目的 应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建登革病毒特异性全长人源抗体库.方法 采集登革确诊患者恢复期外周血,分离外周血淋巴细胞并提取其总RNA,用RT-PCR扩增全长Kappa轻链(LCk)和重链可变区(VH)基因,构建抗体轻链基因库和抗体重链基因库；将抗体基因库转染CHO细胞、用流式细胞仪分析抗体在CHO细胞表面的表达.结果 以1.2 μg总RNA为模板,用6套引物扩增全长Kappa轻链和重链可变区基因,插入表达载体,轻链基因库容量为1.45×104,重链基因库容量为1.8×105;随机挑选的10个轻链克隆和10个重链克隆,经过测序鉴定,轻链有8个含有正确的阅读框架,编码8个不同的氨基酸序列,重链有7个含有正确的阅读框架,编码7个不同的氨基酸序列.流式细胞仪分析含有正确阅读框架的单克隆和抗体基因库,均检测到全长抗体在CHO细胞表面的表达,抗体库中可表达的抗体多样性达到109.结论 以1.2 μg总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,成功构建可表达库容量达到109的登革病毒特异性全长人抗体基因库.
作者：温扬明；蓝开健；王俊洁；余晶仪；屈娅荣；赵卫；张复春；谭万龙；曹虹 刊期： 2013年第06期
目的 探讨靶向抑制EZH2表达对子宫内膜癌细胞生长及侵袭的影响及其分子机制.方法 实时荧光定量PCR检测EZH2在子宫内膜癌与癌旁子宫内膜组织中的表达差异.利用化学合成siRNA转染子宫内膜细胞,靶向抑制EZH2表达.MTT、流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期改变.Boyden小室检测细胞侵袭情况的变化.Western blotting检测细胞周期因子及基质金属蛋白酶2(MMP2)表达改变.结果 相比于癌旁子宫内膜组织,EZH2基因在子宫内膜癌中表达相对增高.SiRNA在子宫内膜癌细胞中抑制EZH2表达后,细胞增殖能力明显降低,且细胞周期也阻滞在G1期.Boyden小室分析显示,在抑制EZH2表达后,细胞的侵袭能力也明显降低.机制分析显示,在抑制EZH2表达后,细胞周期因子E2F1及MMP2表达明显降低,而抑癌基因p21表达明显升高.结论 EZH2在子宫内膜癌中表达明显升高.SiRNA靶向抑制EZH2之后通过下调E2F1、MMP2及上调p21表达后,能明显减慢子宫内膜癌细胞增殖和侵袭速度.
作者：冷灵芝；黄启涛；董玉楠；俞泓；田焱；彭国庆 刊期： 2013年第06期
目的 通过观察含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)培养的Col0205细胞,研究其对CD133与ALDH1表达的影响.方法 用含生长因子的无血清培养基对Col0205细胞进行培养,以含血清培养基(serum-supplimented medium,SSM)组作为对照,流式细胞术检测两组细胞表面标志物CD133表达的阳性率；流式分选SFM组CD133+细胞和CD133-细胞,倒置显微镜观察CD133+细胞和CD133-细胞在无血清培养基中的生长特性；利用细胞免疫荧光检测CD133+细胞和CD133-细胞CD133和ALDH1的表达；分别将CD13+细胞和CD13-细胞在NOD/SCID小鼠皮下进行成瘤实验,采用免疫组织化学方法对肿瘤组织检测ALDH1表达.结果 SFM组CD133+细胞比例明显高于SSM组(P＜0.05)；CD133+细胞在SFM中可以形成肿瘤干细胞球,而CD133-则不能形成；CD133+细胞高表达CD133和ALDH1,且两者共表达,而CD133细胞则是阴性表达；CD133+细胞和CD133-细胞成瘤后,CD133+细胞组肿瘤组织ALDH1阳性表达,而CD133-细胞组阴性表达.结论 含生长因子的无血清培养基培养CD133+Col0205大肠癌细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达ALDH1,ALDH1可能是大肠癌干细胞候选的标志物之一.
作者：黎丽旋；张珊珊；梁芬芬；林英豪；李润华；陈楚弟；肖冰 刊期： 2013年第06期
目的 观察exendin-4对大鼠肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、纤维连接蛋白(FN)表达的影响.方法 试验分组:对照组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组(10 ng/ml)、TNF-α(10 ng/ml) +El组(1 nmol/L exendin-4)、TNF-α(10 ng/ml)+E5组(5 nmol/L exendin-4)、TNF-α(10 ng/ml)+E10组(10nmol/L exendin-4).收集24 h细胞,提取RNA,采用实时荧光定量检测细胞内MCP-1 mRNA的表达；分别在24、48 h收集各组细胞培养上清液,采用ELISA检测培养细胞上清中MCP-1、FN的浓度.结果孵育24 h时,TNF-α组MCP-1 mRNA和细胞培养上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加(P＜0.01)；与TNF-α组比较,TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞内MCP-1 mRNA和培养上清内MCP-1、FN含量均明显降低；孵育48 h时,TNF-α细胞培养上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加(P＜0.01)；与TNF-α组比较,TNF-α+E1组、TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞培养上清内MCP-1、FN含量均明显降低；并且随着时间的延长和exendin-4浓度的增加,培养上清内MCP-1、FN含量降低更加明显.结论 Exendin-4可明显抑制TNF-α诱导的系膜细胞MCP-1 mRNA的表达,并以剂量和时间依赖的方式抑制TNF-α诱导的系膜细胞培养上清内MCP-1、FN的含量,提示exendin-4可能会对肾脏具有一定保护作用.
