目的 探讨B细胞转录激活因子(BATF)对急性哮喘小鼠气道炎症的调控及其与维甲酸孤儿核受体γt (RORγt)的关系.方法 将24只健康雌性BALB/c小鼠,随机分为生理盐水组(NS组)、哮喘模型组(AS组)、地塞米松治疗组(DEX组),每组8只.卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠模型.HE染色观察小鼠小支气管及肺组织病理改变;支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数和分类;酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中白细胞介素-17(IL-17)蛋白的浓度;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中IL-17、BATF、RORγtmRNA的表达情况.结果 HE染色示AS组小支气管炎症细胞浸润较NS组多,以嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(PMN)及淋巴细胞为主,DEX组小支气管炎症细胞浸润情况较AS组轻.AS组、DEX组BALF中白细胞(WBC)总数、EOS及PMN均较NS组多(P<0.05),DEX组上述细胞数较AS组少(P<0.05).BALF中IL-17蛋白浓度及肺组织IL-17、BA TF、RORγt mRNA表达水平均为AS组>DEX组>NS组(P<0.05).小鼠肺组织BA TF与IL-17、RORγt mRNA表达及BALF中WBC、EOS、PMN计数呈正相关(P均<0.05).结论 在急性哮喘小鼠支气管肺组织中存在BATF、RORγt、IL-17表达的上调;BATF可能通过与RORγt的协同作用调控Th17细胞的分化发育及分泌功能发挥对小鼠气道炎症的调控作用.
作者:原淑莉;钟萍;范贤明;黄成亮;王文军;湛晓勤;何小鹏 刊期: 2015年第04期
目的 实时三维超声心动图多巴酚丁胺负荷试验(RT3D-DSE)评价缺血性二尖瓣反流(IMR)患者瓣膜反流量和心肌功能.方法 纳入IMR患者72例,患者治疗前行RT3D-DSE检查,采集静息状态、不同剂量多巴酚丁胺(Dob)负荷下三维心脏全容积和三维二尖瓣反流图像.定量参数包括:左心室舒张期末/收缩期末容积(LVEDV/ESV)、左心室射血分数(LVEF)、左心室心肌质量(LVMd/s);左心室17节段小容积达峰时间标准差(Tmsv-SD)、节段Tmsv之间的大差值(Tmsv-Dif);左心室心肌平均位移(Eave),左心室位移标准差(Esd);二尖瓣反流射流紧缩口截面面积(VCA).结果 94.4%患者完成Dob 30 μg/(kg·min)负荷,69.4%的患者完成40 μg/(kg·min)负荷,38.9%的患者完成Dob 50 μg/(kg·min)负荷.随着Dob剂量加大[5~40 μg/(kg·min)],VCA逐渐减小,Dob 30 μg/(kg·min)时减小程度大;LVEF逐渐增加,Dob 50 μg/(kg·min)时减小;LVESV、LVMd逐渐减小,Dob 50 μg/(kg·min)时增加;Tmsv-16/12/6SD%、Tmsv-16/12/6Dif%逐渐减小,Dob50 μg/(kg·min)时增加;Eave、Esd逐渐增加,Dob 40~50 μg/(kg·min)时减小.各负荷状态与静息状态相比,二尖瓣反流量及左心室重构参数差值变化均有统计学意义.结论 IMR患者RT3D-DSE呈双相反应,在负荷剂量≤40 μg/(kg ·min)时左心室重构及心脏同步化均有改善,反流量减小.
作者:刘佳霓;熊名琛;白文娟;陈丽萍;张晓玲;唐红 刊期: 2015年第04期
目的 通过研究浸润T淋巴细胞的存在对髓系来源的抑制性细胞(MDSC)数量变化的影响,探讨浸润T淋巴细胞在肿瘤微环境中对MDSC的募集作用.方法 建立BALB/c小鼠和免疫缺陷裸鼠荷瘤模型,进行裸鼠荷瘤T淋巴细胞过继实验和抗体阻断T淋巴细胞实验,观察对肿瘤生长的影响,采用肿瘤组织HE染色观察病理组织学变化,采用流式细胞术(FACS)检测肿瘤组织内MDSC的数量变化.结果 荷瘤裸鼠肿瘤较正常小鼠荷瘤的肿瘤生长更快(P<0.05),肿瘤微环境中MDSC的百分率更低,与正常小鼠肿瘤组织相比差异有统计学意义(P<0.05).接受T淋巴细胞过继后的荷瘤裸鼠肿瘤微环境中MDSC百分率有增加(P<0.05).接受抗体阻断实验的过继荷瘤裸鼠肿瘤组织内MDSC百分率减少(P<0.05).结论 肿瘤微环境中浸润T淋巴细胞能直接诱导MDSC的募集,并对肿瘤生长产生影响.
作者:柳晓芸;刘妍彤;毛野;杜晶;杜薇;余佳耘;罗敏;桑亚雄;高祥 刊期: 2015年第04期
目的 利用高通量测序,研究口腔种植体周围炎龈下微生物的多样性,为种植体周围炎微生物学病因的研究提供思路.方法 刮取种植体周围炎患者(D组)及正常种植修复患者(N组)龈下菌斑,利用Illumina Miseq测序平台,对16S rRNA V4区进行双端测序;通过Mothur等软件进行群落结构的多样性分析.结果 9个样本总测156 507条序列,共4 402个操作分类单位(OTU);在D组中的优势菌属为:新月形单胞菌属(Selenomonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)及梭杆菌属(Fusobacterium)等,在N组中的优势菌属为:梭杆菌属、韦荣球菌属(Veillonella)及链球菌属(Streptococcus)等;PcoA检测显示两组微生物群落结构差异明显.LEfSe检测发现,在门、纲、目、科及属的水平上,两组均具有差异.结论 种植体周围炎的发生发展不仅是牙周炎相关致病微生物的作用,而且与口腔微生物群落结构中菌属的变化有关;密螺旋体属(Treponema)、草螺菌属(Herbas pirillum)、Butyricimona及Phaeobacter等菌属在种植体周围炎及健康患者中存在差异,提示它们可能与种植体周围炎的发生发展密切相关.
