黄玲玥;柏林;赵岩;肖中举
目的 构建果蝇细胞周期调控的数学模型.方法 使用一组常微分方程描述细胞周期网络中核心分子的相互作用,计算分子浓度的连续周期性变化,并捕获分子交互的离散事件.结果 计算结果吻合实验观测到的分子浓度的周期变化,揭示和解释了细胞周期时程补偿的数学机制与定量特性.结论 E2F1 (E2F transcription factor l)所联结的正负反馈是调控G1/S与G2/M时程补偿的核心机制.
作者:刘文音;朱浩 刊期: 2013年第06期
目的 探讨塞来昔布增强口腔癌细胞化疗敏感性与其阻滞细胞周期进程及调节P-gp之间的相关性.方法 塞来昔布10、20、40、80 μmol/L和/或长春新碱0.375、0.75、1.5、3μmol/L处理KBNCR细胞后,分别采用MTT法检测KB/VCR细胞生长抑制率;流式细胞术检测细胞周期分布情况;Western blot检测周期相关蛋白Cyclin Dl、p21 wAF1/CIP1及P-gp的蛋白表达.结果 塞来昔布浓度较低时<20 μmol/L)对KB/VCR生长增殖无明显影响,但小剂量的塞来昔布10 μmol/L可显著增强VCR对KBNCR细胞的毒性作用,并呈时间依赖性.塞来昔布与长春新碱联合作用于KB/VCR细胞24、48、72 h后,其生长抑制率分别为(37.53±2.05)%、(46.67±3.17)%及(54.02±1.53)%,显著高于塞来昔布和长春新碱单独用药组(P均<0.01).塞来昔布与VCR联合应用能改变细胞周期分布,与VCR组相比,联合用药组G0/G1期细胞数量增加(56.08±0.46)%,S期和G2/M期细胞数目降低[S期:(22.83±0.20)%; G2/M期:(21.09±0.66)%].此外,与VCR组细胞相比,联合用药能显著降低Cyclin D1的表达,增强p21wWAF1/CIP1的表达,并且Cyclin Dl蛋白水平的降低及p21WAF1/CIP1蛋白水平的上升伴随着P-gp蛋白的下调.结论 塞来昔布下调节P-gp而增强KB/VCR细胞对化疗药物的敏感性可能与Cyclin D1和p2lWAF1/CIP1蛋白变化引起的细胞周期阻滞有关.
作者:廖汶晓;闫怡轩;黄艳青;李伟忠 刊期: 2013年第06期
目的 研究甘露聚糖结合凝集素(MBL)对人中性粒细胞(PMN)功能的影响.方法 采用ELISA和Dot blot检测MBL与微生物的结合;应用流式细胞术检测及荧光显微镜观察MBL对PMN吞噬功能的影响;用qPCR分析MBL对PMN表达IL-lβ、TNF-α和 CDllbmRNA的影响,以ELISA检测MBL对PMN分泌TNF-α和IL-6的影响;应用NBT还原法检测MBL对PMN呼吸爆发的影响.结果 MBL与微生物结合并呈浓度依赖关系.无人血清时,MBL对PMN吞噬C.albicans和E.coli无明显影响.存在MBL缺陷人混合血清时,MBL可促进PMN对C.albicans的吞噬且这种作用可被甘露聚糖所阻断,上调PMN IL-1β、TNF-α、IL-6及CDllb表达水平,刺激PMN呼吸爆发.结论 MBL以补体凝集素途径依赖方式增强PMN吞噬功能,并促进炎性细胞因子分泌.