作者：江颖娟；薛耀明；张倩；张艳飞；袁园 刊期： 2013年第06期
目的 原核表达瘦素受体(OBR)近跨膜区重组融合蛋白并进行SD大鼠免疫实验,观察其对SD大鼠脂肪沉积的影响.方法 设计1对带有BamH Ⅰ和HindⅢ酶切位点特异性引物,扩增OBR胞外近跨膜区基因片段(1705～2364 bp),经酶切后连接到表达载体pRSETA的BamH Ⅰ和HindⅢ两酶切位点之间,构建OBR胞外近跨膜区重组表达质粒并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达,SDS-PAGE电泳分析和western blotting鉴定表达产物.随后制备OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白并免疫SD大鼠,观察其对SD大鼠体质量、采食量、体长、Lee's指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积、皮下脂肪沉积的影响.结果 SDS-PAGE电泳分析和Western blotting鉴定结果显示,在IPTG诱导下OBR胞外近跨膜区重组表达菌表达了相对分子质量27 600左右的融合蛋白.对SD大鼠免疫OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白后,体质量、体长、Lee's指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积与对照组无明显差异,而采食量显著增加、皮下脂肪细胞体积减小.结论 成功表达西藏小型猪瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白,免疫SD大鼠可促进采食和抑制皮下脂肪沉积.
作者：刘闻；吴丽红；徐名衬；郭日红；顾为望；施振旦；袁进 刊期： 2013年第06期
目的 提出一种把膝关节软骨T2图自动分为三层及九个区域并算出各区域T2均值的方法.方法 本方法根据临床经验丰富的放射科医生在T2图上手动勾勒出的膝关节软骨边缘,计算其中轴线以及中轴线的法线,然后将医生分割区域沿法线方向等间距再分为表浅层、中间层、深层三层,再根据中轴线的长度选取两条法线将软骨区域均分为内中外三部分,后计算各个区域内的T2均值,并通过Bland-Altman分析方法进行统计学分析.结果 手工分区和自动分区方法的95％一致性界限为(-3.04 ms,3.20 ms),其一致性界限窄(小于小均值的一半),变异系数为4.04％.结论 自动分区与手工分区这两种方法具有较好的一致性,而且自动分区方法克服了手工分区方法的主观性.
作者：钟智辉；余太慧；王雷；阳维；冯美燕；卢振泰；陈武凡；冯衍秋 刊期： 2013年第06期
目的 基于中和抗体VRC01与HIV-1 gpl20的结合模式,利用计算机虚拟筛选,从IBS天然产物数据库中筛选靶向HIV-1gpl20的小分子HIV-l进入抑制剂,并对其抗病毒活性和机制进行研究.方法 运用MM-PBSA方法计算候选化合物与HIV-1gpl20结合后自由能的变化；利用HIV-1假病毒、活病毒技术及细胞融合实验,检测化合物抑制HIV-1感染的活性；XTT比色法检测化合物对细胞的毒性；采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)研究化合物体外抗病毒活性的机理.结果 利用计算机从40 000个化合物中虚拟筛选出19个与gpl20结合后自由能降低较大的小分子化合物,其中NC-2具有抑制HIV-1感染和细胞融合的活性,其抑制HIV-1实验株ⅢB的IC50是1.95±0.44 μmol/L,抑制HIV-1JRFL假病毒的IC50是10.58±0.13 μrmol/L.酶联免疫吸附法结果表明NC-2体外能抑制HIV-1 gpl20与CD4的结合,但不抑制HIV-1 gp41六螺旋的形成.结论该计算机虚拟筛选的方法可为开发作用于HIV-1 gpl20的小分子进入抑制剂提供参考.同时,通过计算机辅助设计加病毒活性筛选的方法,得到一个新颖结构的HIV进入抑制剂NC-2.
作者：段恒；王玉芹；宋德寿；陈之朋；裘佳寅；陆路；姜世勃；刘叔文；谭穗懿 刊期： 2013年第06期
通过Cu(I)催化的点击化学合成一种放射性碘标记化合物,建立一套新的放射性碘标记的方法,该方法温和、快速、高效.结果显示在有机相反应中,通过点击化学反应5-碘-(125/131I)-1,2,3-三唑化合物在24 h内合成,放射化学产率达到13％.但是在水相中,点击化学标记生物分子RGD的放射化学产率为0.原因是在水相中,Cu(I)催化作用使得氢离子和碘离子发生了交换反应,没有足够的放射性碘配体与RGD发生偶联.本文还提出了在反应溶剂为有机相和水相的条件下Cu(Ⅰ)催化该环加成反应的不同反应机制.
