王剑；张继帅；侯宁；滕艳；程萱；杨晓
作者： 刊期： 2005年第05期
环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在乳腺癌组织中表达水平比其在正常乳腺组织和乳腺良性疾病组织中表达水平高,且和乳腺癌预后有一定关系.COX-2可通过多种途径影响乳腺上皮细胞的代谢和演变.本文综述了COX-2在乳腺癌演变过程中的变化规律和作用机制.
作者：朱坤兵；尉承泽；黄焰 刊期： 2005年第05期
目的:检测并鉴定感染组织中的克里米亚-刚果出血热病毒.方法:分别经皮下与腹腔两种途径感染乳小鼠;应用RT-PCR技术对病毒核酸进行检测;利用透射电镜超薄切片技术对病毒进行形态学鉴定.结果:RT-PCR可在心脏、肝脏、脾脏、肾脏以及脑组织内检测到病毒核酸,透射电镜下可在肝细胞胞浆内观察到形态典型的病毒粒子.结论:应用RT-PCR技术可以对感染组织中的克里米亚-刚果出血热病毒进行检测,利用透射电镜可以对病毒的形态进行观察与鉴定.
作者：赵晓冬；王翠娥；李豫川；吴小红；曹军田；严格；李金凤 刊期： 2005年第05期
目的: 检测Cre重组酶在心肌细胞特异性Cre重组酶转基因小鼠(α-MHC-Cre)中的组织分布及其在体内介导基因重组的作用. 方法:将α-MHC-Cre转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,利用LacZ染色对双转基因阳性子代小鼠进行检测.然后,将α-MHC-Cre小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠交配,利用PCR和Southern杂交对Cre重组酶介导重组的组织特异性进行检测.结果:LacZ染色表明,Cre重组酶只在心肌细胞中特异性表达并介导ROSA位点LoxP序列间的重组.PCR和Southern结果显示Cre重组酶只在心肌细胞中特异地剔除了Smad4基因,进一步验证了Cre重组酶在心肌细胞中发挥介导LoxP位点重组的作用. 结论:α-MHC-Cre转基因小鼠具有良好的组织特异性,只在心肌细胞中表达Cre重组酶,并能在体内成功地介导心肌细胞基因组上LoxP位点间的重组,是一种理想的研制心肌细胞特异性基因剔除小鼠的工具小鼠.
作者：王剑；张继帅；侯宁；滕艳；程萱；杨晓 刊期： 2005年第05期
目的:克隆人黑素瘤抗原-1(MAGE-1)基因,构建真核表达载体,建立稳定表达人MAGE-1的小鼠细胞株.方法:提取人肝癌细胞的总RNA,RT-PCR法获得人MAGE-1 cDNA,将测序正确的MAGE-1基因克隆至真核表达载体pcDNA3中,进行酶切鉴定和序列测定.将重组质粒pcDNA/MAGE和空载体pcDNA3分别转染入小鼠骨髓瘤细胞SP2/0中,经G418筛选获得稳定表达株,用RT-PCR和Western印迹检测MAGE-1基因的转录及蛋白表达.结果:从肝癌细胞中成功克隆到人MAGE-1基因,经测序证明基因正确,酶切和序列测定表明,人MAGE-1基因的真核表达质粒已成功构建.将此重组质粒转入的SP2/0细胞可稳定表达人MAGE-1基因.结论:成功构建可稳定表达人MAGE-1基因的小鼠转基因细胞,为MAGE-1的免疫治疗研究奠定了基础.
作者：何竞；张贺秋；冯晓燕；宋晓国；王国华；凌世淦 刊期： 2005年第05期
目的:获得小鼠脂联素(adiponectin,ADPN)在肝脏的高效稳定表达,方法:构建含肝脏特异性启动子hAATp和增强子ApoEHCR的小鼠脂联素基因(mAd)的真核表达载体pAA-neo-mAd.以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)为报告基因证明该载体在COS-7细胞中表达后,流体动力法(hydrodynamics-based procedure)通过尾静脉注射将其导入小鼠肝脏,通过肝脏mAd mRNA定量(半定量RT-PCR法)、免疫组织化学检测及血清脂联素水平测定(定量ELISA法)鉴定脂联素在肝脏的表达及表达效率.结果:肝组织RT-PCR的结果显示,注射后12 h肝脏内即可检测到mAd mRNA的表达,且能持续表达6周以上.24 h后血清脂联素水平显著升高,48 h达到峰值,一直持续6周后仍明显高于正常水平.肝脏脂联素免疫组化染色呈阳性.结论:流体动力法能有效地将质粒载体pAA-neo-mAd导入小鼠肝脏,并能在小鼠肝脏高效稳定地表达重组小鼠脂联素.
