吴晓江；王殮；季加孚
肺癌侵袭和转移是多基因、多步骤共同作用的结果,协同促进了细胞癌变、侵袭和转移.其中肿瘤转移抑制基因结构和功能异常,导致对肿瘤转移表型的失调控,终导致肿瘤转移.近年来细胞水平和组织水平的研究表明nm23-H1为肿瘤转移抑制基因(tumor metastasis suppressor genes),与肺癌细胞的转移潜力密切相关.本研究利用基因转染技术,通过体外实验研究nm23-H1对nm23-H1基因缺失肺癌细胞株L9981转移表型的影响,初步探讨nm23-H1基因对肺癌的治疗价值,以期为肺癌的基因治疗提供客观依据.
作者：郑海霞；申东兰；周清华；何艳玲；彭安；朱文；王艳萍 刊期： 2005年第03期
目的:探讨促纤维增生性小圆细胞肿瘤(DSRCT)石蜡包埋组织中EWS-WT1融合基因表达的临床病理意义及其应用价值.方法:收集DSRCT石蜡包埋组织4例,原始神经外胚叶瘤/尤文肉瘤(PNET/ES)2例,腺泡状横纹肌肉瘤2例,淋巴瘤2例,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测t(11;22)(p13;q12)染色体易位融合基因EWS-WT1的表达.结果:4例DSRCT中有3例检测出融合基因的表达,对照组均没有检测出.结论:DSRCT石蜡包埋组织中检测EWS-WT1融合基因的表达具有较好的敏感性和特异性,可作为临床病理诊断和鉴别诊断DSRCT的一个可靠的基因诊断指标.
作者：杨郁；王华；王玉萍；张伟；回允中；王子慧；郑杰 刊期： 2005年第03期
研究恶性肿瘤的重要材料就是肿瘤标本,但长期以来国内始终没有建立起切实可行、规范的科研型标本库,未形成规范的标本保存方法.北京大学临床肿瘤学院标本库始建于1996年,其职责是采集、保存和利用人类常见肿瘤的组织和血液标本,并对其进行科学的管理和质量控制.目的是充分利用医院现有的肿瘤标本资源,为人类疾病的基础和临床研究提供材料.标本库于2000年底改建,在外科、手术室、病理科的配合下,现已初步形成标准化、规范化的样本采集、储存和管理体系.目前库存常见肿瘤标本3 000多份,近5年增加了血清标本的保存项目,现已库存常见肿瘤血清标本2 000份.
作者：季加孚 刊期： 2005年第03期
目的:研究胃癌患者手术前后外周血浆、对应原发肿瘤以及癌旁组织中p16基因启动子区异常甲基化的检出状况,探讨其在胃癌疗效评估中的应用.方法:采用甲基化特异性PGR方法,扩增84例胃癌患者的原发肿瘤、癌旁组织、手术前血浆中pl6基因启动子区,以及上述患者中30例行胃癌根治性手术患者术后14～21天血浆中p16基因启动子区,以15例健康人血浆作为正常对照.采用凝胶电泳-溴乙锭显色以及高效液相色谱两种方法检测产物.结果:84例患者样品中,原发肿瘤中存在pl6基因异常甲基化26例(31.0%),癌旁组织中阳性2例(0.02%),术前血浆中阳性12例(14.3%),15例健康人血浆检测均为阴性.患者血浆阳性者同时也存在对应肿瘤组织阳性.30例同时有手术前后血浆标本的胃癌根治手术患者中,原发肿瘤组织中p16异常甲基化14例,其中6例术前血浆阳性,术后5例转阴.在检测样本中,高效液相色谱的检测结果与凝胶电泳-溴乙锭显色结果一致.结论:胃癌患者外周血浆中可以检测到与原发肿瘤一致的p16异常甲基化,手术后血浆中p16甲基化状态的变化与手术治疗有关,高效液相色谱作为一种便捷的技术可以应用于PCR产物的检测.