作者:李志杰;王少果;李跃烘;涂东祥;刘世云;聂红兵;李志强;张菊梅 刊期: 2015年第04期
目的 通过对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期患者中医证候及现代医学相关指标的调查研究,探讨稳定期患者中医证候的变化规律以及各证候与BODE指数(body massindex,airflow obstruction,dyspnea,and exercise capacity index,BODE index)、生活质量的关系.方法 收集符合纳入标准的300例COPD稳定期患者,按病变由单一脏腑向多个脏腑的累积确立5组虚证证型:肺气虚(A组)、肺脾气虚(B组)、肺肾气虚(C组)、肺脾肾气虚(D组)及气阴两虚(E组),每种证型各60例.进行COPD生活质量相关生活问卷(COPD assessment test,CAT)调查,分析BODE指数与生存质量的相关性.结果 5组间比较,A组体质量指数(BMI)、第1 s用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%)高,6 min步行距离长,呼吸困难程度低(P<0.05),BODE评分、CAT得分低(P<0.05).D组和E组间上述指标和评分差异无统计学意义(P>0.05),均为BMI、FEV1%低,6 min步行距离短,呼吸困难程度高(P<0.05).BODE指数评分与CAT得分呈正相关(r=0.883,P<0.05).结论 随着COPD病情的发展,病变由单一脏腑逐渐累积多个脏腑,由肺气虚→肺脾气虚/肺肾气虚→肺脾肾气虚,呈现BODE指数和CAT得分逐渐升高的特征.
作者:王华楠;周维;毛兵 刊期: 2015年第04期
目的 探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因沉默对SW480人结肠癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 利用脂质体法转染介导的siRNA干扰技术转染人结肠癌细胞SW480,设立干扰组:转染HIF-1α干扰序列;阴性对照组:转染无关序列;空载体组:为空白质粒;空白对照组:未转染.用Real-time PCR及Western blot、MTT比色法、流式细胞仪(FCM)检测各组HIF-1α mRNA及蛋白的表达、SW480细胞增殖及凋亡.结果 干扰组在各时间点对HIF-1α mRNA表达的沉默效率均在80%以上,高于其他3组(P均<0.05);与其余3组相比,干扰组HIF-1α蛋白相对表达量降低(P<0.05),增殖曲线表明其增殖受抑;凋亡率显著升高(P<0.01).结论 HIF-1α基因沉默可促进人结肠癌细胞SW480凋亡,抑制肿瘤细胞生长.
作者:王强;郝朗松;史佳;黄健 刊期: 2015年第04期
目的 研究胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂艾塞那肽(exenatide)对糖尿病患者心脏舒张功能及血管内皮细胞功能的影响.方法 血糖控制欠佳的糖尿病患者随机分为GLP-1组(GLP-1组,n=13)和胰岛素组(INS组,n=12).在二甲双胍治疗基础上,GLP-1组加用exenatide,胰岛素组加用胰岛素治疗.分别于治疗前、后检测空腹血糖(FBG)、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)、血压及一般临床指标,超声检测左室射血分数(LVEF)、舒张早期二尖瓣大血流速度(E)、舒张晚期二尖瓣大血流速度(A),组织多普勒二尖瓣环处舒张早期大运动速度(e)、组织多普勒二尖瓣环处舒张晚期大运动速度(a)、肱动脉血流介导的内皮依赖性血管舒张功能(EDV)、硝酸甘油介导的非内皮依赖性血管舒张功能(EIV).结果 经24周治疗后,两组患者FBG、HbA1c水平均较治疗前下降(P<0.05),但治疗后两组间FBG、HbA1c差异无统计学意义(P>0.05).两组患者治疗前均存在心脏舒张功能减退.治疗后GLP-1组患者二尖瓣环处组织多普勒e峰、e/a值、E/e值改善(P<0.05),而胰岛素组的e峰、e/a值、E/e值较治疗前变化不明显(P>0.05).两组患者治疗后的EDV较治疗前改善(P<0.01),且治疗后GLP-1组EDV高于胰岛素组(P<0.05).治疗前后两组间比较EIV无明显变化(P>0.05).结论 GLP-1可显著改善左室舒张功能及内皮依赖性舒张功能,其心血管功能的改善可能独立于降糖作用之外.
作者:王晓昊;韩丽娜;余叶蓉;王椿;王犇;文晓蓉;黄鹤;景显超 刊期: 2015年第04期
目的 研究皮质酮是否可通过调节γ-氨基丁酸(GABA)受体影响神经细胞凋亡.方法 体内实验:将健康雄性SD大鼠(8~9周龄,20只)制备慢性束缚应激高血糖模型,测定血清皮质酮水平.取脑于进行HE染色观察显微结构,利用活化型Caspase-3免疫组化、TUNEL染色检测细胞凋亡.体外实验:NG108-15细胞(神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞系)经皮质酮(10-7 mol/L)作用后用免疫印迹法检测活化型Caspase-3含量.NG108-15细胞重组GABAB2受体后,用100μmol/L巴氯酚和100μtmol/L CGP35348分别激动和拮抗GABAB受体,检测皮质酮(10-7 mol/L)作用下重组NG108-15细胞内活化型Caspase-3的表达量.结果 慢性束缚应激高血糖大鼠脑干孤束核HE染色见异常细胞,免疫组化染色可见活化型Caspase-3阳性凋亡细胞、TUNEL染色也可见阳性细胞核,血清皮质酮呈现先升高后回落的趋势.体外培养NG108-15细胞表达GABAB1受体,其在皮质酮的作用下活化型Caspase-3表达量增高(P<0.05).在皮质酮和巴氯芬作用下,重组NG108-15细胞活化型Caspase-3的表达量低于皮质酮和CGP35348作用下的活化型Caspase-3的表达量(P<0.05).结论 皮质酮对GABAB受体的抑制是导致神经细胞兴奋性水平的异常,从而引发凋亡的机制之一.
