学术投稿

人类DNA修复蛋白hR24Lp具有转录激活作用

李平法;傅欣;梁崇凤;朱应葆;童坦君

关键词:修复蛋白, 转录, 修复基因, 重组修复, 切除修复, 酵母, 表型, 紫外线, 突变株, 实验室, 互补法, 遗传, 校正, 同源, 克隆
摘要:hR24L是本实验室首次用遗传互补法克隆出的人类DNA修复基因,它与酵母RAD24L(又称RAD24)基因同源.人类hR24L基因能校正酵母RAD24L突变株的紫外线敏感表型和X线敏感表型,参与DNA切除修复和重组修复.
北京大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 用生物反应器培养决明发根合成游离蒽醌化合物

    目的:探索批量培养植物发根以生产次生代谢物的方法.方法:用容量5 L的生物反应器培养决明发根,连续观测液体培养基pH值变化,用分光光度计连续测定培养基中游离蒽醌类化合物的含量.结果:在36 d培养期内收获决明发根761 g,发根鲜重增殖了42倍.结论:培养基pH值的高低变化在一定程度上反映了生物反应器中游离蒽醌类化合物的合成情况.

    作者:常振战;果德安;郑俊华;金明善;谢梅英;沈昕;王沙生 刊期: 2000年第02期

  • 幽门螺杆菌的cagA基因和iceA基因与胃十二指肠疾病的关系

    目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)cagA基因及iceA基因的存在情况与胃十二指肠疾病的关系.方法:用PCR方法检测174例临床病人胃粘膜活检标本中Hp的cagA基因及iceA基因的存在情况.结果:cagA的检出率为89.7%(156/174),iceA1的检出率为62.1%(108/174),iceA2的检出率为32.2%(56/174),7例为iceA1 和iceA2皆阳性,3例未能检测到iceA等位基因型.各疾病组间cagA、iceA1、iceA2的检出率无统计学差异.结论:cagA基因及iceA基因不能作为本地区Hp毒力增强的标志.

    作者:张莉;林三仁;金珠;叶嗣懋;丁士刚 刊期: 2000年第02期

  • 电凝法治疗下肢静脉曲张

    目的:为了减少术中出血和术后皮下血肿和瘢痕, 介绍一种治疗下肢静脉曲张的电凝法.方法:下肢静脉曲张295例,共403条肢 体,除腹股沟切口高位结扎大隐静脉及其分支外,曲张静脉及大隐静脉主干均采取电凝法使之闭塞.结果:术后除1例外,均无皮下出血 及血肿.术后住院时间仅2~3 d.结论:电凝法治疗下肢静脉曲张是一种简便、易行的方法,此方法损伤小、出血少,并具有成形效果.

    作者:董国祥 刊期: 2000年第02期

  • 变应原皮试过敏休克1例

    临床常规对变应性鼻炎进行皮肤试验查找过敏原.和其他药物过敏试验一样,对高度过敏者行该试验时也应提高警惕,以防过敏性休克发生.我科自开展此项检查以来,共进行400例检测,其中有1例发生过敏性休克,现报告如下.

    作者:古雅兰;檀庆兰;李学佩 刊期: 2000年第02期

  • 钴胺素非依赖蛋氨酸合成酶催化反应的模型研究

    目的:探讨钴胺素非依赖蛋氨酸合成酶催化合成蛋氨酸的反应机制.方法:以2-氨基-4-羟基-5, 5, 6-三甲基-5, 6, 7, 8-四氢吡啶并[3, 2-d]嘧啶作为活化N5-甲基四氢叶酸甲基转移的模型,在碱性条件下,与L-高半胱氨酸(2)和硫酚(6)反应.结果:通过化学和仪器分析方法鉴定.甲基从模型化合物(5)转移到L-高半胱氨酸分子和硫酚分子的巯基上,生成了L-蛋氨酸(3)和PhSCH3(7).结论:甲基四氢叶酸模型分子中的N5-甲基可通过亲电性基团或质子与N5形成配合物而被活化.

    作者:刘俊义;吴晓华;王凤荣 刊期: 2000年第02期

  • 乙型肝炎病毒表面抗原蛋白基因的克隆及其在P815细胞中的表达

    1 材料与方法1.1 质粒的构建pCP10质粒含有ayw亚型HBV全基因组.该质粒作为扩增S蛋白基因的模板,上、下游引物含BglⅡ的酶切位点.