作者：王成；尹吉林；周伟；张岚；周晴 刊期： 2013年第06期
目的 研究miR-590的两个臂-miR-590-5p和miR-590-3p对肝癌细胞增殖能力的影响,以及参与肿瘤发生发展的机制.方法 利用miRNA芯片、QPCR对肝癌标本和各细胞株miR-590的表达谱系进行分析和验证.通过脂质体将miR-590 mimic或inhibitor转染正常肝细胞或肝癌细胞,MTT生长曲线分析和软琼脂克隆形成实验检测转染后细胞增殖及存活能力的变化.Targetscan预测miR-590-5p和miR-590-3p的靶基因,并通过萤光素酶报告系统以及western blot进行验证.结果 miRNA芯片结果显示3个肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织相对于癌旁正常组织,miR-590-5p和miR-590-3p表达上调.通过QPCR验证了10例临床HCC肿瘤标本发现80％的HCC组织相对于癌旁组织miR-590-5p和miR-590-3p均同步显著上调.QPCR结果进一步发现,HepG2、Hep3B、Huh7三株HCC细胞株相对于正常肝细胞株L-O2 miR-590-5p/3p同样表达上调.MTT和软琼脂克隆形成结果显示,L-O2分别过表达miR-590-5p和miR-590-3p,细胞的增殖能力都显著增加(P＜0.05)；而HepG2、Hep3B、Huh7分别下调miR-590-5p和miR-590-3p的表达后,细胞的增殖能力也都显著降低(P＜0.05).Targetscan预测,PDCD4和PTEN分别作为miR-590-5p和miR-590-3p的潜在靶基因.萤光素酶报告系统以及western blot结果显示miR-590-5p和miR-590-3p可以分别直接下调靶基因PDCD4和PTEN的表达(P＜0.05).进一步我们发现miR-590-3p通过下调PTEN激活PI3K-AKT信号通路,促进AKTl-S473的磷酸化水平.结论在HCC发展过程中miR-590扮演着重要的致癌因子角色,我们结果发现miR-590的两个臂都具有促进肿瘤发生的生物学功能,它们分别通过靶向调节抑癌基因PDCD4和PTEN的表达来促进HCC细胞的增殖和存活,并激活核心的PI3K-AKT肿瘤信号通路.由此可见miR-590在HCC发生发展过程中具有重要的意义,也可作为临床诊治潜在的新靶标.
作者：杨红飞；郑文宏；赵文淘；关春燕；安靓 刊期： 2013年第06期
目的 构建果蝇细胞周期调控的数学模型.方法 使用一组常微分方程描述细胞周期网络中核心分子的相互作用,计算分子浓度的连续周期性变化,并捕获分子交互的离散事件.结果 计算结果吻合实验观测到的分子浓度的周期变化,揭示和解释了细胞周期时程补偿的数学机制与定量特性.结论 E2F1 (E2F transcription factor l)所联结的正负反馈是调控G1/S与G2/M时程补偿的核心机制.
作者：刘文音；朱浩 刊期： 2013年第06期
原发性滤泡性免疫母细胞淋巴瘤(FIBL)是种极少见的淋巴瘤,其免疫表型CD10阳性提示起源于生发中心,而CD138阳性说明伴有浆母/浆细胞分化.为了更好地诊疗此病,本文从临床病理和免疫表型的特点方面报道国内首例女性患者,行PET-CT检查明确全身淋巴结的累及情况,并分别与滤泡性淋巴瘤、反应性滤泡增生作鉴别诊断.FIBL作为滤泡性淋巴瘤的罕见变异型,表现为滤泡内的肿瘤性免疫母细胞过度增生,向弥漫性大B细胞淋巴瘤的转化率略高于滤泡性淋巴瘤,预后较差,应予重视.
作者：何选秋；杨磊；丁彦青 刊期： 2013年第06期
目的 用在体细胞贴附式记录的方式,比较乌拉坦和氯胺酮麻醉条件下初级听皮层听觉神经元对纯音的反应特性,探查两种麻醉剂对初级听皮层单个神经元纯音编码机制的影响.方法 选取45只体质量200～250g的Sprague-Dawley雌性健康大鼠,将其随机分为两组,分别用乌拉坦和氯胺酮作为基础麻醉剂,手术暴露初级听皮层.选取短纯音作为刺激条件,用在体细胞贴附式记录的方式获得大鼠初级听皮层的单个听觉神经元动作电位发放情况,并用Matlab软件提取动作电位的相关参数,分析两种麻醉剂对听神经元的声反应特性的影响.结果 除了特征频率和Q值(特征频率与频率带宽的比值,反应听觉神经元的频率调谐特性)以外,小阈强度、自发放水平、声反应的潜伏期、刺激时间直方图以及频率-强度调谐曲线的类型均受到麻醉剂类型的影响.在乌拉坦麻醉条件下,声反应神经元对短声刺激表现出较高的阈强度、较低的自发放水平、较长的潜伏期,且接受较强抑制性频率-强度调谐曲线出现较频繁.结论乌拉坦和氯胺酮对声音频率信息在听觉通路中的传递无明显影响.但在乌拉坦麻醉条件下,初级听皮层神经元受到更强的抑制,这可能与乌拉坦能加强中间抑制性神经元的作用或抑制听神经元本身的兴奋性有关.
作者：黄玲玥；柏林；赵岩；肖中举 刊期： 2013年第06期
目的 建立乙型肝炎病毒肽核酸钳制PCR(PNA-PCR)耐药监测方法,以提前监测乙型肝炎病毒YMDD耐药株的产生.方法 选取rtM2041(ATT)、rtM204V(GTG)突变型质粒与野生型质粒rtM204(ATG)按照不同比例混合后,用PNA-PCR法及直接测序法对耐药位点进行检测,评价两种方法的灵敏度及特异性；选取临床耐药检测患者血清标本85例,采用PNA-PCR法及直接测序法进行耐药检测,比较两种方法的耐药检出率.结果 PNA-PCR法可在105倍野生型YMDD基因背景下检测出突变,灵敏度为0.001％,可检测到低限为101拷贝.而直接测序法可检测的基因突变的低极限为104拷贝,检测灵敏度为10％.85例临床耐药检测患者中,PNA-PCR法YMDD检测阳性率为85.9％(73/85:YIDD:40,YVDD:23,YIDD+YVDD:10),而PCR产物直接测序法检阳性率仅为40％ (34/85:YIDD:21,YVDD:11,YIDD+YVDD:2).阴性对照,两种方法均未测出HBV病毒,两种方法的特异性均较好.结论 PNA-PCR方法在灵敏度及特异性上均优于直接测序法,而且操作简便,快捷,在科研和临床上都有很好的应用前景.
