目的 研究小檗碱(berberine,Ber)对高脂模型大鼠胆固醇代谢的影响,并探讨其可能的机制是否与胰岛素诱导基因2(insulin.induced gene 2,Insig-2)基因表达有关.方法 ♂清洁级SD大鼠40只,随机分为普食组(Normal diet,ND)、高脂饲料组(High fat diet,HFD)、高脂饲料+洛伐他汀组(Lovastatin diet,LD)、高脂饲料+低剂量小檗碱干预组(Ber low dose diet,BLD)、高脂饲料+高剂量小檗碱干预组(Ber high dose diet,BHD).Ber干预18 wk后测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等血生化指标的含量.RT-PCR和Western blot技术检测各组大鼠肝脏Insig-2 mRNA和蛋白表达变化.结果 Ber干预呈剂量依赖性降低高脂模型大鼠血清TC和LDL-C水平;低剂量Ber明显上调高脂血症大鼠肝脏lnsig-2基因mRNA和蛋白表达水平,而高剂量Bet则反馈性下调Insig-2基因mRNA和蛋白的表达.结论 Bet干预具有明显的凋血脂作用,其机制可能是通过上调肝脏Insig-2基因表达,从而抑制肝脏中胆固醇的合成代谢.
作者：常伟；王红；尹华峰；周岐新；杨俊霞 刊期： 2009年第01期
目的 研究七叶皂苷体外抗SGC-7901肿瘤细胞的作用及其机制.方法 采用MTT法观察药物对SGC-7901肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测SGC-7901肿瘤细胞周期的变化;FITC-Annexin V/PI双标记检测SGC-7901肿瘤细胞的凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2的表达.结果 七叶皂苷可明显抑制SGC-7901肿瘤细胞的增殖,并抑制细胞周期和诱导细胞发生凋亡,可下调凋亡相关蛋白Bcl-2的表达.结论 七叶皂苷体外对SGC-7901肿瘤细胞具有良好的抑制作用,并可诱导细胞发生凋亡.
作者：吴子侠；吴海竞；曹莉；孙晓飞；明志君；张学光 刊期： 2009年第01期
目的 探讨吴茱萸碱对人肝癌细胞HepG2的生长抑制、诱导凋亡和对细胞周期的影响.方法 体外试验MIT法测存活率,DAPI染色观察细胞凋亡形态,流式细胞术、彗星电泳技术分析药物对DNA作用.结果 吴茱萸碱能抑制人肝癌细胞ItepG2的生长.用64、16、4、1、0.25μmol·L-1浓度的吴茱萸碱处理HepG2细胞72 h的抑制率分别为74.0%、69.0%、60.5%、44.0%、16.4%.DAPI染色后吴茱萸碱组癌细胞均表现出较为典型的细胞凋亡特征.流式细胞仪检测1μmol·L-1吴茱萸碱作用24和36 h出现亚二倍体凋亡峰,细胞周期阻滞于G2/M期.凋亡率对照组为4%,1 lunol·L-1吴茱萸碱作用12、24、36 h的凋亡率分别为4.4%、18.0%、30.3%.彗星电泳显示1μmol·L-1吴茱萸碱作用24和48 h后,细胞后面形成长的拖尾,平均光密度值较阴性对照组降低,彗星尾距较阴性对照组增加,且二者的改变与作用时间相关.结论 吴茱萸碱能抑制人肝癌细胞HepG2的生长及诱导其凋亡.
作者：朱丽红；刘小东；谭宇蕙；李杰芬；杜标炎；吴映雅 刊期： 2009年第01期
目的 有报道表明staurosporine作为一种蛋白激酶C(PKC)的抑制剂,可以在多种细胞系内调节细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的活性,但是它的衍生物staurosporine agly-coHe(SA)是否具有相同的作用还不清楚,本次实验旨在阐明其对ERK1/2活性的调节作用.方法 培养至4～8代的大鼠肺动脉平滑肌细胞,经过SA处理后提取细胞蛋白,应用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的含量,观察不同浓度和时间点的SA对ERK1/2活性的影响.结果 在纳摩尔浓度水平的SA可以降低大鼠肺动脉平滑肌细胞中ERK1/2的磷酸化水平,但是30 μmol·L-1的SA可以激活ERK1/2,这种激活作用可以被丝裂素活化蛋白激酶的激酶(MEK)的抑制剂PD98059或蛋白激酶A(PKA)的激活剂异丙肾上腺素(isoproterenol)所抑制.结论 SA对肺动脉平滑肌细胞中的ERK1/2活性有双向调节作用,这种作用是通过PKC和(或)PKA通路产生的.
作者：张家宁；褚晓杰；吕昌莲；吴春铃；包红霞；唐晓波；朱大岭 刊期： 2009年第01期
目的 探讨rIL-1α对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞功能的影响及木瓜苷(GCS)的作用.方法 采用弗氏完全佐剂(FCA)诱导大鼠AA模型,分离培养大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS),用MTT法检测FLS的增殖能力,放射免疫法(RIA)测定FLS产生PGE2和cAMP的水平.结果 在10μg·L-1的rIL-1α(1、2、4、8、24 h)体外刺激下,AA大鼠FLS产生的PGE2水平升高,cAMP水平在1～8 h升高,24 h反而下降.GCS(100、50、25、12.5 mg·L-1)体外给药可不同程度的抑制FLS的增殖反应和PGE2的产牛,升高cAMP水平.结论 rIL-1α可以促进AA大鼠FLS的增殖,降低cAMP,升高PGE2,GCS能明显逆转rIL-1α对FLS的影响.