    作者:柯亨宁;斯崇文;于敏;张琦;刘丹;曲春燕 刊期: 2000年第02期

  • 血液透析超滤脱水对急性肾功能衰竭患者近曲小管的影响

    目的:观察急性肾功能衰竭患者行血液透析治疗超滤脱水后,尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase, NAG)的水平及肾组织活检光镜下近曲小管的组织形态和电镜下超微结构的变化,探讨超滤脱水对近曲小管的影响.方法:6例急性肾功能衰竭患者在血液透析超滤脱水过程中,监测血压、心率及血容量的变化;首次透析前0~1 h、透后即刻、透后第1天清晨、第2天清晨分别留尿检测NAG,其中4例在进行了4~6次透析后进行了肾活检.结果:6例患者透析过程中平均血容量下降(6.9±3.1)%,透中s与透前比较,平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)、心率均无显著变化.透后即刻6例患者尿NAG均较透前升高,尚无随时间变化的规律,与血容量的下降率亦无明显相关.肾穿刺活检光镜及电镜下未发现明显肾小管损伤的新鲜病变.结论:急性肾衰患者血液透析过程中,合适的超滤脱水量不会引起血压的显著变化及肾脏的灌注不良,尽管有尿酶NAG的升高,但并未造成肾小管组织学上新的损伤.

    作者:王梅;王静艳;王素霞;左力;王海燕 刊期: 2000年第02期

  • 尾加压素Ⅱ在心血管系统中的作用

    尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ, UⅡ)早是从鱼尾部神经下垂体中提取出的神经肽,近年已从人体脊髓中克隆出来.Ames等在(1999,401:282-286)上首次报道,UⅡ也分布于心血管组织,其血管收缩作用为内皮素的10余倍,是迄今已知的强的缩血管活性物质.作者首次在人体发现,UⅡ受体为G蛋白偶联受体GPR14,主要分布于心血管组织.

    作者:张勇刚;杨军;夏春芳;彭旭;陈亚红;马春艳;唐朝枢 刊期: 2000年第02期

  • 氟化钠稳定血标本中乳酸水平的观察

    血乳酸增高常见于组织严重缺氧的各种疾病,在休克的不可逆期及疾病的终末期,血乳酸可达25 mmol.L-1以上.但乳酸测定时,若血乳酸标本不及时处理,血乳酸水平将逐渐增高,乳酸增高的主要原因是糖酵解作用.

    作者:李振荣;张捷 刊期: 2000年第02期

  • 电穿孔法对分枝杆菌进行高效基因转化

    目的:探讨卡介苗(Bacille Calmette-Guerin, BCG) 分枝杆菌的电穿孔转化方法及其影响因素.方法:在基因脉冲仪上用电穿孔法对快生长型耻垢分枝杆菌--M. Smegmatis mc2155和BCG电转化大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒ME-65.结果:电穿孔法可以成功地转化两种分枝杆菌,筛选出卡那霉素抗性菌 株.通过对转化子提取质粒进行酶切鉴定和PCR扩增均证明为阳性重组体.转化效率达104/μgDNA.重组质粒可以在分枝杆菌中稳定复制.初步结果表明,质粒DNA的构象和浓度、初始培养物的浓度和活力、电转化参数包括电压、电阻以及转化前对菌体的冰浴时间等都对转化效率有一定的影响.结论: BCG重组疫苗研制中分枝杆菌的基因转化问题的解决为研制能表达分枝杆菌及其它感染性疾病或肿瘤抗原的BCG多价重组疫苗提供了实验基础.

    作者:路艳艳;皇甫永穆 刊期: 2000年第02期

  • 实验性大鼠骨质疏松症颞下颌关节的骨组织形态计量学观察

    目的:观察实验性大鼠骨质疏松症对颞下颌关节(temporomandibular jiont, TMJ)骨组织形态计量学的影响.方法:20只20周龄SD大鼠分为2组,每组10只.用去势方法诱导大鼠骨质疏松症作为实验组;假手术组作为对照组.应用骨组织形态计量方法观察大鼠髁突软骨下骨结构变化.结果:实验组大鼠髁突软骨下骨小梁相对体积减小,平均宽度变薄,而骨小梁吸收表面百分比与类骨质表面百分比比对照组均增加.结论:实验性骨质疏松症大鼠髁突软骨下骨存在骨重建负平衡与高骨转换现象.这种变化可导致TMJ重建的改变,可能是引起TMJ退行性变化的原因之一.

