周萍;冯捷;黄华梁;钱和年;蒋欣;付天云;叶雪
目的:了解豚鼠内淋巴囊表面的脉管及其粘膜下层结构对内耳功能的影响.方法:用碳素墨水加0.1 mol*L-1甲醛进行左心室灌注,将豚鼠的颞骨标本用冬青油透明并进行显微检查及透射电镜检查.结果:内淋巴囊表面有非常丰富的血管网,而且与乙状窦有很密切的联系.内淋巴囊周围被毛细血管、微静脉、静脉和个别微动脉形成的一个细密的环状血管网所包绕.毛细血管周围有丰富的淋巴窦.毛细血管与淋巴窦构成一个完整、细密的网状结构.结论:内淋巴囊不仅是代谢非常活跃的器官,而且粘膜下丰富的淋巴窦与血管网可缓解压力变化对内淋巴造成的影响,借此来维持内淋巴的内环境稳定.提示梅尼埃病可能就是各种原因引起内淋巴囊血液循环障碍,使内淋巴囊的物质交换功能障碍,从而产生内淋巴积水.
作者:余力生;谢大鹤;于德林;王德炳 刊期: 1998年第06期
目的:研究自制转流管在动物背驮式肝移植中的转流效果.方法:16只狗中8只为供体,另8只行原位背驮式肝移植,用涂有聚氨酯的乳胶管实现门静脉及下腔静脉血的转流,监测循环及肠管瘀血情况,取出转流管后观察有无凝血块.结果:手术均能完成,历时3~5 h.插管过程无出血,肠管无瘀血.无转流管原因引起的循环不稳.涂层内侧无凝血块.转流管接口及尖端涂层有破裂,与乳胶管之间有少量血凝块.结论:自制转流管抗凝效果良好,满足动物实验的转流要求.但涂层与乳胶管粘和不牢,破裂后血液进入形成凝块.
作者:宋世兵;侯宽永;张同琳;袁炯;修典荣;石晶 刊期: 1998年第06期
目的:了解胎膜早破时测定粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF)的临床意义.方法:测定64例胎膜早破产妇在分娩时母血清及脐血清的G-CSF和C-反应蛋白(c-reacting protein, CRP)水平,同时以64例正常产妇做对照.结果:观察组母及脐血清G-CSF阳性分别为10和12例,较对照组4和5例增高,P<0.05;血清G-CSF和CRP都异常或脐血清任何一项测定异常时,75%~100%新生儿发病;观察组与对照组分别有26与16例新生儿发病,P<0.05.结论:胎膜早破时测定G-CSF对预测新生儿的发病有一定的临床价值.
作者:刘玉洁;郑新芝 刊期: 1998年第06期
目的:探讨角膜基质细胞在内毒素作用下表达核转录因子NF-κB的情况.方法:取体外培养的2~3代人角膜基质细胞,分别加入0.2、1.0、5.0、25 mg*L-1内毒素培养6 h;1.0 mg*L-1内毒素培养1.5、3、6、12、24 h,采用免疫荧光抗体染色,流式细胞仪计数的检测方法,观察NF-κB的表达水平.细胞爬片经免疫荧光染色后摄像.结果:角膜基质细胞NF-κB的基础表达率为9.4%.内毒素作用后,随时间和浓度递增,于6 h和药物质量浓度为5 mg*L-1时高,阳性率分别为21.7%和48.0%,其后下降.用药前,核转录因子分布于细胞浆内.内毒素作用后,细胞浆内NF-κB增多,核内也出现阳性表达.结论:核转录因子NF-κB存在于体外培养的人角膜基质细胞中,能够被内毒素激活,可能是角膜炎症过程中的一种重要调控因素.
作者:赵锦;吴静安;孙兴才 刊期: 1998年第06期
目的:制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183-B2单域(重链可变区,VH)抗体,以用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗.方法:将已分离的VH基因克隆入噬菌粒表达载体pFUW80中,将重组子转化琥珀突变抑制菌株XL1-BLue,经辅助噬菌体M13 K07援救后包装成噬菌体颗粒,表达产物通过ELISA测定活性.结果:VH基因克隆入噬菌粒pFUW80,双酶切鉴定见预期大小片段,表明克隆成功.表达产物经ELISA测定,待测值高出阴性对照2.5倍.结论:该抗人卵巢癌小分子单域抗体具有与相应卵巢癌抗原发生特异结合的能力,有望用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗.