作者：刘亚航；张连海；任晖；张桂国；秦斐；孔广忠；邓国仁；季加孚 刊期： 2005年第03期
目的:探讨氟[18F]-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)双探头符合线路单光子发射型计算机断层(SPECT)双时相显像鉴别病变性质的临床应用价值.方法:30例病变性质不明的患者进行18F-FDG符合线路SPECT双时相显像,早期显像在注射18FDG后1 h进行,延迟显像分为2组,一组时间间隔为3.5 h,另一组时间间隔为4.5 h.结果:30例患者(1例患者行2次双时相显像)共检出48个病灶,其中恶性病变30个,良性病变18个,均经病理活检证实或临床随访确诊.用定性法分析,双时相显像的灵敏度96.7%,特异性83.3%,准确率91.7%,阳性预测值90.6%,阴性预测值93.8%.符合线路SPECT早期显像和CT检查的灵敏度、特异性、准确率、阳性预测值、阴性预测值分别为93.3%,72.2%,85.4%,84.8%,86.7%与76.9%,57.1%,70.0%,76.9%,57.1%.所有恶性病变(除1例假阴性病变外)延迟显像T/NT均明显升高(t=-3.071,P＜0.01),而良性病变延迟显像与早期显像T/NT差异无统计学意义(t=0.398,P=0.695).结论:18F-FDG符合线路SPECT双时相显像有利于良、恶性病变鉴别,并有助于提高病变诊断的特异性及准确率.
作者：王荣福；张建华；张春丽；范岩；付占立；张旭初；胡怀湘；何晓坤；林景辉；郭凤琴；赵光宇；王彦福；田红 刊期： 2005年第03期
目的:探讨组织因子促进人类大肠癌细胞侵袭的机制,研究其与MMP-2和MMP-9的相关性.方法:获取转染正义/反义TFcDNA的人类大肠癌HT-29细胞系/LoVo细胞系裸鼠皮下种植瘤标本,应用Western blot和RTPCR技术,检测转染组和对照组肿瘤组织中MMP-2和MMP-9的蛋白和mRNA表达水平;同时采用明胶酶谱法检测转染反义LoVo细胞系培养上清中的MMP-2和MMP-9活性的变化.结果:与对照组相比较,转染正义TFcDNA的HT-29细胞系成瘤标本TF表达升高,其所对应的MMP-9和MMP-2蛋白水平和mRNA水平表达也明显升高;转染反义TFcDNA的LoVo细胞系成瘤标本中的TF,MMP-9和MMP-2蛋白和mRNA水平表达明显低于对照组,转染反义TFcDNA的LoVo细胞系培养上清液中的MMP-9和MMP-2活性较对照组低;MMP-9和MMP-2表达与组织因子表达具有相关性.结论:组织因子促进人类大肠癌细胞的侵袭,其部分机制可能与组织因子上调MMP-9和MMP-2的表达有关,组织因子可能是大肠癌细胞分泌MMPs的内在激动剂.
作者：汤坚强；万远廉；刘玉村；戎龙；汪欣；吴涛；潘义生；叶京明；姚宏伟；朱静 刊期： 2005年第03期
目的:探讨孤儿受体ERRα与雌激素(E)、孕激素(P)之间的相互关系及其在子宫内膜癌发病中的作用.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测不同浓度(10-10,10-8,10-6mol/L)17β-雌二醇(17β-E2)作用于Ishikawa细胞系不同时间(0 min,15 rmin,30 min和24 h)后ERRα mRNA的变化,并应用ER拮抗剂ICI182780同时作用细胞,观察是否可阻断E2对ERRα的调控作用;检测不同浓度孕酮(10-8,10-7,10-6,10-5mol/L)作用于Ishikawa细胞系24 h后ERRα mRNA的变化.结果:10-10mol/L 17β-E2作用于Ishikawa细胞系15 min,30 min及24 h后ERRα mRNA水平与未加E2相比均稍有增加,而10-8,10-6mol/L 17β-E2作用于细胞系15 min,30 min及24 h后ERRα mRNA明显减小,以10-8mol/L作用后减少明显.同时加入E2和ICI182780作用于细胞系后,E2对ERRα mRNA的减小作用被阻断.10-8mol/L孕酮作用于细胞系24 h后,ERRα mRNA与对照组相比无明显变化,但加入10-7,10-6和10-5mol/L孕酮后,ERRα mRNA表达均出现明显增加.结论:17β-E2可减少子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞ERRα mRNA的表达,此减少作用是通过ER介导完成的.孕酮可增加ERRα mRNA的表达.
