朱则今；吴静安；陶佩珍；王淑琴
1 材料与方法研究对象:健康对照组214例,均为女性,年龄21～68岁,平均47岁.共分为5个年龄组,21～30岁(44例)、31～40岁(70例)、41～50岁(31例)、51～60岁(35例)、61～68岁(34例).乳癌根治术前组共56例,年龄32～89岁,平均48岁,按UICC分期,Ⅰ期20例,Ⅱ期26例,Ⅲ期7例,Ⅳ期3例,均为首发病例.乳癌根治术后组,为1995年7月至1997年6月检测的369例乳癌根治术后的患者,共629例血清标本.年龄34～90岁,平均50岁,随诊时间1～24个月,平均10.2个月.其中无复发转移346例,确诊为局部复发2例,有远处转移者21例.
作者：冯疏影；徐玉秀；朱鹰；夏铁安 刊期： 1998年第06期
目的:制备血管内皮细胞生长因子受体(kinase insert domain containing receptor, KDR)的单克隆抗体并鉴定其特异性.方法:在大肠杆菌中表达重组KDR融合蛋白.融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养.单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛和S-P免疫组化筛选并鉴定其亚类.结果:经ELISA双筛和组化筛选获得了一株能稳定分泌人KDR单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为SSW2),其分泌抗体亚类为IgG1,产生的腹水效价可达1×10-6.结论:SSW2同血管内皮细胞尤其是肿瘤组织的血管内皮细胞有较强的阳性反应.
作者：宋述梅；吴健；寿成超 刊期： 1998年第06期
目的:了解胎膜早破时测定粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF)的临床意义.方法:测定64例胎膜早破产妇在分娩时母血清及脐血清的G-CSF和C-反应蛋白(c-reacting protein, CRP)水平,同时以64例正常产妇做对照.结果:观察组母及脐血清G-CSF阳性分别为10和12例,较对照组4和5例增高,P＜0.05;血清G-CSF和CRP都异常或脐血清任何一项测定异常时,75%～100%新生儿发病;观察组与对照组分别有26与16例新生儿发病,P＜0.05.结论:胎膜早破时测定G-CSF对预测新生儿的发病有一定的临床价值.
作者：刘玉洁；郑新芝 刊期： 1998年第06期
1 资料与方法1985年至1996年在北京医科大学第一医院外科诊断为原发性直肠癌并接受局部切除治疗的患者共17例,随访16例,其中男5例,女11例.中位年龄59岁(35～69岁).随访中位时间61个月(12～138个月).
作者：罗斌；王文治 刊期： 1998年第06期
目的:临床研究和分析骨髓增生异常综合征(MDS)112例.方法:总结自1982年10月至1997年10月期间MDS 112例的一般情况、临床和实验室检查特点及治疗.结果:55例(49%)在40岁以下,111例(99.1%)和95例(84%)分别有贫血和全血细胞减少,全部病例骨髓红系有巨幼样变,粒系病态造血达92%,骨髓活检发现不成熟前体细胞异常定位(ALIP)者为39%(14/36),难治性贫血(RA)和难治性贫血伴环状铁粒幼细胞(RAS)型病人用雄性激素治疗后78%(66/85)血红蛋白有提高,而血小板无明显变化,原始细胞增多型难治性贫血、转化中的原始细胞增多型难治性贫血和慢性粒单细胞白血病型病人主要死于急性白血病.结论:骨髓病态造血和ALIP对诊断有重要价值,雄性激素可改善RA和RAS型病人的贫血,但如何防止MDS转化成急性白血病仍需研究.
作者：马明信；朱美华；虞积仁；武淑兰；朱平；王颖；岑溪南；邱志祥；王文生；谢光潞 刊期： 1998年第06期
目的:探讨bcl-2 mRNA在良性前列腺增生发病过程中所起的作用.方法:采用斑点杂交技术研究正常和增生前列腺组织中bcl-2 mRNA表达情况,并加以比较,同时采用原位杂交技术了解bcl-2 mRNA在增生前列腺中表达.结果:bcl-2 mRNA在增生前列腺组织中表达明显高于在正常前列腺组织中的表达,增生组织中平均表达值是正常组织的(1.71±0.72)倍;原位杂交显示:bcl-2 mRNA主要在前列腺上皮组织中表达,并呈现由基底细胞向表层上皮细胞表达逐渐减弱趋势.结论:bcl-2 mRNA 在增生组织中高表达表明增生前列腺上皮细胞抗凋亡作用强于正常组织,提示bcl-2参与前列腺细胞增殖与凋亡过程,增生前列腺中bcl-2高表达可能是诱发良性前列腺增生的重要病因.