作者:周萍;冯捷;黄华梁;钱和年;蒋欣;付天云;叶雪 刊期: 1998年第06期
目的:在大肠杆菌高效表达抗胃癌单抗3H0011的scFv.方法:利用PCR技术将3H11 scFv基因从分泌型表达载体转移至高效表达载体,获得3H11 scFv包含体的表达,经超声裂解、洗涤、变性后,尝试透析复性和凝胶过滤色谱柱上在位复性,结果:透析复性未能得到有活性的3H11 scFv,而柱上在位复性效果良好,获得有功能性的3H11 scFv.结论:成功进行了3H11 scFv的柱上复性,不同scFv在表达和复性中显示出明显差异,在基因工程抗体研制中值得注意.
作者:李竞;王琰;王卓智;朱迎春;董志伟 刊期: 1998年第06期
目的:研究一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)在正常足月妊娠和妊娠高血压时胎盘、脐带中的表达.方法:组织形态学观察,还原型辅酶Ⅱ酶组织化学和内皮型NOS(eNOS)免疫组织化学及图像分析定量研究.结果:妊娠高血压者胎盘、脐带有纤维素样坏死等病理性改变,还原型辅酶Ⅱ酶组化及eNOS免疫组化示NOS表达明显减弱,且分布异常.结论:妊娠高血压者胎盘及脐带中eNOS表达减弱,导致NO产生减少,胎盘循环缺血,可能是妊高征发病的重要机制之一.
作者:宋明清;刘斌 刊期: 1998年第06期
目的:观察大黄素对动脉损伤后离体培养的平滑肌细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期时相的影响,了解大黄素抑制离体培养的平滑肌细胞增殖的作用机制.方法:指数增长期的平滑肌细胞同步化于G0期后,加入20 mg*L-1大黄素于含胎牛血清10%(体积分数)的细胞培养液中,24 h后分别用流式细胞仪进行细胞周期时相测定和抗PCNA蛋白单克隆抗体染色.结果:与对照组比较,用了大黄素以后,G0/G1期细胞百分比升高,S期细胞百分比下降,下降率为75.5%,平滑肌细胞抗PCNA单克隆抗体染色呈阴性.表明PCNA蛋白的表达受到抑制,细胞受阻于G0期.结论:抑制PCNA蛋白表达、阻滞细胞周期的移行是大黄素抑制平滑肌细胞增殖的重要机制之一.
作者:尹春琳;徐成斌 刊期: 1998年第06期
目的:确定脐血中高水平的造血因子的来源.方法:应用抗粒单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)和抗粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的单克隆抗体对19例健康产妇足月分娩的胎盘组织的冰冻切片进行免疫组织化学染色.以耳鼻咽喉科摘取的鼻息肉组织做对照.结果:胎盘郎汉斯细胞及合体细胞呈现阳性反应,而阴性对照无反应.结论:胎盘滋养层细胞可能是产生脐血中GM-CSF和G-CSF的主要细胞.
作者:刘桂兰;于国青;虞有智;回允中 刊期: 1998年第06期
目的:分析鸡乙酰胆碱受体(acetylcholine receptors, AChR) γ亚基基因与不同发育阶段鸡骨骼肌核因子的相互作用.方法:以AChR γ基因-204/-50片段为探针,与孵化9~18 d的鸡胚和出生后1 d、2周雏鸡骨骼肌核抽提物进行凝胶阻滞和Southwestern印迹分析.结果:凝胶阻滞实验显示,9 d、13 d鸡胚骨骼肌核抽提物与γ基因-204/-50片段结合反应可形成明显的阻滞条带,18 d后阻滞条带明显减弱.Southwestern印迹分析显示,9~18 d肌核抽提物中有2种核因子可识别、结合γ基因-204/-50片段,相对分子质量分别为30 000和53 000.采用2种实验方法在出生后的核抽提物中未检出DNA结合活性.结论:AChR γ基因-204/-50片段可被30 000和53 000两种核因子识别,两因子在鸡胚发育的9~18 d表达,出生后消失.它们可能对鸡AChR γ基因的转录激活起作用.