作者：高敏；魏丽惠；孙蓬明；王建六；赵丹；赵超；王志启 刊期： 2005年第03期
目的:探讨血清可溶性白细胞介素2受体(solubility interleukin receptor,sIL-2R)表达水平与急性淋巴细胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)复发的关系.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法,检测48例ALL患者初诊、复发未治疗前及第1次完全缓解后sIL-2R表达水平.结果:ALL初诊组和复发组sIL-2R表达水平显著高于正常对照组,而在ALL缓解组与正常人比较,差异没有统计学意义;初诊或复发组患者sIL-2R水平显著高于缓解组;动态观察30例患者发现,治疗有效达到完全缓解时sIL-2R水平明显下降,而病情复发时患者sIL-2R水平显著上升,sIL-2R水平上升出现在骨髓细胞形态学确诊之前一个月左右.结论:动态检测完全缓解后患者sIL-2R表达水平,有利于ALL复发早期诊断.
作者：柳金；吴登蜀；张伸；阎晨华；周宇；张永顶；齐振华 刊期： 2005年第03期
目的:分析胃癌中11种CT抗原(cancer/testis antigen)基因的表达分布及NY-ESO-1蛋白引发的自身体液免疫应答,为胃癌的特异性肿瘤疫苗治疗提供依据.方法:利用RT-PCR方法,检测101例胃癌患者肿瘤标本和对应正常胃黏膜中11种CT抗原基因的表达.ELISA方法检测抗NY-ESO-1抗体.利用NY-ESO-1的单抗E978,应用免疫组化方法检测组织切片中NY-ESO-1抗原物质.结果:101例胃癌患者中,74.3%的患者至少表达1种检测的CT抗原基因.12例患者表达NY-ESO-1 mRNA,5例可以检测到NY-ESO-1抗原蛋白以及针对NY-ESO-1抗原的体液免疫反应.结论:胃癌中表达多种CT抗原基因,表达率较高的MAGE-3,SSX-4和NY-ESO-1/LAGE-1蛋白等可作为肿瘤疫苗的备选抗原,其中NY-ESO-1蛋白的免疫原性得到验证.CT抗原的多价肿瘤疫苗在胃癌治疗中具有一定的可行性.
作者：吴晓江；王殮；季加孚 刊期： 2005年第03期
目的:分析病人白血病细胞染色体畸变涉及的86种融合基因和临床白血病类型的相关性,探讨常见融合基因筛查法在临床诊断和分型中的应用价值.方法:收集161例初发或者复发的白血病患者及8例骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓细胞,提取RNA,用32条特异性引物逆转录为cDNA,利用白血病29种染色体畸变形成的融合基因的86种mRNA剪接变异体引物,分8管进行多重RT-PCR,筛查白血病融合基因.结合临床状态和形态学观察了解融合基因与白血病类型的关系.结果:白血病中115例(71%)分别检测出10种白血病常见融合基因,包括AMLl/ETO、PML/RARα、PLZF/RARα、dupMLL、MLL/AF6、MLL/AF10、CBFβ/MYHll、BCR/ABL、Hoxll、Evil.其中52例慢性粒细胞白血病(CML)100%检出BCR/ABL;25例急性早幼粒细胞白血病(APL)中88%检出融合基因,其中21例APL检测出PML/RARα,1例APL检测出PLZF/RARα;AMLl/ETO阳性的17例急性白血病(AL)16例为FAB-M2亚型,1例为混合型白血病;CBFβ/MYH11阳性的4例AL 3例为FAB分型的M4,1例为M5,属于向粒单细胞系统分化的白血病.16例AL检测出MLL基因异常,其中MLL/AF6白血病均为FAB分型的M5,具有典型的原始单核细胞白血病的特征.17例急性淋巴细胞白血病(ALL)5例检测出BCR/ABL.8例MDS病人中2例检测出融合基因,其中AMLl/ETO阳性的MDS-RAEB很快发展为AML.结论:这种以多重RT-PCR为基础的白血病常见融合基因筛查法可以准确、快速而且可靠地确定白血病的分子类型,提供白血病诊断和治疗的依据.
