李竞；王琰；王卓智；朱迎春；董志伟
RAD18基因是人类基因组计划研究的重要模式生物--啤酒酵母的复制后修复上位显性组的重要成员,其编码的产物RAD18蛋白与RAD6蛋白在体内形成紧密的复合物.鉴于DNA修复基因在进化上具有很强的保守性,为探讨RAD18基因在高等动物细胞中存在的意义,我们以全长的RAD18基因为探针,应用染色体原位杂交技术及RNA印迹技术对多种细胞如KGY444(裂殖酵母)、S2(果蝇)、NIH3T3(小鼠)、A10(大鼠)、COS-7(猴)、293(人)等及Wistar大鼠多种组织进行了研究.染色体原位杂交结果显示,上述各种细胞均有很强的RAD18基因杂交信号,而质粒载体片段杂交对照则无信号.RNA印迹杂交结果表明,上述各种细胞及Wistar大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑等组织均有RAD18基因表达.这说明RAD18基因无论是在生物进化上,还是在维持细胞的正常功能方面均具有重要意义.本工作为今后克隆哺乳动物及人类该基因同源基因提供了理论依据.
作者：吴皎辉；韩云；朱应葆 刊期： 1998年第06期
目的:用卵巢癌抗独特型单链抗体6B11 scFv代替肿瘤抗原免疫动物,观察是否诱导动物产生特异性体液免疫反应.方法:将6B11 scFv交联钥孔虫戚虫血蓝素,辅以弗氏佐剂反复免疫BALB/c小鼠,制备抗血清.采用间接法ELISA,竞争抑制ELISA及免疫流式细胞法分析抗血清特性.结果:经ELISA检测显示,由6B11 scFv刺激产生的抗-抗独特型单链抗体(Ab3)能与6B11 scFv和卵巢癌组织抗原OC166-9特异性结合.竞争抑制ELISA表明,Ab3能有效抑制卵巢癌单抗COC166-9(Ab1)与OC166-9的特异性结合.免疫流式分析结果可见, Ab3能与表达卵巢癌抗原的人卵巢癌细胞系OV1细胞表面结合而不能与无卵巢癌抗原表达的人宫颈癌细胞系HeLa细胞表面结合.从以上结果可以证明Ab3与Ab1的抗原结合特性相同.结论:6B11 scFv能代替卵巢癌抗原诱导动物产生特异性体液免疫反应,具有模拟抗原的作用,为6B11 scFv作为卵巢癌抗独特型单链抗体疫苗的实际应用提供依据.
作者：刘玉英；钱和年；冯捷；付天云；叶雪；姚煜 刊期： 1998年第06期
目的:为适用于中国人的直丝弓矫治器提供基础数据.方法:用三维测量仪及其计算机辅助系统,对67名正常中国人的牙齿进行了三维精密测量.结果:与白种人相比,中国人上切牙和上、下尖牙转矩角较大,上、下切牙和上、下尖牙轴倾角较小,上中侧切牙间冠凸距相差较小,上、下尖牙及上下第一磨牙与其近中邻牙之间的冠凸距相差较大,下第一磨牙补偿角为负值.结论:正常牙齿位置与形态具有种族特征,在我国正畸临床中,应发展适于中国人的直丝弓矫治器.
作者：杨新海；曾祥龙 刊期： 1998年第06期
目的:了解胎膜早破时测定粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF)的临床意义.方法:测定64例胎膜早破产妇在分娩时母血清及脐血清的G-CSF和C-反应蛋白(c-reacting protein, CRP)水平,同时以64例正常产妇做对照.结果:观察组母及脐血清G-CSF阳性分别为10和12例,较对照组4和5例增高,P＜0.05;血清G-CSF和CRP都异常或脐血清任何一项测定异常时,75%～100%新生儿发病;观察组与对照组分别有26与16例新生儿发病,P＜0.05.结论:胎膜早破时测定G-CSF对预测新生儿的发病有一定的临床价值.
作者：刘玉洁；郑新芝 刊期： 1998年第06期
目的:评价17997(20 mg*L-1)滴眼治疗实验性单纯疱疹性角膜炎(herpes simplex keratitis, HSK)的疗效及滴眼剂的刺激性.方法:建立兔眼HSK动物模型,以1 g*L-1无环鸟苷滴眼剂作为阳性对照,以0.15 mol*L-1生理盐水作为阴性对照,采用裂隙灯观察角膜病变情况并评分、病毒分离检测及透射电镜观察评价17997疗效.采用Draize眼刺激实验评价药物毒性.结果:17997(20 mg*L-1)可有效地治疗HSK,减轻角膜病变程度,缩短平均治愈时间,疗效与无环鸟苷相似.17997滴眼剂(20 mg*L-1)及其赋形剂的Draize评分结果表明,17997滴眼剂无眼刺激性.结论:广谱抗病毒药17997治疗实验性单纯疱疹性角膜炎获得了与无环鸟苷相似的疗效,且无临床毒性.