作者:陈阿德;王燕;张丽芸;卢晓;左大明;陈政良 刊期: 2013年第06期
通过Cu(I)催化的点击化学合成一种放射性碘标记化合物,建立一套新的放射性碘标记的方法,该方法温和、快速、高效.结果显示在有机相反应中,通过点击化学反应5-碘-(125/131I)-1,2,3-三唑化合物在24 h内合成,放射化学产率达到13%.但是在水相中,点击化学标记生物分子RGD的放射化学产率为0.原因是在水相中,Cu(I)催化作用使得氢离子和碘离子发生了交换反应,没有足够的放射性碘配体与RGD发生偶联.本文还提出了在反应溶剂为有机相和水相的条件下Cu(Ⅰ)催化该环加成反应的不同反应机制.
作者:王成;尹吉林;周伟;张岚;周晴 刊期: 2013年第06期
目的 探讨结肠癌组织中白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)的表达及其临床意义.方法 选择150例结肠癌及癌旁正常组织制成微阵列芯片作为研究对象,用免疫组织化学方法检测组织芯片中SLPI蛋白表达并评分,采用x2检验比较不同SLPI表达水平和结肠癌临床病理陛特征,包括年龄、性别、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移之间的关系.结果 SLPI在结肠癌组织中相对于正常结肠组织高表达,SLPI蛋白高表达与肿瘤分化[低分化:8(42.1%)vs 11(57.9%);中/高分化:3(2.3%)vs 128(97.7%)、TNM分期:[Ⅲ~Ⅳ:25 (29.4%)vs 60(70.6%)]、I~Ⅱ:2(3.1%)vs 63(96.9%)、淋巴结转移[18(28.6%)vs 45(71.4%)]及远处转移[11 (84.6%)vs 2(15.4%)]相关(P<0.05),而与患者的性别和年龄差异无统计学意义(P>0.05).结论 SLPI表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移有关,有可能作为判断结肠癌患者预后的指标.
作者:郭久冰;李国新;庄建民;纪程宏;刘峰;陶国全;董汉章 刊期: 2013年第06期
目的 观察exendin-4对大鼠肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、纤维连接蛋白(FN)表达的影响.方法 试验分组:对照组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组(10 ng/ml)、TNF-α(10 ng/ml) +El组(1 nmol/L exendin-4)、TNF-α(10 ng/ml)+E5组(5 nmol/L exendin-4)、TNF-α(10 ng/ml)+E10组(10nmol/L exendin-4).收集24 h细胞,提取RNA,采用实时荧光定量检测细胞内MCP-1 mRNA的表达;分别在24、48 h收集各组细胞培养上清液,采用ELISA检测培养细胞上清中MCP-1、FN的浓度.结果孵育24 h时,TNF-α组MCP-1 mRNA和细胞培养上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加(P<0.01);与TNF-α组比较,TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞内MCP-1 mRNA和培养上清内MCP-1、FN含量均明显降低;孵育48 h时,TNF-α细胞培养上清MCP-1、FN表达较对照组明显增加(P<0.01);与TNF-α组比较,TNF-α+E1组、TNF-α+E5组、TNF-α+E10组细胞培养上清内MCP-1、FN含量均明显降低;并且随着时间的延长和exendin-4浓度的增加,培养上清内MCP-1、FN含量降低更加明显.结论 Exendin-4可明显抑制TNF-α诱导的系膜细胞MCP-1 mRNA的表达,并以剂量和时间依赖的方式抑制TNF-α诱导的系膜细胞培养上清内MCP-1、FN的含量,提示exendin-4可能会对肾脏具有一定保护作用.
作者:江颖娟;薛耀明;张倩;张艳飞;袁园 刊期: 2013年第06期
目的 原核表达瘦素受体(OBR)近跨膜区重组融合蛋白并进行SD大鼠免疫实验,观察其对SD大鼠脂肪沉积的影响.方法 设计1对带有BamH Ⅰ和HindⅢ酶切位点特异性引物,扩增OBR胞外近跨膜区基因片段(1705~2364 bp),经酶切后连接到表达载体pRSETA的BamH Ⅰ和HindⅢ两酶切位点之间,构建OBR胞外近跨膜区重组表达质粒并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达,SDS-PAGE电泳分析和western blotting鉴定表达产物.随后制备OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白并免疫SD大鼠,观察其对SD大鼠体质量、采食量、体长、Lee's指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积、皮下脂肪沉积的影响.结果 SDS-PAGE电泳分析和Western blotting鉴定结果显示,在IPTG诱导下OBR胞外近跨膜区重组表达菌表达了相对分子质量27 600左右的融合蛋白.对SD大鼠免疫OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白后,体质量、体长、Lee's指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积与对照组无明显差异,而采食量显著增加、皮下脂肪细胞体积减小.结论 成功表达西藏小型猪瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白,免疫SD大鼠可促进采食和抑制皮下脂肪沉积.
