贺慧颖；项一宁；李燕；钟镐镐；吴秉铨；郑杰
肺癌侵袭和转移是多基因、多步骤共同作用的结果,协同促进了细胞癌变、侵袭和转移.其中肿瘤转移抑制基因结构和功能异常,导致对肿瘤转移表型的失调控,终导致肿瘤转移.近年来细胞水平和组织水平的研究表明nm23-H1为肿瘤转移抑制基因(tumor metastasis suppressor genes),与肺癌细胞的转移潜力密切相关.本研究利用基因转染技术,通过体外实验研究nm23-H1对nm23-H1基因缺失肺癌细胞株L9981转移表型的影响,初步探讨nm23-H1基因对肺癌的治疗价值,以期为肺癌的基因治疗提供客观依据.
作者：郑海霞；申东兰；周清华；何艳玲；彭安；朱文；王艳萍 刊期： 2005年第03期
目的:研究肿瘤相关抗原HCA520对HEK293细胞增殖的影响,获得HCA520生物学功能的初步提示.方法:构建pcDNA3-HCA520-flag真核表达载体转染HEK293细胞并建立稳定转染细胞系,利用MTT实验观察HCA520对HEK293细胞增殖速率的调节.通过RT-PCR检测可能参与HCA520对HEK293细胞增殖促进作用的相关分子,并用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑(MTT)实验进一步验证目标分子对HEK293细胞增殖的作用.结果:MTT实验结果显示HCA520显著提高HEK293细胞的增殖速率,HCA520上调白细胞介素-6在HEK293细胞中的表达,后者部分参与HCA520对HEK293细胞的促增殖作用.结论:HCA520对HEK293细胞的增殖具有促进作用,并推测可能通过促进细胞恶性增殖在肿瘤发生中发挥作用.
作者：钱晓萍；李国栋；韩克军；陈慰峰 刊期： 2005年第03期
目的:探讨组织因子促进人类大肠癌细胞侵袭的机制,研究其与MMP-2和MMP-9的相关性.方法:获取转染正义/反义TFcDNA的人类大肠癌HT-29细胞系/LoVo细胞系裸鼠皮下种植瘤标本,应用Western blot和RTPCR技术,检测转染组和对照组肿瘤组织中MMP-2和MMP-9的蛋白和mRNA表达水平;同时采用明胶酶谱法检测转染反义LoVo细胞系培养上清中的MMP-2和MMP-9活性的变化.结果:与对照组相比较,转染正义TFcDNA的HT-29细胞系成瘤标本TF表达升高,其所对应的MMP-9和MMP-2蛋白水平和mRNA水平表达也明显升高;转染反义TFcDNA的LoVo细胞系成瘤标本中的TF,MMP-9和MMP-2蛋白和mRNA水平表达明显低于对照组,转染反义TFcDNA的LoVo细胞系培养上清液中的MMP-9和MMP-2活性较对照组低;MMP-9和MMP-2表达与组织因子表达具有相关性.结论:组织因子促进人类大肠癌细胞的侵袭,其部分机制可能与组织因子上调MMP-9和MMP-2的表达有关,组织因子可能是大肠癌细胞分泌MMPs的内在激动剂.
作者：汤坚强；万远廉；刘玉村；戎龙；汪欣；吴涛；潘义生；叶京明；姚宏伟；朱静 刊期： 2005年第03期
研究恶性肿瘤的重要材料就是肿瘤标本,但长期以来国内始终没有建立起切实可行、规范的科研型标本库,未形成规范的标本保存方法.北京大学临床肿瘤学院标本库始建于1996年,其职责是采集、保存和利用人类常见肿瘤的组织和血液标本,并对其进行科学的管理和质量控制.目的是充分利用医院现有的肿瘤标本资源,为人类疾病的基础和临床研究提供材料.标本库于2000年底改建,在外科、手术室、病理科的配合下,现已初步形成标准化、规范化的样本采集、储存和管理体系.目前库存常见肿瘤标本3 000多份,近5年增加了血清标本的保存项目,现已库存常见肿瘤血清标本2 000份.
