曾莉;吴新民;马琼;苏玉
目的: 制备抗p185erbB2单克隆抗体,并研究其对表达p185erbB2肿瘤细胞的结合及生长抑制作用.为后续工作奠定基础.方法:用NIH3T3-erbB2细胞免疫BALB/c小鼠,制备抗p185erbB2单克隆抗体.经ELISA、免疫沉淀、Western blot及免疫组化检测单抗的结合特异性.并用MTT比色法检测所获抗体对表达p185erbB2肿瘤细胞的生长抑制作用.结果:经筛选获得1株对表达p185erbB2细胞反应阳性,不表达p185erbB2细胞反应阴性的单克隆抗体1H3;免疫沉淀、Western blot均表明1H3可与p185erbB2分子特异性结合;免疫组化结果显示1H3对c-erbB2阳性的乳癌组织呈特异性着染;MTT比色法检测表明1H3对不同的p185erbB2阳性肿瘤细胞均有不同程度的生长抑制作用.结论: 单克隆抗体1H3能与p185erbB2特异结合,并可不同程度地抑制NIH3T3-erbB2或SKBR3细胞的生长,除可应用于临床对p185erbB2的检测外,尚具有肿瘤生物治疗的潜在应用开发价值.
作者:韩梅;姜北海;吴健;寿成超 刊期: 2003年第02期
目的:观察全身麻醉与硬膜外麻醉对自主神经张力的影响. 方法:32例ASAⅠ~Ⅱ级择期行子宫切除术的成年女性患者,随机分为硬膜外组(epidural anesthesia ,EA组,n=16)和全麻组(general anesthesia, GA组,n=16),应用心率变异功率频谱分析技术(power spectral analysis of heart rate variability, HRV-PSA)观察两组患者在麻醉前(T1)、麻醉诱导后15 min(T2)、切皮后1 min(T3)、牵拉子宫(T4)、子宫切下后(T5)及术毕时(T6)的心率变异性(heart rate variability, HRV)的变化.结果:EA组:与T1比较,LF/HF在T4时升高,低频(LF)、高频(HF)在T5、T6时下降,差异有显著性,其余各时点LF、HF、LF/HF无明显改变.GA组:与T1比较,LF、HF均下降,LF/HF除T6时升高,其余各时点均下降,差异有显著性. 结论:硬膜外麻醉和全麻对HRV均有一定程度的抑制,但前者对其影响较小,交感/迷走神经张力向交感占优势的方向转移;全麻对LF、HF抑制较强,且交感/迷走神经张力向副交感占优势的方向转移,而术后LF/HF又急剧升高,自主神经系统的稳定性严重受影响.
作者:李群;关雷;蒋建渝 刊期: 2003年第02期
作者: 刊期: 2003年第02期
移植物抗宿主病(graft versus host disease, GVHD)及其相关并发症的发生严重影响了异基因造血干细胞移植的疗效,据统计,HLA配型相合的同胞间移植,≥Ⅱ度急性GVHD(aGVHD)的发生率为20%~60%.迄今为止环孢霉素A(cyclosporine, CSA)联合4次短程甲氨蝶呤(methotrexate, MTX)的方案仍是公认的、经典的、较好的预防aGVHD的方案.但也有单位采用3次或小剂量的MTX与CSA 联合[1].为了解MTX3次或4次给药方式的临床疗效,我们对在本单位进行同胞或亲属间移植的24名采用MTX3次给药方案的患者的临床资料进行了总结.
作者:陈育红;黄晓军;许兰平;张耀臣;任汉云;高志勇;郭乃榄;陆道培 刊期: 2003年第02期
目的:研究La3+对肝型及肠型碱性磷酸酶活性的影响及作用机制.方法:采用磷酸苯二钠法测定酶活性,荧光滴定监测La3+对碱性磷酸酶内源性荧光的影响,由荧光淬灭方程计算La3+在酶分子上的结合数目及结合常数.结果:La3+可以增强肝型碱性磷酸酶的活性,而对肠型碱性磷酸酶有抑制作用.La3+对两种酶反应的动力学参数有不同的影响.发现La3+对肠型碱性磷酸酶的内源性荧光具有淬灭作用,说明La3+的结合可以改变酶分子在溶液中的构象.由荧光淬灭方程,测得La3+与肠型碱性磷酸酶只有一类,约78个结合位点,结合常数为2.1×104.结论:La3+对两种碱性磷酸酶具有不同的作用;La3+通过改变肠型碱性磷酸酶的构象影响其活性.