作者：王晓峰；姜辉；叶海云；许清泉；朱积川；侯树坤 刊期： 1998年第06期
目的:制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183-B2单域(重链可变区,VH)抗体,以用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗.方法:将已分离的VH基因克隆入噬菌粒表达载体pFUW80中,将重组子转化琥珀突变抑制菌株XL1-BLue,经辅助噬菌体M13 K07援救后包装成噬菌体颗粒,表达产物通过ELISA测定活性.结果:VH基因克隆入噬菌粒pFUW80,双酶切鉴定见预期大小片段,表明克隆成功.表达产物经ELISA测定,待测值高出阴性对照2.5倍.结论:该抗人卵巢癌小分子单域抗体具有与相应卵巢癌抗原发生特异结合的能力,有望用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗.
作者：周萍；冯捷；黄华梁；钱和年；蒋欣；付天云；叶雪 刊期： 1998年第06期
目的:为适用于中国人的直丝弓矫治器提供基础数据.方法:用三维测量仪及其计算机辅助系统,对67名正常中国人的牙齿进行了三维精密测量.结果:与白种人相比,中国人上切牙和上、下尖牙转矩角较大,上、下切牙和上、下尖牙轴倾角较小,上中侧切牙间冠凸距相差较小,上、下尖牙及上下第一磨牙与其近中邻牙之间的冠凸距相差较大,下第一磨牙补偿角为负值.结论:正常牙齿位置与形态具有种族特征,在我国正畸临床中,应发展适于中国人的直丝弓矫治器.
作者：杨新海；曾祥龙 刊期： 1998年第06期
目的:研究肺癌MDM2蛋白表达与p53突变之间的关系.方法:用免疫组化检测125例肺癌p53和MDM2蛋白表达,以聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法检测p53基因第5～8外显子的突变.结果:PCR-SSCP检测阳性的52例肺癌MDM2阳性率为19.2%;而阴性的73例肺癌MDM2蛋白阳性率为35.6%.统计学检验显示肺癌MDM2蛋白表达与p53突变之间呈负相关(χ2=3.98,P<0.05);MDM2蛋白阳性与肺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、分化程度、临床分期和p53蛋白表达无显著相关性.结论:MDM2过度表达可能在p53基因没有突变肺癌的发生过程中起重要作用.
作者：张骏；郑杰；方伟岗；李红梅；由江峰；王洁良；吴秉铨 刊期： 1998年第06期
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种富含唾液酸的磷酸化糖蛋白, 近来的研究发现,在体外OPN具有抑制草酸钙晶体生长的活性.
作者：姜学军；冯陶；常连胜；郭应禄 刊期： 1998年第06期
目的:探讨不同氧流量对异氟烷的消耗量和体内摄取的影响.方法:24例异氟烷全身麻醉的病人,按新鲜氧流量不同随机分为3组.氧流量分别为2.0、1.0和0.3 L*min-1.以微量泵向呼吸环路吸入远端输入异氟烷,调节输入速度使肺泡异氟烷浓度维持在低肺泡有效浓度的1.1倍.监测异氟烷吸入及呼出体积分数,以吸-呼体积分数差作为摄取指标,观察异氟烷的消耗量及体内摄取量的变化.结果:异氟烷的消耗量随氧流量的增大而明显增加;体内摄取量各组间差异无显著性.结论:在维持相同低肺泡有效浓度时,异氟烷的消耗量随着新鲜氧流量的增加而增加;体内对异氟烷的摄取量与新鲜氧流量的大小无关.
