学术投稿

外源pcD2/VEGF基因在大鼠体内的表达、分布及其持续时间

盛琴慧;朱小君;牛大地;冷冰;周爱儒;朱国英

关键词:外源, 基因, 大鼠, 体内, 分布情况, endothelial growth factor, 血管内皮生长因子, 肢体动脉闭塞症, 多肽生长因子, 细胞的增殖, 分子遗传学, 转移, 新生血管, 免疫原性, 免疫反应, 肌内, 免疫学, 缝线法, 安全性, 治疗
摘要:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是一类新型的多肽生长因子,能促进血管内皮细胞的增殖和新生血管的形成.我们已经报道,采用基因缝线法肌内转移VEGF基因,治疗肢体动脉闭塞症的大鼠和家犬,具有显著疗效[1,2].但局部导入的VEGF基因在体内的分布情况及是否产生免疫反应还不清楚,本文通过肌内转移pcD2/VEGF基因,观察其在大鼠体内的表达、分布及免疫原性,以探讨在分子遗传学和免疫学方面的安全性.
北京大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 苯那普利降低慢性肾炎尿蛋白的临床观察

    目的:了解苯那普利(benazepril)的降低慢性肾小球肾炎尿蛋白的作用.方法:对慢性肾炎病人64例进行多中心自身对照观察.结果:经苯那普利治疗12周后,大量蛋白尿组(30例)尿蛋白下降47.0%,小量蛋白尿组(34例)尿蛋白下降47.5%,平均起效时间分别为(5.1±3.2)周(大量蛋白尿组)和(2.7±2.1)周(小量蛋白尿组),同时,其中14例肾病综合征患者的低白蛋白血症也有明显改善.结论:苯那普利可部分地降低慢性肾小球肾炎患者的尿蛋白.

    作者:金其庄;王化民;赵秀娟;潘缉圣;范敏华;周柱亮;刘章锁;李荣山;姬长鸣;李英;王静毅;刘瑞华;周春华;王海燕 刊期: 1999年第02期

  • 谷氨酸注入下丘脑的背内侧核引起升压反应的机制

    目的:分析下丘脑背内侧核(nucleus dorsomedialis hypothalami, NDM)升压反应的机制.方法:大鼠脑内或静脉注射不同药物,记录血压和心率的变化.结果:(1)谷氨酸(glutamate, Glu)注入NDM,P物质注入室旁核(nucleus paraventricularis, NPV)或延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla, RVL)均引起升压反应;(2)NDM 升压反应可被双侧NPV或RVL内注入P物质拮抗剂衰减,但RVL内注入阿托品无此效应;(3)静脉注射酚妥拉明也能使NDM升压反应减小,而心得安或甲基阿托品静脉注射对该反应无影响.结论:Glu注入NDM可通过NPV(P物质受体)和RVL(P物质受体)-交感缩血管神经系统引起升压反应.

    作者:丁欣;吴金胜;顾蕴辉;王益光;谭璐 刊期: 1999年第02期

  • 体外培养星形胶质细胞缺氧/再给氧后谷氨酸摄取功能的变化

    目的:观察缺氧及再给氧对体外培养星形胶质细胞存活能力及谷氨酸摄取功能的影响.方法:取生后1~2 d新生昆明小鼠大脑皮层进行星形胶质细胞原代培养,培养1周左右予以缺氧.缺氧时间分别为12、24、48 h,并取缺氧24 h后再给氧0、12、24、48 h的细胞观察其形态、死亡细胞数目、乳酸脱氢酶活性及谷氨酸摄取能力的变化.结果:缺氧组及再给氧组星形胶质细胞死亡数较对照组无明显变化,缺氧前、后乳酸脱氢酶活性亦无明显改变,缺氧组谷氨酸摄取功能较对照组下降30%~60%,并随缺氧时间延长而明显下降(与对照组相比,P<0.01),再给氧24 h内谷氨酸摄取能力有所恢复,但未达正常水平.结论:星形胶质细胞与神经元相比,对缺氧培养液较为耐受,缺氧对星形胶质细胞存活能力无明显影响,但细胞摄取谷氨酸能力有所改变.

    作者:熊晖;梁卫兰;母得志;吴希如 刊期: 1999年第02期

  • 重组组织型纤溶酶原激活剂溶栓治疗急性心肌梗死临床观察

    目的:观察重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator, rt-PA)治疗急性心肌梗死的疗效.方法:53例急性心肌梗死患者,于60 min或90 min内给予rt-PA总量为50 mg,观察血管再通的临床指标、低血压、出血及寒战等并发症.结果:总血管再通42例(42/53),其中,60 min组及90 min组再通者分别有19例(19/28)、23例(23/25).不良反应发生中,一过性低血压6例(6/53),轻度出血7例(7/53),发生寒战1例(1/53),一般不需处理自行消失.结论:rt-PA是一种安全、有效的溶栓剂.