作者：朱则今；吴静安；陶佩珍；王淑琴 刊期： 1998年第06期
目的:观察自体-2000型血液回收机临床应用效果.方法:用自体-2000型血液回收机对128例患者行外科手术中自体血液回输.并对患者术前血、术中回收血、术后静脉血进行血常规化验及血液生化检验,对回收血做形态观察.结果:128例患者平均每例回收原血1 850 ml,经血液回收机处理后获得浓缩血615 ml,均回输给病人.术后血常规、多项生化检查及血浆电解质检查结果均达到正常水平.除3例因室颤、严重心功能不全死亡(与血液回收机无关)外,其余病人术后恢复顺利,结论:自体-2000型血液回收机能有效减少术中血液的丢失,减少输血后并发症.
作者：张明礼；刘燕；宋乃庆；陶凉；吴栋；张仁尧；胡秉忠；陈鸿义 刊期： 1998年第06期
目的:寻找更好的方法诊断和治疗角化脱屑型手足癣.方法:对174例临床拟诊为角化脱屑型手足癣的患者采用改良KONCPA法进行真菌学检查,并与KOH法、真菌培养法进行对照.受试患者随机予以伊曲康唑0.2 g,2/d,用7 d(Ⅰ组);0.2 g,2/d,用14 d(Ⅱ组);特比萘芬0.25 g,1/d,用14 d(Ⅲ组);质量分数为0.01的萘替芬霜外用30 d(Ⅳ组)及0.01(质量分数)特比萘芬霜外用30 d(Ⅴ组)进行治疗.结果:KOH法检查真菌阳性率为62.4%,真菌培养法为86.78%,改良KONCPA法为100%(P<0.001).Ⅰ组治愈8例(8/30),有效13例(13/30);Ⅱ组治愈31例(31/51),有效42例(42/51);Ⅲ组治愈22例(22/33),有效32例(32/33);Ⅳ组治愈22例(22/36),有效35例(35/36);Ⅴ组治愈17例(17/24),有效24例(24/24).结论:(1)改良KONCPA法明显优于KOH法与真菌培养法;(2)萘替芬霜或特比萘芬霜可作为首选药;(3)伊曲康唑0.2 g,2/d,14 d疗法明显优于7 d疗法;(4)特比萘芬治疗角化脱屑型手足癣临床疗效优于伊曲康唑.
作者：张文娟；桑菊花；蔡永明；陈周 刊期： 1998年第06期
目的:探讨角膜基质细胞在内毒素作用下表达核转录因子NF-κB的情况.方法:取体外培养的2～3代人角膜基质细胞,分别加入0.2、1.0、5.0、25 mg*L-1内毒素培养6 h;1.0 mg*L-1内毒素培养1.5、3、6、12、24 h,采用免疫荧光抗体染色,流式细胞仪计数的检测方法,观察NF-κB的表达水平.细胞爬片经免疫荧光染色后摄像.结果:角膜基质细胞NF-κB的基础表达率为9.4%.内毒素作用后,随时间和浓度递增,于6 h和药物质量浓度为5 mg*L-1时高,阳性率分别为21.7%和48.0%,其后下降.用药前,核转录因子分布于细胞浆内.内毒素作用后,细胞浆内NF-κB增多,核内也出现阳性表达.结论:核转录因子NF-κB存在于体外培养的人角膜基质细胞中,能够被内毒素激活,可能是角膜炎症过程中的一种重要调控因素.
作者：赵锦；吴静安；孙兴才 刊期： 1998年第06期
目的:探讨叔丁基羟基茴香醚(BHA)对双香豆素加强阿霉素毒性的保护作用及其抗氧化机制.方法:小鼠随机分为以下各组:正常对照组,双香豆素组,阿霉素组,双香豆素+阿霉素组和BHA+双香豆素+阿霉素组,每组6只.血清醌还原酶(QR)、ALT、LDH和CK催化活性用酶动力学方法测定,肝丙二醛(MDA)含量按硫代巴比妥酸方法测定.结果:经双香豆素处理组血清QR催化活性显著降低.与单给阿霉素组比较,双香豆素能显著增强阿霉素所致的血清ALT、LDH、CK催化活性升高,肝MDA含量也增高 .BHA具有对抗双香豆素所引起的QR催化活性降低的作用,并具有显著降低双香豆素+阿霉素所导致的ALT、LDH、CK及肝MDA含量增高的作用.结论:双香豆素具有加强阿霉素对小鼠毒性的作用,而BHA对双香豆素加强阿霉素毒性则显示出明显保护作用,其机制与BHA增强QR催化活性及抗脂质过氧化作用有关.