作者：季加孚 刊期： 2005年第03期
目的:研究金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERα,ERβ mRNA的调节作用,探讨植物雌激素对子宫内膜癌的作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据.方法:体外培养子宫内膜癌细胞系Ishikawa,采用实时荧光定量RT-PCR方法,观察不同剂量金雀黄素对两种雌激素亚型表达的影响,阳性对照为雌二醇、孕酮作用组.结果:(1)低剂量金雀黄素能提高子宫内膜癌细胞ERα mRNA表达,但其作用较雌二醇明显弱;低剂量金雀黄素能降低ERβ mRNA的表达,而雌二醇对ERβ mRNA作用不明显.(2)高剂量金雀黄素的作用与孕酮相似,能下调子宫内膜癌细胞ERα mRNA和ERβ mRNA表达,但较孕酮作用弱.结论:金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERα mRNA和ERβ mRNA的表达作用不同,而且与其剂量有一定关系.推测金雀黄素有雌激素受体调节剂的作用.
作者：薛晓鸥；魏丽惠 刊期： 2005年第03期
目的:总结射频消融(radiofrequency ablation,RFA)对肝恶性肿瘤的治疗效果,探讨并发症类型及处理措施.方法:对343例778个肝恶性肿瘤行582人次超声引导RFA治疗.其中原发性肝癌(HCC)212例,448个癌灶,肿瘤大径平均4.0 cm,根据国际抗癌协会的肿瘤分期,其中63例(29.7%)为Ⅰ～Ⅱ期,149例(70.3%)为Ⅲ～Ⅳ期(含43例手术切除后复发癌).肝转移癌(MLC)131例,330个癌灶,癌灶直径平均为3.9 cm,原发灶69.5%(91例)来自胃肠道.治疗原则为消融范围超过癌周0.5～1.0 cm;对较大肝肿瘤,采用较规范的计算方案指导射频治疗.治疗中密切观察图像异常改变,监测生命体征,以便及时发现出血及周围损伤.治疗后24 h内或1个月后增强CT检查肿瘤无活性为治疗成功.随访时间为2～62个月.结果:射频治疗成功率HCC为95.5%(428/448灶),MLC为96.4%(318/330灶);局部复发率分别为8.5%(38/448灶),11.8%(39/330灶).共有138例(40.2%)由于肿瘤复发或新生而进行2～11次治疗.随访343例1年、2年和3年的生存率,HCC分别为87.7%,67.4%和56.8%,其中63例早期癌分别为92.9%,82.8%,74.5%;MLC分别为81.6%,50.8%,27.2%.本组并发症的发生率占2.4%(14/582人次),多发生于治疗中或治疗后即刻,主要为机械性损伤、热损伤等,分别为出血5例,肠穿孔1例,邻近脏器结构损伤5例,胆汁瘘2例,皮肤烫伤1例.结论:RFA作为一种肝肿瘤的局部微创治疗方法,对早期肝癌可获得手术治疗效果;对中晚期肝癌、肝癌术后复发、肝转移癌等临床治疗困难的病例,也可提供有效而相对安全的治疗手段.重视并发症的表现并采用相应的对症处理措施,可提高患者生存质量,延长生存期.
作者：陈敏华；严昆；杨薇；高文；戴莹；王艳滨；张晖；霍苓；邢宝才；黄信孚 刊期： 2005年第03期
神经淋巴瘤病(neurolymphomatosis,NL)是指非霍奇金淋巴瘤浸润周围神经系统,临床表现以周围神经损害为主,病理检查可以发现肿瘤细胞在神经组织浸润伴随有髓神经纤维轴索或髓鞘损害.本文报道1例通过神经活检证实的神经淋巴瘤病.