作者：张迎迎；何海棠；杨洁；侯金林 刊期： 2013年第06期
目的 研究毒蕈碱胆碱能受体(mAChRs)亚型对脊髓背角感觉神经元谷氨酸能突触传递的调节机制.方法 在急性切取的腰段脊髓切片上,利用全细胞膜片钳法记录mAChRs非特异性激动剂氢化震颤素M(Oxo-M)对脊髓背角浅层神经元谷氨酸能兴奋性突触后电流(eEPSCs)的影响,给予M2/M4受体特异性拮抗剂喜巴辛,观察mAChRs在脊髓背角浅层神经元谷氨酸能递质释放调节过程中的作用.结果 不同浓度Oxo-M使脊髓背角神经元单突触和多突触eEPSCs的幅度显著降低,其抑制强度呈浓度依赖性,喜巴辛可以拮抗Oxo-M对刺激诱发eEPSCs幅度的抑制作用,在记录的25个细胞中,92.3％的单突触细胞和75％的多突触细胞表现为Oxo-M抑制作用被完全拮抗,另有16％的细胞表现为部分拮抗作用.结论 mAChRs激活后通过位于脊髓背角传人神经末梢突触前膜的M2或M4受体亚型抑制兴奋性谷氨酸递质的释放,这种突触前对谷氨酸释放的调节可能是胆碱能系统和mAChRs在脊髓水平对伤害性刺激调控的作用机制.
作者：杜威；郭英；袁维秀 刊期： 2013年第06期
目的 研究甘露聚糖结合凝集素(MBL)对人中性粒细胞(PMN)功能的影响.方法 采用ELISA和Dot blot检测MBL与微生物的结合；应用流式细胞术检测及荧光显微镜观察MBL对PMN吞噬功能的影响；用qPCR分析MBL对PMN表达IL-lβ、TNF-α和 CDllbmRNA的影响,以ELISA检测MBL对PMN分泌TNF-α和IL-6的影响；应用NBT还原法检测MBL对PMN呼吸爆发的影响.结果 MBL与微生物结合并呈浓度依赖关系.无人血清时,MBL对PMN吞噬C.albicans和E.coli无明显影响.存在MBL缺陷人混合血清时,MBL可促进PMN对C.albicans的吞噬且这种作用可被甘露聚糖所阻断,上调PMN IL-1β、TNF-α、IL-6及CDllb表达水平,刺激PMN呼吸爆发.结论 MBL以补体凝集素途径依赖方式增强PMN吞噬功能,并促进炎性细胞因子分泌.
作者：陈阿德；王燕；张丽芸；卢晓；左大明；陈政良 刊期： 2013年第06期
目的 评估CL-1肝细胞跟人肝星形细胞(HSC)的微载体微重力共培养来提高CL-1肝细胞的活力与功能的可行性.方法 实验分为两组:CL-1肝细胞微载体微重力单培养组和CL-1肝细胞、HSC微载体微重力共培养组.通过倒置显微镜观察、细胞计数、MTT染色及扫描电子显微镜比较两组肝细胞的形态、细胞活力差异,并通过、培养上清中ALT、白蛋白浓度等功能指标测定,比较两组肝细胞活力和功能差异.结果 共培养组较单培养组细胞生长迅速,细胞从24 h贴壁后开始增长,到第5天进入高峰.共培养组1～7 d的肝细胞密度明显高于单培养组的细胞密度(P＜0.05).两组肝细胞ALT、白蛋白从第1天开始不断分泌增加,第5天达到峰值,第6、7天有所下降.ALT功能比较,共培养组明显低于单培养组(P＜0.05).白蛋白功能比较,共培养组明显高于单培养组(P＜0.05).倒置显微镜、扫描电镜及MTT均提示共培养组肝细胞形态、活力优于单培养组.结论 人肝细胞、HSC微载体微重力共培养研究有利于维持及增强旋转生物反应器的肝细胞活力及功能,对人工肝的培养模式发展具有重要意义.
作者：潘康明；周焕城；张志；高毅；徐小平 刊期： 2013年第06期
目的 探讨基础状态高血清黄体生成素(LH)、不同黄体生成素/卵泡刺激素比值(LH/FSH)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响.方法 回顾性分析我中心接受IVF治疗的134个PCOS助孕周期,按照基础状态LH≤10 U/L分为A1(LH≤10 U/L)、A2(LH＞10 U/L)组,按照LH/FSH＜2分为B1(LH/FSH＜2)、B2(LH/FSH≥2)组.分别比较A、B组患者一般情况、胚胎质量和临床妊娠结局.结果 A2组血清FSH、T、LH/FSH比值、获卵数均较A1组高,有统计学差异(P＜0.05)；但两组在窦卵泡计数(AFC)、降调时间、Gn天数、启动日LH、LH/FSH、胚胎质量及临床妊娠结局方面均无统计学差异.B2组的基础LH、HCG日E2、获卵数较B1组高,但Gn使用剂量较少,有统计学差异(P＜0.05)；而两组在降调节时间、Gn天数、启动日LH、LH/FSH比值、临床妊娠结局方面无统计学差异.结论PCOS患者经口服避孕药物预处理后,基础状态高LH水平(LH＞10 IU/L)及高LH/FSH比值(LH/FSH≥2)对其IVF妊娠结局无不良影响.