作者:胡健;贾煜;刘湘陶;李荣昌;王夔 刊期: 2003年第02期
本实验构建了4个蛋白激酶C(PKC)α突变体-GFP真核表达载体,并使它们在C2C12细胞中得到表达,为研究PKCα结构与转位的关系奠定了基础.
作者:刘新华;陈瑞华;陆纲;鹿培源;贾弘(是);李刚 刊期: 2003年第02期
造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)体外培养时在不同的细胞因子刺激下形成人们可以辨认的各系细胞集落,被称为各系的集落形成细胞(colong-forming cell,CFC).本研究对人类脐血单个CD34+CD38-细胞进行体外培养,分别与单一黏附因素纤维结合素(Fn)及干细胞支持性基质AFT024体外模拟造血微环境相互作用,研究其集落形成能力与早期分裂模式之间的关联,以及体外模拟的造血微环境对其集落形成能力的影响.旨在从定向造血干细胞早期分裂模式入手,研究调节CFC生长增殖的各种因素,以期为定向造血干细胞体外纯化,扩增以及基因工程提供一条具有实用价值的途径.
作者:刘代红;Micheal Punzel;Anthony Ho 刊期: 2003年第02期
目的: 研究比较体外循环术后3种肺功能指标的临床意义.方法: 选择在我院连续行择期体外循环下冠状动脉搭桥手术的24例病人,根据体外循环停机后机血处理方式不同分为AT组(血液回收组)和非AT组(非血液回收组),记录在麻醉诱导后及停机后1、6、24、48 h的血流动力学和氧合指标,并计算比较呼吸指数(RI)、氧合指数(OI)和M指数(PaO2/PAO2)3种肺功能指标.结果: 体外循环术后心脏指数(CI)、氧摄取率(O2ER)、氧利用指数(DO2I)和氧消耗指数(VO2I)均明显升高,而静动脉分流率(Qs/Qt)呈逐渐降低趋势,两组间各指标没有差异.AT组中RI、OI 和PaO2/PAO2在围手术期没有明显改变,而非AT组在停机后出现RI升高、OI和PaO2/PAO2降低,两组间没有统计学差异.但是非AT组停机24 h后RI和PaO2/PAO2的变化率与AT组有显著差异,改变趋势更明显.RI、OI 和PaO2/PAO2三者均与Qs/Qt和VO2I呈显著相关关系.结论:RI、OI和PaO2/PAO2都恰当的反映了体外循环术后肺功能的变化,并且个体化的监测其动态变化可能对临床工作更具指导意义.
作者:崔虎军;张明礼;肖锋;李岩;王进;陈鸿义 刊期: 2003年第02期
目的:探讨脐带血造血干细胞库建立中的脐带血采集、分离、低温冻存的方法.方法:自1997年7月至2000年7月已冻存经过HLA配型的脐带血(cord blood,CB)3 744份.CB采自经检查符合要求的足月顺产或剖宫产新生儿,经(citrate phosphate adenine dextnse, CPD-A)抗凝,用密闭式血袋采集法采集.采集后置于室温保存,18 h内处理.用羟乙基淀粉(hydroxythyl starch, HES)沉降后一次分离方法去除绝大多数红细胞及大部分血浆.采用以二甲亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)为主的冷冻保剂,冷冻保存CB.DMSO的终质量分数为10%.经序控降温后,置于-196 ℃液氮中保存.结果:分析了3 744份冻存CB,平均采集量为(93±22) ml(45~198 ml).浓缩后平均体积为(38±8) ml(30~60 ml);浓缩前后有核细胞数.浓缩前平均有核细胞数为11.2×108±5.3×108(4.5×108~45.1×108);采用HES沉降一次离心浓缩去除红细胞后的平均有核细胞数为9.7×108±4.6×108(3.1×108~30.5×108);平均有核细胞回收率为79%.质控检测40份标本细胞活率为88.2%,CFU-GM回收率和CD34+细胞计数分别为97.6%和86.4%.结论:本研究采用的CB采集、冻存及造血干细胞和病原生物检测的方法是安全有效的.