作者:魏慧平;郑翔;潘倩;李鑫;夏卫维;吴炳火;周雪 刊期: 2015年第04期
目的 探讨沉默CD86的树突状细胞(DC)在异种胰岛混合淋巴细胞培养中的作用.方法 分离培养BALB/c小鼠骨髓来源DC,流式细胞仪鉴定后,以CD86 siRNA转染DC.分离纯化SD大鼠胰岛,吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)双荧光染色方法检测胰岛细胞活性;提取SD大鼠脾脏淋巴细胞,与经siRNA沉默CD86的DC混合培养,使DC负载SD大鼠抗原.在400胰岛当量SD大鼠胰岛细胞+1×106个BALB/c小鼠淋巴细胞(对照组1)基础上,混合普通DC(负载SD大鼠抗原)(对照组2)或siRNA沉默CD86的DC(负载SD大鼠抗原)(实验组)进行体外培养,另以单纯SD大鼠胰岛细胞为空白组,培养3d后倒置显微镜下检测细胞形态学变化,测定上清液中反映淋巴细胞增殖的细胞因子白介素(IL)-2、IL-4、IL-10及干扰素(IFN)-γ水平,AO/PI染色观察胰岛活性,并行葡萄糖刺激胰岛素释放实验,计算刺激指数.结果 培养所得的细胞具有典型的DC形态,流式细胞仪检测DC表面CD11c、CD80、CD86的表达阳性率分别为(86.26±9.73)%、(72.64±8.55)%、(77.18±10.23)%.CD86siRNA转染DC后CD86沉默.SD大鼠胰岛杂质较少,形态正常,细胞活性>95%.混合细胞培养3d后,与对照组1、2比较,实验组的IL-10水平升高(P<0.05),IL-4水平相当(P>0.05),1L-2、IFN-γ均降低(P<0.05),淋巴细胞增殖少,胰岛功能好,刺激指数高.实验组4种细胞因子均高于空白组(P<0.05),刺激指数低于空白组(P<0.05).结论 沉默CD86的DC负载供体抗原后,与供体胰岛、受体淋巴细胞混合培养,可在一定程度上减轻免疫排斥反应,从而保护供体胰岛功能.
作者:苏安平;田伯乐;张肇达;李全生 刊期: 2015年第04期
目的 探讨年龄、性别及季节对正常成人血清促甲状腺激素(TSH)及甲状腺激素(TH)水平的影响.方法 将2 564例健康体检者按性别分为男性组和女性组,按年龄分为青年组、中年组和老年组,按体检时间分为夏季组和冬季组.分别检测各组血清TSH、三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、游离T3(FT3)、游离T4(FT4)水平,并分析比较各组间差异有无统计学意义.结果 青年组女性和中年组女性TSH值高于同年龄组男性;青年组女性和中年组女性T3、FT3、FT4水平,均低于同年龄组男性(P<0.05).男性人群中TSH水平随年龄增长呈上升趋势,FT3、FT4水平随年龄增长呈下降趋势,青年组女性FT3水平高于老年组女性,而T4水平低于老年组(P<0.05).夏季测得的TSH、T3、FT4水平均低于冬季水平(P<0.05),FT3水平无季节差异,TSH、T3、T4、FT4与季节存在相关性(r值分别为0.079,0.092,-0.137,0.140).结论 年龄、性别、季节等因素均可影响TSH及甲状腺激素水平.建议临床上诊治甲状腺疾病,判定甲状腺功能状态时应考虑上述因素对其的影响.
作者:马瑞婷;黄慧;严悦溶;陈大伟;刘英;张国福 刊期: 2015年第04期
目的 检验中文版杰弗逊同理心量表医学生版(JSPE-S)用于评价医学生同理心水平的信度和效度,探讨在中国大陆医学生中的适用性.方法 回译英文版杰弗逊同理心量表,在374例大学医学生中展开调查,采用分半信度、内部一致性信度检验量表信度,采用集合效度、区分效度和结构效度评估量表的效度.结果 JSPE-S量表的分半信度系数为0.853,内部一致性信度Cronbach's α系数为0.861;其3个维度的集合效度定标实验成功率为95.0%,区分效度定标实验成功率为95.0%;提取3个公因子后,累积方差贡献率为50.87%,因子负荷估计值为0.485~0.834,公因子方差为1.736~4.625.结论 中文版JSPE-S信度和效度较好,适用于中国医学生.
作者:姜恬;宛小燕;刘元元;李晓松 刊期: 2015年第04期
目的 探讨丙烯醛吸入损伤对大鼠气道脑源性神经营养素(BDNF)表达的影响.方法 用丙烯醛雾化吸入造成成年雄性健康大鼠气道黏液高分泌损伤模型,损伤后不同时间点(1周、3周和6周各11只)取气管上皮,以生理盐水雾化吸入为对照(1、3、6周各11只).用免疫组化和原位杂交染色检测BDNF蛋白和mRNA的定位分布,RT-PCR检测气道BDNF mRNA不同时程的表达变化.结果 气管上皮和平滑肌可见BDNF阳性细胞,胞浆染色.RT-PCR显示与对照组相比,丙烯醛吸入1周气管中BDNF mRNA表达明显上调(P<0.05),随后逐渐回落,到第3周回到对照组水平,持续至第6周(P均>0.05).结论 丙烯醛吸入致大鼠气道损伤过程中,气管上皮和平滑肌BDNF表达早期明显上调,提示BDNF参与了气道损伤过程中神经源性炎性反应调控.
作者:袁兵;杨瑞安;赵伟;许彦彦;但齐琴;张云辉 刊期: 2015年第04期
目的 检测T细胞因子4 (T cell factor 4,Tcf-4)、基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinases-7,MMP7)和survivin在结直肠癌中的表达及其相关性,探讨其在结直肠癌发生、发展、侵袭和转移等过程中的作用及其临床意义.方法 应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测50例结直肠癌及其对应的癌旁正常黏膜组织中Tcf-4、MMP7和survivin mRNA表达水平,采用免疫组织化学染色技术(Elivision)检测100例结直肠癌和60例正常黏膜组织中Tcf 4、MMP7和survivin蛋白的表达,并分析三者间及与临床病理特征之间的关系.结果 50例结直肠癌组织及其正常黏膜组织中Tcf-4、MMP7、survivin mRNA均表达,结直肠癌组织的表达均高于正常黏膜组织,差异均有统计学意义(P均<0.01);100例结直肠癌组织中Tcf 4蛋白阳性表达率为69.00%(69/100),MMP7蛋白阳性表达率为77.00%(77/100),survivin蛋白阳性表达率为65.00% (65/100),阳性表达率均高于正常黏膜组织[分别为16.67%(10/60),13.33%(8/60)和15.00%(9/60)],组间差异均有统计学意义(P均<0.01).Tcf-4、MMP7、survivin三者在结直肠癌中的表达水平均与患者的淋巴结转移、Dukes分期有关(P<0.05),MMP7蛋白表达还与患者癌组织浸润深度有关(P<0.05),survivin蛋白表达还与患者癌组织分化程度有关(P<0.05).经Spearman秩相关分析显示,在结直肠癌组织中,Tcf-4蛋白阳性表达与MMP7(r=0.302,P<0.01)、survivin蛋白(r=0.279,P<0.01)阳性表达呈正相关;MMP7与survivin蛋白阳性表达无相关性(r=0.097,P>0.05).结论 Tcf-4、MMP7和survivin在结直肠癌组织中高表达,并与结直肠癌患者的淋巴结转移、Dukes分期有关,提示它们可能参与了结直肠癌的发生和发展.