作者:倪菊华;关宝祥;贾弘禔 刊期: 1998年第06期
目的:研究重度妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘绒毛组织中内皮素-1(ET-1)mRNA的表达,探讨ET-1与妊高征的关系.方法:用地高辛标记的内皮素-1 cDNA探针对重度妊高征患者及正常对照组产妇胎盘绒毛组织总RNA行斑点印迹杂交.利用Leica QWIN图像处理及分析系统测量每个杂交点的平均光密度值.结果:妊高征组患者胎盘绒毛组织ET-1 mRNA的表达较正常妊娠组明显增高.结论:重度妊高征患者胎盘绒毛组织ET-1表达增强可能引起全身血管痉挛,导致妊高征,同时也可能与妊高征易并发胎儿宫内发育迟缓有关.
作者:佟秀琴;李诗兰;赵扬玉;张小为;王蔼明 刊期: 1998年第06期
1 材料与方法研究对象:健康对照组214例,均为女性,年龄21~68岁,平均47岁.共分为5个年龄组,21~30岁(44例)、31~40岁(70例)、41~50岁(31例)、51~60岁(35例)、61~68岁(34例).乳癌根治术前组共56例,年龄32~89岁,平均48岁,按UICC分期,Ⅰ期20例,Ⅱ期26例,Ⅲ期7例,Ⅳ期3例,均为首发病例.乳癌根治术后组,为1995年7月至1997年6月检测的369例乳癌根治术后的患者,共629例血清标本.年龄34~90岁,平均50岁,随诊时间1~24个月,平均10.2个月.其中无复发转移346例,确诊为局部复发2例,有远处转移者21例.
作者:冯疏影;徐玉秀;朱鹰;夏铁安 刊期: 1998年第06期
钙离子通道是一个大分子的跨膜蛋白质,在心肌细胞的静息电位和动作电位的形成中起着非常重要的作用.不同来源的组织中均存在着钾离子通道,它们之间除了结构上的不同外,也存在着功能上的差异.不同进化程度、不同种系动物的电压依赖性钾离子通道在结构上也有很大的不同.因此,研究人心肌和其它组织的钾离子通道,对于进一步研究钾离子通道在不同组织中的作用以及钾离子通道开放剂和阻断剂的作用机制是至关重要的.
作者:谭焕然 刊期: 1998年第06期
RAD18基因是人类基因组计划研究的重要模式生物--啤酒酵母的复制后修复上位显性组的重要成员,其编码的产物RAD18蛋白与RAD6蛋白在体内形成紧密的复合物.鉴于DNA修复基因在进化上具有很强的保守性,为探讨RAD18基因在高等动物细胞中存在的意义,我们以全长的RAD18基因为探针,应用染色体原位杂交技术及RNA印迹技术对多种细胞如KGY444(裂殖酵母)、S2(果蝇)、NIH3T3(小鼠)、A10(大鼠)、COS-7(猴)、293(人)等及Wistar大鼠多种组织进行了研究.染色体原位杂交结果显示,上述各种细胞均有很强的RAD18基因杂交信号,而质粒载体片段杂交对照则无信号.RNA印迹杂交结果表明,上述各种细胞及Wistar大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑等组织均有RAD18基因表达.这说明RAD18基因无论是在生物进化上,还是在维持细胞的正常功能方面均具有重要意义.本工作为今后克隆哺乳动物及人类该基因同源基因提供了理论依据.