作者：王立新；林三仁 刊期： 1998年第06期
目的:探讨不同氧流量对异氟烷的消耗量和体内摄取的影响.方法:24例异氟烷全身麻醉的病人,按新鲜氧流量不同随机分为3组.氧流量分别为2.0、1.0和0.3 L*min-1.以微量泵向呼吸环路吸入远端输入异氟烷,调节输入速度使肺泡异氟烷浓度维持在低肺泡有效浓度的1.1倍.监测异氟烷吸入及呼出体积分数,以吸-呼体积分数差作为摄取指标,观察异氟烷的消耗量及体内摄取量的变化.结果:异氟烷的消耗量随氧流量的增大而明显增加;体内摄取量各组间差异无显著性.结论:在维持相同低肺泡有效浓度时,异氟烷的消耗量随着新鲜氧流量的增加而增加;体内对异氟烷的摄取量与新鲜氧流量的大小无关.
作者：戴旻；杨拔贤；许幸；杨天明 刊期： 1998年第06期
cyclin D是细胞周期G1期的主要正性调节因子,已被证实其过度表达与多种恶性肿瘤有关,但其与急性白血病的相关性研究国内外还很少报道.我们对30例小儿急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)患儿骨髓涂片利用免疫组化方法检测cyclin D的3种亚型(cyclin D1、D2和D3)的表达情况.10例非白血病儿童骨髓标本作为正常对照.
作者：李静；张乐萍 刊期： 1998年第06期
目的:探讨bcl-2 mRNA在良性前列腺增生发病过程中所起的作用.方法:采用斑点杂交技术研究正常和增生前列腺组织中bcl-2 mRNA表达情况,并加以比较,同时采用原位杂交技术了解bcl-2 mRNA在增生前列腺中表达.结果:bcl-2 mRNA在增生前列腺组织中表达明显高于在正常前列腺组织中的表达,增生组织中平均表达值是正常组织的(1.71±0.72)倍;原位杂交显示:bcl-2 mRNA主要在前列腺上皮组织中表达,并呈现由基底细胞向表层上皮细胞表达逐渐减弱趋势.结论:bcl-2 mRNA 在增生组织中高表达表明增生前列腺上皮细胞抗凋亡作用强于正常组织,提示bcl-2参与前列腺细胞增殖与凋亡过程,增生前列腺中bcl-2高表达可能是诱发良性前列腺增生的重要病因.
作者：王晓峰；姜辉；叶海云；许清泉；朱积川；侯树坤 刊期： 1998年第06期
目的:观察大黄素对动脉损伤后离体培养的平滑肌细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期时相的影响,了解大黄素抑制离体培养的平滑肌细胞增殖的作用机制.方法:指数增长期的平滑肌细胞同步化于G0期后,加入20 mg*L-1大黄素于含胎牛血清10%(体积分数)的细胞培养液中,24 h后分别用流式细胞仪进行细胞周期时相测定和抗PCNA蛋白单克隆抗体染色.结果:与对照组比较,用了大黄素以后,G0/G1期细胞百分比升高,S期细胞百分比下降,下降率为75.5%,平滑肌细胞抗PCNA单克隆抗体染色呈阴性.表明PCNA蛋白的表达受到抑制,细胞受阻于G0期.结论:抑制PCNA蛋白表达、阻滞细胞周期的移行是大黄素抑制平滑肌细胞增殖的重要机制之一.
作者：尹春琳；徐成斌 刊期： 1998年第06期
目的:构建高效真核表达载体以提高细胞因子在真核细胞中的表达效率.方法:利用基因克隆技术构建了两个新的白细胞介素-6(IL-6)真核表达载体pAdCIIL-6和P335ciil-6.将它们瞬时转染COS-7细胞后,利用IL-6依赖株7TD1对上清中的IL-6进行检测.结果:两种新建载体分别能提高IL-6在真核细胞中的表达效率5.5和3.4倍.结论:腺病毒的病毒相关Ⅰ和ⅡRNA(virus-associated Ⅰand ⅡRNA, VAⅠand VAⅡ)和腺伴随病毒(adeno associated virus, AAV) 的倒转末端重复序列(inverted terminal repeat, ITR)能提高细胞因子在真核细胞中的表达.