    作者:蒋宝琦;朱继红;刘健;吴淳 刊期: 1999年第02期

  • 应用吸烟行为团体干预法对北京医科大学学生控烟效果评价

    目的:评价北京医科大学5年来在新生入学时应用吸烟行为团体干预法进行控烟的效果.方法: 采用整群分层抽样方法,对1994~1998级学生中的1169 人进行问卷调查、分析,并以此分析结果与1988、1991、1995年相应的调查结果进行对比.结果:北京医科大学学生1988、1991、 1995、1998年的吸烟率分别为30.0%、26.7%、22.5%、5.0%,呈明显下降趋势;特别表现在男性学生的吸烟率分别为58.6%、50.4%、42.5%、8.8%,其下降趋势更为明显.结论: 吸烟行为团体干预法成功地鼓励学生预防或停止吸烟,创造了许多无烟班,使北京医科大学学生吸烟率明显下降,并为大、中、小学校可应用的控烟方法提供了科学依据.

    作者:马迎华;李红;胡长风;王嘉;朱锡莹 刊期: 1999年第02期

  • 决明Ri质粒转化根离体培养研究

    目的:用Ri质粒转化决明,检测转化根培养物中蒽醌化合物的产生.方法:用叶盘法转化决明外植体诱导Ri质粒转化根并用Southern杂交加以鉴定,测定转化根的生长周期,用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定光培养及暗培养转化根中游离蒽醌化合物的质量分数.结果:决明转化根在第5~20天为对数生长期,Southern杂交证明了Ri质粒T-DNA转移并整合到植物基因组中,HPLC结果说明暗培养转化根中芦荟大黄素等6种游离蒽醌化合物含量为光培养的2倍多.结论:决明转化根培养周期为35 d较为适宜;暗培养有利于决明转化根的生长及游离蒽醌化合物的积累.

    作者:常振战;沈昕;果德安;王沙生;金明善;谢梅英;郑俊华 刊期: 1999年第02期

  • 丙型肝炎病毒HCV E1区基因的真核表达载体构建及序列分析

    目的:建立丙型肝炎病毒包膜区基因的真核表达载体,并通过对其序列分析阐明其作为基因接种的可能性.方法:经常规RT-PCR法从HCV RNA阳性病人的血清中扩增出HCV E1区的基因片段,经EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切后将其克隆到真核表达载体P cDNA3中,阳性克隆经Sma Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切鉴定;用双脱氧终止法测序,同时利用计算机软件对其推定的氨基酸序列进行分析.结果:RT-PCR扩增产物经酶切过夜后与经过同样双酶切的真核表达载体PcDNA3连接,阳性克隆经Sma Ⅰ和Xba Ⅰ酶切后产生了预期大小的144bp的片段 .测序后其核苷酸序列与已经报道的HCV Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型的同源性分别为72.8%、93.25% 、61.96%和56.44%;其推定的氨基酸序列的同源性分别为77.3%、95.7%、54.6%和51.35%;与已经报道的中国株的同源性为95.06%和93.25%;属HCV Ⅱ型; 经计算机辅助分析表明该片段内含有4个可能的糖基化位点,1个跨膜区,其氨基端为信号肽序列,在跨膜区的两端分别含有2个和1个抗原决定簇, 而每一个抗原决定簇内均含有1个糖基化位点,该片段内还含有2个T细胞识别位点.结论:本实验克隆的HCV E1基因属Ⅱ型,为我国流行的基因型,其基因的一级结构具备进行有关HCV核酸免疫的研究条件,其真核表达载体的构建,为进一步研究HCV E1基因的功能及HCV基因免疫的研究创造了条件.

    作者:高建恩;蒋栋;陶其敏;纪和平;季颖;冯百芳 刊期: 1999年第02期

  • 小鼠实验性睾丸炎期间生精细胞凋亡的观察

    目的:观察睾丸炎期间生精细胞凋亡的情况.方法:Giemsa染色、TUNEL及流式细胞术测定.结果:经Giemsa染色可见一些生精细胞及巨大核细胞的细胞核染色致密,形状不规则.流式细胞仪测定发现正常小鼠睾丸内亚单倍体很少,模型小鼠睾丸内亚单倍体增多.TUNEL阳性细胞在模型小鼠睾丸内增多,主要为精原细胞、精母细胞及管腔中的巨大核细胞.结论:正常小鼠睾丸中可见少量凋亡的生精细胞.睾丸炎期间凋亡的生精细胞增多.此时出现的一些巨大核细胞也是凋亡中的细胞.