作者：戴旻；杨拔贤；许幸；杨天明 刊期： 1998年第06期
我室以前的研究发现,在束缚应激大鼠和小鼠血清中能产生1种抑制正常淋巴细胞转化的大分子蛋白质,相对分子质量为1.55×105和3.70×105,并且证明该蛋白的生成受中枢神经系统的调控[1].随后又发现应激大鼠外周淋巴组织(脾和淋巴结)匀浆提取物亦可抑制淋巴细胞转化,进一步的研究表明这种抑制物的生化特性和相对分子质量与血清中的应激免疫抑制蛋白相类似,并证明血中应激免疫抑制蛋白来源于外周淋巴组织[2].上述结果是我室首先发现并已在国内外报道.本文利用部分纯化的应激免疫抑制蛋白作抗原,制备出抗应激免疫抑制蛋白的单克隆抗体,并利用此单抗从另一侧面证实血清中应激免疫抑制蛋白与淋巴组织产生的抑制蛋白是同一物质.
作者：李乐群；邵黎；吴晓婷；黄庆军；邓玉兰；丁桂凤；范少光 刊期： 1998年第06期
目的:确定脐血中高水平的造血因子的来源.方法:应用抗粒单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)和抗粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的单克隆抗体对19例健康产妇足月分娩的胎盘组织的冰冻切片进行免疫组织化学染色.以耳鼻咽喉科摘取的鼻息肉组织做对照.结果:胎盘郎汉斯细胞及合体细胞呈现阳性反应,而阴性对照无反应.结论:胎盘滋养层细胞可能是产生脐血中GM-CSF和G-CSF的主要细胞.
作者：刘桂兰；于国青；虞有智；回允中 刊期： 1998年第06期
目的:用卵巢癌抗独特型单链抗体6B11 scFv代替肿瘤抗原免疫动物,观察是否诱导动物产生特异性体液免疫反应.方法:将6B11 scFv交联钥孔虫戚虫血蓝素,辅以弗氏佐剂反复免疫BALB/c小鼠,制备抗血清.采用间接法ELISA,竞争抑制ELISA及免疫流式细胞法分析抗血清特性.结果:经ELISA检测显示,由6B11 scFv刺激产生的抗-抗独特型单链抗体(Ab3)能与6B11 scFv和卵巢癌组织抗原OC166-9特异性结合.竞争抑制ELISA表明,Ab3能有效抑制卵巢癌单抗COC166-9(Ab1)与OC166-9的特异性结合.免疫流式分析结果可见, Ab3能与表达卵巢癌抗原的人卵巢癌细胞系OV1细胞表面结合而不能与无卵巢癌抗原表达的人宫颈癌细胞系HeLa细胞表面结合.从以上结果可以证明Ab3与Ab1的抗原结合特性相同.结论:6B11 scFv能代替卵巢癌抗原诱导动物产生特异性体液免疫反应,具有模拟抗原的作用,为6B11 scFv作为卵巢癌抗独特型单链抗体疫苗的实际应用提供依据.
作者：刘玉英；钱和年；冯捷；付天云；叶雪；姚煜 刊期： 1998年第06期
目的:分析鸡乙酰胆碱受体(acetylcholine receptors, AChR) γ亚基基因与不同发育阶段鸡骨骼肌核因子的相互作用.方法:以AChR γ基因-204/-50片段为探针,与孵化9～18 d的鸡胚和出生后1 d、2周雏鸡骨骼肌核抽提物进行凝胶阻滞和Southwestern印迹分析.结果:凝胶阻滞实验显示,9 d、13 d鸡胚骨骼肌核抽提物与γ基因-204/-50片段结合反应可形成明显的阻滞条带,18 d后阻滞条带明显减弱.Southwestern印迹分析显示,9～18 d肌核抽提物中有2种核因子可识别、结合γ基因-204/-50片段,相对分子质量分别为30 000和53 000.采用2种实验方法在出生后的核抽提物中未检出DNA结合活性.结论:AChR γ基因-204/-50片段可被30 000和53 000两种核因子识别,两因子在鸡胚发育的9～18 d表达,出生后消失.它们可能对鸡AChR γ基因的转录激活起作用.