作者：祝毓琳；张英；朱平；杨英；杜金伟；刘静 刊期： 2005年第03期
经典的雌激素受体(estrogen receptorα,ERα)发现20年来,对乳腺癌的治疗和预后产生了重要影响[1].1996年一种新的雌激素受体亚型,即雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)在人睾丸组织中发现[2].它在乳腺癌组织中的表达引起了广泛关注,推测其可能对乳腺癌的发生、治疗和预后判断具有重要意义.因此我们以回顾性研究为主探讨了雌激素受体亚型ERβ在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.
作者：冯娟；虞有智；谢大鹤 刊期： 2005年第03期
目的:研究氟尿嘧啶代谢相关酶在原发性结直肠癌的表达及临床意义.方法:收集北京大学临床肿瘤学院2003年8月至2004年2月收治的经病理确诊的61例原发性结直肠癌患者的标本,应用RT-PCR方法检测原发性结直肠癌组织和非肿瘤组织中胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)、二氢胸腺嘧啶脱氢酶(dihydropyrimidinedehydrogenase,DPD)、乳清酸磷酸核糖基转移酶(orotate phosphoribosyl transferase,OPRT)的基因表达.结果:每种酶在肿瘤组织和非肿瘤组织中的基因表达水平存在正相关.肿瘤组织与非肿瘤组织相比,TS和DPD表达近似.结直肠癌肿瘤组织中OPRT表达水平是非肿瘤组织中OPRT表达水平的4.38倍(P=0.000),OPRT的表达量在黏液腺癌中是低的,在低分化腺癌中是高的.肿瘤组织/非肿瘤组织OPRT表达量的比值(TOPRT/NoPRT)与淋巴结转移(r=0.36;P=0.005)、脉管转移(r=0.26;p=0.041)和组织学分化(r=-0.33;P=0.009)具有相关性.结论:采用RT-PCR法检测三种酶在结直肠癌中的表达切实可行,有良好的临床应用前景.提示OPRT可能是潜在的结直肠癌预后指标.
作者：王华；董培德；张连海；季加孚 刊期： 2005年第03期
目的:探讨c-kit基因和PDGFRA基因在我国胃肠道间质瘤(GIST)中的突变状况.方法:用PCR扩增和直接测序的方法,检测60例GIST c-kit基因9号、11号、13号和17号外显子突变以及PDGFRA基因12号和18外显子突变.结果:60例GIST中kit基因突变率为63.3%,绝大多数为杂合性突变,少数为纯合性突变.其中以编码近膜区的11号外显子突变为常见(58.3%);其次为编码胞外区的9号外显子突变(3.3%);偶见编码胞内酪氨酸激酶结构域的13号外显子突变(1.7%),是一个新的突变位点L641P;未检出17号外显子突变.11号外显子的突变位点多集中在5'端的经典热点(42.9%),表现为密码子第557-560的点突变和框内缺失.第二个热点位于11号外显子的3'端,为框内串联重复.后者主要发生在胃部,女性患者多见.60例GIST中PDGFRA基因突变率为5%,表现为编码胞内酪氨酸激酶结构域的18号外显子D842V点突变,且均为CD117阴性.未见编码近膜区的12号外显子突变.结论:CD117阳性GIST主要表现为c-kit突变,分布在11号外显子经典热点和3'端热点,后者与老年女性胃GIST相关.PDGFRA基因突变主要见于CD117阴性GIST,多发生在后腹膜,具高度侵袭危险性.