作者:刘闻;吴丽红;徐名衬;郭日红;顾为望;施振旦;袁进 刊期: 2013年第06期
目的 研究绝经期前成年女性肾移植前、后的性功能改变.方法 42例成年已婚女性、透析治疗超过6个月、肾移植术后肾功能恢复正常超过6个月的女性肾移植受者纳入研究.统计肾移植前后月经周期情况、检验患者手术前后性激素水平.采用女性性功能指数(FSFI)量表分别评估术前、术后患者的性功能.结果 肾移植前闭经、月经稀发、月经频发及月经正常的患者分别有18例(42.9%)、10例(23.8%)、5例(11.9%)、9例(21.4%),移植后分别为7例(16.7%)、5例(11.9%)、6例(14.3%)、24例(57.1%).肾移植后催乳素(PRL)、卵泡刺激素(FSH)及黄体生成素(LH)较肾移植术前明显降低,而雌二醇(E2)和孕酮(P)较术前升高(P<0.001).移植前19例(45.2%)、术后36例(85.7%)受者有性生活(P<0.001).肾移植前、后女性性功能障碍(FSD)的总发病率分别为90.5%、40.5%(P<0.001).肾移植前FSFI评分中性欲、性唤起、阴道润滑、性满意度、性高潮及性交痛领域的分值显著低于肾移植后(P<0.001).结论 肾移植术后肾功能恢复正常后成年女性受者的性功能能够明显改善.
作者:于立新;夏仁飞;周敏捷 刊期: 2013年第06期
目的 目前国际常用的胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)风险分级标准有三种:Fletcher、Miettinen和NIH2008,本文拟探讨三种分级对中国GIST风险程度评估中的应用价值.方法 回顾性分析2008年1月~2010年12月我院收治并具有完整病理及随访资料的144例原发GIST患者的临床及随访资料,采用Fletcher、NIH2008分级分别对其进行风险评估,采用Mieninen分级对119例GIST进行风险评估,使用Kaplan-Meier生存分析比较Miettinen和Fletcher分级,建立Logistic回归模型分析比较Miettinen和NIH2008分级的准确度.结果 (1)Fletcher分级中中危组的非胃(小肠、直肠等)GIST和胃GIST的无瘤生存时间之间相比差异有统计学意义(P=0.001),Miettinen分级极低、低、中、高危各组中,不同部位GIST的无瘤生存时间相比差异无统计学意义(P>0.05);(2) Miettinen分级的Logistic回归模型:y=l.350-3.807X1-4.664X2-2.554X3;NIH2008分级的Logistic回归模型:y=0.875-3.332X.-3.944X2-2.028X3; Logistic回归模型的判对率比较:Miettinen分级(89.4)> NIH2008分级(85.2).结论 Fletcher分级相对简易,有一定的使用价值,但是对不同部位的GIST的预后评估容易误判;Miettinen分级在中国GIST的风险评估中可能可以成为NIH2008分级一种潜在的补充手段.