作者：唐丽琴；魏伟；王晓玉 刊期： 2009年第01期
目的 探讨TNF-α诱导的肺泡巨噬细胞(AM)性基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的信号通路以及吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对MMP-9表达的影响机制.方法 从慢性阻塞性肺疾病患者支气管肺泡灌洗液中分离与培养AM,以PDTC预处理AM,以TNF-α或IL-1刺激AM.半定量逆转录-聚合酶链反应法检测MMP-9 mRNA的表达;Western blot检测MMP-9蛋白的表达及TNF-α或IL-1诱导的IκBα磷酸化水平.凝胶阻滞分析实验检测NF-κB活性.结果 TNF-α上调AM源性MMP-9 mRNA和蛋白的表达(P<0.05);PDTC抑制TNF-α诱导的MMP-9的表达(P<0.05).PDTC对TNF-α或IL.1诱导的IKBα的磷酸化均无抑制作用(P>0.05).PDTC对TNF-α或IL·1诱导的NF-κB的活化均有抑制作用(P<0.05);且PDTC不能在体外直接抑制NF-κB的DNA结合活性(P>0.05).结论 NF-κB在TNF-α诱导的AM源性MMP-9的表达中起着重要作用;PDTC 可能通过抑制泛素化-蛋白酶小体途径来下调TNF-α诱导的AM源性MMP-9的表达.
作者：李亚清；张珍祥 刊期： 2009年第01期
目的 在海马神经元和星形胶质细胞水平探讨胍丁胺抗抑郁作用机制.方法 采用多种应激方式建立大鼠慢性应激抑郁模型,通过开场实验和蔗糖饮水实验观察模型组、阳性对照药氟西汀组(10 nag·kg-1,ig)和胍丁胺组(20 mg·kg-1,ig)大鼠的行为学变化;应用神经元标志物--微管相关蛋白2(microtubtde-associated protein 2,MAP2)和星形胶质细胞标志物--胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫组织化学染色,观察各组大鼠海马神经元和星形胶质细胞形态改变.结果 慢性应激模型组大鼠开场实验水平运动得分和垂直运动得分明显降低,蔗糖偏嗜度明显降低,氟西汀和胍丁胺可逆转此变化;免疫组化结果显示,慢性应激模型组MAP2和GFAP表达明显减弱,表现为海马神经元突起长度和数目以及星形胶质细胞的数量和突起数量明显降低,氟西汀和胍丁胺可改善此病理变化.结论 海马神经元和星形胶质细胞共同参与抑郁症发生,胍丁胺可逆转慢性应激引起的细胞形态结构改变,发挥抗抑郁作用.
作者：陈红霞；张黎明；张有志；赵楠；李锦；李云峰 刊期： 2009年第01期
目的 应用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts,KFs)中纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAl-1)mRNA的表达.方法 体外分离培养KFs,应用不同浓度(1.25～20 pmol·L-1)TGF·β1刺激KFs 3 h或TGF-β1(10 pmol·L-1)刺激KFs不同时间(0.5～6 h),采用SYBR Green I荧光实时定量RT-PCR法检测,以β-actin基因作为内参,计算各组PAI-1 mRNA的相对表达量.结果 与空白对照组相比,TGF-β1能明显诱导KFs中PAI-1 mRNA的表达,10、20pmol·L-1浓度组表达比值分别增至4.19及4.44倍(P<0.01);TGF-β1(10 pmol·L-1)的1、2 h时间组表达比值分别增至2.29及2.41倍(P<0.05),3、6 h时间组分别增至4.19及5.83倍(P<0.01).提示,TGF-β1诱导KFs中PAl-1mRNA表达的适浓度为10 pmol·L-1、适时间为3 h.结论 利用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测TGF-β1诱导KFs中PAI-1 mRNA的表达,为进一步研究瘢痕疙瘩中TGF-β1信号通路的靶基因调控机制,以及开发治疗瘢痕疙瘩的新药提供了基础.
作者：何淑芳；杨林；黄维娟；杨雁；周伏圣；方巧云；张安平；杨森；张学军 刊期： 2009年第01期
目的 体外测定两种AZT-氟喹诺酮偶联物SRLZ和SROZ的抗HIV-1活性及抗菌活性.方法 通过合胞体抑制、HIV-1感染细胞保护、HIV-1 p24抗原测定等方法检测急性感染中化合物对HIV-1实验株、临床分离株的抑制作用和对慢性感染细胞中的病毒复制影响;通过体外金黄色葡萄球菌的抑制实验检测化合物的抗菌活性.结果 AZT-氟喹诺酮偶联物SRLZ和SROZ能抑制HIV-1实验株诱导的合胞体形成,减少病毒感染细胞的死亡和抑制病毒在细胞内的复制;SRLZ和SROZ对HIV-1临床分离株也有较好的抑制作用;SRLZ和SROZ对HIV-1的抑制活性与AZT相近;AZT-氟喹诺酮偶联物也能抑制金黄色葡萄球菌,其MIC值与其相应的阳性药物相近.结论 SRLZ和SROZ有很好的抗HIV-1活性和抗菌活性.