作者:欧玉荣;景桂英;吴琼;高杉;承泽农;董修芹 刊期: 2015年第04期
目的 分析芦山地震骨折伤员的伤情特点和功能受限情况,为地震后骨折患者的康复提供指导依据.方法 采用四川大学华西医院康复医学科自制的《四川省雅安市420地震伤员功能评定表》,对2013年4月20~30日在四川大学华西医院就诊的113例芦山地震骨折伤员进行早期调查和评估.结果 113例地震骨折伤员中,坠落伤是常见的受伤原因,占总例数的39.82%;椎体骨折是常见类型,占26.55%;损伤以轻度为主,占80.53%;合并症发生率高,占89.37%.运动功能受限主要是关节活动度受限、平衡功能受限和肌力下降,分别占97.35%、89.38%和87.61%;心肺功能受限的比例为19.47%;循环功能受限的比例为18.58%;日常生活活动能力受限比例为76.11%,其中,洗澡、上下楼梯和行走功能受限分别为96.46%、86.73%和78.76%;疼痛发生率高,为97.35%,其中VAS值在4~6分区间的比例大,占40.71%,心理功能、职业功能和社会交往功能受限比例分别为46.02%、99.12%和100%.结论 芦山地震骨折伤员有其自身的伤情特点和功能受限情况.根据功能受限情况,优化地震后骨折的康复方案,注重心理功能、职业功能以及社会交往功能的康复,使患者早日回归家庭和社会.
作者:王谦;刘遄;王朴;魏晓菲;周予婧;陶英霞;何成奇 刊期: 2015年第04期
目的 探索非典型抗精神病药利培酮对大鼠脑区中脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor,TrkB)、P75神经营养因子受体(P75 neurotrophin receptor,P75NTR)的调控作用.方法 将大鼠随机分为利培酮处理组(n=8)和对照组(n=8),利培酮处理组采用0.25 mg/kg利培酮腹腔内注射,对照组采用等量安慰剂腹腔内注射,连续处理14d后处死大鼠.取大鼠左右前额叶皮质、左右颞叶皮质及海马,提取RNA并进行BDNF、TrkB和P75NTR mRNA的实时荧光定量PCR分析.结果 利培酮处理组大鼠的左右前额叶皮质、左右颞叶皮质及海马中BDNF及TrkBmRNA的表达水平较对照组增高(P<0.05),而利培酮处理组P75NTR mRNA的表达与对照组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 利培酮能够上调大鼠左右前额叶皮质、左右颞叶皮质及海马BDNF-TrkB信号通路,而不能改变上述脑区中P75NTR mRNA的表达水平.
作者:余波;王雪;韦锦学;倪培艳;梁林辉;赵连生;马小红;李涛;王英成 刊期: 2015年第04期
目的 探讨妊娠期染毒全氟辛烷磺酸盐(perfluorooctane sulfonate,PFOS)对子代成年雄鼠Leydig细胞(adult Leydig cell,ALC)合成睾酮的影响.方法 对妊娠第12 d的SD大鼠采用灌胃方式染毒PFOS(5 mg/kg),1次/d,连续8d.仔鼠出生后第70 d (PND70),观测子代雄鼠体质量、睾丸系数、精子数量、血清睾酮浓度,并采用实时荧光聚合酶链式反应检测睾酮合成途径中相关因子mRNA的相对表达量.结果 与对照组相比,染毒组子代雄鼠体质量降低(P<0.001);睾丸系数增高(P<0.001);精子数量及血清睾酮浓度降低(P<0.05);ALC中睾酮合成相关基因类固醇能急性调控因子(Star基因)、清除因子受体类B成员1(Scarb1基因)、P450scc编码基因(Cyp11a1)、17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD3)编码基因(Hsd17b3)的mRNA表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05),而胰岛素样生长因子-1基因(Igf1)和胰岛素样因子-3基因(Insl3)的mRNA表达差异无统计学意义.结论 妊娠期染毒PFOS可抑制子代雄鼠睾酮合成途径中相关基因的表达,降低子代雄鼠睾丸ALC合成睾酮的功能.
作者:马英;杨春壮;刘星;赵冰海;初彦辉;李洪志 刊期: 2015年第04期
目的 向食管癌Eca109细胞中转染pcDNA3.1(+)/myc-His A-丝裂原活化蛋白激酶6(MKK6)重组过表达载体,观察过表达MKK6影响沉默信息转录调控因子(SIRT1)表达后肿瘤细胞增殖、凋亡以及侵袭力发生的变化,探讨p38-MAPK-SIRT1调节轴的存在性及其对Eca109细胞各项肿瘤行为学造成的影响.方法 根据GenBank中MKK6基因的mRNA序列设计引物,构建MKK6过表达载体;将Eca109细胞分空载体转染组、MKK6过表达载体转染组、MKK6-SIRT1 ShRNA共转染组和MKK6-RES(白藜芦醇)组,相应处理后,采用Wcstern blot测定各组Eca109细胞的SIRT1及MKK6表达水平,MTT法检测各组Eca109细胞的增殖活力,Transwell法观察各组Eca109细胞的侵袭力,流式细胞术检测各组Eca109细胞的凋亡情况.结果 测序结果表明成功构建MKK6过表达载体;转染MKK6过表达载体可降低Eca109细胞的内源性SIRT1表达,减弱Eca109细胞的增殖活力,促其凋亡,同时可使Eca109细胞的侵袭力增强,以上各项改变均与SIRT1的表达水平有关.结论 Eca109细胞内可能存在p38-MAPK-SIRT1调节轴,MKK6及其下游因子对SIRT1可能具有反馈调节作用,可引起Eca109细胞各项肿瘤行为学的变化.
作者:杨晓龙;胡开锋;刘明佳;任朋亮;陈利弘;刘戟 刊期: 2015年第04期
目的 探讨中国西部地区汉族人群中非典型钙粘蛋白1基因(CELSRl) rs6007897多态性与缺血性脑卒中的相关关系.方法 采用连接酶方法对所有受试者(759例缺血性脑卒中者和786例对照者)进行rs6007897位点基因型的检测,分析比较两组间基因型和等位基因频率的差异.结果 两组均检出AA和AG 2种基因型,基因型和等位基因频率两组比较差异不具有统计学意义.运用多因素logistic回归校正多种混杂因素后,结果发现rs6007897基因型(P=0.797,比值比=0.886,95%可信区间:0.352~2.227)与缺血性脑卒中无明显关系.结论 中国西部地区汉族人群中CELSR1基因SNP位点rs6007897多态性与缺血性脑卒中之间可能无明确关联.