    作者:程鹏;马绪臣 刊期: 2000年第02期

  • 甲硫氨酸脑啡肽对NIH 3T3细胞和人肝癌Bel 7402细胞生长具有抑制作用

    目的:研究甲硫氨酸脑啡肽对体外培养的NIH3T3 细胞、人肝癌Bel7402细胞增殖的影响.方法:MTT微培养染色法检测不同质量浓度的甲硫氨酸脑啡肽对NIH3T3 细胞、人肝癌Bel7402细胞的作用以及一定质量浓度的纳洛酮、阿片δ受体单克隆抗体、5-氟脲嘧啶对这种作用的影响.结果:(1)10 mg.L-1至80 mg.L-1的甲硫氨酸脑啡肽对这2种细胞均有不同的抑制效应(NIH3T3 32%~66%与Bel7402 36%~64%);(2)纳洛酮能阻断甲硫氨酸脑啡肽对细胞抑制效应,阿片δ受体单克隆抗体没有这种阻断能力;(3)5-氟脲嘧啶(10 mg.L-1)和甲硫氨酸脑啡肽(50 mg.L-1)有协同作用.结论:甲硫氨酸脑啡肽能抑制细胞增殖.提示NIH3T3细胞和Bel 7402细胞胞膜上可能存在阿片ζ受体介导.

    作者:李孟森;李平风;杨非易;葛韵琴;李刚;杜国光 刊期: 2000年第02期

  • 碱性成纤维细胞生长因子拮抗大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的机制

    目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)拮抗大鼠心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的机制.方法:H/R处理的大鼠心肌细胞的孵育液中,对照组不加任何处理因素,其它各组分别加bFGF(10 μg.L-1)、bFGF与丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)抑制剂PD98059(50 μmol.L-1)、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂H7(40 μmol.L-1)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME,50 μmol.L-1).孵育完毕,测定细胞活力、ATP含量及孵育液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)含量.结果:H/R组心肌细胞活力较对照组降低32%(P<0.01),细胞ATP含量减少58%(P<0.01),孵育液中LDH活性增加5.8倍(P<0.01);bFGF组心肌细胞活力较H/R组增高17%(P<0.01),细胞ATP含量增加45%(P<0.01),孵育液中LDH活性降低31%(P<0.01),细胞PKC、MAPK活性分别增加32%(P<0.01)和10%(P<0.05).PD98059、H7、PD98059+H7及L-NAME各组心肌细胞活力较bFGF组分别降低13%、17%、24%和27%(均P<0.01),细胞ATP含量分别减少20%、28%、37%和25%(均P<0.01),孵育液中LDH活性分别增加49%、46%、55%和40%(均P<0.01).结论:bFGF对心肌细胞H/R损伤的拮抗作用通过PKC、MAPK的激活及NOS/NO系统所介导.

    作者:姜志胜;符民桂;赵文;王晓红;唐朝枢 刊期: 2000年第02期

  • 丙型肝炎病毒E2基因激发小鼠细胞免疫的实验研究

    目的:研究丙型肝炎病毒E2基因接种能否诱导机体产生细胞免疫以及乙型肝炎病毒preS基因对其诱导细胞免疫能力的影响.方法:以BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞株(SP2/O)为宿主细胞,建立表达丙肝病毒 E2蛋白的靶细胞,将其注射于E2基因或preS与E2融合蛋白基因免疫的小鼠腹腔,记录小鼠接种瘤细胞后的存活期,以小鼠存活期的长短作为反映基因免疫小鼠对HCV E2蛋白细胞免疫的有无或强弱的指标.结果:靶细胞表达了相对分子质量约为70 000的E2蛋白,E2基因接种小鼠的存活期长于对照组,单独E2基因接种组的存活期显著长于对照组,也长于preS与E2融合蛋白基因免疫组.结论:E2基因接种能诱导细胞免疫,但与preS融合后,其诱导细胞免疫的能力会降低.

    作者:谢尧;高建恩;梁庆华;陶其敏 刊期: 2000年第02期

  • 二苯乙烯氮杂环类化合物的抗癌定量构效关系

    钙调素(calmodulin, CaM)是细胞内重要的钙结合蛋白之一,对调节细胞分裂、增 殖起重要作用.近年来发现钙调素拮抗剂有一定的抗癌活性,其突出特点是:(1)它可 以抑制肿瘤细胞的增殖,可使癌细胞生长阻断在G1-S期转换上[1];(2)它可以使肿瘤 细胞向正常细胞逆转,有报道当用CaM拮抗剂三氟拉嗪处理人胃癌MGC-803细胞时,可使之趋 向于多边形正常上皮细胞形态转化[2];(3)它是一种肿瘤细胞多药耐药性的逆转剂[3].所以钙调素拮抗剂有可能发展成为一种新型的多功能的抗肿瘤药物.

    作者:刘波;朱娜;崔景荣;雷小平 刊期: 2000年第02期

  • 经导管髂内动脉灌注羟基喜树碱的实验研究

    临床上以顺铂+多柔比星方案经导管髂内动脉灌注治疗膀胱癌获得了显著的疗效[1],但顺铂严重的肾毒性使该方案的推广受到一定程度的限制[2].国内外研究发现无肾毒性的抗肿瘤药羟基喜树碱对于体外培养的人体膀胱癌细胞有明显的抑制作用[3].为明确其是否适合经导管髂内动脉灌注方案治疗膀胱癌,我们针对经动、静脉途径给药后羟基喜树碱与膀胱组织的亲和特性进行了动物实验研究.