作者：耿旭景；欧湘红；廖旖欣；谭雯雅；王松；全松 刊期： 2013年第06期
目的 探讨DNA分化抑制因子(inhibitor of DNA differentiation,Id)Id1/Id3在子宫内膜癌中的表达及对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及粘附等生物学行为的作用.方法 Western blot方法检测4例子宫内膜癌组织及相应的癌旁组织中的Id1/Id3的表达；将子宫内膜癌RL-952和HEC-1-B两株细胞各分为未处理细胞组、空白病毒组、启动子病毒组和Id1/Id3双敲低组.通过qRT-PCR检测不同腺病毒载体感染细胞后MMP2、CXCR4和P21 mRNA表达量,Westem blot检测MMP2、CXCR4、P21蛋白表达情况；通过MTT增殖试验、Transwell侵袭实验、细胞划痕实验和细胞粘附实验检测Id1/Id3表达改变后,对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、移行和粘附能力的影响.结果 Id1/Id3在子宫内膜癌组织中较癌旁组织表达增高(P＜0.05)；双敲低Id1/Id3,子宫内膜癌细胞中MMP2、CXCR4的mRNA水平和蛋白水平明显降低(P＜0.05),P21的mRNA水平和蛋白水平则明显升高(P＜0.05),RNAi组与其他3组细胞相比均有显著性差异；Id 1/Id3双敲低组子宫内膜癌RL-952和HEC-1-B株细胞增殖能力、侵袭能力、迁移能力和粘附能力均抑制(P＜0.05).结论 Id1/Id3在子宫内膜癌患者组织中高表达,并可通过升调MMP2、CXCR4和降调P21的表达促进子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及粘附作用,靶向Id1/Id3治疗可能成为预防和治疗子宫内膜癌的新方案.
作者：孙丽丽；李学农；刘国炳 刊期： 2013年第06期
目的 探讨静息状态下CT冠状动脉造影(CTCA)结合CT首过心肌灌注成像(CT first-pass MPI)全面诊断冠心病的临床可行性与准确性.方法 55例怀疑或诊断为冠心病的患者,两周内完成CTCA与CAG检查.应用CTCA的原始数据进行CTfirst-pass MPI分析,以CAG结果为参照,评价CT first-pass MPI及CTCA结合CT first-pass MPI检测阻塞性冠脉病变的准确性.结果 以CAG结果作为参照,CT fiRst-pass MPI检测阻塞性冠脉病变的敏感性为84.6％,特异性为68.8％,阳性预测值为86.8％,阴性预测值为64.7％,准确性为80.0％; CTCA结合CT first-pass MPI诊断阻塞性冠脉病变的敏感性为92.3％,特异性为93.8％,阳性预测值为97.3％,阴性预测值为83.3％,准确性为92.7％.结论 静息状态下CTCA结合CT first-pass MPI方法可以同时提供冠脉解剖学及功能学方面的信息,临床可行,且可准确的诊断阻塞性冠脉疾病.
作者：汪奇；秦静；盖鲁粤；王志国；关志伟；孙志军；董蔚；杨立；陈韵岱 刊期： 2013年第06期
目的 检测Nusap1基因蛋白在肝癌手术切缘中的表达情况及其与肿瘤早期复发的关系.方法 选择常规病理学检查手术切缘为阴性的原发性肝癌标本61例,用免疫组化法检测手术切缘Nusap1基因蛋白表达情况.结果 肝癌手术切缘中Nusap1蛋白表达阳性有21例,其中15例术后早期复发(71.4％)；阴性40例,术后仅12例出现早期复发(30％)；阳性组术后早期复发率明显高于阴性组,差异有显著性(P＜0.05).结论 肝癌手术切缘中Nusap1蛋白表达与术后早期复发明显相关,可预测肝癌术后早期复发高危患者及指导术后辅助治疗.
作者：张猛；杨定华；刘萧；刘延；梁鉴坤；何华；钟克波；林梁；陶国贵 刊期： 2013年第06期
目的 探讨塞来昔布增强口腔癌细胞化疗敏感性与其阻滞细胞周期进程及调节P-gp之间的相关性.方法 塞来昔布10、20、40、80 μmol/L和/或长春新碱0.375、0.75、1.5、3μmol/L处理KBNCR细胞后,分别采用MTT法检测KB/VCR细胞生长抑制率；流式细胞术检测细胞周期分布情况；Western blot检测周期相关蛋白Cyclin Dl、p21 wAF1/CIP1及P-gp的蛋白表达.结果 塞来昔布浓度较低时＜20 μmol/L)对KB/VCR生长增殖无明显影响,但小剂量的塞来昔布10 μmol/L可显著增强VCR对KBNCR细胞的毒性作用,并呈时间依赖性.塞来昔布与长春新碱联合作用于KB/VCR细胞24、48、72 h后,其生长抑制率分别为(37.53±2.05)％、(46.67±3.17)％及(54.02±1.53)％,显著高于塞来昔布和长春新碱单独用药组(P均＜0.01).塞来昔布与VCR联合应用能改变细胞周期分布,与VCR组相比,联合用药组G0/G1期细胞数量增加(56.08±0.46)％,S期和G2/M期细胞数目降低[S期:(22.83±0.20)％; G2/M期:(21.09±0.66)％].此外,与VCR组细胞相比,联合用药能显著降低Cyclin D1的表达,增强p21wWAF1/CIP1的表达,并且Cyclin Dl蛋白水平的降低及p21WAF1/CIP1蛋白水平的上升伴随着P-gp蛋白的下调.结论 塞来昔布下调节P-gp而增强KB/VCR细胞对化疗药物的敏感性可能与Cyclin D1和p2lWAF1/CIP1蛋白变化引起的细胞周期阻滞有关.