作者：毕鸿雁；那佳；臧贵明；张巍；袁云 刊期： 2005年第03期
目的:探讨血清可溶性白细胞介素2受体(solubility interleukin receptor,sIL-2R)表达水平与急性淋巴细胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)复发的关系.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法,检测48例ALL患者初诊、复发未治疗前及第1次完全缓解后sIL-2R表达水平.结果:ALL初诊组和复发组sIL-2R表达水平显著高于正常对照组,而在ALL缓解组与正常人比较,差异没有统计学意义;初诊或复发组患者sIL-2R水平显著高于缓解组;动态观察30例患者发现,治疗有效达到完全缓解时sIL-2R水平明显下降,而病情复发时患者sIL-2R水平显著上升,sIL-2R水平上升出现在骨髓细胞形态学确诊之前一个月左右.结论:动态检测完全缓解后患者sIL-2R表达水平,有利于ALL复发早期诊断.
作者：柳金；吴登蜀；张伸；阎晨华；周宇；张永顶；齐振华 刊期： 2005年第03期
目的:研究龙葵总提取物对U266细胞的细胞毒作用及其机制.方法:U266细胞株与龙葵总提取物共同培养,用CCK-8试剂检测细胞毒作用;用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡.结果:龙葵总提取物对U266细胞有细胞毒作用,半数抑制(质量)浓度约为117 mg/L;龙葵总提取物影响U266细胞周期,G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡细胞增加.用Annexin V/PI染色及TFAR19染色流式细胞仪检测,均显示细胞凋亡与龙葵总提取物有剂量依赖关系.结论:龙葵总提取物对U266细胞有体外细胞毒作用,其作用机制部分是诱导细胞凋亡.
作者：王蔚；陆道培 刊期： 2005年第03期
目的:分析病人白血病细胞染色体畸变涉及的86种融合基因和临床白血病类型的相关性,探讨常见融合基因筛查法在临床诊断和分型中的应用价值.方法:收集161例初发或者复发的白血病患者及8例骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓细胞,提取RNA,用32条特异性引物逆转录为cDNA,利用白血病29种染色体畸变形成的融合基因的86种mRNA剪接变异体引物,分8管进行多重RT-PCR,筛查白血病融合基因.结合临床状态和形态学观察了解融合基因与白血病类型的关系.结果:白血病中115例(71%)分别检测出10种白血病常见融合基因,包括AMLl/ETO、PML/RARα、PLZF/RARα、dupMLL、MLL/AF6、MLL/AF10、CBFβ/MYHll、BCR/ABL、Hoxll、Evil.其中52例慢性粒细胞白血病(CML)100%检出BCR/ABL;25例急性早幼粒细胞白血病(APL)中88%检出融合基因,其中21例APL检测出PML/RARα,1例APL检测出PLZF/RARα;AMLl/ETO阳性的17例急性白血病(AL)16例为FAB-M2亚型,1例为混合型白血病;CBFβ/MYH11阳性的4例AL 3例为FAB分型的M4,1例为M5,属于向粒单细胞系统分化的白血病.16例AL检测出MLL基因异常,其中MLL/AF6白血病均为FAB分型的M5,具有典型的原始单核细胞白血病的特征.17例急性淋巴细胞白血病(ALL)5例检测出BCR/ABL.8例MDS病人中2例检测出融合基因,其中AMLl/ETO阳性的MDS-RAEB很快发展为AML.结论:这种以多重RT-PCR为基础的白血病常见融合基因筛查法可以准确、快速而且可靠地确定白血病的分子类型,提供白血病诊断和治疗的依据.
