彭黎明；颜存粮
目的用一种新的荧光染色技术(FLICA/PI)检测放射诱导T淋巴细胞白血病细胞(MOLT-4)的细胞凋亡过程中胱氡肽酶 3(Caspase 3)原位激活及探讨其活性变化特点,并与亚G1峰和膜联蛋白 V/碘化丙啶(Annexin V/PI)检测细胞凋亡方法的灵敏度进行比较性评价.方法以放射诱导的MOLT-4细胞凋亡为模型,用荧光标记的Caspase 3抑制剂(FLICA)标记原位激活的Caspase 3,然后,用流式细胞仪定量检测并分析其活性变化;同时,用亚G1峰法和Annexin V/PI检测细胞凋亡.结果 FLICA/PI检测到的Caspase 3激活,在照射后2 h开始升高(5.84%),而Annexin V/PI在4 h时检测到的凋亡率为5.35%,FLICA/PI比Annexin V/PI可提前2 h检测到细胞凋亡,Caspase 3活性的出现早于细胞膜反转.FLICA阳性率在照射后4 h暴发性增高至12.39%,显示有时间效应.两种检测方法均比亚G1峰法敏感, 但Annexin V/PI检测的凋亡率低于FLICA/PI法.结论 X-射线能诱导MOLT-4细胞凋亡,并有明显的时间效应关系;Caspase 3激活有阈值效应,是照射后细胞发生凋亡过程中早于形态学变化的检测指标.用Caspase 3活性检测细胞凋亡更直接,更敏感.
作者：冯永东；陶德定；谢大兴；钟以胜；李小兰；肖薇；余源；吴剑宏；胡俊波；龚建平 刊期： 2004年第09期
目的了解中国产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型分布.方法收集北京、浙江、新疆及郑州等共400株临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用接合试验,聚合酶链反应,克隆测序等方法明确ESBLs基因型. 结果 400株细菌中356株细菌ESBLs的基因型明确.其中328株细菌产1种ESBLs,主要为CTX-M型,包括CTX-M-14型ESBLs占52.25%,CTX-M-3型占14.25%,CTX-M-24型占7.25%,CTX-M-22型占2%,CTX-M-28和CTX-M-9型分别占0.75%,CTX-M-13、CTX-M-27和CTX-M-29型各占0.25%;其次为SHV型,其中SHV-12占2.5%(10/400),SHV-5占1.00%,SHV-2占0.5%.28株细菌同时携带2种或3种ESBLs,占7.00%(28/400),其中以同时产CTX-M-14和CTX-M-3常见.结论中国产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型以CTX-M-14型为主;其次为CTX-M-3型,部分菌株同时产两种及两种以上ESBLs.
作者：季淑娟；顾怡明；谭文涛；王丹丹；冯羡菊；周志慧；俞云松；陈亚岗；李兰娟 刊期： 2004年第09期
目的对红细胞(Red blood cell, RBC)与白细胞(White blood cell, WBC) 计数参考方法的结果进行比对,以保证结果的可靠性.方法按照国际血液学标准化委员会的要求,建立红细胞与白细胞计数的参考方法.使用Eightcheck-3WP和Cellcheck-400 为比对物质,同时在卫生部临床检验中心和日本参考实验室进行检测并将结果进行比对.结果红细胞计数结果的差别可控制于2%以下,白细胞计数结果的差别可控制于3.5%以下.结论红细胞与白细胞计数参考方法检测结果的可比性良好,该比对模式的建立保证了参考方法检测结果的准确性和可靠性.