作者：廖汶晓；闫怡轩；黄艳青；李伟忠 刊期： 2013年第06期
目的 探讨干扰素α和恩替卡韦(ETV)治疗e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)的48周临床疗效及其预测因素.方法 采用回顾性研究方法.共人组HBeAg阳性CHB患者129例,其中聚乙二醇化干扰素α-2a(PEG-IFNa-2a)组27例；普通干扰素α(IFNa)组51例；ETV组51例.记录基线、12周、24周及48周HBeAg定量、HBV DNA定量及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平.采用t检验、Wilcoxon秩和检验、F检验、Kruskal-Wallis H检验、x2检验及受试者工作特征曲线(ROC)进行统计学分析.结果 治疗48周时,PEG-IFNa-2a组、IFNα组和ETV组HBV DNA检测不到率分别为55.6％、72.5％和84.3％,差异有统计学意义(P＜0.05)；PEG-IFNa-2a组、IFNa组和ETV组治疗48周时HBeAg血清转换率分别为33.3％、43.1％和11.8％,差异有统计学意义(P＜0.05),但PEG-IFNα-2a组与IFNα组患者HBeAg血清学转换率无统计学差异(P＞0.05).PEG-IFNα-2a组和ETV组在治疗48周时是否出现HBeAg血清学转换与基线时的年龄、性别、HBeAg,HBV DNA定量和ALT水平无关；IFNα组在治疗48周时是否出现HBeAg血清学转换与基线HBeAg水平相关(P=0.048),与基线时的年龄、性别、HBV DNA定量和ALT水平无关.依据基线时的年龄、HBeAg,HBV DNA定量及ALT水平,12周和24周HBeAg,HBV DNA定量、ALT水平及HBeAg较基线的下降率、24周HBeAg较12周的下降率获得的ROC曲线,在PEG-IFNα-2a治疗组,24周HBeAg较基线的下降大于97.81％(曲线下面积(AUC)=o.827,P=0.006),其48周时HBeAg血清学转换敏感性和特异性分别为0.778和0.889,阳性预测值和阴性预测值分别为0.778和0.889;若24周HBeAg较12周下降大于42.75％(AUC=0.790,P=0.016),其48周时HBeAg血清学转换敏感性和特异性分别为0.889和0.722,阳性预测值和阴性预测值分别为0.615和0.929.结论 治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎48周,PEG-IFNa-2a和IFNα较ETV有更高的HBeAg血清学转换率,ETV较PEG-IFNa-2a和IFNa有更高的HBV DNA转阴率.24周HBeAg较基线下降大于97.81％可作为PEG-IFNα-2a组患者48周HBeAg血清学转换的佳预测因素.
作者：谢志伟；周福元；周元平 刊期： 2013年第06期
目的 目前国际常用的胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)风险分级标准有三种:Fletcher、Miettinen和NIH2008,本文拟探讨三种分级对中国GIST风险程度评估中的应用价值.方法 回顾性分析2008年1月～2010年12月我院收治并具有完整病理及随访资料的144例原发GIST患者的临床及随访资料,采用Fletcher、NIH2008分级分别对其进行风险评估,采用Mieninen分级对119例GIST进行风险评估,使用Kaplan-Meier生存分析比较Miettinen和Fletcher分级,建立Logistic回归模型分析比较Miettinen和NIH2008分级的准确度.结果 (1)Fletcher分级中中危组的非胃(小肠、直肠等)GIST和胃GIST的无瘤生存时间之间相比差异有统计学意义(P=0.001),Miettinen分级极低、低、中、高危各组中,不同部位GIST的无瘤生存时间相比差异无统计学意义(P＞0.05)；(2) Miettinen分级的Logistic回归模型:y=l.350-3.807X1-4.664X2-2.554X3;NIH2008分级的Logistic回归模型:y=0.875-3.332X.-3.944X2-2.028X3; Logistic回归模型的判对率比较:Miettinen分级(89.4)＞ NIH2008分级(85.2).结论 Fletcher分级相对简易,有一定的使用价值,但是对不同部位的GIST的预后评估容易误判；Miettinen分级在中国GIST的风险评估中可能可以成为NIH2008分级一种潜在的补充手段.
作者：陈韬；刘浩；胡彦锋；余江；牟廷裕；李国新 刊期： 2013年第06期
目的 探讨口服地屈孕酮片在冻融胚胎移植(FET)周期中进行黄体支持对临床结局的影响.方法 对2010年1月～2011年9月于我中心施行的1643例FET周期进行回顾性病例对照分析.患者按所采用的治疗方案不同进行分组:A组为自然周期FET,B组为激素替代周期(HRT)FET.A、B组又按黄体支持用药方案不同各分为两个亚组,其中A(Ⅰ)组使用地屈孕酮片(n=358例),A(Ⅱ)组使用黄体酮(n=634例)；B(Ⅰ)组使用地屈孕酮片十补佳乐(n=185例),B(Ⅱ)组使用黄体酮+补佳乐(n=466例).分别比较A、B两组中Ⅰ和Ⅱ方案对临床结局的影响.结果 1643个FET周期,在A、B两组中Ⅰ和Ⅱ两种黄体支持用药方案中,临床妊娠率、胚胎种植率、早期流产率、异位妊娠率、继续妊娠率均无统计学差异(P＞0.05).结论 在FET周期中,应用口服地屈孕酮片进行黄体支持可达到与黄体酮针剂相同的临床结局,在FET的黄体支持中可用地屈孕酮片替代黄体酮针剂.