作者:陈韬;刘浩;胡彦锋;余江;牟廷裕;李国新 刊期: 2013年第06期
目的 研究毒蕈碱胆碱能受体(mAChRs)亚型对脊髓背角感觉神经元谷氨酸能突触传递的调节机制.方法 在急性切取的腰段脊髓切片上,利用全细胞膜片钳法记录mAChRs非特异性激动剂氢化震颤素M(Oxo-M)对脊髓背角浅层神经元谷氨酸能兴奋性突触后电流(eEPSCs)的影响,给予M2/M4受体特异性拮抗剂喜巴辛,观察mAChRs在脊髓背角浅层神经元谷氨酸能递质释放调节过程中的作用.结果 不同浓度Oxo-M使脊髓背角神经元单突触和多突触eEPSCs的幅度显著降低,其抑制强度呈浓度依赖性,喜巴辛可以拮抗Oxo-M对刺激诱发eEPSCs幅度的抑制作用,在记录的25个细胞中,92.3%的单突触细胞和75%的多突触细胞表现为Oxo-M抑制作用被完全拮抗,另有16%的细胞表现为部分拮抗作用.结论 mAChRs激活后通过位于脊髓背角传人神经末梢突触前膜的M2或M4受体亚型抑制兴奋性谷氨酸递质的释放,这种突触前对谷氨酸释放的调节可能是胆碱能系统和mAChRs在脊髓水平对伤害性刺激调控的作用机制.
作者:杜威;郭英;袁维秀 刊期: 2013年第06期
目的 检测六株结肠癌细胞中Dickkopf-l (DKK1)的表达并探讨其意义.方法 在6株结肠癌细胞(SW480、SW620、HT29、LS174T、LOVO、HCTll6)分别应用qPCR方法检测DKK1的mRNA表达水平.用Western blot方法和细胞免疫组化方法检测DKK1的蛋白表达情况.结果 荧光定量分析显示,DKK1在HT29、HCT116中的表达高于其他四株细胞(P<0.05);Western blot显示,DKKt在HCT116、HT29中的表达同样高于其他四株细胞;细胞免疫组化染色显示,DKK1在六株结肠癌细胞株中呈阳性表达.结论 DKK1在6株人结肠癌细胞系中的表达具有差异性.
作者:于倩;杨磊;丁彦青;赵震;刘会平 刊期: 2013年第06期
目的 评估p27蛋白在胞浆中表达与鼻咽癌患者临床病理学特征的关系.方法 利用免疫组化检测P27蛋白在鼻咽癌组织与鼻咽组织之间的表达.利用统计学方法分析P27蛋白在鼻咽癌与鼻咽组织胞浆中表达差异以及P27蛋白在胞浆中表达与与鼻咽癌患者临床病理参数之间的相关性.结果 免疫组化结果显示,P27蛋白是一个核浆表达蛋白.与正常鼻咽组织相比,P27蛋白在鼻咽癌组织胞浆中的表达明显下调(P=0.047),且下调表达与T分级(P=0.033)呈负相关.此外,P27蛋白在鼻咽癌组织胞浆中的表达与淋巴结转移和临床分期虽然无显著意义,但也展现了明显负相关趋势(P=0.157,P=0.090).结论 P27蛋白在细胞胞浆中过低表达可能促进鼻咽癌的发生发展,且其可作为预测鼻咽癌患者预后的不利因素之一.
作者:黄巍;孙世珺;叶亦菁;方唯意 刊期: 2013年第06期
目的 系统评价狄诺塞麦对低骨量妇女腰椎骨密度的影响及其安全性.方法 检索Medline数据库、Embase数据库、Cochrane临床对照实验中心数据库、万方数据库、中国知网全文数据库、中国生物医学文献数据库有关狄诺塞麦治疗低骨量妇女的临床研究,按照纳入及排除标准筛选出随机对照试验,用jadad量表对纳入的研究进行质量评价.提取有效数据,采用RevMan 5.0.24软件进行meta分析.结果 共纳入双盲、随机对照试验5项,采用固定效应模型进行meta分析,结果示狄诺塞麦治疗12月后,腰椎骨密度升高幅度比安慰剂对照试验高5.45% (95% CI,5.05%~5.84%),P<0.00001.对随访期间发生的严重不良事件、严重感染事件及腰背痛事件,采用固定效应模型进行meta分析,两组间并无显著差异.结论 狄诺塞麦组相对安慰剂对照组可显著提高腰椎骨密度,两者的安全性近似.