作者:吴皎辉;韩云;朱应葆 刊期: 1998年第06期
目的:评价17997(20 mg*L-1)滴眼治疗实验性单纯疱疹性角膜炎(herpes simplex keratitis, HSK)的疗效及滴眼剂的刺激性.方法:建立兔眼HSK动物模型,以1 g*L-1无环鸟苷滴眼剂作为阳性对照,以0.15 mol*L-1生理盐水作为阴性对照,采用裂隙灯观察角膜病变情况并评分、病毒分离检测及透射电镜观察评价17997疗效.采用Draize眼刺激实验评价药物毒性.结果:17997(20 mg*L-1)可有效地治疗HSK,减轻角膜病变程度,缩短平均治愈时间,疗效与无环鸟苷相似.17997滴眼剂(20 mg*L-1)及其赋形剂的Draize评分结果表明,17997滴眼剂无眼刺激性.结论:广谱抗病毒药17997治疗实验性单纯疱疹性角膜炎获得了与无环鸟苷相似的疗效,且无临床毒性.
作者:朱则今;吴静安;陶佩珍;王淑琴 刊期: 1998年第06期
目的:制备邻苯二甲酸酐(phthalic anhydride, PA)大鼠哮喘模型,探讨细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)与PA哮喘气道炎症的关系.方法:用PA免疫大鼠制备哮喘模型,观察哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的变化及支气管肺组织的病理改变;用Northern杂交方法检测哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA的表达.结果:哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞数较对照组显著增加,支气管肺组织炎性细胞浸润程度较对照组增加,支气管粘膜皱缩加重;哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA 比对照组表达增高,表达量与炎性细胞的改变呈显著正相关.结论:哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA表达量的增高不仅与哮喘气道炎症的发生有关,还与哮喘气道炎性细胞浸润的严重程度有密切关系.
作者:赵振东;刘镜愉;丁丽华;陈明 刊期: 1998年第06期
目的:制备血管内皮细胞生长因子受体(kinase insert domain containing receptor, KDR)的单克隆抗体并鉴定其特异性.方法:在大肠杆菌中表达重组KDR融合蛋白.融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养.单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛和S-P免疫组化筛选并鉴定其亚类.结果:经ELISA双筛和组化筛选获得了一株能稳定分泌人KDR单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为SSW2),其分泌抗体亚类为IgG1,产生的腹水效价可达1×10-6.结论:SSW2同血管内皮细胞尤其是肿瘤组织的血管内皮细胞有较强的阳性反应.
作者:宋述梅;吴健;寿成超 刊期: 1998年第06期
目的:为适用于中国人的直丝弓矫治器提供基础数据.方法:用三维测量仪及其计算机辅助系统,对67名正常中国人的牙齿进行了三维精密测量.结果:与白种人相比,中国人上切牙和上、下尖牙转矩角较大,上、下切牙和上、下尖牙轴倾角较小,上中侧切牙间冠凸距相差较小,上、下尖牙及上下第一磨牙与其近中邻牙之间的冠凸距相差较大,下第一磨牙补偿角为负值.结论:正常牙齿位置与形态具有种族特征,在我国正畸临床中,应发展适于中国人的直丝弓矫治器.
作者:杨新海;曾祥龙 刊期: 1998年第06期
目的:观察非创伤性修复治疗(ART)技术和两种玻璃离子水门汀充填恒磨牙浅龋的临床效果.方法:68例患者,152个恒磨牙Ⅰ类洞,9个Ⅱ类洞,用Fuji ⅨGP、Ketac-Molar两种玻璃离子水门汀和GK银汞合金充填龋洞,半年后对3种材料的固位、表面磨耗、边缘折裂、充填体颜色变化以及与自然牙颜色匹配等进行复查和对比评估.结果:两种玻璃离子水门汀充填龋洞后半年未见继发龋和边缘折裂现象;材料颜色变暗,与自然牙颜色匹配性趋向协调,但表面磨耗较银汞合金明显.结论:ART技术和两种玻璃离子水门汀充填恒磨牙浅龋具有较好的临床实用性,但尚需长期观察.
作者:洪伟;高炜;冯海兰 刊期: 1998年第06期
cyclin D是细胞周期G1期的主要正性调节因子,已被证实其过度表达与多种恶性肿瘤有关,但其与急性白血病的相关性研究国内外还很少报道.我们对30例小儿急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)患儿骨髓涂片利用免疫组化方法检测cyclin D的3种亚型(cyclin D1、D2和D3)的表达情况.10例非白血病儿童骨髓标本作为正常对照.
作者:李静;张乐萍 刊期: 1998年第06期