作者：祝毓琳；张英；朱平；杨英；杜金伟；刘静 刊期： 2005年第03期
目的:寻找与肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65(cancer and embryo expression protein 65,CEP65)相互结合的蛋白分子,为研究CEP65在肿瘤发生中的作用机制提供线索.方法:以CEP65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交方法,筛选人胚胎组织cDNA表达文库.将获得的阳性克隆cDNA片段分别克隆到原核和哺乳细胞表达质粒,通过GST pull-down和免疫共沉淀对相互作用蛋白作进一步验证.结果:筛选到能与CEP65相互结合的低密度脂蛋白受体相关蛋白产关联蛋白(low density lipoprotein receptor-related protein-associated protein 1,RAP).将分别在原核和哺乳细胞中表达的RAP与CEP65进行GST pull-down实验,结果显示,原核表达的GST-RAP可以与His-CEP65相互结合,而在哺乳细胞共表达的GST-CEP65和Myc-RAP也能相互结合.结论:RAP可以和CEP65相结合,CEP65有可能通过与RAP相互作用,在肿瘤的浸润、转移及增生中发挥其功能.
作者：靳更林；张建芝；苏荣；刘晓颖；吴健；孟麟；寿成超 刊期： 2005年第03期
在过去的50年,医学的发展令人瞩目.多数传染性疾病得到了有效的控制,人类疾病谱发生了巨大变化,心血管病、恶性肿瘤成为严重威胁人类健康的主要疾病.根据统计推测,全球1990年全部肿瘤新发病例810万,死亡病例520万;2000年新发病例1 010万,死亡病例620万.预计到2020年全球肿瘤新发病例将达2 000万,死亡病例将达1 200万,成为全球大的公共卫生问题.
作者：游伟程 刊期： 2005年第03期
目的:了解雌、孕激素和米非司酮对子宫内膜癌细胞生长的影响.方法:体外培养高分化子宫内膜癌细胞Ishikawa和中分化子宫内膜癌细胞Hec-1B,分为对照组、雌激素组、雌孕激素联合组、雌孕激素和米非司酮联合组,在24,48,72,96 h测定各组细胞生长趋势的变化.结果:雌激素作用72 h Ishikawa细胞生长显著高于对照组,Hec-1B细胞较对照组有升高趋势,但差异无统计学意义.孕激素作用72 h对Ishikawa细胞有显著抑制作用,96 h后对Hec-1B细胞有显著抑制作用.在雌、孕激素基础上加入米非司酮96 h后Ishikawa细胞明显增生,48 h后Hec-1B细胞明显增生.结论:雌激素可以刺激子宫内膜癌细胞的生长.孕激素在雌激素基础上抑制内膜癌细胞的生长.米非司酮有拮抗孕激素的抑制子宫内膜癌细胞生长的作用.
作者：陆叶；于丽；陈春玲；廖秦平 刊期： 2005年第03期
目的:研究Pyk2(proline-rich tyrosine kinase-2)在正常胃黏膜组织与胃癌组织中表达的差异,探讨其意义.方法:应用免疫组织化学的方法检测59例正常胃黏膜组织标本和52例胃癌组织标本中Pyk2的表达情况.结果:免疫组织化学结果显示,Pyk2在正常胃黏膜组织中的表达阳性率为86.44%(51/59),在胃癌组织中表达阳性率为19.23%(10/52),两者差异具有统计学意义(P＜0.05);在高分化胃癌中表达阳性率为47.37%(9/19),而在中、低分化胃癌中表达阳性率为3.03%(1/33),两者差异具有统计学意义(P＜0.05).Pyk2表达阳性率在不同TNM分期胃癌中分别为:Ⅰ期66.67%(6/9),Ⅱ期30%(3/10),Ⅲ期3.45%(1/29),Ⅳ期0%(0/4),差异具有统计学意义[(Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ)vI,x2=15.767,P＜0.05)].结论:本研究观察到Pyk2在正常胃黏膜组织中有表达,在胃癌组织中低表达或几乎无表达,并且其表达随着胃癌恶性度和TNM分期的增加而逐渐降低.提示Pyk2可能在胃癌的发生、发展过程中起重要作用.