作者:秦凤琴;余丽华;胡文婷;郭建;陈宁;郭江;方婧环;何俐 刊期: 2015年第04期
目的 探讨在体内缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)条件下,脑衰蛋白调节蛋白2(collapsin response mediator protein 2,CRMP-2)与轴突及树突损伤的关系.方法 以10日龄新生SD大鼠为研究对象,行右侧颈总动脉结扎手术,8%氧氮混合气缺氧2.5h制作HI模型.Western blot法检测HI后大鼠皮层及海马脑组织CRMP-2总蛋白和磷酸化蛋白、淀粉样前蛋白(amyloid precursor protein,APP)表达变化;使用蛋白激酶B(Akt)抑制剂渥曼青霉素(wortmannin)和LY294002后,Western blot和免疫组化染色法检测CRMP-2总蛋白和磷酸化蛋白在HI后4h、24 h改变;HI后72h,Western blot和免疫组化检测渥曼青霉素对APP表达的影响,电镜检测轴突及树突损伤.结果 HI后CRMP-2总蛋白表达无明显变化;磷酸化CRMP-2(p-CRMP-2)蛋白表达在0.5h短暂上升,此后一直处于低水平;HI后APP蛋白表达在2h开始上升,此后2~24 h一直处于稳定增高水平,48~72 h表达量再次增高.HI后4h和24 h,渥曼青霉素或LY294002干预未改变CRMP-2总蛋白表达量,但p-CRMP-2的表达量增加.HI后72 h,渥曼青霉素预处理增加APP的表达量,加重轴突及树突损伤.结论 CRMP-2作为Akt信号通路下游蛋白,参与调控新生大鼠HI后神经元轴突和树突损伤.
作者:熊涛;陈洪菊;屈艺;母得志 刊期: 2015年第04期
目的 评估双频谱多普勒同步测量二尖瓣前向血流E峰和二尖瓣环组织多普勒e'峰的起始时间差(T E-e,)在无创估测左室舒张末压(LVEDP)和左室舒张功能不全中的价值.方法 纳入NYHA心功能≥Ⅱ级,且左室射血分数(LVEF)≥50%的疑诊冠心病拟行冠脉造影患者78例,冠脉造影时行左心导管检查,根据LVEDP分为舒张功能不全组(LVEDP≥15 mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)和对照组(LVEDP<15 mmHg).行常规心脏超声及双频谱多普勒超声测量TEe,,并比较T E-e'.结果 78例患者舒张功能不全组48例,对照组30例.双频谱多普勒方法测量的同步T E-e,在舒张功能不全组高于对照组[(24.1±31.4)ms vs.(8.1±23.3) ms,P=0.019],且与LVEDP呈线性关系(r=0.424,P<0.001).ROC曲线示TEe'=25 ms时,同步T E-e'诊断左室舒张功能不全的敏感性和特异性分别为56.3%和76.7%.传统方法测量T E-e'操作者间重复测量的可信限为-37.7~34.9 ms,采用双频谱多普勒方法同步测量T E-e'可提高重复性(重复测量可信限-28.0~27.3 ms).结论 同步T E-e'在左室舒张功能不全的患者中延长,且与LVEDP呈正相关.与传统方法相比,双频谱多普勒方法可提高TE-e'测量的重复性.
作者:贺勇;李娅姣;李晨;刘丹;唐红;饶莉 刊期: 2015年第04期
目的 研究重组高效复合干扰素(rSIFN-co)对肺腺癌细胞株A549增殖和凋亡的影响.方法 筛选rSIFN-co对A549细胞的有效浓度,及与顺铂联合用药的佳浓度和作用时间.分为rSIFN-co(5 μg/mL)组、传统重组集成干扰素α(干复津,5 μg/mL)组、rSIFN-co(5 μg/mL)+顺铂(2μg/mL)组、干复津(5 μg/mL)+顺铂(2 μg/mL)组、顺铂(2 μg/mL)组和RPMI-1640液空白组,分别干预A549细胞.MTT法检测各组7d活细胞数并作生存曲线,流式细胞仪检测48 h各组细胞凋亡率,免疫荧光法检测48 h各组凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2表达.结果 rSIFN-co的有效浓度为1~64 μg/mL,顺铂的低有效浓度为2 μg/mL,与2μg/mL顺铂联合用药时rSIFN-co的佳浓度为5 μg/mL,佳作用时间为48 h.生存曲线示rSIFN-co对A549的抑制作用强于干复津,rSIFN-co+顺铂的抑制作用强于干复津十顺铂.rSIFN-co可诱导A549细胞凋亡,rSIFN-co组凋亡率高于干复津组(P=0.000),rSIFN-co+顺铂组凋亡率高于rSIFN-co组(P=0.004)及顺铂组(P=0.023).rSIFN-co能增强A549中Fas的表达,并抑制Bcl-2的表达,其中rSIFN-co组Bcl-2表达低于干复津组(P<0.05).结论 rSIFN-co能抑制A549增殖,且作用强于干复津,与顺铂联合应用的抑制作用增强,其对A549的抑制作用与调节凋亡相关基因表达有关.
作者:阚奇伟;刘伦旭;魏光文;蒲强;诸葛雪朋;马林;马军亮 刊期: 2015年第04期
目的 观察米诺环素对大鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤后皮质神经元结构及突触素(synaptophysin,SYN)蛋白表达的影响.方法 将36只大鼠随机分为假手术组(Sham组)、I/R模型组(I/R组)及米诺环素组(Min 组),每组12只.Sham组不进行I/R处理,不给药.I/R组及Min组均采用线栓法阻塞大脑中动脉制作大鼠MCAO模型,再尾静脉注射PBS或米诺环素(3 mg/kg,2次/d)14 d后,采用Montoya楼梯实验评估3组大鼠前肢运动功能,HE染色观察皮质神经元的形态结构,免疫荧光法观察缺血灶周围神经突的生长,Western blot法检测缺血脑组织内SYN蛋白的表达.结果 假手术组大鼠无明显神经功能缺损,皮层神经元细胞形态正常,微管相关蛋白-2(microt ubule-associated protein-2,MAP-2)阳性神经元排列整齐,神经突较长;同模型组相比,米诺环素组大鼠的前肢运动功能改善,MAP-2及SYN蛋白表达增加,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论 米诺环素能促进大鼠缺血皮层神经元神经突的生长、突触素的表达及神经功能的恢复,发挥对脑组织可塑性的调节作用.
