彭涛；温晓雪；王林；刘靖；金义光；杨建云
目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDIs)诱导肿瘤细胞产生周期阻滞以及诱导p21WAF1/CIP1表达的分子机制.方法:以人宫颈癌HeLa细胞为模型,用曲古抑菌素A(TSA)处理HeLa细胞,通过流式细胞术检测细胞周期及凋亡,通过Western印迹及RT-PCR检测周期相关分子的蛋白及mRNA的表达;并构建TSA靶分子启动子区的荧光素酶报告质粒,进一步检测TSA的主要作用位点,寻找相关作用途径.结果与结论:TSA可诱导HeLa细胞发生周期阻滞,并呈现明显的剂量和时间依赖关系,加大用药剂量及延长用药时间可诱导凋亡.TSA可显著诱导p21WAF1/CIP1的表达,表现为转录水平的调节,其变化可以指示周期阻滞的程度.p21WAF1/CIP1启动子区3′端是TSA作用的主要位点,同样被TSA诱导表达增加的p53很可能通过与其效应元件的结合而使TSA诱导p21WAF1/CIP1表达的总效果增强.
作者：赵国伟；宋宜；董燕；钱俊杰；梅柱中；田宝磊；张应玖；孙志贤 刊期： 2005年第05期
目的:对夏枯草中化学组成进行薄层层析,研究具有抗菌作用的有效部位.方法:采用95%乙醇和水连续浸提夏枯草分别获得醇提(A)和水提浸膏(B).醇提浸膏用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水连续萃取,获得不同萃取部分(A-a,A-b,A-c,A-d);水提物采用3倍乙醇沉淀分为醇溶部分(B-a)和醇不溶部分(B-b),然后对其进行薄层层析.采用2倍稀释法比较夏枯草各萃取部分的体外抗菌活性.结果:醇提物中的水溶部分(A-d)对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌均有抗菌作用.结论:夏枯草具有抗菌作用.
作者：董剑英；杨静；赵春芝；单俊杰；王宏军 刊期： 2005年第05期
血小板生成素(TPO)是一种重要的细胞因子,不仅在巨核细胞增殖、成熟和血小板产生中发挥主要的调控作用,而且参与造血干细胞自我更新和分化的调节.TPO与其受体c-Mpl结合后,c-Mpl形成同源二聚体,激活JAK/STAT、Shc/Ras/MAPK、PI3K/Akt等信号通路,引发一系列生理效应.本文主要对TPO、TPO受体蛋白的结构及其介导的信号转导通路等方面的研究进展作一综述.
作者：刘红岩；从玉文；毛秉智 刊期： 2005年第05期
目的:检测并鉴定感染组织中的克里米亚-刚果出血热病毒.方法:分别经皮下与腹腔两种途径感染乳小鼠;应用RT-PCR技术对病毒核酸进行检测;利用透射电镜超薄切片技术对病毒进行形态学鉴定.结果:RT-PCR可在心脏、肝脏、脾脏、肾脏以及脑组织内检测到病毒核酸,透射电镜下可在肝细胞胞浆内观察到形态典型的病毒粒子.结论:应用RT-PCR技术可以对感染组织中的克里米亚-刚果出血热病毒进行检测,利用透射电镜可以对病毒的形态进行观察与鉴定.
作者：赵晓冬；王翠娥；李豫川；吴小红；曹军田；严格；李金凤 刊期： 2005年第05期
目的:建立爪蟾卵母细胞双电极电压钳记录技术.方法:在去除滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞上,建立双电极电压钳记录技术,并使用该技术观察爪蟾卵母细胞表达的内源性递质门控性和电压门控性离子通道电流.结果:灌流液中分别加入NMDA受体、γ-氨基丁酸和烟碱受体激动剂,均未能在爪蟾卵母细胞上诱发出电流.去极化刺激仅可诱发出一外向电流.此电流的幅度随细胞外液中Ca2+浓度的增加而增大.当外液中无Ca2+或无Cl-时,电流消失.此电流不被TEA所阻断,但能被MnCl2可逆性阻断.结论:成功建立了爪蟾卵母细胞双电极电压钳记录技术.去极化刺激在爪蟾卵母细胞上诱发出的外向电流为钙依赖性Cl-电流.
作者：刘晓燕；郑建全；艾平；张树卓；李立君；翁谢川 刊期： 2005年第05期
莫达非尼(modafinil)于1994年首次在法国上市,商品名Modiodal,用于治疗发作性睡眠症和嗜睡性多眠症,其化学结构见图1.莫达非尼的药理特征不同于拟交感神经药物,而与脑中抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的减少有关,并对5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素有调控作用[1].1998年莫达非尼先后于英国和美国上市,多年来的临床使用表明该药不良反应较小,疗效确切[2].目前国内尚无莫达非尼产品上市,在原料药合成工艺的质量控制研究中,我们建立了莫达非尼原料药含量的高效液相色谱测定法.