作者：倪菊华；关宝祥；贾弘禔 刊期： 1998年第06期
RAD18基因是人类基因组计划研究的重要模式生物--啤酒酵母的复制后修复上位显性组的重要成员,其编码的产物RAD18蛋白与RAD6蛋白在体内形成紧密的复合物.鉴于DNA修复基因在进化上具有很强的保守性,为探讨RAD18基因在高等动物细胞中存在的意义,我们以全长的RAD18基因为探针,应用染色体原位杂交技术及RNA印迹技术对多种细胞如KGY444(裂殖酵母)、S2(果蝇)、NIH3T3(小鼠)、A10(大鼠)、COS-7(猴)、293(人)等及Wistar大鼠多种组织进行了研究.染色体原位杂交结果显示,上述各种细胞均有很强的RAD18基因杂交信号,而质粒载体片段杂交对照则无信号.RNA印迹杂交结果表明,上述各种细胞及Wistar大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑等组织均有RAD18基因表达.这说明RAD18基因无论是在生物进化上,还是在维持细胞的正常功能方面均具有重要意义.本工作为今后克隆哺乳动物及人类该基因同源基因提供了理论依据.
作者：吴皎辉；韩云；朱应葆 刊期： 1998年第06期
目的:在大肠杆菌高效表达抗胃癌单抗3H0011的scFv.方法:利用PCR技术将3H11 scFv基因从分泌型表达载体转移至高效表达载体,获得3H11 scFv包含体的表达,经超声裂解、洗涤、变性后,尝试透析复性和凝胶过滤色谱柱上在位复性,结果:透析复性未能得到有活性的3H11 scFv,而柱上在位复性效果良好,获得有功能性的3H11 scFv.结论:成功进行了3H11 scFv的柱上复性,不同scFv在表达和复性中显示出明显差异,在基因工程抗体研制中值得注意.
作者：李竞；王琰；王卓智；朱迎春；董志伟 刊期： 1998年第06期
钙离子通道是一个大分子的跨膜蛋白质,在心肌细胞的静息电位和动作电位的形成中起着非常重要的作用.不同来源的组织中均存在着钾离子通道,它们之间除了结构上的不同外,也存在着功能上的差异.不同进化程度、不同种系动物的电压依赖性钾离子通道在结构上也有很大的不同.因此,研究人心肌和其它组织的钾离子通道,对于进一步研究钾离子通道在不同组织中的作用以及钾离子通道开放剂和阻断剂的作用机制是至关重要的.
作者：谭焕然 刊期： 1998年第06期
目的:探讨角膜基质细胞在内毒素作用下表达核转录因子NF-κB的情况.方法:取体外培养的2～3代人角膜基质细胞,分别加入0.2、1.0、5.0、25 mg*L-1内毒素培养6 h;1.0 mg*L-1内毒素培养1.5、3、6、12、24 h,采用免疫荧光抗体染色,流式细胞仪计数的检测方法,观察NF-κB的表达水平.细胞爬片经免疫荧光染色后摄像.结果:角膜基质细胞NF-κB的基础表达率为9.4%.内毒素作用后,随时间和浓度递增,于6 h和药物质量浓度为5 mg*L-1时高,阳性率分别为21.7%和48.0%,其后下降.用药前,核转录因子分布于细胞浆内.内毒素作用后,细胞浆内NF-κB增多,核内也出现阳性表达.结论:核转录因子NF-κB存在于体外培养的人角膜基质细胞中,能够被内毒素激活,可能是角膜炎症过程中的一种重要调控因素.
作者：赵锦；吴静安；孙兴才 刊期： 1998年第06期
目的:观察大黄素对动脉损伤后离体培养的平滑肌细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期时相的影响,了解大黄素抑制离体培养的平滑肌细胞增殖的作用机制.方法:指数增长期的平滑肌细胞同步化于G0期后,加入20 mg*L-1大黄素于含胎牛血清10%(体积分数)的细胞培养液中,24 h后分别用流式细胞仪进行细胞周期时相测定和抗PCNA蛋白单克隆抗体染色.结果:与对照组比较,用了大黄素以后,G0/G1期细胞百分比升高,S期细胞百分比下降,下降率为75.5%,平滑肌细胞抗PCNA单克隆抗体染色呈阴性.表明PCNA蛋白的表达受到抑制,细胞受阻于G0期.结论:抑制PCNA蛋白表达、阻滞细胞周期的移行是大黄素抑制平滑肌细胞增殖的重要机制之一.
作者：尹春琳；徐成斌 刊期： 1998年第06期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