作者:陶涛;秦文熠;李作孝;李小刚 刊期: 2015年第04期
目的 调查四川地区丙肝病毒基因型的分布,探讨其与抗病毒疗效及疾病相关因素之间的关系.方法 对189例就诊于四川大学华西医院的丙肝患者进行基因型调查,并在聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林抗病毒治疗前后的多个时间点对血清病毒载量进行测定,分析抗病毒治疗应答率,同时测定基线血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平.结果 四川地区共发现4种HCV基因型,存在9种基因亚型,基因型以HCV-1型为主,占79.89% (151/189),其中1b型占78.84%;非HCV-1型感染者占20.11% (38/189).HCV-1型感染者的治疗结束时病毒学应答(ETVR)率及早期病毒学应答(EVR)率低于非HCV 1型(分别为65.56% vs.84.21%,52.98% vs.76.32%,P<0.05);不同HCV基因型感染者的基线血清病毒载量及基线肝功能指标水平之间的差异并无统计学意义.结论 四川地区丙肝患者中以HCV-1型感染者多.证实HCV基因型是四川地区丙肝患者重要的抗病毒治疗疗效的预测因素.
作者:丁柳;钟慧钰;宋兴勃;陆小军;周娟;刘显中;应斌武 刊期: 2015年第04期
目的 研究阴道上皮内瘤变(VaIN)的临床病理特征及采用阴道镜下CO2激光治疗的临床疗效.方法 回顾性分析经组织学确诊的195例VaIN患者的临床病理特点、人乳头瘤病毒感染(HPV)状况;病灶采用阴道镜下CO2激光治疗,术后1月用重组人干扰素α2b(rIFN-α2b)阴道泡腾胶囊(80×104 IU/粒)阴道给药治疗HPV感染,并随访12个月以上,评价临床疗效.结果 所有患者均曾行子宫全切术,病因多为宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌.195例VaIN患者中,HPV感染172例,感染率88.2%,多数为二型以上混合感染(82.6%,142/172).阴道镜下CO2激光+rIFN-α2b阴道给药治疗3月,治愈率达到79.5%.其中VaIN Ⅰ治愈率为90.9%,VaIN Ⅰ~Ⅱ治愈率为81.6%,VaINⅡ治愈率为71.4%,VaINⅡ~Ⅲ治愈率为58.6%,VaINⅢ治愈率为40.0%,随着组织学分类级别升高,治愈率呈下降趋势.结论 HPV感染与VaIN发生密切相关,阴道镜下CO2激光+rIFN-α2b治疗VaIN简单,有效,可作为VaIN的治疗首选.
作者:张雅晴;冯余宽;何镭;林卫 刊期: 2015年第04期
目的 探讨Liver-first Approach治疗直肠癌伴肝转移患者术后疗效.方法 对在我院诊治的81例直肠癌伴肝转移患者分别采用先切除转移灶,后切除原发灶进行治疗(即Liver-first Approach方式,A组,39例)和先切除原发灶,后切除转移灶进行治疗(即传统方式,B组,42例)后的疗效进行回顾性分析.A组患者在转移灶切除术前行新辅助化疗,原发灶切除前行新辅助放疗合并或不合并化疗,B组患者在原发灶切除前行新辅助放疗合并或不合并化疗,术后无并发症且恢复良好,再行转移灶切除术.比较两组患者术后局部癌组织复发率,以及死亡率.结果 本研究随访发现直肠局部复发的患者共9例,占总研究病例数的11.1%,其中A组5例(12.8%),B组4例(9.5%),两组差异无统计学意义(P>0.05).肝脏复发患者共10例,占总研究病例数的12.3%,其中A组4例(10.3%),B组6例(14.3%),两组差异无统计学意义(P>0.05).随访期间两组患者死亡总数为16例,死亡率为19.8%,其中A组死亡患者8例(20.5%),B组死亡患者8例(19.0%),两组差异无统计学意义(P>0.05).结论 Liver-first Approach并辅以转移灶切除前行新辅助化疗,原发灶切除前行新辅助放疗合并或不合并化疗的治疗方式并未因原发灶肿瘤进展从而影响患者长期生存效果,安全有效.
作者:汪晓东;甘志明;熊先泽;阳川华;李立 刊期: 2015年第04期
目的 探讨维生素A(vitamin A,VA)与小儿迁慢性腹泻(persistent diarrhea,PD)之间的关系.方法 选取我院新入院的PD患儿119例,根据完全随机数字表法分成4组,进行VA、Zn制剂的干预治疗.A组口服VA制剂,B组口服Zn制剂,C组同时口服VA和Zn制剂,D组不补充VA和Zn制剂.VA的补充剂量为2 500IU/d,Zn的补充剂量根据年龄调整,VA和Zn的补充疗程均为14d,出院时干预疗程不足者,通过出院后电话随访保证VA或(和)Zn补充至足疗程.结果 PD患儿血清VA水平为(0.72±0.32) μmol/L,亚临床型维生素A缺乏(subclinical vitamin A deficiency,SVAD)占60.50%.经VA干预5d、7d、10d、14d后,各组间的疗效和总有效率的差异无统计学意义(P>0.05或P>0.008 3).4组患儿的总有效率均随疗程的增加而增加,但随疗程的增加,各组内总有效率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 PD可引起大多数患儿血清VA水平的下降.VA对辅助治疗小儿PD的疗效不确切.
作者:李杨;刘泉波;王玉婷;陈洁 刊期: 2015年第04期
目的 分析慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者常用的血清学指标与肝脏病理的相关性.方法 纳入HBV感染者[乙肝表面抗原(HBsAg)阳性或乙肝病毒载量(HBV DNA)持续阳性超过6个月]301例,进行肝穿刺病理检查,病理组织学诊断按炎症活动度分5级(G0~G4)、纤维化分5期(S0~S4);常规血清生化检查:包括血清丙氨酸转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、AST/ALT和白、球蛋白比值(A/G);并进行HBV DNA和HBV基因型检测,分析各检测指标与病理炎症活动度分级及纤维化分期的相关性.结果 ALT、AST水平和AST/ALT比值G2/G(3+4)组高于G0/G1组(P<0.05),与肝脏炎症分级呈正相关(r分别为0.487,0.648,0.509,P<0.05);GLB水平S2/S(3+4)组高于S0/S1组(P<0.05),与肝脏纤维化分期呈正相关(r=0.674,P<0.05).A/G水平S2/S(3+4)组低于S0/S1组(P<0.05),与肝脏纤维化分期呈负相关(r=-0.500,P<0.05).基因C型的HBV感染者的炎症及纤维化程度高于基因B型者(x2分别为11.460和12.729,P<0.05).结论 ALT、AST水平和AST/ALT比值对G2及以上的肝脏炎症、GLB和A/G对S2及以上的肝脏纤维化有较好的诊断价值,基因C型的HBV感染者较基因B型者病情进展相对更快.