作者：刘红涛；袁勇；张颖妹；狄春辉；王应；马大龙 刊期： 1998年第06期
目的:研究自制转流管在动物背驮式肝移植中的转流效果.方法:16只狗中8只为供体,另8只行原位背驮式肝移植,用涂有聚氨酯的乳胶管实现门静脉及下腔静脉血的转流,监测循环及肠管瘀血情况,取出转流管后观察有无凝血块.结果:手术均能完成,历时3～5 h.插管过程无出血,肠管无瘀血.无转流管原因引起的循环不稳.涂层内侧无凝血块.转流管接口及尖端涂层有破裂,与乳胶管之间有少量血凝块.结论:自制转流管抗凝效果良好,满足动物实验的转流要求.但涂层与乳胶管粘和不牢,破裂后血液进入形成凝块.
作者：宋世兵；侯宽永；张同琳；袁炯；修典荣；石晶 刊期： 1998年第06期
1 材料与方法研究对象:健康对照组214例,均为女性,年龄21～68岁,平均47岁.共分为5个年龄组,21～30岁(44例)、31～40岁(70例)、41～50岁(31例)、51～60岁(35例)、61～68岁(34例).乳癌根治术前组共56例,年龄32～89岁,平均48岁,按UICC分期,Ⅰ期20例,Ⅱ期26例,Ⅲ期7例,Ⅳ期3例,均为首发病例.乳癌根治术后组,为1995年7月至1997年6月检测的369例乳癌根治术后的患者,共629例血清标本.年龄34～90岁,平均50岁,随诊时间1～24个月,平均10.2个月.其中无复发转移346例,确诊为局部复发2例,有远处转移者21例.
作者：冯疏影；徐玉秀；朱鹰；夏铁安 刊期： 1998年第06期
目的:制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183-B2单域(重链可变区,VH)抗体,以用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗.方法:将已分离的VH基因克隆入噬菌粒表达载体pFUW80中,将重组子转化琥珀突变抑制菌株XL1-BLue,经辅助噬菌体M13 K07援救后包装成噬菌体颗粒,表达产物通过ELISA测定活性.结果:VH基因克隆入噬菌粒pFUW80,双酶切鉴定见预期大小片段,表明克隆成功.表达产物经ELISA测定,待测值高出阴性对照2.5倍.结论:该抗人卵巢癌小分子单域抗体具有与相应卵巢癌抗原发生特异结合的能力,有望用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗.
作者：周萍；冯捷；黄华梁；钱和年；蒋欣；付天云；叶雪 刊期： 1998年第06期
目的:探讨目前常用的美学修复材料各自的特点和适应证.方法:对139例患者分别进行的塑料、烤瓷、类瓷和铸瓷的修复各65件,共260件,进行了1年的临床观察和问卷式调查,用卡方数据进行比较处理.结果:塑料修复体在颜色、边缘密合度和基牙牙龈状态方面均逊色于烤瓷、类瓷和铸瓷修复体,差异有极显著性,而烤瓷和类瓷与铸瓷修复体在形态、边缘密合度和基牙牙龈状态方面效果相似,差异均无显著性,但铸瓷修复体的折断率明显高于烤瓷和类瓷者,烤瓷与铸瓷在颜色方面有显著性差异.结论:塑料只能作为暂时固定修复材料,烤瓷、类瓷与铸瓷各有其相应的临床适应证,均有较高的临床修复价值.
作者：孙凤；魏克立；钱端申；张桂荣；郭小军；俞红 刊期： 1998年第06期
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种富含唾液酸的磷酸化糖蛋白, 近来的研究发现,在体外OPN具有抑制草酸钙晶体生长的活性.
作者：姜学军；冯陶；常连胜；郭应禄 刊期： 1998年第06期
目的:分析鸡乙酰胆碱受体(acetylcholine receptors, AChR) γ亚基基因与不同发育阶段鸡骨骼肌核因子的相互作用.方法:以AChR γ基因-204/-50片段为探针,与孵化9～18 d的鸡胚和出生后1 d、2周雏鸡骨骼肌核抽提物进行凝胶阻滞和Southwestern印迹分析.结果:凝胶阻滞实验显示,9 d、13 d鸡胚骨骼肌核抽提物与γ基因-204/-50片段结合反应可形成明显的阻滞条带,18 d后阻滞条带明显减弱.Southwestern印迹分析显示,9～18 d肌核抽提物中有2种核因子可识别、结合γ基因-204/-50片段,相对分子质量分别为30 000和53 000.采用2种实验方法在出生后的核抽提物中未检出DNA结合活性.结论:AChR γ基因-204/-50片段可被30 000和53 000两种核因子识别,两因子在鸡胚发育的9～18 d表达,出生后消失.它们可能对鸡AChR γ基因的转录激活起作用.
作者：倪菊华；关宝祥；贾弘禔 刊期： 1998年第06期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