作者：郭宏杰；汪欣；刘玉村；万远廉；尹洪芳；李挺；朱静 刊期： 2005年第03期
目的:探讨反义表皮生长因子受体(epidermal growthfactor receptor,EGFR)cDNA转染对胶质母细胞瘤细胞株U87MG端粒酶活性和端粒长度的影响及其机制.方法:用反义EGFR cDNA转染胶质母细胞瘤细胞株U87MG后,筛选出低表达EGFR的细胞株;用telomeric repeat amplification protocol assay(TRAP分析)检测肿瘤细胞的端粒酶活性;用Southern印迹杂交方法检测端粒长度;用半定量RT-PCR方法检测端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、端粒酶相关蛋白1(human telomerase-associated protein 1,hTEP1)和c-myc基因的表达.结果:反义EGFR cDNA转染胶质母细胞瘤U87MG后,其EGFR蛋白表达量明显降低;肿瘤细胞生长缓慢,对EGF的生长刺激作用,反应明显减弱;肿瘤细胞的端粒酶活性明显降低,端粒长度显著缩短;hTERT的mRNA表达量略微降低,而hTEP1和c-myc的mRNA表达量未见明显改变.结论:反义EGFR cDNA转染胶质母细胞瘤可以有效阻断EGFR信号传导通路,降低肿瘤细胞的端粒酶活性,使端粒长度缩短,这可能是抑制肿瘤细胞生长的新机制;反义EGFR cDNA转染降低hTERT mRNA的表达,可能是其降低端粒酶活性的机制之一.
作者：田新霞；张云岗；杜娟；郑杰 刊期： 2005年第03期
目的:探讨c-kit基因和PDGFRA基因在我国胃肠道间质瘤(GIST)中的突变状况.方法:用PCR扩增和直接测序的方法,检测60例GIST c-kit基因9号、11号、13号和17号外显子突变以及PDGFRA基因12号和18外显子突变.结果:60例GIST中kit基因突变率为63.3%,绝大多数为杂合性突变,少数为纯合性突变.其中以编码近膜区的11号外显子突变为常见(58.3%);其次为编码胞外区的9号外显子突变(3.3%);偶见编码胞内酪氨酸激酶结构域的13号外显子突变(1.7%),是一个新的突变位点L641P;未检出17号外显子突变.11号外显子的突变位点多集中在5'端的经典热点(42.9%),表现为密码子第557-560的点突变和框内缺失.第二个热点位于11号外显子的3'端,为框内串联重复.后者主要发生在胃部,女性患者多见.60例GIST中PDGFRA基因突变率为5%,表现为编码胞内酪氨酸激酶结构域的18号外显子D842V点突变,且均为CD117阴性.未见编码近膜区的12号外显子突变.结论:CD117阳性GIST主要表现为c-kit突变,分布在11号外显子经典热点和3'端热点,后者与老年女性胃GIST相关.PDGFRA基因突变主要见于CD117阴性GIST,多发生在后腹膜,具高度侵袭危险性.