    作者:聂振英;刘斌 刊期: 1999年第02期

  • 糖尿病患者骨代谢生化指标改变的临床意义

    目的:分析糖尿病患者骨代谢生化指标改变的临床意义.方法:选取187名糖尿病住院病人,根据性别分为两大组,各组又根据糖尿病类型及正常对照分为3小组,每小组内根据年龄≤50岁和>50岁再分组,测定血清中骨钙素(bone GLA-protein osteocalcin, BGP),降钙素(calcitonin, CT),甲状旁腺激素(parathyroid hormone, PTH),抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase, TRAP),25-羟维生素D3(25 hydroxy vitamin D3, 25-OHVitD3),1,25-双羟维生素D3(1,25-dihydroxy vitamin D3, 1,25-(OH)2VitD3).以本院同年龄,同性别正常职工60名为正常对照.结果:Ⅰ型糖尿病≤50岁年龄组,无论性别,血BGP、CT、1,25-(OH)2VitD3均低于正常对照和Ⅱ型糖尿病组,PTH高于正常对照组,TRAP、25-OHVitD3与正常对照和Ⅱ型糖尿病组无差异.Ⅱ型糖尿病组与正常对照组以上各指标差异无显著性.结论:Ⅰ型糖尿病组骨代谢血生化有改变,尤其是≤50岁组,主要与胰岛素缺乏有关.提示速发Ⅰ型糖尿病患者易发生骨质疏松.Ⅱ型糖尿病患者与正常对照无差异.

    作者:张红杰;毛腾淑 刊期: 1999年第02期

  • 冠状动脉长病变介入治疗后再狭窄

    经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneous transluminal coronary angioplasty, PTCA)治疗长病变的手术成功率较低, 并发症率较高, 对术后再狭窄的发生也有一定的影响[1].本文旨在分析病变长度和再狭窄的关系.

    作者:温尚煜;毛节明;郭丽君;赵一鸣;张福春;牛杰;郭静萱;陈明哲 刊期: 1999年第02期

  • 小鼠胚卵石蜡切片及免疫组织化学染色方法

    石蜡切片法是科研与教学工作中的一种常用实验技术,在细胞生物学、组织胚胎学及病理学中应用甚广[1].对于一般肉眼可见的较大组织标本来说,此项技术操作简便 ,标本能够长期保存.胚卵标本是研究人与动物胚胎发生发育过程中必须观察的标本,尤其是植入前的早期胚卵,对研究胚体早期发育的影响因素至关重要.本文对原有的胚卵切片技术进行了改进,为进一步研究人与动物的早期胚卵发育及其影响等诸因素提供了新的技术方法.已有研究表明层粘连蛋白(laminin,LN)在胚胎粘附、着床过程中发挥重要作用[2,3].本实验利用植入前各阶段的早期胚卵,以单个胚卵石蜡包埋切片技术为手段 ,通过免疫组化染色研究LN在小鼠早期胚卵中的分布,摸索出一套特异性强的针对单个胚卵进行免疫组化染色的方法,为进一步研究LN在小鼠早期胚卵中的免疫定位及分布奠定了基础.

    作者:吕丹瑜;李英 刊期: 1999年第02期

  • 含重组人血小板生成素基因的小鼠成纤维细胞的克隆筛选与鉴定

    目的:获取稳定表达重组人血小板生成素(thrombopoie tin, TPO)的NIH3T3成纤维细胞克隆,为开展成纤维细胞介导的TPO基因治疗研究提供细胞学基础.方法:以重组人T PO cDNA为目的基因, 构建真核细胞表达重组体pcDNA3/TPO,藉脂质体将其转染于NIH3T3细胞,经G418筛选,获得稳定表达重组人TPO的细胞克隆,应用PCR、RT-PCR及Western印迹等技术鉴定目的基因的导入及表达.结果:pcDNA3/TPO可藉脂质体转染NIH3T3细胞,转染细胞可稳定表达并分泌TPO.结论:已获得所需细胞克隆,为应用人TPO cDNA进行基因治疗奠定了基础.

    作者:韩安平;陆爱丽;王申五;侯纬敏;王德炳 刊期: 1999年第02期

  • 重组小鼠Fas配体在大肠杆菌中的表达和纯化

    目的:获得纯化的由大肠杆菌表达的小鼠Fas配体(Fas ligand, FasL ).方法:以质粒pET-15b为载体,在大肠杆菌BL21( DE3)中表达小鼠的FasL,用金属螯合亲和层析法纯化.结果:转化菌中,重组质粒是稳定的,异丙基-β-D硫代半乳糖苷可诱导小鼠FasL的表达,金属螯合亲和层析法可以初步纯化此蛋白.结论:在大肠杆菌中表达出小鼠的FasL,并得到初步纯化.