作者:陈立宇;王娟;王威亚;唐红;冯萍 刊期: 2015年第04期
目的 评估主动脉弓部内膜无破口的Stanford A型主动脉夹层患者接受近端手术重建的早中期临床预后,评价该手术策略的安全性及有效性.方法 回顾性分析2010年1月至2013年2月期间四川大学华西医院心脏大血管外科23例接受近端手术重建的弓部内膜无破口的Stanford A型主动脉夹层患者临床资料,其中男性17例,女性6例,平均年龄(48.04±12.37)岁(21~73岁).急性主动脉夹层12例,慢性主动脉夹层11例;Bentall手术13例,Cabrol手术2例,Wheat手术1例,升主动脉置换十主动脉瓣修复1例,单纯升主动脉置换6例.术后通过门诊及电话随访.结果 患者平均体外循环时间(182.83±36.98) min,阻断时间(111.87±18.82) min,停循环时间(24.22±6.38) min.术后肺部感染4例(17.4%),其中2例行气管切开;1例(4.3%)行腹膜透析治疗,2例(8.7%)术后发生暂时性神经系统功能障碍,自行恢复.无卒中、偏瘫、永久性神经系统功能障碍等发生;23例患者均顺利出院,无死亡.平均随访时间为(38.35±11.95)月(18~56月),无失访患者.至随访结束,23例患者均存活且恢复正常生活,夹层假腔闭合率为65.22%(15例).未有患者因主动脉弓部或降主动脉病变而行二次手术.结论 弓部内膜无破口的Stanford A型主动脉夹层采用近端外科手术重建安全有效,该手术策略在患者的个体化治疗中可以作为一种选择.
作者:钱宏;蒙炜;胡佳;肖正华;方智;李阳;古君;钟明华;张宏伟 刊期: 2015年第04期
目的 比较直径小于3 cm的小肝癌患者在开腹肝切除术与射频消融术后的生活质量及心理健康状况.方法 收集2008年1月至2011年12月我中心收治的102例小肝癌患者相关资料,并且按照其手术方案将其分为切除组(58例)和射频消融组(44例).比较两组患者的基线资料(人口学资料、肿瘤相关数据),术后恢复相关情况,术后患者生存情况,术后分别用SF-36及SCL-90-R量表作定期随访并总结两组患者术后生活质量及心理健康状况.结果 两组间人口学、基线水平资料及肿瘤特征差异无统计学意义(P>0.05),切除组的肿瘤大部分位于肝脏边缘,而射频消融组大部分位于中心位置(P<0.01).两组患者在术后1、3、5年总生存率及无瘤生存率差异并无统计学意义(P>0.05).在SF 36量表的8项指标中,射频消融组生理功能优于切除组(P=0.006),而其他7项及躯体健康总和及精神健康总和并无差异,反映术后心理健康状态的SCL-90-R量表的9项指标差异也无统计学意义(P>0.05).结论 无论是术后的总生存率或无瘤生存率,还是术后生活质量或心理健康状态,小肝癌射频消融术后能取得与切除相似或更佳的临床效果.
作者:唐怀蓉;雷建勇;严律南;杨家印;文天夫;王清;李磊 刊期: 2015年第04期
目的 建立有限采样法估算天疱疮患者口服强的松联合霉酚酸酯(MMF)的霉酚酸(MPA)血药浓度-时间曲线下面积(AUC)模型.方法 采集天疱疮患者口服强的松联合MMF达稳态后服药前和服药后0.5h、1h、2h、4h、6h、8h和12h外周静脉血,用酶放大免疫测定技术(EMIT)检测血浆MPA浓度,用线性梯形法计算服药后0~12 h的MPA-AUC,用DAS软件分析药动学参数,用SPSS软件拟合估算MPA-AUC0-12h的回归方程,并用Bland-Altman法对其精准性进行评价.结果 取得37次完整采血点数据,其MPA血药浓度-时间曲线形态基本相同;2点和3点拟合的复相关系数较低,4点、5点拟合的复相关系数较高,其中4点(1h、4h、8h、12 h)、5点(0.5h、1h、4h、8h、12 h)、5点(1h、4h、6h、8h、12 h)拟合的回归方程与实际AUC0-12h的相关性好、误差低,结合预测精准性、检测成本和可操作性,推荐4点的回归模型AUC012h =7.277+1.090C1h +4.670C4 h+3.214C8h+2.118C12h.结论 天疱疮患者口服强的松联合多剂MMF,以服药后1h、4h、8h、12h的MPA浓度估算MPA-AUC0-12h较好,可作为临床监测MPA浓度的指标,指导个体化给药.
作者:郭生红;邹远高;李薇;夏登梅 刊期: 2015年第04期
目的 探讨腹主动脉瘤患者接受腹主动脉瘤腔内修复术(EVAR术)后胃肠功能改善情况.方法 将89例EVAR术后患者根据手术先后顺序分为4组,分别为对照组、腹部超导组(超声波导入胃肠宁贴片)、足三里按摩组、足三里按摩合并腹部超导组.观察并比较各组患者术后第一次出现肠道排气时间、排便时间和肠鸣时间(肠鸣音每次至少3 min).术后每隔2h观察一次,夜间睡眠期间可酌情减少观察时间.结果 各组患者术前人口学参数、合并症情况及腹主动脉瘤解剖学参数差异均无统计学意义.术中麻醉方式以局麻为主.髂总动脉瘤引起单侧髂内动脉封堵共8例,样本均衡,各组间差异无统计学意义.方差分析显示:与对照组相比,其余3组术后第一次出现肠鸣时间、排便时间、恢复进食时间和排气时间均有所改善,尤其排便时间.进一步两组间比较,足三里按摩组和腹部超导组之间术后第一次出现肠鸣时间、排便时间和排气时间差异无统计学意义;足三里按摩合并腹部超导组术后第一次出现肠鸣时间、恢复进食时间比腹部超导组和足三里按摩组更早(P均<0.05);然而,在术后第一次出现排气和排便时间方面,足三里按摩合并腹部超导组并未比足三里按摩组和腹部超导组明显缩短.结论 足三里按摩十腹部超导组在术后肠鸣音恢复时间、患者术后恢复进食时间均较其他组明显提前,有利于术后胃肠道功能恢复,促进患者康复,值得推广.