作者：龙晶；Dharmarajan Sriram；张高红；郑永唐 刊期： 2009年第01期
目的 研究S-甲基异硫脲(SMT)对阿霉素(ADR)所致大鼠心肌线粒体腺苷三磷酸合酶(ATPS)活性改变的影响.方法 大鼠腹腔注射ADR(5.0 mg·kg-1)1次,给ADR处理的大鼠静脉注射不同剂量的SMT 1次进行干预.分别用寡霉素一无机磷法、血红蛋白氧化法测定心肌线粒体的ATPS活性、一氧化氮合酶活性;分别用荧光素酶法、硝酸还原酶法测定心肌线粒体的腺苷三磷酸(ATP)含量、一氧化氮(NO)含量;用逆转录-聚合酶链反应方法检测心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达.结果 SMT(5.0,10.O,20.0 mg·kg-1)拮抗ADR所致心肌线粒体的ATPs活性降低、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性增加(P<0.01);拮抗ADR所致心肌线粒体的ATP含量降低、NO含量增加(P<0.01);拮抗ADR所致心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达水平降低(P<0.01).结论 SMT拮抗ADR导致心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达水平降低而拮抗ADR导致ATPS活性降低,从而改善心肌线粒体供能;SMT拮抗ADR导致心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达水平降低可能与其选择性地抑制ADR所诱导心肌线粒体的iNOS活性使NO产生减少,从而减少NO抑制心肌线粒体的ATPS6 mRNA、ATPS8 mRNA表达有关.
作者：阳冠明；刘微；李树全；彭献华；叶司原；利基林；林善修 刊期： 2009年第01期
目的 探讨nAChR激动剂尼古丁对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的学习记忆障碍小鼠模型的治疗作用以及可能的作用机制.方法 小鼠侧脑室注入凝聚态Aβ25-35 4.5μl.次日,用药组给予尼古丁0.2和2 mg·kg-1(ip,bid×7d),对照组及模型组ip生理盐水.给药结束4 d后(造模成功后11 d),进行各组行为学及皮层、海马组织乙酰胆碱酯酶(ACHE)、胆碱乙酰转移酶(CHAT)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)活性指标的检测.结果 定位航行实验发现,训练d 4,模型组小鼠的上台潜伏期和游泳距离明显高于对照组和0.2、2 mg·kg-1尼古丁治疗组(P<0.01);空间搜索实验发现,实验d 5撤除平台,模型组在平台所在象限(第Ⅱ象限)中游泳的时间百分比明显低于对照组(P<0.01)和0.2及2 mg·kg-1尼古丁治疗组(P<0.05);模型组在平台所在象限(第Ⅱ象限)中游泳的距离百分比明显低于对照组(P<0.01),但与0.2及2 mg·kg-1尼古丁治疗组无差别(P0.05).酶活性检测发现尼古丁治疗组的AChE及ChAT的活性较对照组明显升高(P<0.01);尼古丁治疗组(2 mg·kg-1)MDA的活性较模型组明显降低(P<0.01),尼古丁治疗组(0.2 nlg·kg-1)的活性较模型组无改变(P>0.05);尼古丁治疗组的GSH活性较模型组明显升高(P<0.01).结论 尼古丁能够改善Aβ25-35诱导痴呆小鼠的学习记忆功能障碍,该作用与其增强ChAT的活性以及抗氧化应激有关.
作者：任汝静；王刚；潘静；朱亮；张施；孙小康；陈红专；陈生弟 刊期： 2009年第01期
目的 通过观察重组人红细胞生成素(rhEPO)影响肾小球系膜细胞生长,以及表达纤维连接蛋白(FN)的作用,探讨应用rhEPO后对肾组织可能产生的生物学效应.方法 培养的大鼠肾小球系膜细胞在不同剂量(1、10、100和1000U·ml-1)rhEPO的作用下,细胞计数和蛋白浓度测定评价细胞是否肥大;蛋白免疫印迹法检测FN蛋白表达的变化.6 CD-1小鼠接受单次(n=8)腹腔注射rhEPO(1000 U·kg-1体重),注射后24 h处死并分离肾小球以检测其FN表达量的变化.结果 ①rhEPO能够增加系膜细胞蛋白质的含量,以100 U·ml-1工作浓度rhEPO的作用效果为明显[(1.269±0.382)μg·10-3cells vs(0.247±0.058)μg·10-3cells;P<0.01)];②rhEPO能够刺激系膜细胞上调FN蛋白的表达,与对照组相比,100 U·ml-1的rhEPO明显增加系膜细胞FN蛋白的表达,随着rhEPO浓度的增加,系膜细胞FN的表达进一步增多,呈剂量依赖性;③间接免疫荧光检测可见rhEPO作用系膜细胞24 h后,可见大量呈网状、条索状,甚至板块状FN蛋白分布于细胞间隙;④单次腹腔注射rhEPO后24 h的肾小球FN增加.结论 rhEPO可以造成系膜细胞的肥大,同时诱导系膜细胞增加FN合成,提示rhEPO可以通过影响系膜细胞的功能造成肾小球功能的异常.