    作者:顾维丰;王玉刚;殷金珠 刊期: 1999年第02期

  • 电离辐射诱导新生大鼠大脑皮质诱导型一氧化氮合酶的表达

    目的:研究诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)在电离辐射导致的神经细胞凋亡中的作用.方法:以单剂量2.0 Gy γ射线照射出生后0 d的Wistar大鼠,用ABC法检测照射后第0.5、1、2、4、6、8、12、24、48小时大脑皮质内iNOS的表达.结果:照射组各时间点均有不同程度的iNOS表达,第6小时达峰值.各对照组未见iNOS表达.结论:iNOS所具有的神经毒作用可能是电离辐射导致的发育中脑神经细胞凋亡的重要因素.

    作者:徐胜利;沈丽 刊期: 1999年第02期

  • 外源pcD2/VEGF基因在大鼠体内的表达、分布及其持续时间

    血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是一类新型的多肽生长因子,能促进血管内皮细胞的增殖和新生血管的形成.我们已经报道,采用基因缝线法肌内转移VEGF基因,治疗肢体动脉闭塞症的大鼠和家犬,具有显著疗效[1,2].但局部导入的VEGF基因在体内的分布情况及是否产生免疫反应还不清楚,本文通过肌内转移pcD2/VEGF基因,观察其在大鼠体内的表达、分布及免疫原性,以探讨在分子遗传学和免疫学方面的安全性.

    作者:盛琴慧;朱小君;牛大地;冷冰;周爱儒;朱国英 刊期: 1999年第02期

  • 辛伐它汀对高胆固醇血症患者部分止血参数的影响

    大规模前瞻性临床试验已证明辛伐它汀可明显降低冠心病病人的发病与死亡率,但其对止血功能的影响至今不清.

    作者:陈红;罗宇 刊期: 1999年第02期

  • α1肾上腺素受体3种亚型在心血管共存的生理与病理生理意义

    我们曾首先证实α1肾上腺素受体(α1-AR)包含α1A与α1B两种亚型.α1A-AR与一系列选择性拮抗剂的结合呈高亲和性,不被氯乙基可乐定(chlorethylclonidine, CEC)不可逆阻断,激动后促进肌醇磷脂水解,在介导平滑肌收缩效应时依赖细胞外Ca2+通过双氢吡啶敏感性钙通道的进入;α1B-AR与选择性拮抗剂的结合呈低亲和性,能被CEC不可逆阻断,激动后促进肌醇磷脂水解,并由此启动生物学效应,并不依赖细胞外Ca2+通过双氢吡啶敏感性钙通道进入细胞[1~3].

    作者:韩启德 刊期: 1999年第02期

  • 葡萄胎Y染色体的出现率及其遗传学意义

    目的:探讨Y染色体在葡萄胎中的出现率及其遗传学意义.方法:采用3对引物对大体病理完全性和部分性葡萄胎共41例标本扩增Y染色体长臂、短臂和着丝粒区特异DNA序列.结果:28例完全性葡萄胎中Y阳性者6例(6/28),13例部分性葡萄胎中Y染色体阳性者4例(4/13),统计学检验两类葡萄胎间Y染色体出现率差异无显著性.结论:Y染色体在病理学完全性和部分性葡萄胎中的出现率差异无统计学意义,提示葡萄胎的遗传学类型与病理分类可能并不存在完全的对应关系.

    作者:张小为;张丽珠;周羡梅 刊期: 1999年第02期

  • 准分子激光原位角膜切削术治疗近视术后眼压变化

    目的:评估准分子激光原位角膜切削术(excimer laser in situ keratomileusis, LASIK)治疗近视术后使用非接触式压平眼压计测量眼压的准确性.方法:于 LASIK术前及术后3个月采用非接触式压平眼压计测量不同程度(等值球镜-2.00 D~-26.63 D)近视的1 005只眼的眼压,并进行比较.同时,将术后眼压变化结果与术后角膜厚度及曲率变化结果进行回归分析.结果:LASIK术后眼压较术前显著降低,近视矫治程度越高,即术后角膜越薄、角膜曲率越小,则眼压降低越明显.结论:LASIK术后使用非接触式压平眼压计测量眼压较实际值偏低,其原因可能是术后角膜变薄、曲率变小所致.

    作者:赵连娣;陈跃国 刊期: 1999年第02期

  • 补阳还五汤对大鼠动脉血栓形成前后动脉血中血小板活化因子的影响

    自王清任创制补阳还五汤以来,其临床应用广泛,疗效显著,是目前中风等血栓性疾病应用频率高的方剂[1].血小板活化因子(platelet activating factor,PAF )是迄今发现的体内强的血小板聚集剂,与血栓形成密切相关[2].本研究应用大鼠实验性动脉血栓模型,探讨补阳还五汤对动脉血栓形成前后动脉血中PAF质量浓度的影响,为其防治血栓性疾病提供新的实验依据.

    作者:张继平;李长龄;郭欣欣;王银叶;王桂玲 刊期: 1999年第02期

北京大学学报(医学版)杂志

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