作者：彭涛；温晓雪；王林；刘靖；金义光；杨建云 刊期： 2005年第05期
目的:研究COBRA1(cofactor for BRCA1)在雌激素受体α(ERα)信号途径中的潜在作用.方法: 用GST pull-down实验检测COBRA1与ERα的相互作用、定位相互作用的区域,探讨不同配体对相互作用的影响.用免疫共沉淀方法检测COBRA1与ERα在细胞内的相互作用.利用含有雌激素应答元件(estrogen responsive element, ERE)的荧光素酶(luciferase, LUC)报告基因(C3-LUC)检测COBRA1对ERα转录活性的影响.结果:在体内外,COBRA1与ERα存在相互作用,COBRA1和ERα的中间区域是它们相互作用的区域.抗雌激素可增强COBRA1与ERα的结合.COBRA1以激素依赖方式抑制ERα的转录活性.结论:COBRA1是一新型ERα共抑制因子,可能在ERα信号途径中起重要作用.
作者：叶棋浓；丁丽华；朱建华；黄翠芬；李熔 刊期： 2005年第05期
肝再生增强因子是一种新的肽类肝细胞辅助丝裂原,能促进肝再生.其同源基因广泛存在于各种生物体中.本文从肝再生增强因子的基因克隆与分子结构、组织分布与分泌方式、受体分布与信号转导和生物活性等方面进行综述,以加深对肝再生机制的了解.
作者：张勇；宋良文 刊期： 2005年第05期
微波剂量学是对沉积在生物体内的微波能量及其分布的物理量度.它通常用比吸收率(SAR)来表示生物效应和作为防护限值量,SAR不仅与入射微波有关,还与生物体的电特性、尺寸、形状、结构有关.本文综述了几种确定SAR的实验方法,包括能差法、电场法、测温法、量热法和热像法,并对其用途和误差来源进行了分析.
作者：周红梅；苏镇涛；杨国山 刊期： 2005年第05期
目的:评价普氏立克次体120×103表面抗原的N端和C端重组蛋白的免疫原性.方法: 将纯化的N端和C端重组蛋白分别免疫小鼠,采用酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光试验分析免疫小鼠的体液免疫应答水平;用MTT法评价小鼠脾淋巴细胞的增殖情况,分析免疫小鼠的细胞免疫应答水平,并采用RT-PCR方法检测免疫小鼠脾淋巴细胞被重组蛋白刺激后细胞因子的表达.结果: N端和C端重组蛋白均诱导小鼠产生较高水平的特异性IgG抗体,诱导高水平的小鼠脾淋巴细胞增殖;经两种重组蛋白刺激的小鼠脾淋巴细胞均表达了IFN-γ和IL-2.结论: 普氏立克次体120×103表面抗原的N端和C端重组蛋白具有良好的免疫原性,能够诱导机体产生高水平的体液免疫和细胞免疫应答,可作为流行性斑疹伤寒亚单位疫苗的候选蛋白.
作者：高宁；温博海；张军；陈梅玲；邱玲；牛东升 刊期： 2005年第05期
目的:对手术舱室建立超压防护,按照夏、冬两季不同应用地区的气候环境设计手术舱室制冷与供热系统.方法:根据压力平衡下手术舱室漏气量与新风补充量相等的原理实现超压防护设计;根据手术舱室的冷热负荷设计空调与暖风系统的总体结构,运用计算流体动力学方法进行手术舱室内温度环境仿真.结果:手术舱能够保持300 Pa以上的超压防护;仿真结果表明制冷与供热系统的设计方案能够使手术舱室内温度保持在(25±3)℃,人体操作区的微风速在0.5 m/s以下.结论:手术舱室能够满足静止状态下的内部超压指标要求,以及医疗作业对手术舱室温度环境的总体要求.
作者：刘亚军；徐新喜；谭树林；祁建城；李若新 刊期： 2005年第05期
目的:探索p21被蛋白激酶A(PKA)磷酸化修饰后对其泛素化修饰和稳定性的影响.方法:构建p21可能磷酸化位点的突变体p21 T145A,观察PKA体外磷酸化修饰p21;Western印迹分析PKA特异性抑制剂H89对p21稳定性的影响;通过免疫沉淀分析H89对p21泛素化修饰的影响以及p21 Thr 145突变前后和Skp2结合能力的变化.结果:PKA体外磷酸化修饰p21的Thr 145;PKA特异性抑制剂H89能够提高p21的稳定性并抑制p21的泛素化修饰;野生型(wild) p21比p21 T145A结合Skp2的能力强.结论:PKA磷酸化修饰p21的Thr145后导致其结合E3连接酶结合亚基Skp2的能力增强,从而促进p21的泛素化修饰,导致p21稳定性的降低.