作者：周书琴；闻萍；高雯；王晓华；方丽；狄佳；江蕾；熊明霞；张飞飞；杨俊伟 刊期： 2009年第01期
目的 探讨δ阿片受体激活对血清饥饿诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用及机制.方法 新生大鼠心肌细胞分为对照、模型、D-丙(2)-D-亮(5)脑啡肽DADLE 0.1μmol·L-1;DADLE 0.1μmol·L-1+naltrindole(δ阿片受体拮抗剂)10 μmol·L-1、DADLE0.1 μmol·L-1+GFl09203X 10μmol·L-1、DADLE0.1 μmol·L-1+staurosporine 1μmol·L-1组;分组给药48 h后,MTT法检测细胞存活率;流式细胞仪测心肌细胞的凋亡指数;流式细胞仪检测细胞周期.Western blot法检测心肌细胞的胞质内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶.3(caspase-3)表达及蛋白激酶C(PKC)的表达.结果 δ阿片受体激动剂DADLE能明显抑制由血清饥饿引起的心肌细胞的凋亡,表现为细胞存活率升高,凋亡率下降,G0/G1百分比降低,G2/M百分比增加;caspase-3蛋白表达明显下降;PKC蛋白表达明显升高;加入nahrindole可以阻断DA-DLE对心肌细胞凋亡的抑制作用,加入GF109203X和stau-rosporine可明显拮抗DADLE抑制由血清饥饿引起的心肌细胞的凋亡的作用,表现为细胞存活率降低,凋亡率升高;G0/G1百分比增加,G2/M百分比降低;caspase-3的蛋白表达明显升高;PKC表达明显降低.结论 8阿片受体激活后通过活化PKC通路抑制血清饥饿所致的心肌细胞凋亡.
作者：王大鹏；王洪新；唐博；喻晓春 刊期： 2009年第01期
目的 探讨1型糖尿病大鼠肾脏脂质沉积和固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)的表达以及胰岛素处理的影响.方法 以Wistar大鼠建立链脲佐菌素1型糖尿病模型并随机分为正常对照组,糖尿病模型组和胰岛素处理组.喂养2 wk后处死,测定.肾皮质组织甘油三酯含量,油红0染色检测脂质沉积的部位;免疫组织化学、Western blot和原位杂交检测肾脏SREBP-1表达.结果 与正常对照组相比,1型糖尿病大鼠肾脏甘油三酯含量明显升高,油红0检测示脂质沉积定位于肾近曲小管上皮细胞,肾小球内未见着色.胰岛素处理明显降低了甘油三酯含量,和糖尿病模型组相比差异有统计学意义.免疫组织化学检测SREBP-1定位于大鼠肾脏近曲小管上皮细胞胞质,糖尿病组表达量明显高于正常组和胰岛素处理组.Western blot证实了SREBP-1蛋白前体片段和成熟片段在糖尿病组的高表达,前体片段积分光密度比值为0.673±0.027,成熟片段为0.670±O.028,分别是正常组的1.86倍和1.77倍;胰岛素处理后SREBP-1蛋白前体片段表达下降了52.8%,成熟片段表达量下降了30.9%.原位杂交结果证实SREBP-1 mRNA定位于近曲小管上皮细胞胞质,糖尿病组表达明显升高,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);胰岛素处理后其表达明显下降.结论 1型糖尿病大鼠肾近曲小管上皮细胞SREBP-1 mRNA和蛋白表达升高可能参与了肾脏脂质沉积,胰岛素处理可有效降低SREBP-1mRNA和蛋白表达.
作者：郝军；朱琳；戎赞华；段惠军 刊期： 2009年第01期
目的 观察慢性吗啡(Mor)处理对大鼠交感神经节--颈上神经节(SCG)环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)含量的影响.方法 剂量递增法连续皮下注射(sc)吗啡5 d建立慢性吗啡依赖大鼠模型,纳洛酮(Nal)催促戒断法和55℃热水甩尾试验判断模型依赖性和耐受性,125Ⅰ放射性免疫测定法测定SCG中cAMP和cGMP的含量.结果 ①吗啡急性给药组大鼠SCG中cAMP含量较正常对照组降低(P<0.05);②吗啡依赖组大鼠SCG中cAMP含量回到正常对照组水平,并有增高趋势(与正常对照组比较,P0.05;与吗啡急性给药组比较,P<0.05);③吗啡戒断组大鼠SCG中cAMP含量较正常对照明显增高(P<0.05);④各组大鼠SCG的cGMP含量差异无显著性(P>0.05).结论 慢性吗啡处理大鼠交感神经节cAMP存在适应性上调现象.
