋流东 刊期: 2012年第05期

  • 彩色B超诊断疤痕子宫妊娠13例分析

    随着剖宫产率的逐年上升,剖宫产术后疤痕部位妊娠(after cesarean scar pregnancy,CSP)的发生率有明显上升趋势,如早期不能正确诊断、及时处理,易导致难于控制的大出血.甚至危及生命,回顾分析云南九洲医院医近4 a来所治的13例病例,目的在于利用彩色多普勒超声能做到早期诊断,指导临床正确处理提供重要的依据.

    作者:朱莹;李思熳 刊期: 2012年第05期

  • 介入栓塞治疗208例肝血管瘤的临床疗效观察

    目的 观察经皮肝动脉超选插管平阳霉素碘油乳剂栓寒治疗肝血管瘤的临床疗效.方法 收集昆明医科大学第二附属医院2006年1月至2011年2月,经动脉注入平阳霉素+碘化油混悬乳剂栓塞治疗肝血管瘤208例患者,分析疗效.结果 208例患者随访3~12月,除6例瘤体大小无明显变化外,其余肝血管瘤均有不同程度的缩小,有效率达97.1%,其中有108例缩小≥50%.结论 经皮肝动脉超选插管平阳霉素碘油乳剂栓塞治疗肝血管瘤,具有并发症少、恢复快、费用相对低廉、安全、微创等优点,可作为肝血管瘤首选的治疗方法,治疗不理想的小部分患者可行根治手术.

    作者:刘训强;孙敏;王家平;滕毅山;孔鹏 刊期: 2012年第05期

  • 代谢综合征与轻度认知功能障碍的临床研究

    目的 探讨代谢综合征(MS)与轻度认知功能障碍(MCI)的关系.方法 124例MS患者(研究组)和71例健康体检者(对照组),据petersen等MCI诊断/排除标准纳入MCI组和认知功能正常组(NC组);MS患者代谢指标每项异常各计1分,按分值0~1、2、3、4、5分为5个亚组.比较MS与NC组间及MS各分亚组间MCI发生率及各代谢指标与认知功能评分间的关系,并对影响MCI相关因子行多因素分析.结果 (1)MCI发生率:MS组高于非MS组(P<0.01),MS组代谢紊乱积分越高发生率越高(P<0.01); (2)MCI组各代谢紊乱指标(舒张压,高密度脂蛋白HDL-C除外)均高于NC组(P<0.05),ISI低于NC组(P<0.05); (3)认知功能总评分及各分量表评分MS组低于非MS组(P<0.05); (4)各认知评分(图像自由回忆除外)与MS负相关,与空腹胰岛素(FIN)负相关(指向记忆、人像特点回忆除外),MoCA、MMSE与血压负相关.排除糖尿病患者后,以上关系不变,而认知评分与FIN由负相关变为不相关; (5)教育程度、胰岛素抵抗和MS终进入Logistic方程(回归系数分别为-0.460/0.855/1.289).结论 (1)MS影响认知功能各个环节,MS整体对认知功能的影响大于各组份; (2)受教育程度高是MCI的保护凶素,MS、胰岛素抵抗是MCI的独立危险因素.

    作者:赵晓红;杨玉梅;鲍娟;王曦;张媛媛;赵青 刊期: 2012年第05期

  • 泮托拉唑治疗消化性溃疡出血的临床观察

    上消化道出血是临床常见急症,常见病因为消化性溃疡、急性糜烂出血性胃炎、十二指肠炎、反流性食管炎、食管胃底静脉曲张破裂和胃癌,Mallory-Weiss综合征引起的出血亦不少见.药物仍是目前治疗上消化道出血的主要手段[1].为探讨泮托拉唑治疗消化性溃疡出血的临床效果,笔者将陆良县人民医院近年来收治的895例消化性溃疡出血患者的临床资料分析如下.

    作者:闵万苍;杨世昆 刊期: 2012年第05期

  • 肺癌诊疗技术新进展

    1 肺癌流行病学19世纪初,肺癌在世界上还是一种罕见的疾病.20世纪50年代开始,吸烟等种种因素导致了肺癌发病率和死亡率的节节攀升.从我国近年来城乡前10位恶性肿瘤的构成来看,肺癌已代替肝癌成为我国首位恶性肿瘤死亡原因,占全部恶性肿瘤死亡的22.7%,且发病率和死亡率仍在继续上升.

    作者:黄云超 刊期: 2012年第05期

  • 门脉高压性胃病在区域性门脉高压和肝硬化患者中的对比临床分析

    门脉高压性胃病(portal hypertensive gastropat-hy,PHG)主要由肝硬化门脉高压引起,也可由肝外性门脉高压引起[1].区域性门脉高压症(regional portal hypertension,RPH)占肝外性门脉高压症的5%[2],在临床上笔者发现区域性门脉高压症患者很少出现PHG,查阅文献未见肝外性门脉高压中PHG发病情况报道,笔者对11例RPH患者与同期住院的84例肝硬化门脉高压患者PHG发病情况进行了对照研究,以期对两者关系作初步探讨.

    作者:王芸;耿嘉蔚;范红 刊期: 2012年第05期

  • HPLC法测定大鼠血浆中甲硝唑的浓度

    目的 建立大鼠血浆中甲硝唑浓度测定的HPLC法.方法 选用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水-冰乙酸(10:10:80:0.1),流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为317nm,柱温25℃,以替硝唑作内标物.结果 甲硝唑的线性范围为1~1 000mg/L,呈良好的线性关系(r=0.996 9),在低、中、高3个质量浓度的准确度分别为99.69%、96.35%、101.2%.RSD分别为0.3%、6.92%、8.66%,其日内、日间精密度≤15%.结论 可用于甲硝唑在大鼠体内的药物动力学研究.

    作者:赵春梅;杨和金;苏梅;蔡曼玲;徐红花;毛勇 刊期: 2012年第05期

  • 老鹳草素对血小板聚集和血小板-中性粒细胞之间相互作用的影响

    目的 研究老鹳草素抗血小板聚集作用及其对血小板与中性粒细胞之间相互作用的影响.方法 采用Born方法观测老鹳草素在体内和体外对家兔血小板聚集功能的影响,运用玫瑰花结实验测定血小板与中性粒细胞的黏附反应,以Fura-2-AM为荧光指示剂,检测老鹳草索对激活的血小板内钙水平的影响.结果 老鹳草素在体外呈浓度依赖性明显抑制花生四烯酸(AA)、腺苷二磷酸(ADP)及血小板活化因子(PAF)诱导的血小板聚集功能.其半数抑制浓度(IC50)分别为2.4、0.4和1.1μmol/L;5 mg/kg的老鹳草素灌胃亦明显抑制AA、ADP和PAF诱导的血小板聚集;老鹳草素显著降低洗涤血小板内钙离子浓度、减少细胞外钙内流及内钙释放,其IC50分别为71.9、84.9、62.9 μmol/L.老鹳草素明显阻抑凝血酶激活的血小板与中性粒细胞之间的黏附作用,并抑制肉豆蔻佛波醇(fMLP)激活的中性粒细胞上清液诱导的血小板聚集功能,其IC50分别为3.2和10.2 μmol/L.结论 老鹳草素明显抑制血小板聚集功能,降低血小板内钙水平,同时阻抑血小板与中性粒细胞之间的相互作用.

    作者:陈鹏;李璠;何波;武鸿翔;杨建宇;张小超;沈志强 刊期: 2012年第05期

昆明医科大学学报杂志

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主管:云南省教委

主办:昆明医学院