作者:刘开彦;高志勇;姜永军;董文川;李丹;王逸兰;黄宁伟;陆道培 刊期: 2003年第02期
目的:通过对体外受精获得的人合子进行Tesarik合子分型,探讨合子分型与受精后胚胎质量、胚胎种植率、多胎率的关系.方法: 对2001年11月至 2002年3月因各种原因的不孕行体外受精胚胎移植治疗(IVF-ET)患者的226个胚胎 (实验组),应用NikonTE300 倒置光学显微镜,对体外受精的人合子及受精后D3的胚胎进行形态学观察,并进行Tesarik合子分型和胚胎分级,了解各型合子发育成优质胚胎的比率.226个胚胎中198个来自通过常规体外受精(in vitro fertilization, IVF)方法发育来的胚胎,28个来自通过单精子胞浆内注射方法(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)受精发育来的胚胎.以D3优质胚胎标准及合子分型双重标准选择移植胚胎,即当有多个D3优质胚胎可供移植时,选择移植0型合子发育而来的优质胚胎.与2000年10月至2001年10月单纯使用D3优质胚胎标准选择移植胚胎的患者(对照组)进行比较,总结两组胚胎种植率;比较单纯0型合子优质胚胎与单纯非0型合子优质胚胎的种植率;探讨0型合子优质胚胎移植数与多胎率的关系.结果:由0型和非0型合子发育成D3优质胚胎的比率差异无显著性.加入合子分型作为选择胚胎的标准后实验组胚胎种植率明显高于对照组,差异有显著性.移植0型合子的优质胚胎数增加,多胎率增加.结论:0型合子发育的优质胚胎种植潜能明显高于非0型合子发育的优质胚胎,当选择移植的优质胚胎均由0型合子发育而来时,应降低移植胚胎数,有利于减少多胎妊娠.
作者:田莉;王山米;王筠;沈浣 刊期: 2003年第02期
同种异体器官移植免疫反应受多种因素影响,其中淋巴细胞的迁移和浸润是重要的一环.而在这一过程中,黏附分子起到相当重要的介导和启动作用.有研究表明某些黏附分子的表达在同种异体移植中增加[1-3],但其具体机制不明.故本研究探讨组织中黏附分子在同种异体肝移植免疫反应中的作用.
作者:刘玉兰;刘峰;孙君泓 刊期: 2003年第02期
目的:分析用血浆巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测结果指导抗CMV干预性治疗的临床意义.方法:1999年8月至2001年7月行异基因造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)的所有患者自预处理开始,常规用PCR法检测血浆的CMV-DNA(采用华美公司生产的巨细胞病毒4 ℃PCR检测试剂盒),每周1次.其中尚无CMV病的临床表现而检测到血浆CMV阳性的患者89例.随机选取52例阳性患者给予干预性治疗.将上述89例患者分为3组(分别为停止治疗时血浆CMV-PCR转阴组、停止治疗时未转阴组、血浆CMV阳性未治疗组)比较各组CMV病的发生率.CMV病的发生率采用Kaplan-Meier 曲线表示,曲线间的比较用Log-Rank(曲线无交叉)或Breslow(曲线交叉)检验,某时点率的比较采用RXC列联表或χ2检验. 结果:100 d内CMV病的发生率,在治疗后血浆CMV-PCR由阳性转为阴性组为10.26%,治疗结束时血浆CMV-PCR仍为阳性组为66.67%,血浆 CMV-PCR阳性未治疗组为36.24%(P=0.0000).上述3组中任两组移植后100 d CMV病的发生率差异均有显著性.移植后1年时上述3组CMV病累积发生率分别为30.65%、75.00%、42.95% (P=0.0009),治疗未转阴组与治疗转阴组和阳性未治疗组相比,CMV病的发生率明显升高.结论:血浆CMV-PCR检测结果用来指导干预性治疗有一定临床意义.干预性治疗后血浆CMV-DNA仍未转阴者, 应考虑换药或联合用药治疗.
作者:许兰平;黄晓军;郭乃榄;任汉云;张耀臣;陆道培 刊期: 2003年第02期
目的: 探讨炎症性肠病患者肠黏膜白细胞介素18 (IL-18) 的表达及与疾病活动性的关系.方法:活动期克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)患者分别为23例和20例,其中CD 9例、UC 11例经药物(SASP或SASP+糖皮质激素)治疗后达缓解期;20例对照来自于非炎症性肠病患者手术切除之正常结肠组织.采用半定量RT-PCR检测肠黏膜IL-18 mRNA表达,免疫组化方法原位检测肠黏膜组织中IL-18蛋白表达量.结果:活动期CD患者肠黏膜IL-18mRNA表达显著高于活动期UC和对照组,活动期UC与对照组比较差异无显著性.免疫组化显示肠黏膜上皮细胞和固有层单个核细胞(主要是巨噬细胞和树突状细胞)表达IL-18;活动期CD患者表达量显著高于活动期UC和对照,活动期UC与对照比较差异无显著性;缓解期CD患者IL-18表达与活动期相比显著下降,UC患者IL-18表达下降则差异无显著性.结论:IL-18参与了炎症性肠病的发病过程,并与CD活动有关.