作者：何萍；莫宁；于洪波 刊期： 2009年第01期
目的 探讨TRPV1在脂多糖(LPS)致大鼠发热过程中的作用和机制.方法 48只♂ SD大鼠随机分为4组,正常对照组(N)、capsazepine组(CPZ)、LPS组(LPS)和capsaz-epine+LPS组(CPZ+IPS).连续观察体温变化;在发热高峰期通过颈椎脱臼迅速处死动物,以Fura-2/AM为荧光指示剂,测定下丘脑细胞内[Ca<2+]i;应用放射免疫法检测下丘脑中cAMP含量的变化.结果 ①各组体温变化大值(△Tmax)由高至低顺序为:CPZ+LPS组＞LPS组＞CPZ组＞N组;其中,CPZ+LPS组与LPS组比较,AT(300～480 min期间)及体温反应指数TRI8均增高(P＜0.01);②在发热高峰期,CPZ+LPS组[Ca2+];明显低于其它3组(P<0.01);③CPZ+LPS组cAMP含量与其它组比较增多(P<0.01).结论 capsazepine可能通过阻断下丘脑TRPV1通道,改变细胞内钙离子浓度,进而影响LPS性发热过程.
作者：王乐；王兰兰；曹宇 刊期： 2009年第01期
目的 观察多沙唑嗪(racemic-doxazosin,rac-DOX)及其对映体(S-DOX、R-DOX)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响.方法 采用培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞,应用MTT比色法,测定VSMCs的增殖活力,Giemsa's染色观察VSMCs的形态学改变.结果 在3～30 μmol·L-1浓度范围,S-DOX、R-DOX和rac-DOX作用于VSMCs 96 h,均抑制大鼠胸主动脉VSMCs增殖活动;但是,S-DOX的抑制作用强于同浓度R-DOX(P<0.05),与同浓度rac-DOX的抑制作用无差别.以30 μmol·L-1浓度的药物处理VSMCs 48 h、72 h和96 h;S-DOX对主动脉VSMCs增殖的抑制率依次为28.67%、34.51%和56.89%,R.DOX为22.59%、26.66%和45.79%,,rac-DOX为21.88%、32.84%和52.04%.以不同浓度的药物处理大鼠胸主动脉VSMCs 96 h,rac-DOX、S-DOX和R-DOX抑制VSMCs增殖达40%的浓度(IC40)分别为(12.1±2.6)、(10.2±1.3)和(20.9±2.2)μmol·L-1;R-DOX的IC40值大于rac-DOX和S-DOX(P<0.01).S-DOX处理后,VSMCs出现细胞体积变小,核固缩,核边集等形态学改变.结论 S-DOX和R-DOX对大鼠胸主动脉VSMCs的抗增殖作用具有化学结构的立体选择性,S-DOX的抗VSMCs增殖作用明显强于R-DOX.
作者：王荣英；任雷鸣 刊期： 2009年第01期
目的 观察心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia reperfusion,MIR)时大鼠心肌组织,血清NO水平及NOS同工酶蛋白表达的变化和内洋地黄素特异性抗体对MIR时心肌NO系统损伤的保护作用.方法 采用左冠状动脉前降支结扎30 min,复灌45 min建立在体大鼠MIR模型,Sprauge-Dawley大鼠随机分成7组,每组10只,假手术组、缺血/再灌注模型组、生理盐水组、维拉帕米组、小剂量、中剂量、高剂量地高辛抗血清组.各组于再灌注45 min后立即取左室心尖部缺血区心肌并断尾取血,检测心肌匀浆和静脉血中NO含量,心肌匀浆中的eNOS、iNOS水平,免疫组织化学SABC法检测心肌组织eNOS、iNOS;光镜下观察心肌组织形态学变化.结果 MIR时心肌组织NO水平明显降低,但血清中NO水平无明显变化;eNOS表达明显减少,iNOS表达明显增加,心肌组织结构发生明显损伤;中、高剂量地高辛抗血清能有效降低心肌组织iNOS表达,恢复心肌细胞eNOS活性,提高心肌组织和血液中的NO水平,减轻MIR导致的心肌组织结构损伤.结论 内洋地黄素特异性抗体对MIR造成的心肌NO系统损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能通过拮抗内洋地黄素,调节心肌NOS同工酶的表达紊乱而实现.