作者：贺慧颖；项一宁；李燕；钟镐镐；吴秉铨；郑杰 刊期： 2005年第03期
目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白质β(lysosome-associated protein transmembrane4 beta,LAPTM4B)基因多态性与肺癌易感性的关系.方法:以病例-对照研究的方法,用基于特异性引物的PCR对134例正常人和162例肺癌患者进行LAPTM4B基因分型,将卡方检验用于检测肺癌组和对照组基因型频率和其它参数的分布.结果:LAPTM4B的*2等位基因频率在肺癌组中为40.1%,较对照组(28.0%)显著增高(P=0.002).基因型分布在肺癌组和对照组间差异有统计学意义.*1/2和*2/2基因携带者患肺癌的危险性分别是*1/1的1.91倍(95%CI:1.178～3.110)与3.26倍(95%CI:1.338～7.929).LAPTM4B基因型分布与患者年龄,肺癌的病理类型,分化程度,临床分期以及HBV感染等无明显关系.结论:LAPTM4B基因多态性与肺癌易感性相关,* 2等位基因可能是肺癌发生的危险因素.
作者：邓丽娟；张青云；刘波；周柔丽 刊期： 2005年第03期
神经淋巴瘤病(neurolymphomatosis,NL)是指非霍奇金淋巴瘤浸润周围神经系统,临床表现以周围神经损害为主,病理检查可以发现肿瘤细胞在神经组织浸润伴随有髓神经纤维轴索或髓鞘损害.本文报道1例通过神经活检证实的神经淋巴瘤病.
作者：毕鸿雁；那佳；臧贵明；张巍；袁云 刊期： 2005年第03期
目的:研究金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERα,ERβ mRNA的调节作用,探讨植物雌激素对子宫内膜癌的作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据.方法:体外培养子宫内膜癌细胞系Ishikawa,采用实时荧光定量RT-PCR方法,观察不同剂量金雀黄素对两种雌激素亚型表达的影响,阳性对照为雌二醇、孕酮作用组.结果:(1)低剂量金雀黄素能提高子宫内膜癌细胞ERα mRNA表达,但其作用较雌二醇明显弱;低剂量金雀黄素能降低ERβ mRNA的表达,而雌二醇对ERβ mRNA作用不明显.(2)高剂量金雀黄素的作用与孕酮相似,能下调子宫内膜癌细胞ERα mRNA和ERβ mRNA表达,但较孕酮作用弱.结论:金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERα mRNA和ERβ mRNA的表达作用不同,而且与其剂量有一定关系.推测金雀黄素有雌激素受体调节剂的作用.
作者：薛晓鸥；魏丽惠 刊期： 2005年第03期
目的:研究肿瘤相关抗原HCA520对HEK293细胞增殖的影响,获得HCA520生物学功能的初步提示.方法:构建pcDNA3-HCA520-flag真核表达载体转染HEK293细胞并建立稳定转染细胞系,利用MTT实验观察HCA520对HEK293细胞增殖速率的调节.通过RT-PCR检测可能参与HCA520对HEK293细胞增殖促进作用的相关分子,并用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑(MTT)实验进一步验证目标分子对HEK293细胞增殖的作用.结果:MTT实验结果显示HCA520显著提高HEK293细胞的增殖速率,HCA520上调白细胞介素-6在HEK293细胞中的表达,后者部分参与HCA520对HEK293细胞的促增殖作用.结论:HCA520对HEK293细胞的增殖具有促进作用,并推测可能通过促进细胞恶性增殖在肿瘤发生中发挥作用.