作者:侯晓玲;袁丁;黄斌;张林;赵纪春 刊期: 2015年第04期
目的 通过锥形束CT(CBCT)技术对个别正常(牙合)牙齿的近远中倾斜度进行测量研究,探究其正常范围,总结该技术的优势所在,为临床工作及新型矫治器的开发提供帮助.方法 选取10例成人个别正常(牙合)口腔颌面部CBCT扫描数据.使用Dolphin软件重建出颌面部三维图像,再利用USC root Vector牙根分析系统分别定位每颗牙齿的冠根中心点,确定牙长轴,从而测量牙齿近远中向倾斜度.结果 上颌牙齿除第二磨牙为远中倾斜之外,其余牙齿均为近中倾斜,且倾斜度变化范围为-7.41°~14.75°.下颌牙齿除切牙几乎无近远中向的倾斜外,其余牙齿均表现为近中倾斜,其倾斜度变化范围为-1.97°~18.71°.对颌同名牙近远中倾斜交角均介于160.78°~178.88°,起伏波动不大.结论 利用CBCT技术能够较准确地测量个别正常(牙合)牙齿的的近远中倾斜度,其优势在于成像精确度高、图像伪影少以及测量分析直观便捷等.
作者:姚政铎;周林曦;沈刚 刊期: 2015年第04期
目的 设计新型全关节镜下Inlay技术重建后交叉韧带(PCL)胫骨侧开槽器及手术流程.方法 设计制作全新的、适合全镜下操作的胫骨Inlay技术重建PCL的胫骨侧开槽器及配套设备,在6例尸体标本上进行试验研究,探索标准操作流程,对标本进行生物力学测试和影像学研究,对器械设计和手术流程进行优化.结果 成功设计并制作出包含3部件的胫骨侧开槽器;器械使用简便,手术操作可行,所有操作在平均78.5 min内完成;力学测试证明移植物固定牢靠,膝关节初始稳定性良好;影像学检查提示骨块位置良好,移植物走行正常.结论 全新设计的全镜下Inlay重建PCL胫骨端开槽器及手术流程操作简单可行,器械设计还可进一步优化.
作者:陈刚;李箭;付维力;唐新;李棋 刊期: 2015年第04期
目的 分析农村居民两周就诊次数的影响因素,探讨多水平零膨胀Poisson模型在零过多计数资料中的应用.方法 利用第五次国家卫生服务调查四川省农村居民数据,采用多水平随机截距零膨胀Poisson回归模型分析四川省农村地区居民两周就诊次数的影响因素.结果 Logistic回归分析结果表明性别、年龄和慢性病患病是影响农村居民两周患病与否的因素,Poisson回归分析结果表明到近医疗机构的时间、民族、婚姻状态和受教育程度是农村居民两周患病后就诊次数的影响因素.结论 文化程度高、到近医疗机构时间短以及未婚的居民两周就诊次数多.同时,多水平零膨胀Poisson回归模型能较好地解决数据中过多零的问题.
作者:李迪;熊华英;董婷;刘俊阳;张菊英 刊期: 2015年第04期
目的 建立粪便中腺病毒的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光快速检测方法.方法 采用试剂盒法提取粪便中腺病毒DNA,选择腺病毒六邻体基因保守区域进行PCR扩增反应.PCR产物分别用高灵敏度的SYBR Gold和SYBR Orange核酸荧光染料进行标记,在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下分离,采用激光诱导荧光检测特异性PCR扩增产物.结果 腺病毒扩增产物在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下可分别于9 min和6 min内完成检测.将PCR扩增产物测序,并与NCBI基因库中核酸序列比对,结果表明所选用的扩增序列特异性良好.商品化DNA Marker毛细管电泳和微流控芯片电泳对目标DNA片段bp值求得的日内精密度分别为1.14%~1.34%和1.18%~1.48%,日间精密度分别为1.27%~2.76%和2.85%~4.06%.毛细管电泳-激光诱导荧光法和微流控芯片电泳-激光诱导荧光法检测腺病毒的灵敏度分别为2.33×102 copies/mL和2.33×103 copies/mL.两种方法用于实际粪便样品测定,准确度高.结论 本研究建立的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光检测方法能够快速、灵敏、准确地检测出粪便中的腺病毒.
作者:阮佳;任冬霞;杨丹旎;龙品品;赵洪玥;王乙棋;李永新 刊期: 2015年第04期
患者,男,56岁,因“背部及左髋关节疼痛2月”,行髋关节MRI发现左侧股骨头坏死,骨密度检查示骨量减少,收入我科.既往无使用糖皮质激素、饮酒及外伤史.查体:左髋关节4字试验、骨盆分离挤压试验阳性.辅助检查:甲状旁腺素、骨转换指标、25-羟维生素D、血尿钙、血尿磷均正常.血常规提示血红蛋白109 g/L,肝肾功能及大小便常规正常.免疫固定电泳查见单克隆λ球蛋白.骨髓涂片未见异常,骨髓活检示:骨髓造血细胞增生明显低下,免疫组化发现约占有核细胞5%的浆细胞分布.
作者:李静;沈恺;黄慧 刊期: 2015年第04期
患者,女,25岁,因“停经38+6周,要求入院待产”入院.患者12年前因机器绞发造成颈椎损伤,且伤及第6、7颈髓致高位截瘫.当时四肢及胸部以下感觉运动消失,大小便失禁,经保守治疗及康复训练2年后至今,损伤平面以下肌肉功能不完全,可扶助行器行走,大小便可部分控制.查体:生命体征平稳;颈部可前倾及后仰;四肢肌力Ⅳ级.辅助检查:谷丙转氨酶(ALT) 118 IU/L,谷草转氨酶(AST) 83 IU/L;血常规及电解质检查正常;B超提示胎儿正常,拟行择期剖宫产.术前诊断:高位截瘫,妊娠合并肝功能异常,G1 P039周宫内孕头位单活胎待产.
作者:柳慧;林雪梅;马玉姗;黄燕 刊期: 2015年第04期