作者：钱俊杰；孙国敬；宋宜；梅柱中；董燕；刘斌；孙志贤 刊期： 2005年第05期
目的: 检测Cre重组酶在心肌细胞特异性Cre重组酶转基因小鼠(α-MHC-Cre)中的组织分布及其在体内介导基因重组的作用. 方法:将α-MHC-Cre转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,利用LacZ染色对双转基因阳性子代小鼠进行检测.然后,将α-MHC-Cre小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠交配,利用PCR和Southern杂交对Cre重组酶介导重组的组织特异性进行检测.结果:LacZ染色表明,Cre重组酶只在心肌细胞中特异性表达并介导ROSA位点LoxP序列间的重组.PCR和Southern结果显示Cre重组酶只在心肌细胞中特异地剔除了Smad4基因,进一步验证了Cre重组酶在心肌细胞中发挥介导LoxP位点重组的作用. 结论:α-MHC-Cre转基因小鼠具有良好的组织特异性,只在心肌细胞中表达Cre重组酶,并能在体内成功地介导心肌细胞基因组上LoxP位点间的重组,是一种理想的研制心肌细胞特异性基因剔除小鼠的工具小鼠.
作者：王剑；张继帅；侯宁；滕艳；程萱；杨晓 刊期： 2005年第05期
目的:获得小鼠脂联素(adiponectin,ADPN)在肝脏的高效稳定表达,方法:构建含肝脏特异性启动子hAATp和增强子ApoEHCR的小鼠脂联素基因(mAd)的真核表达载体pAA-neo-mAd.以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)为报告基因证明该载体在COS-7细胞中表达后,流体动力法(hydrodynamics-based procedure)通过尾静脉注射将其导入小鼠肝脏,通过肝脏mAd mRNA定量(半定量RT-PCR法)、免疫组织化学检测及血清脂联素水平测定(定量ELISA法)鉴定脂联素在肝脏的表达及表达效率.结果:肝组织RT-PCR的结果显示,注射后12 h肝脏内即可检测到mAd mRNA的表达,且能持续表达6周以上.24 h后血清脂联素水平显著升高,48 h达到峰值,一直持续6周后仍明显高于正常水平.肝脏脂联素免疫组化染色呈阳性.结论:流体动力法能有效地将质粒载体pAA-neo-mAd导入小鼠肝脏,并能在小鼠肝脏高效稳定地表达重组小鼠脂联素.
作者：王会中；付秋霞；陈竞新；贾帅争；詹林盛；孙红琰；王全立 刊期： 2005年第05期
目的:建立新分离呼肠病毒(reovirus)的空斑技术,进行病毒纯化,为呼肠病毒生物学和分子生物学的研究奠定基础.方法: 4株新分离呼肠病毒的早代毒种经L929细胞连续传代,当产生细胞病变后进行空斑试验,加营养琼脂培养6 d后加中性红,24 h内挑取空斑,扩增一次后做PCR鉴定.取呼肠病毒PCR阳性病毒进行第2次克隆纯化.结果:4株新分离呼肠病毒经L929细胞连续传2～4代,均能观察到明显的细胞病变.用10-3和10-4接种L929单层细胞,第6～7天均能产生空斑,空斑呈圆形,直径为0.2～1.0 mm,并分别测定其空斑滴度(PFU/ml).两次纯化后进行PCR检测,呼肠病毒基因扩增阳性、脊髓灰质炎病毒基因扩增阴性.结论:4株呼肠病毒的空斑出斑规律,通过两次克隆,获得纯化的病毒.
作者：苏裕心；何君；朱虹；宋立华；黄如统；端青 刊期： 2005年第05期
作者： 刊期： 2005年第05期
泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway, UPP)是细胞内降解蛋白质的重要途径,与细胞多种生理功能调节密切相关.本文主要论述了SCF(Skp-cullin-F-box protein)泛素化途径及对原癌基因c-myc产物的降解调控作用.
作者：安静；周平坤 刊期： 2005年第05期
目的:探讨HBV转录调控核心序列在肝细胞中转录的活性.方法:构建HBV增强子和启动子调控的荧光素酶报告载体,用脂质体转染法将其转染肝细胞和非肝细胞,双荧光素酶报告基因试验检测其在不同细胞中的转录活性.结果:HBV启动子在2.2.15细胞中转录活性高,在其他肝细胞中的转录活性显著高于非肝细胞.结论:由HBV启动子构建的载体可能是一种新颖的有前景的靶向性肝癌细胞基因治疗载体.
作者：孙强玲；杨义军；付汉江；杨明；铁轶；朱捷；孙志贤；郑晓飞 刊期： 2005年第05期
环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在乳腺癌组织中表达水平比其在正常乳腺组织和乳腺良性疾病组织中表达水平高,且和乳腺癌预后有一定关系.COX-2可通过多种途径影响乳腺上皮细胞的代谢和演变.本文综述了COX-2在乳腺癌演变过程中的变化规律和作用机制.
作者：朱坤兵；尉承泽；黄焰 刊期： 2005年第05期
毫米波是频率介于30～300 GHz之间的高频电磁波.毫米波技术在军事、医学等领域的广泛应用,特别是非杀伤性毫米波武器的出现,引起人们对毫米波损伤效应及安全防护研究的极大关注.毫米波由于组织穿透能力差(不足1 mm),直接照射一般只能造成角膜、皮肤等的损伤,但大剂量全身照射也可引发循环衰竭而致死.本文介绍了毫米波照射引起的角膜、皮肤损伤及致死效应.
作者：杨在富；钱焕文 刊期： 2005年第05期
军事医学杂志
主管:军事医学科学院
主办：军事医学科学院