    作者:王健;蒋学祥;邹英华;吕永兴;彭勃 刊期: 2000年第02期

  • 儿童肾外伤的急症处理

    目的: 提高儿童肾外伤的早期诊断和治疗,保存肾功能.方法:对56例儿童肾外伤进 行回顾性分析(男44例,女12例),其中4例先天性肾盂、输尿管交界处狭窄引起肾积水破 裂;29例合并其他脏器损伤(29/56),包括骨盆骨折6例,尿道损伤4例,大腿皮肤撕脱伤2 例,膀胱损伤2例,脾破裂6例,胰腺损伤2例,胫骨骨折2例,肝损伤5例;休克12例(12/ 5 6);对侧肾积水3例(3/56).全组患儿有肉眼血尿和患肾区触痛.结果:48例患儿保守 治疗,2例行Anderson-Hynes肾盂成形术,2例行肾切除术,4例行肾缝合术.随访 0.5~ 6年,肾功能改善.结论:对肾损伤患儿,一般不需手术治疗,只有发生严重肾损伤,需 行肾探查术或切除术.静脉肾盂造影和CT检查对儿童肾外伤的早期诊断和治疗非常必要.

    作者:王淑芹 刊期: 2000年第02期

  • 急性机械性绞窄性肠梗阻预测模型的建立和检验

    目的:应用多变量分析方法建立急性机械性绞窄性肠梗阻的预测模型.方法:总结3家医院7至10年间收治的急性机械性肠梗阻571例,分别应用logistic回归和分类与回归树(classification and regression tree, CART)方法建立急性绞窄性肠梗阻的预测模型,用交叉应证方法对模型进行检验,并与临床经验的诊断进行比较.结果:腹痛性质、压痛包块、腹水征、肌紧张、既往手术史和类似发作史是建立模型的重要变量,其中前4项与肠绞窄呈正相关,后两项与肠绞窄呈负相关;logistic模型的敏感度为71.8%,特异度为73.1%,CART模型的敏感度为73.1%,特异度为69.8%,两种模型的敏感度明显高于临床医师的经验判断(45.2%).结论:logistic和CART模型对急性机械性绞窄性肠梗阻具有预测作用,对临床诊断有参考意义.

    作者:王立新;史宗道;赵一鸣;汪欣;蒋斌;顾晋;姜可伟;周孝思 刊期: 2000年第02期

  • 慢性阻塞性肺疾病患者气道胆碱能M2受体功能状态

    目的:了解慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive palmonary disease, COPD)患者M2受体的功能.方法:健康对照组10例,COPD组 8例.所有受试者随机先后进入组织胺气道激发试验-匹罗卡品气道预处理后组织胺激发试验组和匹罗卡品气道预处理后组织胺激发试验-组织胺气道激发试验组,两次激发试验间隔7 d,并划出剂量-反应曲线,观察用药前后1 s用力呼气量、Dmin、R值的变化.结果:正常组匹罗卡品气道预处理后Dmin增加195%(P<0.01),COPD组匹罗卡品气道预处理前后FEV1、Dmin、R值差异均无显著性.结论:COPD患者M2受体功能下降.

    作者:姚婉贞;刘亚;韩翔;王国扬;柳晓芳;陈亚红 刊期: 2000年第02期

  • 幽门螺杆菌对人和大鼠胃上皮细胞细胞外信号调节激酶活性的影响

    目的:研究幽门螺杆菌提取物对人胃上皮细胞株BGC-823和大鼠胃上皮细胞株RGM1的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)活性的影响.方法:采用蛋白质免疫印迹法测定ERK酶蛋白含量和活性.结果:在各观察时间点,两种细胞ERK酶蛋白含量无明显差异.在无血清存在情况下,幽门螺杆菌提取物使BGC-823 细胞ERK活性持续增加而对RGM1细胞ERK活性几乎没有影响;在有血清存在情况下,Hp提取物使BGC-823细胞ERK活性持续增加而使RGM1细胞ERK活性一过性增加.结论:幽门螺杆菌提取物对胃上皮细胞株BGC-823和RGM1的ERK活性的影响不同.

    作者:陈永昌;张建中;李铁;盛涛;朱文玉 刊期: 2000年第02期

北京大学学报(医学版)杂志

北京大学学报(医学版)杂志

主管:中华人民共和国教育部

主办:北京大学