作者：彭明婷；谷小林；陆红；申子瑜 刊期： 2004年第09期
目的研究分析我国南方汉族人脊髓小脑性共济失调(SCA)不同基因亚型的分布状况.方法对临床诊断为SCA的36个家系43例患者和散发38例患者,采用聚合酶链反应(PCR)对SCA病的三核苷酸重复(TNR)片段进行扩增,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳和图像分析软件计算其长度,推算所有正常和异常扩增等位基因内TNR重复次数.结果我国南方汉族人群的SCA患者中SCA3是常见的类型,占42.0%,而SCA2、SCA1、SCA7、SCA6和SCA12型分别为7.4%、4.9%、3.7%、2.5%和1.2%,未检出SCA8、SCA10、SCA17、DRPLA和FRDA亚型.结论在家族性和散发性SCA患者中,SCA3为常见类型,PCR检测可确立大部分患者的基因亚型.
作者：谢秋幼；梁秀龄；李洵桦 刊期： 2004年第09期
目的研究硝酸甘油(GTN)对肿瘤细胞生长繁殖的影响及机制.方法以人宫颈癌细胞系(Hela细胞)为研究对象,用四甲基偶氮唑(MTT)法检测Hela细胞的活性;流式细胞仪检测bcl-2蛋白,细胞周期,细胞凋亡指数;比色法检测亚硝酸盐、还原型谷胱甘肽(GSH).结果 GTN代谢产生一氧化氮(NO)及亚硝酸盐,MTT试验显示Hela细胞活性明显降低;经0.175 mmol/L GTN处理后,Hela内GSH由(43.97±2.80) nmol/106降至(36.46±2.32) nmol/106细胞,细胞培养体系GSH由(71.68 ± 3.02) μmmol/L降至(58.38±0.81) μmol/L;bcl-2蛋白表达下降,细胞凋亡指数由1.47±0.03提高到2.72±0.089,使Hela细胞G2～M期所占比例由3.47±1.09增加至12.71±1.45,S期所占比例由45.955±4.66降至34.867±3.92.结论 GTN可抑制肿瘤细胞的生长繁殖,其机制与GTN代谢消耗GSH和产生NO有关.
作者：张阳东；田亚平；董矜；汪德清 刊期： 2004年第09期
聚合酶链反应(PCR)具有操作简便、灵敏度高和特异性强等优点.但也常因标本受PCR扩增产物污染而产生假阳性结果.因此,控制外源性DNA污染已成为各实验室非常关注的问题.近年来,人们采用了许多方法消毒处理不同的污染环境和污染物[1-5],但结果报导不一.为选择一种消除实验室DNA污染的佳方法,我们选用六种传统的消毒法进行对比研究.现将结果报告如下.
作者：刘军权；陈复兴；周忠海；曹苏梅 刊期： 2004年第09期
2002年5月,我们从一例脑脓肿患者的脓液标本中分离出SR菌落变异的嗜沫嗜血杆菌.患者,男,40岁,2002年4月30日入院,该患者在入院前一周无明显诱因出现右侧肢体活动不灵,于入院前两天开始出现头痛,伴头晕、恶心、呕吐,无复视,无耳聋.
作者：宿丽娟；冯刚；杨静波；蔡秀荣 刊期： 2004年第09期
目的探讨并建立微流控芯片的电泳分离方法,用于快速分离尿蛋白.方法利用照相平板湿蚀刻法在5 cm×5 cm×0.1 cm石英玻片上,刻制管道宽度为70 μm、深度约40 μm的十字形电泳泳道,以500 V为进样电压、2 000～2 500 V为分离电压、pH 10.5的75 mmol/L 硼酸缓冲液为电泳液分离尿蛋白. 结果在2～3 min完成电泳,纯牛白蛋白、人运铁蛋白、人IgG均可得到单一分离峰,其混合样品亦可得到较好分离.在38例尿蛋白阳性患者中,用该法检测发现溢出性蛋白尿3例、选择性蛋白尿9例、非选择性蛋白尿26例,8例健康对照未检出蛋白峰.结论本法具有快速、简便、检测成本低的特点,依据电荷和分子量的不同,可将蛋白尿初步分为溢出性蛋白尿、选择性蛋白尿、非选择性蛋白尿,有利于临床的诊断和预后判断,有较好的应用前景.