作者：王星；王德国；柯永胜；唐振国；杨玉雯；汪源经 刊期： 2009年第01期
目的 观察无创性肢体缺血预适应(NLIP)对心脏缺血/再灌损伤后心肌凋亡的影响而进一步探讨其对心脏的延迟保护作用.方法 通过连续3 d每天1次,3个循环下肢无创性5 min缺血5 min再灌建立NLIP模型.实验分3组:心肌缺血/再灌组(I/R)、心脏缺血预适应组(IP)、NLIP组.再灌末取心肌组织,以四氮唑染色法测定心肌梗死面积(IS/AAR × 100%);以TUNEL法检测细胞凋亡并且用免疫组织化学法检测凋亡基因的表达;分离心肌细胞,用流式细胞仪检测细胞凋亡率以及凋亡基因表达率.结果 与I/R组(47.6%±7.5%)比较,IP和NuP能明显降低梗死面积(24.6%±8.7%和23.1%±7.4%,P<0.01);流式细胞仪检测结果表明,在I/R组,细胞凋亡率高(16.21%±2.12%),Bcl-2/Bax比值低(0.66±0.03),IP和NLIP能明显降低细胞凋亡率(5.30%±0.81%,4.82%±1.15%,P
作者：李淑娟；吴艳娜；康毅；尹永强；高卫真；刘艳霞；娄建石 刊期： 2009年第01期
目的 探讨葛根异黄酮(Total isoflavones from pueraria lobata,TIP)对甲基一苯基一吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyr-idinium,MPP+)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其机制.方法 用不同浓度TIP预处理体外培养的PC12细胞后.加入MPP+诱导多巴胺能神经损伤模型,用MTY法检测PC12细胞活力,采用实时定量RT-PCR检测Bcl-2和BaxmRNA的表达水平.结果 MPP+处理48～96 h,细胞活力较空白对照组降低,阴性对照组Bax 2-△△Ct升高,而Bcl-22△△Ct降低,差异具有统计学意义(P<0.05).与阴性对照组比较,葛根异黄酮组Bax 2-△△Ct降低,而Bcl-2 2-△△Ct升高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 葛根异黄酮对MPP+诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用,下调Bax和上调Bcl-2 mRNA表达可能是其作用的机制之一.
作者：牛英才；潘志；李晓明；张春；刘吉成 刊期： 2009年第01期
目的 观察前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)对多巴胺(dopamine,DA)合成细胞系MN9D细胞内源性孤儿核受体Nurrl表达的作用,并研究Nurrl表达增高对酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达的影响,探讨Nurrl调控DA能神经元发育的机制.方法 用100μg·L-1的PGE2作用于MN9D细胞2 h至6 h,观察细胞形态变化,并用免疫细胞化学染色及Western blot方法检测PGE2作用前后MN9D细胞内源性Nurrl及TH表达的变化.结果 ①100μg·L-1的PGE2作用2、4及6 h,MN9D细胞形态没有明显变化.②加入PGE2 2、4及6 h,MN9D细胞Nurrl抗体免疫荧光染色强度比未加PGE2作用的正常对照组细胞明显增强.MN9D细胞自身表达TH呈不均一性,PGE2作用2～6h,MN9D细胞中TH阳性染色细胞百分比与正常对照组细胞接近.③Western blot结果显示,PGE2作用6 h,MN9D细胞Nurrl蛋白表达比未加PGE2的正常对照组细胞明显增加(P＜0.05),而此时TH蛋白表达与正常对照组细胞接近.结论 PGE2可在短时间内迅速明显激活MN9D细胞内源性Nurrl表达,但对TH表达没有影响.TH表达的激活或许还需要除Nurrl以外其它环境或因子的共同参与.
作者：赵咏梅；张海燕；许秋岩；吕风月 刊期： 2009年第01期
目的 研究鞘内注射小胶质细胞特异性抑制剂米诺环素(minocycline,MC)抑制脊髓小胶质细胞的激活对骨癌痛维持的影响.方法 采用小鼠跟骨癌痛模型,♂ C3H/He小鼠42只,随机分为3组(n=14),sarcoma+PBS(phosphate buffered saline)组和sarcoma+MC组行小鼠跟骨癌痛模型制作,跟骨内注射肿瘤细胞;sham+PBS组行假手术,跟骨内注射PBS.造模后11天(post-implantation day 11,PID11),每组随机取10只小鼠,sham+PBS组和sarcoma+PBS组单次鞘内注射MC溶媒(PBS 5μl),sarcoma+MC组单次鞘内注射MC(1 nmol,5μl).各组分别在鞘内注射前、注射后0.5、1、2、4、8、24 h测定机械性痛觉超敏、冷痛觉过敏.各组剩余4只小鼠在PID12鞘内注射后1 h行非伤害性触摸右侧足底90min,分析脊髓背角c-fos蛋白的表达.结果 骨癌痛导致小鼠机械性痛阈和冷痛阈降低,脊髓背角c-fos蛋白的表达上调;单次鞘内注射MC能暂时提高小鼠疼痛阈值,并抑制脊髓背角c-fos蛋白的表达.结论 小胶质细胞的激活对骨癌痛的维持具有重要作用.
作者：唐元章；申文；刘苏；马正良；孙玉娥；张井浪；苏小虎；朱姗姗；宋学军 刊期： 2009年第01期
目的 研究双苯氟嗪对hERG钾通道电流的影响,探讨其抗心律失常作用的可能机制.方法 以非洲爪蟾卵母细胞作为表达系统,采用双电极电压钳技术观察双苯氟嗪对hERG钾通道电流的影响.结果 双苯氟嗪(8 nmol·L-1-5 μmol·L-1)浓度依赖性地抑制hERG电流,IC50为98.0nmol·L-1;在-10 mV～40 mV范围内双苯氟嗪对hERG电流的抑制作用具有电压依赖性;双苯氟嗪1μmol·L-1对半数激活电压无明显影响,但可降低激活时间常数和去活时间常数,加快bERG电流的激活去活.结论 双苯氟嗪降低hERG钾通道电流并改变其动力学特征,提示双苯氟嗪抗心律失常的作用可能与此有关.