作者：王会中；付秋霞；陈竞新；贾帅争；詹林盛；孙红琰；王全立 刊期： 2005年第05期
目的:利用胰腺发育相关基因PDX-1 诱导小鼠胎肝基质细胞向胰腺细胞分化,探讨糖尿病治疗新方法.方法:构建含有胰腺发育相关基因胰腺-十二指肠同源框1(pancreatic duodenal homeobox1,PDX-1 )的真核细胞表达载体pmPDX-1 ,瞬时转染小鼠胎肝基质细胞,通过RT-PCR的方法,检测转染pmPDX-1 质粒的小鼠永生化胎肝基质细胞的胰岛素、胰高血糖素、胰多肽和肝细胞生长因子受体c-met的表达.结果:在mRNA水平上能够检测到胰岛β细胞所分泌的胰岛素、胰岛α细胞所分泌的胰高血糖素和胰腺PP细胞所分泌的胰多肽,表明转染了pmPDX-1 质粒的小鼠胎肝基质细胞在向胰腺细胞分化的过程中,具备了转录表达胰腺的内外分泌因子的能力.对肝细胞生长因子受体c-met的检测,提示分化的细胞没有完全失去肝细胞的特性.结论:通过导入PDX-1 基因可以诱导小鼠胎肝基质细胞向胰腺细胞分化.
作者：陈长浩；师迎旭；付汉江；朱捷；傅学奇；孙志贤；郑晓飞 刊期： 2005年第05期
人工转录因子是通过模拟天然转录因子的结构,由人为设计的DNA结合结构域和功能结构域组成.人工转录因子的构建包括DNA结合结构域和功能结构域的构建,通过体外设计筛选或模建,然后进入体内与特异DNA序列结合调控目的基因的表达;目前有关人工转录因子的应用研究主要集中在人类疾病的治疗,药物发现和生产,农业生物技术及基因功能的研究等方面.
作者：李世崇；朱旭东；陈昭烈；黄培堂 刊期： 2005年第05期
肝再生增强因子是一种新的肽类肝细胞辅助丝裂原,能促进肝再生.其同源基因广泛存在于各种生物体中.本文从肝再生增强因子的基因克隆与分子结构、组织分布与分泌方式、受体分布与信号转导和生物活性等方面进行综述,以加深对肝再生机制的了解.
作者：张勇；宋良文 刊期： 2005年第05期
毫米波是频率介于30～300 GHz之间的高频电磁波.毫米波技术在军事、医学等领域的广泛应用,特别是非杀伤性毫米波武器的出现,引起人们对毫米波损伤效应及安全防护研究的极大关注.毫米波由于组织穿透能力差(不足1 mm),直接照射一般只能造成角膜、皮肤等的损伤,但大剂量全身照射也可引发循环衰竭而致死.本文介绍了毫米波照射引起的角膜、皮肤损伤及致死效应.
作者：杨在富；钱焕文 刊期： 2005年第05期
目的:构建新型噬菌体展示载体,评价其展示效果,为构建scFv库寻找新的展示体系.方法:PCR分离、扩增M13KO7中pⅨ蛋白编码基因,克隆入噬菌体展示载体PHB-gⅢ,替换原载体中的gⅢ-CT段,构建载体PHB-pⅨ,并将相对分子质量约50×103的碱性磷酸酶的编码基因分别克隆入两展示载体,观察其展示碱性磷酸酶能力的差别.结果与结论:成功构建了展示载体PHB-pⅨ,该载体具有与PHB-gⅢ相当的展示碱性磷酸酶的能力,且相同滴度的PHB-gⅢ噬菌体DNA含量略高于PHB-pⅨ噬菌体DNA含量,提示PHB-gⅢ系统展示外源蛋白时存在感染能力下降.PHB-pⅨ系统具有用于展示噬菌体抗体库的良好应用前景.
作者：王双；孙志伟；杜威世；张锦超；俞炜源 刊期： 2005年第05期
1 CHISS软件简介CHISS 是英文Chinese High Intellectualized Statistical Software的缩写,中文名奇思,是一套将数据信息管理、图形制作和数据分析功能综合为一体的具有一定智能的统计分析软件.CHISS软件是北京元义堂科技有限公司与解放军总医院等单位协作开发的.CHISS软件用delphi和C++语言开发集成,它采用模块组合式结构,现开发了数据管理模块、统计分析模块、图形制作模块、科学评价模块、结果编辑模块、试验设计模块、数学模型模块、多元分析模块、重复测量数据分析模块、电子教室模块等10个模块.CHISS软件可广泛应用于科学研究、学校教学、市场调查、企业和医院中的数据管理、挖掘和统计分析,同时为科研、教学、企业提供良好的解决方案.CHISS软件的特点如下.
作者：童新元；曹秀堂；夏蕾 刊期： 2005年第05期
微波剂量学是对沉积在生物体内的微波能量及其分布的物理量度.它通常用比吸收率(SAR)来表示生物效应和作为防护限值量,SAR不仅与入射微波有关,还与生物体的电特性、尺寸、形状、结构有关.本文综述了几种确定SAR的实验方法,包括能差法、电场法、测温法、量热法和热像法,并对其用途和误差来源进行了分析.