作者：王惠民；孙承龙；王跃国；贾春平；丛辉；金庆辉；范亚平；赵建龙 刊期： 2004年第09期
细菌鞭毛纤细,直径只有10～30 nm,远低于光学显微镜的分辨率,只有采用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察其形态.由于细菌鞭毛染色在细菌鉴定中起着很重要的作用,故以下将对其方法及其应用进展作一论述.
作者：谷海瀛 刊期： 2004年第09期
临床检验是将患者的血液、体液、分泌物等标本,通过目视观察、物理、化学分析、仪器等手段进行检测.近年来,随着基础医学、临床医学的发展,检验医学发展迅速,临床检验科实现了自动化、智能化、试剂多样化、检验方法标准化及床边检验快速化,这种现代化在给临床实验室诊断带来准确、高效的同时,也给临床检验科带来了亟待解决的问题.
作者：于翠英 刊期： 2004年第09期
乳腺癌的发生、发展和治疗具有很强的个体特异性.寡核苷酸芯片是一种高通量基因检测技术[1].目前,该项技术已被用于炎症[2]和细胞分化[3]相关基因等研究领域.本研究制备了288条人类肿瘤相关基因的寡核苷酸芯片,并对乳腺癌组织和正常乳腺黏膜组织所表达的基因进行筛选,同时进行差异表达基因生物信息学分析研究,以揭示这些差异基因与乳腺癌发生、分化、浸润及淋巴结转移之间的内在联系.
作者：徐笑红；孟旭莉；王升启 刊期： 2004年第09期
目的探讨肿瘤坏死因子-a(TNF-a)诱导Graves病甲状腺细胞凋亡与相关蛋白表达在Graves病(GD)发病关系中的意义.方法采用免疫组织化学S-P方法检测50例Graves病患者TNF-a,并检测对照组对Fas表达的影响.采用原代细胞培养方法进行细胞培养,细胞培养液中的sFas含量采用ELISA法检测.Fas/sFas mRNA检测采用半定量RT-PCR法. 结果含有TNF-a GD组细胞凋亡率为92.6%,显著高于对照组的凋亡率(36.0%) (P<0.01).其含有TNF-a GD组甲状腺细胞sFas、Fas/sFas mRNA含量与对照组比较差异有显著意义(P<0.01). 结论 TNF-a诱导Graves病甲状腺细胞凋亡及凋亡相关蛋白sFas、Fas/sFas mRNA有一定水平的表达,这些改变可能是TNF-a破坏甲状腺细胞的重要机制之一.
作者：何凤屏；冼苏；陆云飞；尹瑞兴；陈青云 刊期： 2004年第09期
目的探索甲状腺功能紊乱者适实验室诊断指标.方法采用化学发光免疫技术(CLIA)测定不同人群中三碘甲状腺原氨酸(TT3)、甲状腺素(TT4)、促甲状腺素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)浓度,比较受试者工作特征曲线(ROC)下面积及频数分布散点图分离效果.结果甲减诊断 ROC值TSH: 0.94±0.02, FT3:0.70±0.07,FT4:0.92±0.04,FT4/TSH比值:0.95±0.02;甲亢诊断ROC值分别为0.86±0.05, 0.82±0.03, 0.83±0.06, 0.90±0.05.从频数分布散点图显示,FT4/TSH的分离效率甲减93%,甲亢85%.结论 CLIA法测定FT4/TSH比值显示出佳的性能与分离效果,可提高甲状腺功能的诊断效率,FT4/TSH比值应被推荐为甲状腺功能评价的首选指标.
作者：王志刚；王君耀；贾鸣；石亚国 刊期： 2004年第09期
王鸿利教授是我国著名的实验诊断学和血液学专家,是我国检验医学教育的奠基人之一,也是上海第二医科大学检验医学专业的创始人之一.现任上海第二医科大学附属瑞金医院终身教授、主任医师、博士研究生导师.
