学术投稿

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因原核表达载体的构建、表达与抗体制备

张旭;孙等军;方琴;任志娟;陈剑;肖芸;王季石

关键词:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体, 基因表达, 大肠杆菌, 免疫印迹
摘要:目的获取抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗体.方法利用PCR技术和基因重组技术将TRAIL基因构建于原核表达载体pPre-TMHTb中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导其在大肠杆菌DH-5α中获得表达,并将TRAIL蛋白免疫家兔,通过DotBlot及WesternBlot检测抗TRAIL抗体的产生.结果成功构建TRAIL基因原核表达载体,并在大肠杆菌DH-5α中获得表达,TRAIL蛋白表达量占菌体蛋白质总量的11.8%,经Dot Blot及WesternBlot检测证实获得了抗TRAIL抗体.结论成功制备抗TRAIL抗体,从而为TRAIL在真核细胞水平的深入研究奠定了实验基础.
贵州医药杂志相关文献
  • 新生儿窒息的产科因素分析

    新生儿窒息是产科临床中的新生儿危象,也是围产儿死亡的主要原因.本文通过对283例窒息新生儿的产科因素进行回顾性分析,寻找处理方法及预防措施,以期提高产科质量,降低新生儿窒息的发生率.

    作者:况莉;金飞;胡科丽;申晓华 刊期: 2003年第07期

  • 贵州地区部分少数民族大学生心理健康状况调查分析

    国内外大量资料显示大学生群体的心理问题随着经济发展和社会变更日趋严重[1].因此,对大学生心理健康水平的评估与调控,备受社会各界的关注.贵州是一个多民族省份,少数民族占全省37.45%.为了解贵州地区少数民族大学生的心理健康水平,逐步建立区域性的大学生心理健康数据库和评估系统,我们采用SCL-90量表对贵州部分少数民族大学生心理健康状况进行调查.

    作者:邓冰;熊敏;朱焱;张碧昌 刊期: 2003年第07期

  • 结肠黑变病三例报告

    2002年,我中心应用富士能电子结肠镜共进行结肠检查1 207例,其中检出结肠黑变病3例,检出率为0.2%,报告如下.

    作者:杨浩羿;李红灵 刊期: 2003年第07期

  • 异丙酚-安氟醚复合控制性降压在脑科手术中的应用

    颅脑手术特别是颅脑显微神经手术要求颅内压低,出血量少,手术视野相对干净,往往需行控制性降压.

    作者:邓胜利;芶大明 刊期: 2003年第07期

  • 特制人工关节在骨肿瘤保肢治疗中的应用

    目的探讨人工假体在骨肿瘤保肢术中的应用价值.方法分析17例骨肿瘤和瘤样病变患者采用特制人工假体置换术后的效果、功能、并发症及处理.结果共发生并发症4例(23.5%),其中皮下积液2例,局部皮肤坏死1例,局部复发1例.随访3~31个月,平均13个月.1例骨肉瘤出现局部复发改行截肢术,1例骨肉瘤出现肺转移.恶性骨肿瘤患者终保肢率为92.8%,功能评定优良率为80%.单纯铰链式膝关节功能差.结论人工关节置换术可用于恶性及侵袭性骨肿瘤的保肢治疗;但应正确选择适应证,改进假体设计、固定及软组织重建方式,预防并发症.

    作者:向阳;尹培荣;许光耀;段宜强 刊期: 2003年第07期

  • 早期复极综合征264例分析

    早期复极综合征是一种较为常见的心电图正常变异,发生率1.0%~6.1%,以男性居多.一般认为它本身虽无重要意义,但有时可误诊为急性心包炎、心肌梗塞,甚至有因伴胸痛而被开胸探查或行静脉溶栓的病例.在近年我院健康体检和门诊病人中,共收集到264例早期复极综合征,现总结如下.

    作者:林红;余游 刊期: 2003年第07期

  • 关节灌洗配合注射玻璃酸钠治疗膝关节骨性关节炎的临床观察

    骨性关节炎是相当普遍的疾病,占骨科门诊量的30%~40%.虽然关节重建术对于治疗严重的骨性关节炎非常成功,但对于早中期骨性关节炎的有效治疗方法却相当有限.