作者:张炳勇;吕愈敏;洪天配;裴斐;李付英;王新娟 刊期: 2003年第02期
目的:了解恶性淋巴瘤(ML)发病、病理及免疫分型特点,探讨基因分型在诊断中的作用.方法:通过标准链菌素生物素-过氧化物酶标记物法(SABC法)对病理标本进行免疫分型,PCR检测病理及骨髓标本IgH(FR2A,3A)和TCR(β,γ)基因重排,同时对临床及病理资料进行多因素分析.结果:(1)ML中非霍奇金淋巴瘤(NHL)较霍奇金淋巴瘤(HL)发病率高,发病率随年龄增长而递增,60岁以上发病者占38.6%;其平均生存时间明显低于60岁以下者.(2)B-NHL发病率为68.6%,T-NHL为28.6%;B-NHL的3年生存率高于T-NHL.(3)低度恶性NHL占42%,中、高度恶性占58%;低度恶性组平均生存时间较中、高度恶性组长,但统计学上差异无显著性.生存期分析显示Ⅰ~Ⅱ期NHL预后明显优于Ⅲ~Ⅳ期.(4)PCR检测病理及骨髓标本的IgH和TCR重排,B-NHL FR2A的阳性率分别为66.7%及56.2%;FR3A阳性率分别为90.4%及81.2%;T-NHL中TCRβ、γ阳性率分别为91.7%及75.0%;病理标本的阳性率略高于骨髓, T、B分型与免疫分型相符.结论:年龄,T、B分型和临床分期是影响NHL预后的重要因素;分子生物学检测作为辅助手段可以肯定免疫分型结果并补充其不足,骨髓及外周血检测除协助分型外可用于肿瘤微小残留病的监测.
作者:景红梅;克晓燕;高子芬;王良绪 刊期: 2003年第02期
目的:探讨后路经椎弓根系统和椎间融合治疗退变性脊柱侧弯的临床效果.方法:总结1997年9月至2002年6月经手术治疗的32例退变性脊柱侧弯的矫正效果、并发症和随访结果.结果:全组病例术后平均侧弯矫正率为47.9%,疼痛缓解率90.6%,假关节形成1例,腔隙性脑梗塞1例.平均随访15个月(6~57个月),随访期间矫正度数及椎间隙高度无丢失,融合器无移位.结论:后路经椎弓根内固定结合椎间融合器是治疗退变性脊柱侧弯的一种安全有效的方法.
作者:刘海鹰;周殿阁;王会民;易斌;王波;金朝晖;张健;吕厚山 刊期: 2003年第02期
目的:观察腹部手术后不同镇痛方法的镇痛效果及对儿茶酚胺的影响.方法:42例选择性开腹手术患者,随机分为5组,罗哌卡因芬太尼(ropivacaine fentanyl, RF)、布比卡因芬太尼(bupivacaine fentanyl, BF)、布比卡因吗啡(bupivacaine morphine, BM)组术中1.2 g*L-1硬膜外复合全麻,术后持续硬膜外镇痛,镇痛药物分别为1.2 g*L-1罗哌卡因+2 mg*L-1芬太尼、1.2 g*L-1布比卡因+2 mg*L-1芬太尼、1.2 g*L-1布比卡因+80 mg*L-1吗啡;EM组术中硬膜外复合全麻,术后持续静脉吗啡0.5 g*L-1镇痛;静脉吗啡(intravenous morphine, M)组术中单纯全麻,术后持续静脉吗啡0.5 g*L-1镇痛.记录镇痛效果,测定麻醉前、术后1 h、术后24 h血浆肾上腺素和去甲肾上腺素水平.结果:各组均可获得有效的镇痛效果.VAS评分BM组、M组显著低于RF组,VRS评分BM组明显高于RF、EM、M组.BM、M、EM组副作用较多,M组恶心发生率高(5例).术后1 h BM组肾上腺素显著低于BF组,EM组去甲肾上腺素明显低于RF组.术后24 h M组肾上腺素和去甲肾上腺素均高于术前.结论:目前常用的硬膜外或静脉病人自控镇痛方法都有明确的镇痛效果,术中复合硬膜外阻滞或术后硬膜外镇痛可以显著减轻术后应激反应的程度,是更有效的术后镇痛方法.