作者：张国红；耿仙；张璇；杨冀杰；张海林 刊期： 2009年第01期
目的 研究倍半萜内酯小白菊内酯(parthenolide,PL)对多发性骨髓瘤原代细胞和细胞株诱导的凋亡作用及其机制.方法 以多发性骨髓瘤原代细胞及细胞株为研究对象,利用台盼蓝染色检测细胞存活率,用DAPI染色法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测反应氧(ROS)和线粒体膜电位水平变化.结果 2.5μmol·L-1PL引起多发性骨髓瘤(multi-pie myeloma,MM)细胞明显凋亡及线粒体膜电位下降,而正常淋巴细胞在同等条件下不受影响.用2.5μmol·L-1PL作用10 h后,KMM-1和MMls细胞ROS水平明显增加.用自由基清除剂L-N-乙酰半胱氨酸(L-NAC)预处理可抑制ROS的产生,对两种细胞存活率、凋亡率无影响.用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂二亚苯基烟碱氯化物(diphenylene iodonium chloride,DPI)预处理KMM-1和MMls,可明显抑制PL介导的ROS的产生,并对两种细胞凋亡率无影响.结论 PL诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡,而正常淋巴细胞在同等条件下不受影响.PL的凋亡活性是通过引起MM细胞氧化应激而介导的,并进一步推测NADPH氧化活性与PL介导的MM细胞ROS的产生相关.
作者：王巍；安达正晃；周晋 刊期： 2009年第01期
目的 探讨中华眼镜蛇毒(Naja NaBAtra)神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响.方法 PC12细胞分为正常对照组和给药组,采用Western blot方法检测各组PCI2细胞κ阿片受体蛋白质的表达.结果 ①nNGF的25、50、100 μg·L-13个剂量中,50和100μg·L-1nNGF下调PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达,50μg·L-1剂量组下调明显(P<0.01),100 μg·L-1剂量组下调(P<0.05).②50μg·L-1nNGF分别处理PC12细胞1、3、5、7、10 d后,其κ阿片受体蛋白质表达呈降低趋势,其中d 5、7下调(P<0.05),d 10下调明显(P<0.01).③10μmol·L-1吗啡可上调PC12细胞κ阿片受体蛋白表达,而10 μmol·L-1纳络酮对其无影响,二者分别都能逆转nNGF的下调效应,但是二者共存时不能逆转nNGF的下调效应.结论 nNGF诱导PC12细胞分化中,可引起PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的下调效应,该效应能被吗啡或纳络酮逆转,但二者共存不能被逆转效应.
作者：李卉；余晓东；和七一；邓敏；陈夏；林奕心 刊期： 2009年第01期
目的 探讨氯离子通道阻断剂DIDS(4,4′-diisothiocy-ano-2,2′-stilbene.disulfonic acid)对staurosporine(STS)诱导心肌细胞凋亡的调节蛋白Bcl-2/Bax表达的影响.方法 在STS诱导心肌细胞凋亡模型上,观察DIDS对心肌细胞存活率、caspase-3活性、Bcl-2/Bax蛋白表达水平及Bax细胞内分布的影响.实验分组:对照组、STS组、DIDS组.结果 与STS组比较,DIDS能够明显抑制STS诱导的心肌细胞凋亡发生,心肌细胞存活率增加,caspase-3活性水平降低(P<0.01).对照组、STS组和DIDS组在全细胞水平上Bcl-2、Bax表达差异无显著性(P>0.01),在亚细胞水平上发现STS组有明显的Bax蛋白从胞质向线粒体转位,DIDS可以抑制STS诱导的Bax线粒体转位.结论 DIDS抑制心肌细胞凋亡可能与抑制促凋亡分子Bax由胞质向线粒体转位有关.
作者：刘安恒；曹亚南；张卫卫；师堂旺；刘艳；张航向；王晓明 刊期： 2009年第01期
各种致病因素所致慢性肝损伤均可引起肝纤维化,肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的激活是肝纤维化发生发展的中心环节,促进其凋亡被认为是肝纤维化逆转的始动因素.HSC的凋亡机制十分复杂,调控活化HSC凋亡的信号转导途径研究甚少.目前已知的HSC凋亡信号途径主要包括线粒体途径、死亡受体途径和非死亡受体途径.基于这些信号转导途径,研究出选择性诱导HSC凋亡的药物将成为抗肝纤维化治疗的重要手段.该文将对HSC凋亡信号转导通路的新进展进行综述,并对目前已知的具有促HSC凋亡作用的药物进行总结分类.
作者：张怡；平洁；汪晖 刊期： 2009年第01期
磷酸二酯酶(phosphodiesterases,PDEs)作为体内特异性水解第二信使cAMP和cGMP的唯一蛋白酶家族,参与多种生理病理过程.研究表明PDE7是cAMP特异性的,分为PDE7A、PDE7B两个亚型,主要分布在免疫和炎症细胞中.PDE7作为一个新的潜在抗炎免疫药物靶点,其选择性抑制剂有可能用于治疗慢性阻塞性肺疾病(cOPD)、类风湿性关节炎、阿尔采末病(AD)等与免疫炎症密切相关的疾病.