作者：郭薇；陈薪；叶德盛；何于夏；黎璞；牛静；杨新红；唐妍；陈士岭 刊期： 2013年第06期
目的 研究趋化因子CXCL14在骨肉瘤细胞和组织中的表达及其与患者预后的关系.方法 利用RT-PCR、酶联免疫吸附法(ELISA)和荧光定量PCR技术检测4种骨肉瘤细胞株及40对骨肉瘤及癌旁肌肉中CXCL14的表达,CCK8细胞增殖实验、克隆形成实验观察CXCL14对U2OS细胞增殖的影响,免疫组化检测CXCL14在骨肉瘤组织中的表达,并运用Kaplan-Meier法进行生存分析.结果 CXCL14在骨肉瘤细胞株中的表达均高于正常成骨细胞,而且其在骨肉瘤组织的表达也显著高于癌旁肌肉组织(P＜0.01).干扰CXCL14表达能抑制U2OS的生长(P＜0.05),经两条CXCL14干扰RNA处理后U2OS克隆形成率分别为(4.93±0.25)％和(5.03±0.0.31)％,均显著低于阴性对照组(8.03±1.16)％,差异有统计学意义(P＜0.05).Kaplan-Meier生存分析显示,CXCL 14高表达的患者预后比低表达组差(P=0.02).结论 CXCL14在骨肉瘤中高表达,它能促进骨肉瘤细胞的增殖并与患者不良预后相关,提示其可能成为潜在的治疗靶点.
作者：卢金昌；王晋；雍碧城；宋国徽；赵志强；唐清连；邹昌业；尹军强；谢显彪 刊期： 2013年第06期
目的 评估p27蛋白在胞浆中表达与鼻咽癌患者临床病理学特征的关系.方法 利用免疫组化检测P27蛋白在鼻咽癌组织与鼻咽组织之间的表达.利用统计学方法分析P27蛋白在鼻咽癌与鼻咽组织胞浆中表达差异以及P27蛋白在胞浆中表达与与鼻咽癌患者临床病理参数之间的相关性.结果 免疫组化结果显示,P27蛋白是一个核浆表达蛋白.与正常鼻咽组织相比,P27蛋白在鼻咽癌组织胞浆中的表达明显下调(P=0.047),且下调表达与T分级(P=0.033)呈负相关.此外,P27蛋白在鼻咽癌组织胞浆中的表达与淋巴结转移和临床分期虽然无显著意义,但也展现了明显负相关趋势(P=0.157,P=0.090).结论 P27蛋白在细胞胞浆中过低表达可能促进鼻咽癌的发生发展,且其可作为预测鼻咽癌患者预后的不利因素之一.
作者：黄巍；孙世珺；叶亦菁；方唯意 刊期： 2013年第06期
目的 通过检测和比较子宫内膜异位症(EMS)孕妇有无补充叶酸其女性胎儿脐血EMS易感基因HOXA10启动区CpG岛甲基化状态,探讨叶酸优化宫内环境的作用.方法 收集标本2010年1月～2012年12月21例患有EMS孕妇服用和15例未服用叶酸的女性胎儿脐血标本,利用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)及亚硫酸氢盐修饰后测序(BSP)检测和比较各组HOXA10的甲基化率.结果 补充叶酸组女性胎儿EMS易感基因HOXA10甲基化率显著降低,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 提示叶酸在预防胎源性EMS易感基因HOXA10异常甲基化中可能起一定作用.
作者：刘木彪；黄雪梅；许苏容；李蕾 刊期： 2013年第06期
目的 探讨结肠癌组织中白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)的表达及其临床意义.方法 选择150例结肠癌及癌旁正常组织制成微阵列芯片作为研究对象,用免疫组织化学方法检测组织芯片中SLPI蛋白表达并评分,采用x2检验比较不同SLPI表达水平和结肠癌临床病理陛特征,包括年龄、性别、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移之间的关系.结果 SLPI在结肠癌组织中相对于正常结肠组织高表达,SLPI蛋白高表达与肿瘤分化[低分化:8(42.1％)vs 11(57.9％)；中/高分化:3(2.3％)vs 128(97.7％)、TNM分期:[Ⅲ～Ⅳ:25 (29.4％)vs 60(70.6％)]、I～Ⅱ:2(3.1％)vs 63(96.9％)、淋巴结转移[18(28.6％)vs 45(71.4％)]及远处转移[11 (84.6％)vs 2(15.4％)]相关(P＜0.05),而与患者的性别和年龄差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SLPI表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移有关,有可能作为判断结肠癌患者预后的指标.
作者：郭久冰；李国新；庄建民；纪程宏；刘峰；陶国全；董汉章 刊期： 2013年第06期
目的 检测六株结肠癌细胞中Dickkopf-l (DKK1)的表达并探讨其意义.方法 在6株结肠癌细胞(SW480、SW620、HT29、LS174T、LOVO、HCTll6)分别应用qPCR方法检测DKK1的mRNA表达水平.用Western blot方法和细胞免疫组化方法检测DKK1的蛋白表达情况.结果 荧光定量分析显示,DKK1在HT29、HCT116中的表达高于其他四株细胞(P＜0.05)；Western blot显示,DKKt在HCT116、HT29中的表达同样高于其他四株细胞；细胞免疫组化染色显示,DKK1在六株结肠癌细胞株中呈阳性表达.结论 DKK1在6株人结肠癌细胞系中的表达具有差异性.