    作者:邱冰;夏永刚;韩伟;张祖根 刊期: 2003年第07期

  • 贵阳市伤寒和副伤寒防治措施中相关问题浅析

    伤寒和副伤寒是贵州省常见的急性肠道传染病.2000年以来,我市急性传染病疫情报告中的伤寒发病大幅升高,根据流行病学调查证实,与甲型副伤寒的发病迅速增加有关[1].

    作者:蒋巧英;陆朝国;罗月雪;袁飞;田芳贵 刊期: 2003年第07期

  • 妊娠期肝内胆汁淤积症与瘦素的相关性研究

    瘦素是由肥胖基因表达的一种内分泌激素,主要在脂肪组织中产生,经血循环到达全身,与受体结合而发挥作用.

    作者:谢维卫 刊期: 2003年第07期

  • 关节镜下诊断与治疗膝关节游离体

    我科近年来在关节镜下诊断并治疗膝关节游离体45例,经随访,所有病例术后疼痛明显减轻或缓解,关节功能恢复满意,现报告如下.

    作者:范建楠 刊期: 2003年第07期

  • 成人胆总管囊肿的外科治疗体会

    胆总管囊肿是一种先天性胆道疾病,多数病人在成年前即出现症状,但在成年后才被确诊和治疗的报道也不少[1~3].兹将我院1991年11月至2002年12月收治的15例成人胆总管囊肿资料报道如下.

    作者:王润华;程建华 刊期: 2003年第07期

  • 胆管结石乳头局部组织中血管活性肠肽和一氧化氮合酶表达的改变及意义

    目的探讨胆管结石患者乳头局部组织中血管活性肠肽(VIP)和一氧化氮合酶(NOS)表达的改变及意义.方法选择68例进行逆行胰胆管造影和/或乳头括约肌切开术的胆管结石患者,采用内镜下活检乳头局部组织.常规石蜡包埋,连续切片,免疫组化SABC法检测VIP及NOS.对照组为门诊胃镜检查胃粘膜大致正常者.结果结石组乳头粘膜内VIP和NOS阳性产物与对照组相比较显著降低(P<0.01),结石组中VIP和NOS的表达与胆总管直径呈负相关,并且发现VIP和NOS之间呈正相关.结论胆结石患者乳头局部组织中粘膜内VIP和NOS的表达明显降低,且局部组织中VIP和NOS的表达与胆总管直径呈负相关,而VIP与NOS之间呈正相关.提示乳头局部VIP和NOS表达的改变可能在胆结石的形成中发挥一定的作用.

    作者:常玉英;黄永辉;孙诚谊;车筑萍;王于锦 刊期: 2003年第07期

  • 咪唑安定与利多卡因在人工流产术中的应用

    人工流产术是目前临床广泛应用于终止早期妊娠的方法之一.采用有效、方便、安全的镇痛方法解除受术者的恐惧心理,减少人流综合征,值得临床关注.为达到此目的,我们选择在术前静脉注射咪唑安定及宫颈注射利多卡因取得了满意的效果,现总结如下.

    作者:王玉娟;张志军 刊期: 2003年第07期

  • 20年初产妇剖宫产率及适应证变化分析

    近年来我院剖宫产率居高不下.为了解剖宫产率及适应证的变化,探讨剖官产率升高的原因,现将我院20年来的剖宫产病历资料作回顾性分析.

    作者:李裕;金世宗;谢平 刊期: 2003年第07期

  • 超声评价高血压病患者内皮依赖性血管舒张功能障碍

    目的采用无创性血管超声检查方法探讨各级高血压病患者血管内皮功能的变化.方法原发性高血压(EH)惠者88例,根据血压值级别分为三组,所有受检对象均用二维超声测量基础肱动脉内径(D),并用脉冲多谱勒测量基础平均血流速度(V).阻断前臂血流5分钟后开放血流,再重复测定肱动脉反应性充血时的D及V,测算肱动脉内径变化、内径变化率及血流量变化、血流量变化率,并与正常组相比较.结果(1)基础状态下各组间血管内径及血流量差异无显著性;(2)反应性充血后上述四参数均为Ⅲ级组<Ⅱ级组<Ⅰ级组<正常组,且差异均有显著性(P<0.05~0.001);(3)高血压病人血流量变化率与平均血压值呈显著负相关(r=一0.60,P<0.001),内径变化率与平均血压值亦呈显著负相关(r=-0.62,P<0.001).结论原发性高血压病患者随血压值升高,血管内皮功能损害显著加重;无创性超声是检测血管内皮功能简便、实用、价廉的手段.