作者：张莉；杜冠华 刊期： 2009年第01期
神经元钙传感蛋白NCS-1(neuronal calcium sensor-1,NCS-1)是一种具有较强的钙离子结合能力的蛋白质.NCS-I可以结合、传导细微的钙离子浓度变化;而当钙离子浓度超过微摩尔/升数量级时(即生理浓度),其结合能力即达到饱和,这也是它与钙调索(可感受较高浓度的钙离子变化)等其它钙结合蛋白的重要区别之一.它在脑缺血损伤中的作用,还未引起足够的重视,但是根据现有报道,NCS-1极有可能是脑缺血损伤的一个重要的保护因子.另外有研究显示.NCS-1还与神经细胞金属沉积性疾病的发生有关,可以明显增加神经元突触的传导功能.
作者：张占军；李澎；邱蕾；郑璐；王永炎 刊期： 2009年第01期
缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible faetor-1,HIF-1)是一种由α亚基和β亚基组成的异源二聚体.该文对HIF-1活性表达及其在缺血/缺氧诱发的血管新生中的重要作用做了简要综述.
作者：李玉娟；刘建勋 刊期： 2009年第01期
大麻受体分为大麻受体1(CB1)和大麻受体2(CB2),CB2受体主要分布于外周免疫系统,目前研究发现其在中枢神经系统(CNS)也有少量的分布,这可能与其中枢作用密切相关.已有文献报道CB2受体激动剂具有抑制疼痛产生和持续及神经退行性病变等药理学特性,且长期给药不产生明显的精神和躯体依赖等副作用,显示出良好的临床应用前景.为了更好地认识、研究和利用CB2受体及其激动剂,该文综述了CB2受体在CNS的分布及其药理作用特点.
作者：李素燕；颜玲娣；宫泽辉 刊期： 2009年第01期
在人源重组多肽类新药的毒理学研究中,绝大多数受试物在实验动物体内都具有不同程度的免疫原性,使生物利用度降低和毒性反应被削弱.
作者：卢觅佳；吴友苹；陈颖；杨红忠；陈云祥；宣尧仙 刊期： 2009年第01期
铜是具有抗肿瘤活性的金属,很多文献[1～3]表明无机铜和有机铜都具有良好的抑瘤效果,但铜的氧化伤害使其成为一把双刃剑,铜的强氧化性会对多种脏器甚至DNA造成损伤.
作者：沈杰；张冬梅；徐力致；李俊；陈钧辉 刊期： 2009年第01期
目的 建立维生素D,(vitamin D,)联合尼古丁(nico-fine)诱导的大鼠血管钙化亚慢性动物模型.方法 采用维生素D3(300 kIU·kg-1)肌注和尼古丁(25 mg·kg-1,5 ml·kg-1)灌胃制备大鼠血管钙化亚慢性模型,定期测定大鼠体重和尾动脉血压;在造模的第8周、第16周,分别测定大鼠心脏系数、血浆钙、磷含量、血管钙含量、血管碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和血管钙沉积等与血管钙化相关的指标,对胸主动脉进行Von Kossa染色.结果 第3～8周,VDN(vitamin D3and nicotine)大鼠尾动脉压持续增加,与对照组相比差异均有显著性(P均<0.05).第9周后,仍然维持在较高水平.与对照组相比,VDN组大鼠第8周心脏系数升高8.4%(P<0.01);血钙、血磷分别升高3.2%(P<0.01)和12.0%(P<0.05);血管组织钙含量升高27.0%(P<0.01);血管ALP活性与血管钙沉积分别高151.8%和68.8%(P均<0.01).与对照组相比,第16周VDN组大鼠心脏系数升高7.7%(P<0.01),血钙升高3.2%(P<0.05),血磷降低1.4%;血管组织钙含量升高51.0%(P<0.01);血管ALP活性与血管钙沉积分别高87.2%(P.001),31.6%(P<0.05).Von Kossa 染色结果显示第8周和第16周VDN组大鼠胸主动脉中膜均有大量深色颗粒沉积.结论 维生素D3和尼古丁诱导的16wk大鼠血管钙化亚慢性模型可作为药物筛选和机制研究的疾病模型.
作者：王茜倩；闫惠；安春娜；蒲小平 刊期： 2009年第01期
目的 研究组胺、右旋糖酐40和4-氨基吡啶(4-AP)3种致痒物质对瘙痒动物模型的影响,尝试建立一种新型的瘙痒动物模型.方法 用正交实验方法安排实验,各组分别在脱毛部位皮下注射O.1 ml不同致痒剂,记录小鼠30 min内的搔抓潜伏期和搔抓次数,用综合评分法筛选佳致痒组方.分别取各组小鼠注射部位皮肤,测定皮肤中的组胺含量.结果 佳造模组方为联合应用组胺和4-氨基吡啶;各试验组与空白组比较,30 min内的搔抓潜伏期和搔抓次数差异具有显著性(P<0.05或P<0.01);皮肤组胺含量差异亦具有显著性(P<0.05或P<0.01).结论 联合应用组胺和4.氨基吡啶可建立一种理想的瘙痒动物模型.
作者：陈月葵；王晖；梁庆；陈垦 刊期： 2009年第01期