作者：于倩；杨磊；丁彦青；赵震；刘会平 刊期： 2013年第06期
目的 系统评价狄诺塞麦对低骨量妇女腰椎骨密度的影响及其安全性.方法 检索Medline数据库、Embase数据库、Cochrane临床对照实验中心数据库、万方数据库、中国知网全文数据库、中国生物医学文献数据库有关狄诺塞麦治疗低骨量妇女的临床研究,按照纳入及排除标准筛选出随机对照试验,用jadad量表对纳入的研究进行质量评价.提取有效数据,采用RevMan 5.0.24软件进行meta分析.结果 共纳入双盲、随机对照试验5项,采用固定效应模型进行meta分析,结果示狄诺塞麦治疗12月后,腰椎骨密度升高幅度比安慰剂对照试验高5.45％ (95％ CI,5.05％～5.84％),P＜0.00001.对随访期间发生的严重不良事件、严重感染事件及腰背痛事件,采用固定效应模型进行meta分析,两组间并无显著差异.结论 狄诺塞麦组相对安慰剂对照组可显著提高腰椎骨密度,两者的安全性近似.
作者：朱晓文；陈建庭 刊期： 2013年第06期
目的 探讨假性成分为主的“葫芦状”动脉瘤的影像学特点、诊断与治疗策略.方法 回顾性分析6例颅内真性动脉瘤-假性动脉瘤复合体患者的临床资料.结果 本组6例CT提示蛛网膜下腔出血,伴有脑实质内血肿.数字减影血管成像(digital subtraction angiography,DSA)或者磁共振血管成像检查提示颅内动脉瘤,5例前交通动脉瘤,1例左侧大脑中动脉瘤；3D-DSA 重建提示动脉瘤由大、小两部分构成,均为小母囊上发出较大的子囊.本组5例前交通动脉瘤均行弹簧圈栓塞术,2例术后出现严重脑组织肿胀,1例急诊行去骨瓣减压及动脉瘤夹闭术后逐渐恢复,1例死亡；大脑中动脉瘤行开颅夹闭术.2例开颅手术患者术后病理均提示假性动脉瘤成分.5例出院患者预后良好,均随访3个月,临床症状稳定.结论葫芦状动脉瘤是一种以假性动脉瘤成分为主的特殊形态的动脉瘤复合体,有其独特的病理生理过程和影像学特点,治疗上强调根据个体情况及动脉瘤形态学特点选择佳治疗方法尽早修复动脉瘤.
作者：冯文峰；王刚；张国忠；李伟光；李明洲；何小艳；张龙；漆松涛 刊期： 2013年第06期
目的 利用计算机辅助设计为儿童先天性髋关节脱位采用Steel三相截骨矫正手术方案的制定和实施提供一种相对精确的截骨方案.方法 选择13例拟行Steel三相截骨手术治疗的单侧先天性髋关节脱位患儿,术前对患者骨盆行连续螺旋CT连续断层扫描,将原始Dicom格式数据导入Materialise Mimics 14.1软件,三维重建髋关节,以.stl格式保存,导入Imageware 12.0软件,通过镜像重建患髋矫形后位置,模拟Steel三相截骨,建立截骨模板,通过快速成型技术生成模板实体,指导手术.结果 通过术后X线片和术后1年随访,髋臼指数平均为19.1°±3.2°,头臼包容关系明显改善.X线评定优良率为92.31％.结论 计算机辅助截骨模板可以为Steel三相截骨治疗儿童先天性髋关节脱位提供一种个性化、相对精确截骨方案.
作者：佟矿；张元智；张晟；余斌 刊期： 2013年第06期
目的 研究绝经期前成年女性肾移植前、后的性功能改变.方法 42例成年已婚女性、透析治疗超过6个月、肾移植术后肾功能恢复正常超过6个月的女性肾移植受者纳入研究.统计肾移植前后月经周期情况、检验患者手术前后性激素水平.采用女性性功能指数(FSFI)量表分别评估术前、术后患者的性功能.结果 肾移植前闭经、月经稀发、月经频发及月经正常的患者分别有18例(42.9％)、10例(23.8％)、5例(11.9％)、9例(21.4％),移植后分别为7例(16.7％)、5例(11.9％)、6例(14.3％)、24例(57.1％).肾移植后催乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)及黄体生成素(LH)较肾移植术前明显降低,而雌二醇(E2)和孕酮(P)较术前升高(P＜0.001).移植前19例(45.2％)、术后36例(85.7％)受者有性生活(P＜0.001).肾移植前、后女性性功能障碍(FSD)的总发病率分别为90.5％、40.5％(P＜0.001).肾移植前FSFI评分中性欲、性唤起、阴道润滑、性满意度、性高潮及性交痛领域的分值显著低于肾移植后(P＜0.001).结论 肾移植术后肾功能恢复正常后成年女性受者的性功能能够明显改善.
作者：于立新；夏仁飞；周敏捷 刊期： 2013年第06期
白塞病合并淋巴瘤病例罕见,目前国内外文献报道仅23例.本文报道国内第1例(世界上第2例)白塞病合并结外NK/T细胞淋巴瘤(鼻型)的病例,患者为26岁青年男性,确诊白塞病后予泼尼松龙、环磷酰胺、沙利度胺、生物制剂等药物治疗,自然病程2年后因急腹症手术,术后病理诊断“(回肠末端)结外NK/T细胞淋巴瘤,鼻型”.白塞病合并淋巴瘤的机制尚不清楚,本文通过文献复习,总结国内外报道的病例特点,在免疫机制、EB病毒感染、药物应用等方面对相关机制进行探讨.
作者：黄琴；赖伟男；杨敏 刊期： 2013年第06期