作者：周红梅；苏镇涛；杨国山 刊期： 2005年第05期
目的:建立新分离呼肠病毒(reovirus)的空斑技术,进行病毒纯化,为呼肠病毒生物学和分子生物学的研究奠定基础.方法: 4株新分离呼肠病毒的早代毒种经L929细胞连续传代,当产生细胞病变后进行空斑试验,加营养琼脂培养6 d后加中性红,24 h内挑取空斑,扩增一次后做PCR鉴定.取呼肠病毒PCR阳性病毒进行第2次克隆纯化.结果:4株新分离呼肠病毒经L929细胞连续传2～4代,均能观察到明显的细胞病变.用10-3和10-4接种L929单层细胞,第6～7天均能产生空斑,空斑呈圆形,直径为0.2～1.0 mm,并分别测定其空斑滴度(PFU/ml).两次纯化后进行PCR检测,呼肠病毒基因扩增阳性、脊髓灰质炎病毒基因扩增阴性.结论:4株呼肠病毒的空斑出斑规律,通过两次克隆,获得纯化的病毒.
作者：苏裕心；何君；朱虹；宋立华；黄如统；端青 刊期： 2005年第05期
血小板生成素(TPO)是一种重要的细胞因子,不仅在巨核细胞增殖、成熟和血小板产生中发挥主要的调控作用,而且参与造血干细胞自我更新和分化的调节.TPO与其受体c-Mpl结合后,c-Mpl形成同源二聚体,激活JAK/STAT、Shc/Ras/MAPK、PI3K/Akt等信号通路,引发一系列生理效应.本文主要对TPO、TPO受体蛋白的结构及其介导的信号转导通路等方面的研究进展作一综述.
作者：刘红岩；从玉文；毛秉智 刊期： 2005年第05期
泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway, UPP)是细胞内降解蛋白质的重要途径,与细胞多种生理功能调节密切相关.本文主要论述了SCF(Skp-cullin-F-box protein)泛素化途径及对原癌基因c-myc产物的降解调控作用.
作者：安静；周平坤 刊期： 2005年第05期
目的:利用荧光极化原理,在液相系统内建立基于Bcl-2/Bak相互作用模式的高通量药物筛选体系.方法:在液相系统内建立Bcl-2蛋白和多肽的相互作用体系,用光度计检测荧光极化值,分析荧光极化值随蛋白或多肽浓度变化而改变的趋势.结果:对应于Bak蛋白BH3结构域的5FAM标记肽(LP)可与Bcl-2蛋白相互作用,建立了二者相互作用的饱和曲线;非标记竞争性短肽(CP)和LP竞争性地与Bcl-2蛋白结合,而无关肽(NP)则不与Bcl-2相互作用;基于Bcl-2结构筛选到的小分子化合物SC对体系内LP荧光极化值的影响模式与CP相同.结论:在均相系统内初步建立了基于抑制Bcl-2活性进而促进细胞凋亡的药物高通量筛选方法,为实现药物的高通量筛选奠定了基础.
作者：胡美茹；靳宝锋；张学敏；孙瑛勋；沈倍奋 刊期： 2005年第05期
莫达非尼(modafinil)于1994年首次在法国上市,商品名Modiodal,用于治疗发作性睡眠症和嗜睡性多眠症,其化学结构见图1.莫达非尼的药理特征不同于拟交感神经药物,而与脑中抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的减少有关,并对5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素有调控作用[1].1998年莫达非尼先后于英国和美国上市,多年来的临床使用表明该药不良反应较小,疗效确切[2].目前国内尚无莫达非尼产品上市,在原料药合成工艺的质量控制研究中,我们建立了莫达非尼原料药含量的高效液相色谱测定法.
作者：彭涛；温晓雪；王林；刘靖；金义光；杨建云 刊期： 2005年第05期
放射性粒子125I组织间植入治疗技术是运用CT、B超所获得的肿瘤影像学资料结合计算机模拟系统进行精确设计,采用微创或常规手术,将具有放射性的微小粒子按需要均匀植入肿瘤组织中,利用粒子发出的近距离放射线直接杀伤肿瘤组织的一种新的治疗手段[1].我院自2003年以来,成功实施了9例此类手术,均取得了满意的近期疗效.现将开展此疗法的手术配合经验报道如下.
作者：刘长征；胡静；张喜娟；刘睿 刊期： 2005年第05期
目的:建立爪蟾卵母细胞双电极电压钳记录技术.方法:在去除滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞上,建立双电极电压钳记录技术,并使用该技术观察爪蟾卵母细胞表达的内源性递质门控性和电压门控性离子通道电流.结果:灌流液中分别加入NMDA受体、γ-氨基丁酸和烟碱受体激动剂,均未能在爪蟾卵母细胞上诱发出电流.去极化刺激仅可诱发出一外向电流.此电流的幅度随细胞外液中Ca2+浓度的增加而增大.当外液中无Ca2+或无Cl-时,电流消失.此电流不被TEA所阻断,但能被MnCl2可逆性阻断.结论:成功建立了爪蟾卵母细胞双电极电压钳记录技术.去极化刺激在爪蟾卵母细胞上诱发出的外向电流为钙依赖性Cl-电流.
作者：刘晓燕；郑建全；艾平；张树卓；李立君；翁谢川 刊期： 2005年第05期
军事医学杂志
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