作者：贺慧颖；项一宁；李燕；钟镐镐；吴秉铨；郑杰 刊期： 2005年第03期
目的:探讨α1肾上腺素能受体拮抗剂多沙唑嗪对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3在裸鼠体内生长的影响及其作用机制.方法:建立前列腺癌细胞系PC-3的裸鼠体内移植瘤模型,将30只荷瘤裸鼠随机分为5组[A组(对照组),B组(多沙唑嗪3 mg/kg),C组(多沙唑嗪10 mg/kg),D组(多沙唑嗪30 mg/kg),E组(多沙唑嗪100mg/kg)].接种肿瘤细胞1周后每天1次灌胃给药,每周测量肿瘤体积2次,给药2周后处死裸鼠,取肿瘤组织做免疫组织化学Ki67及细胞凋亡DNA原位标记法(TUNEL法)检测,并用免疫印迹法研究蛋白Smad-4及IκBα在各组肿瘤组织中的表达情况.结果:多沙唑嗪给药组肿瘤体积较对照组显著缩小,肿瘤的重量较对照组亦显著减轻,而不同剂量的多沙唑嗪给药组间肿瘤大小差异无统计学意义.免疫组织化学结果显示前列腺癌细胞Ki67的阳性率在A至E组依次为36.5%±8.5%,37.7%±11.3%,40.1%±12.7%,37.2%±12.3%,39.3%±13.1%,各组间差异无统计学意义(P＞0.05);而前列腺癌细胞的TUNEL阳性率在A至E组依次为9.5%±3.5%,24.7%±8.3%,25.7%±9.7%,28.2%±12.1%,27.5%±11.3%,各用药组明显高于对照组(P＜0.01);免疫印迹结果表明用药组蛋白Smad-4及IκBα的表达显著高于对照组.结论:α1肾上腺素能受体拮抗剂多沙唑嗪对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3裸鼠体内移植瘤的生长具有明显抑制作用,其作用机制可能是药物诱导了前列腺癌细胞凋亡,对细胞的增殖并没有明显的影响;而TGF-β1信号转导通路的激活可能是多沙唑嗪引起前列腺癌细胞凋亡的重要机制.
作者：郭长勇；王晓峰；许克新；董建强；黄晓波；刘士军；徐涛；叶海云 刊期： 2005年第03期
目的:分析胃癌中11种CT抗原(cancer/testis antigen)基因的表达分布及NY-ESO-1蛋白引发的自身体液免疫应答,为胃癌的特异性肿瘤疫苗治疗提供依据.方法:利用RT-PCR方法,检测101例胃癌患者肿瘤标本和对应正常胃黏膜中11种CT抗原基因的表达.ELISA方法检测抗NY-ESO-1抗体.利用NY-ESO-1的单抗E978,应用免疫组化方法检测组织切片中NY-ESO-1抗原物质.结果:101例胃癌患者中,74.3%的患者至少表达1种检测的CT抗原基因.12例患者表达NY-ESO-1 mRNA,5例可以检测到NY-ESO-1抗原蛋白以及针对NY-ESO-1抗原的体液免疫反应.结论:胃癌中表达多种CT抗原基因,表达率较高的MAGE-3,SSX-4和NY-ESO-1/LAGE-1蛋白等可作为肿瘤疫苗的备选抗原,其中NY-ESO-1蛋白的免疫原性得到验证.CT抗原的多价肿瘤疫苗在胃癌治疗中具有一定的可行性.
作者：吴晓江；王殮；季加孚 刊期： 2005年第03期
经典的雌激素受体(estrogen receptorα,ERα)发现20年来,对乳腺癌的治疗和预后产生了重要影响[1].1996年一种新的雌激素受体亚型,即雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)在人睾丸组织中发现[2].它在乳腺癌组织中的表达引起了广泛关注,推测其可能对乳腺癌的发生、治疗和预后判断具有重要意义.因此我们以回顾性研究为主探讨了雌激素受体亚型ERβ在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.
作者：冯娟；虞有智；谢大鹤 刊期： 2005年第03期
目的:探讨促纤维增生性小圆细胞肿瘤(DSRCT)石蜡包埋组织中EWS-WT1融合基因表达的临床病理意义及其应用价值.方法:收集DSRCT石蜡包埋组织4例,原始神经外胚叶瘤/尤文肉瘤(PNET/ES)2例,腺泡状横纹肌肉瘤2例,淋巴瘤2例,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测t(11;22)(p13;q12)染色体易位融合基因EWS-WT1的表达.结果:4例DSRCT中有3例检测出融合基因的表达,对照组均没有检测出.结论:DSRCT石蜡包埋组织中检测EWS-WT1融合基因的表达具有较好的敏感性和特异性,可作为临床病理诊断和鉴别诊断DSRCT的一个可靠的基因诊断指标.
作者：杨郁；王华；王玉萍；张伟；回允中；王子慧；郑杰 刊期： 2005年第03期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