作者：钱晓萍；李国栋；韩克军；陈慰峰 刊期： 2005年第03期
目的:探讨α1肾上腺素能受体拮抗剂多沙唑嗪对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3在裸鼠体内生长的影响及其作用机制.方法:建立前列腺癌细胞系PC-3的裸鼠体内移植瘤模型,将30只荷瘤裸鼠随机分为5组[A组(对照组),B组(多沙唑嗪3 mg/kg),C组(多沙唑嗪10 mg/kg),D组(多沙唑嗪30 mg/kg),E组(多沙唑嗪100mg/kg)].接种肿瘤细胞1周后每天1次灌胃给药,每周测量肿瘤体积2次,给药2周后处死裸鼠,取肿瘤组织做免疫组织化学Ki67及细胞凋亡DNA原位标记法(TUNEL法)检测,并用免疫印迹法研究蛋白Smad-4及IκBα在各组肿瘤组织中的表达情况.结果:多沙唑嗪给药组肿瘤体积较对照组显著缩小,肿瘤的重量较对照组亦显著减轻,而不同剂量的多沙唑嗪给药组间肿瘤大小差异无统计学意义.免疫组织化学结果显示前列腺癌细胞Ki67的阳性率在A至E组依次为36.5%±8.5%,37.7%±11.3%,40.1%±12.7%,37.2%±12.3%,39.3%±13.1%,各组间差异无统计学意义(P＞0.05);而前列腺癌细胞的TUNEL阳性率在A至E组依次为9.5%±3.5%,24.7%±8.3%,25.7%±9.7%,28.2%±12.1%,27.5%±11.3%,各用药组明显高于对照组(P＜0.01);免疫印迹结果表明用药组蛋白Smad-4及IκBα的表达显著高于对照组.结论:α1肾上腺素能受体拮抗剂多沙唑嗪对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3裸鼠体内移植瘤的生长具有明显抑制作用,其作用机制可能是药物诱导了前列腺癌细胞凋亡,对细胞的增殖并没有明显的影响;而TGF-β1信号转导通路的激活可能是多沙唑嗪引起前列腺癌细胞凋亡的重要机制.
作者：郭长勇；王晓峰；许克新；董建强；黄晓波；刘士军；徐涛；叶海云 刊期： 2005年第03期
目的:探讨人肺成纤维细胞、上皮细胞间以及与人肺癌细胞的细胞间隙连接通讯(gap junctional intercellular communication,GJIC)特性,以进一步了解GJIC在人肺癌发生、发展中的作用.方法:利用预标记荧光染料传输技术研究了人胚肺上皮类型细胞(HLEC)与人肺成纤维细胞HLF、肺癌PG细胞及其Cx43转染子PG/G4间的异源通讯,Cx43免疫荧光染色和Northern杂交分别检测Cx43蛋白和mRNA的表达.结果:尽管这些细胞除PG外都表达Cx43和具有强的同源通讯功能,但人肺上皮细胞HLEC与成纤维细胞间不能建立GJIC,上皮来源的人肺癌PG细胞与正常上皮细胞HLEC通讯功能缺陷;具有强的同源通讯功能的Cx43转染子PG/C4并未建立与上皮细胞间的通讯功能.结论:人肺不同类型细胞间的GJIC存在选择性,细胞癌变后丧失了与其来源一致的上皮细胞间的通讯,Cx43基因表达并不足以建立二种细胞间的GJIC.
作者：张志谦；胡颖 刊期： 2005年第03期
在过去的50年,医学的发展令人瞩目.多数传染性疾病得到了有效的控制,人类疾病谱发生了巨大变化,心血管病、恶性肿瘤成为严重威胁人类健康的主要疾病.根据统计推测,全球1990年全部肿瘤新发病例810万,死亡病例520万;2000年新发病例1 010万,死亡病例620万.预计到2020年全球肿瘤新发病例将达2 000万,死亡病例将达1 200万,成为全球大的公共卫生问题.
作者：游伟程 刊期： 2005年第03期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