作者:朱晓文;陈建庭 刊期: 2013年第06期
目的 评估CL-1肝细胞跟人肝星形细胞(HSC)的微载体微重力共培养来提高CL-1肝细胞的活力与功能的可行性.方法 实验分为两组:CL-1肝细胞微载体微重力单培养组和CL-1肝细胞、HSC微载体微重力共培养组.通过倒置显微镜观察、细胞计数、MTT染色及扫描电子显微镜比较两组肝细胞的形态、细胞活力差异,并通过、培养上清中ALT、白蛋白浓度等功能指标测定,比较两组肝细胞活力和功能差异.结果 共培养组较单培养组细胞生长迅速,细胞从24 h贴壁后开始增长,到第5天进入高峰.共培养组1~7 d的肝细胞密度明显高于单培养组的细胞密度(P<0.05).两组肝细胞ALT、白蛋白从第1天开始不断分泌增加,第5天达到峰值,第6、7天有所下降.ALT功能比较,共培养组明显低于单培养组(P<0.05).白蛋白功能比较,共培养组明显高于单培养组(P<0.05).倒置显微镜、扫描电镜及MTT均提示共培养组肝细胞形态、活力优于单培养组.结论 人肝细胞、HSC微载体微重力共培养研究有利于维持及增强旋转生物反应器的肝细胞活力及功能,对人工肝的培养模式发展具有重要意义.
作者:潘康明;周焕城;张志;高毅;徐小平 刊期: 2013年第06期
目的 探讨静息状态下CT冠状动脉造影(CTCA)结合CT首过心肌灌注成像(CT first-pass MPI)全面诊断冠心病的临床可行性与准确性.方法 55例怀疑或诊断为冠心病的患者,两周内完成CTCA与CAG检查.应用CTCA的原始数据进行CTfirst-pass MPI分析,以CAG结果为参照,评价CT first-pass MPI及CTCA结合CT first-pass MPI检测阻塞性冠脉病变的准确性.结果 以CAG结果作为参照,CT fiRst-pass MPI检测阻塞性冠脉病变的敏感性为84.6%,特异性为68.8%,阳性预测值为86.8%,阴性预测值为64.7%,准确性为80.0%; CTCA结合CT first-pass MPI诊断阻塞性冠脉病变的敏感性为92.3%,特异性为93.8%,阳性预测值为97.3%,阴性预测值为83.3%,准确性为92.7%.结论 静息状态下CTCA结合CT first-pass MPI方法可以同时提供冠脉解剖学及功能学方面的信息,临床可行,且可准确的诊断阻塞性冠脉疾病.
作者:汪奇;秦静;盖鲁粤;王志国;关志伟;孙志军;董蔚;杨立;陈韵岱 刊期: 2013年第06期
白塞病合并淋巴瘤病例罕见,目前国内外文献报道仅23例.本文报道国内第1例(世界上第2例)白塞病合并结外NK/T细胞淋巴瘤(鼻型)的病例,患者为26岁青年男性,确诊白塞病后予泼尼松龙、环磷酰胺、沙利度胺、生物制剂等药物治疗,自然病程2年后因急腹症手术,术后病理诊断“(回肠末端)结外NK/T细胞淋巴瘤,鼻型”.白塞病合并淋巴瘤的机制尚不清楚,本文通过文献复习,总结国内外报道的病例特点,在免疫机制、EB病毒感染、药物应用等方面对相关机制进行探讨.