作者： 刊期： 2004年第09期
乙型肝炎病毒(HBV)基因组表面抗原(HBsAg)编码区(S区)由S、前S1和前S2基因组成,分别编码S、前S1和前S2三种主要蛋白,从而共同构成HBV外壳蛋白[1].作为一项新的HBV血清学检测指标,乙型肝炎病毒前S1抗原(HBV preS1-Ag)的检测已被普遍应用于乙型肝炎的实验室诊断和疗效观察.我们对310份慢性乙型肝炎患者血清进行了HBV preS1-Ag、HBV-M、HBV-DNA及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)联合检测,进而分析探讨这些指标之间的关系.
作者：夏邦世；沈忠海；马红松；朱金明 刊期： 2004年第09期
为探讨胃腺癌早期诊断方法,我们采用本院近引进的蛋白质指纹图谱仪,表面加强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI),用于检测早期胃腺癌,经对临床检测33例胃腺癌患者,其病理分级为Ⅰ级3例、Ⅱ级13例、Ⅲ级11例、Ⅳ级6例. 31例健康查体者,其灵敏度为90.91%(30/33),特异性为93.55%(29/31),阳性预测值为93.75%(30/32).
作者：粱勇；潘春琴；杨林军；刘池波；孙灵芬；朱雄文；张日初；张瑾；许洋；郭军华 刊期： 2004年第09期
解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)是泌尿生殖道感染的常见病原体[1,2].我们通过对不孕、阴道炎、尿道炎患者以及正常对照者的泌尿生殖道分泌物进行支原体检测,研究分析了支原体感染浓度对不孕的影响及相关性.
作者：徐向荣；叶红；周宗立 刊期： 2004年第09期
目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测细胞角蛋白19(CK19)基因表达在乳腺癌诊疗中的应用价值.方法采用FQ-PCR法,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内对照,测定15名健康女性体检者、25例良性乳腺疾病和76例乳腺癌患者外周血中CK19的表达量.结果 CK19和CK19/GAPDH在正常对照组和良性乳腺疾病组间的差异无显著意义(P>0.05),而乳腺癌组则显著高于前两组(P<0.05),GAPDH在三组间的差异均无显著意义(P>0.05).乳腺癌组的CK19和CK19/GAPDH阳性率为53.9%(41/76),而另两组均为阴性.27例乳腺癌患者术前,化疗后1、28和56 d CK19和CK19/GAPDH均呈下降趋势,但化疗后1和28 d与术前比较,差异无显著意义(P>0.05),化疗后56 d则显著低于术前(P<0.05).结论 FQ-PCR技术是较灵敏和特异的快速定量检测CK19方法,可用于乳腺癌的诊断和疗效监测.
作者：邓君；韩冰；黄文方；饶绍琴；杨明清 刊期： 2004年第09期
经历了传染性非典型肺炎(又称严重急性呼吸综合征, SARS)的疫情之后,人们再次感受了微生物的威力和感染性疾病的凶险.SARS改变了医院的很多工作模式或制度,如建立发热门诊、让发热的初诊患者戴口罩、医护人员穿戴防护衣和护目镜等[1].的确,许多SARS疫情与医院感染密切相关.通过采用严格的医院感染控制措施,终使疫情得以控制.
作者：胡必杰 刊期： 2004年第09期
常见质控规则是基于检出预期随机正态分布的变化.当数据总体显示的均值和标准差与质控图上指定值一样时,我们可见到结果预期的比例在均值加减1个标准差(s)、2 s和3 s范围内. 当数据总体由于准确度或精密度的因素而改变,这些比例也将随着改变,并产生失控标记信号.
作者：王治国；李小鹏；武平原 刊期： 2004年第09期
中华检验医学杂志
主管:中华医学检验杂志
主办：中国科学技术协会