作者:曾莉;吴新民;马琼;苏玉 刊期: 2003年第02期
目的:探讨甲磺酸伊马替尼治疗Ph阳性慢性髓性白血病(chronic myeloid leukemia,CML)慢性期引起的血细胞减少与遗传学疗效的关系.方法:54例CML慢性期患者,日服伊马替尼 400或600 mg,持续18个月.结果:伊马替尼治疗初期2个月,患者严重的白细胞减少(白细胞<2.0×109 L-1)、贫血(血红蛋白<100 g*L-1)和严重的血小板减少(血小板<50×109 L-1)的发生率分别为14.8%、37.0%和27.8%,多数可自行恢复,少数出现严重的白细胞/血小板减少者需要减量或中断治疗.患者治疗前血红蛋白越低、血小板越高,治疗中白细胞和血红蛋白谷值越低;治疗前血小板越低,治疗中血小板谷值越低.严重的白细胞及血小板减少的危险因素分别为:治疗前血小板≥500×109 L-1和外周血嗜碱细胞≥5%及治疗前血小板<100×109 L-1和外周血嗜碱细胞≥5%.伊马替尼治疗1年中,出现严重的白细胞减少者在治疗各期、出现贫血者在治疗6个月内、出现严重的血小板减少者在治疗3个月时获得的遗传学效应均显著降低.结论:血细胞减少是伊马替尼治疗CML慢性期比较常见的毒副作用,出现严重的白细胞减少与持久获得较低的遗传学疗效显著相关,出现贫血和严重的血小板减少与治疗早期(6个月内)获得较低的遗传学疗效显著相关.
作者:江倩;陈珊珊;江滨;江浩;陆颖;黄晓军;陆道培 刊期: 2003年第02期
双生子研究是遗传流行病学领域中经典研究方法之一.开展此类研究首先要解决的就是双生子卵性鉴定.已知的双生子卵性鉴定方法很多,如相似法、问卷法、基因鉴定法等.目前,联合≥9个短串联重复(short tandem repeat, STR)序列的基因鉴定法的结果准确性可以达到99.9%,但是其成本限制使大型流行病学研究很难实现.本课题组在浙江和山东收集到766对双生子,在进行卵性鉴定的过程中采用了基因型鉴定、ABO血型测定和问卷调查3种方法.通过对这些数据进行系统的分析,旨在探讨适用于大规模流行病学研究中双生子卵性鉴定的方法.
作者:吕筠;詹思延;秦颖;李群娜;郭晓霞;曹卫华;逄增昌;薄涛;胡永华;李立明;刘雅诚;霍振义;梁国栋 刊期: 2003年第02期
目的:探讨金属硫蛋白(metallothioneins ,MTs)在小鼠变应性接触性皮炎中所起的作用.方法:用二硝基氟苯(dinitrofluorobenzene ,DNFB)致敏金属硫蛋白基因敲除小鼠(metallothionein-null mouse,MT-/-,不表达MT-I及MT-II)及基因同源对照野生型鼠(MT+/+,正常表达MTs),并在小鼠右耳激发变应性接触性皮炎,分别对比两组小鼠激发后耳肿胀度.结果:野生型鼠(MT+/+)耳肿胀度明显高于基因敲除鼠(MT-/-),统计学分析差异有显著性(P<0.05,t检验).结论:MTs在迟发型变态反应的炎症过程中起重要作用,MT-/-小鼠不能完全表达迟发型变态反应的炎症.
作者:路雪艳;李林峰;王文慧;张宝旭 刊期: 2003年第02期
体外循环诱发的肺脏、肾脏损害,脑血管并发症及术后输血增加了病人的手术风险.另外,体外循环消耗品和术后监护等费用加重了病人的经济负担[1].随着外科技术经验的不断积累及手术器械的不断改进,非体外循环下微创冠状动脉外科的长足发展逐渐减少了体外循环手术并发症的发生率[2].
作者:徐东;万峰;凌云鹏;江龙;陈生龙;张坚;徐莉 刊期: 2003年第02期