作者:黄琴;赖伟男;杨敏 刊期: 2013年第06期
目的 通过检测和比较子宫内膜异位症(EMS)孕妇有无补充叶酸其女性胎儿脐血EMS易感基因HOXA10启动区CpG岛甲基化状态,探讨叶酸优化宫内环境的作用.方法 收集标本2010年1月~2012年12月21例患有EMS孕妇服用和15例未服用叶酸的女性胎儿脐血标本,利用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)及亚硫酸氢盐修饰后测序(BSP)检测和比较各组HOXA10的甲基化率.结果 补充叶酸组女性胎儿EMS易感基因HOXA10甲基化率显著降低,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论 提示叶酸在预防胎源性EMS易感基因HOXA10异常甲基化中可能起一定作用.
作者:刘木彪;黄雪梅;许苏容;李蕾 刊期: 2013年第06期
目的 检测Nusap1基因蛋白在肝癌手术切缘中的表达情况及其与肿瘤早期复发的关系.方法 选择常规病理学检查手术切缘为阴性的原发性肝癌标本61例,用免疫组化法检测手术切缘Nusap1基因蛋白表达情况.结果 肝癌手术切缘中Nusap1蛋白表达阳性有21例,其中15例术后早期复发(71.4%);阴性40例,术后仅12例出现早期复发(30%);阳性组术后早期复发率明显高于阴性组,差异有显著性(P<0.05).结论 肝癌手术切缘中Nusap1蛋白表达与术后早期复发明显相关,可预测肝癌术后早期复发高危患者及指导术后辅助治疗.
作者:张猛;杨定华;刘萧;刘延;梁鉴坤;何华;钟克波;林梁;陶国贵 刊期: 2013年第06期
目的 研究趋化因子CXCL14在骨肉瘤细胞和组织中的表达及其与患者预后的关系.方法 利用RT-PCR、酶联免疫吸附法(ELISA)和荧光定量PCR技术检测4种骨肉瘤细胞株及40对骨肉瘤及癌旁肌肉中CXCL14的表达,CCK8细胞增殖实验、克隆形成实验观察CXCL14对U2OS细胞增殖的影响,免疫组化检测CXCL14在骨肉瘤组织中的表达,并运用Kaplan-Meier法进行生存分析.结果 CXCL14在骨肉瘤细胞株中的表达均高于正常成骨细胞,而且其在骨肉瘤组织的表达也显著高于癌旁肌肉组织(P<0.01).干扰CXCL14表达能抑制U2OS的生长(P<0.05),经两条CXCL14干扰RNA处理后U2OS克隆形成率分别为(4.93±0.25)%和(5.03±0.0.31)%,均显著低于阴性对照组(8.03±1.16)%,差异有统计学意义(P<0.05).Kaplan-Meier生存分析显示,CXCL 14高表达的患者预后比低表达组差(P=0.02).结论 CXCL14在骨肉瘤中高表达,它能促进骨肉瘤细胞的增殖并与患者不良预后相关,提示其可能成为潜在的治疗靶点.
作者:卢金昌;王晋;雍碧城;宋国徽;赵志强;唐清连;邹昌业;尹军强;谢显彪 刊期: 2013年第06期
目的 提出一种把膝关节软骨T2图自动分为三层及九个区域并算出各区域T2均值的方法.方法 本方法根据临床经验丰富的放射科医生在T2图上手动勾勒出的膝关节软骨边缘,计算其中轴线以及中轴线的法线,然后将医生分割区域沿法线方向等间距再分为表浅层、中间层、深层三层,再根据中轴线的长度选取两条法线将软骨区域均分为内中外三部分,后计算各个区域内的T2均值,并通过Bland-Altman分析方法进行统计学分析.结果 手工分区和自动分区方法的95%一致性界限为(-3.04 ms,3.20 ms),其一致性界限窄(小于小均值的一半),变异系数为4.04%.结论 自动分区与手工分区这两种方法具有较好的一致性,而且自动分区方法克服了手工分区方法的主观性.
作者:钟智辉;余太慧;王雷;阳维;冯美燕;卢振泰;陈武凡;冯衍秋 刊期: 2013年第06期