    作者:梁勤;蔡运昌;李保罗;田翔;俞杉 刊期: 2003年第07期

  • 输卵管妊娠行腹腔镜手术与剖腹手术的对比观察

    输卵管妊娠是威胁育龄妇女生命常见的急腹诊之一,其发生率有逐年上升的趋势.既往主要以剖腹手术治疗为主,20世纪90年代随着腹腔镜及其器械技术的发展,使得妇产科临床技术尤其是输卵管妊娠的手术进入了一个微创时代.现结合我科2000年3月至2003年3月应用这一技术的体会,就同期施行腹腔镜手术与剖腹手术治疗输卵管妊娠的综合效果进行比较分析.

    作者:戴峻;包晓武;石伟红 刊期: 2003年第07期

  • 急性重症胰腺炎患者血清TNF-α、IL-6、IL-8检测的临床意义

    急性重症胰腺炎(SAP)的发病机理目前尚不十分清楚.研究认为,胰腺缺血、微循环障碍及炎性介质在SAP的发生发展中起着重要作用.本实验观察20例SAP患者血清TNF-α、IL-6、IL-8含量的变化,探讨其临床意义.

    作者:毛卫;张永宏 刊期: 2003年第07期

  • nm23、P53基因在乳腺癌中的表达及其临床意义

    目的研究nm23、p53基因在乳腺癌中的表达及其临床意义.方法采用免疫组织化学S-P法分别检测76例乳腺癌组织、10例乳腺良性病变中nm23、p53基因蛋白的表达.结果nm23、p53蛋白在乳腺癌阳性表达率分别为44.74%、57.89%,在乳腺良性病变中阳性率分别为50.00%、0.nm23蛋白表达与组织学分级有关(P<0.05);p53蛋白在乳腺良恶性组织之间表达差异有显著性(P<0.01).nm23、p53基因蛋白的表达与腋窝淋巴结转移有关(P<0.01),与组织学类型、年龄、肿块大小无关(P>0.05).nm23与p53之间在乳腺癌中表达呈负相关(P<0.05).结论nm23、p53基因参与了乳腺癌的发生发展过程.联合检测nm23、p53基因蛋白对预测乳腺癌淋巴结转移及判断预后有重要意义.

    作者:周正平;刘华庆 刊期: 2003年第07期

  • 仙灵骨葆胶囊对骨折愈合中生长激素浓度及转化生长因子-β1表达的影响

    目的观察血清生长激素(GH)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的变化,探讨仙灵骨葆胶囊促进骨折愈合的机制.方法制作大鼠骨折模型,用仙灵骨葆胶囊治疗,分别于治疗后7、14、21天检测血清GH浓度,同时取骨组织进行TGF-β1免疫组化染色.结果14、21天时,仙灵骨葆胶囊组动物血清GH浓度明显增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01,P<0.05);7、14、21天时,仙灵骨葆胶囊组骨组织TGF-β1均表达,与对照组比较有明显差异.结论仙灵骨葆胶囊能显著提高血清GH浓度,增强骨组织TGF-β1的表达,提示其参与了促进骨折愈合的作用机制.

    作者:任光友;卢玲;周宁;张贵林;汪建平 刊期: 2003年第07期

  • 硬膜外阻滞复合全身麻醉用于子宫颈癌手术的临床观察

    硬膜外阻滞复合全身麻醉在临床上已广泛采用.子宫颈癌手术由于手术范围较广,单纯硬膜外阻滞麻醉效果不佳,现多采用单纯全身麻醉或硬膜外阻滞复合全身麻醉,而硬膜外阻滞后由于外周血管扩张致使外周阻力下降和回心血量减少,常可引发低血压.

    作者:蒋克东;毛丽;张莎;叶丰力 刊期: 2003年第07期

贵州医药杂志

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主管:贵州省医药卫生学会办公室

主办:贵州省医药卫生学会办公室