赵振东；刘镜愉；丁丽华；陈明
目的:在大肠杆菌高效表达抗胃癌单抗3H0011的scFv.方法:利用PCR技术将3H11 scFv基因从分泌型表达载体转移至高效表达载体,获得3H11 scFv包含体的表达,经超声裂解、洗涤、变性后,尝试透析复性和凝胶过滤色谱柱上在位复性,结果:透析复性未能得到有活性的3H11 scFv,而柱上在位复性效果良好,获得有功能性的3H11 scFv.结论:成功进行了3H11 scFv的柱上复性,不同scFv在表达和复性中显示出明显差异,在基因工程抗体研制中值得注意.
作者：李竞；王琰；王卓智；朱迎春；董志伟 刊期： 1998年第06期
目的:确定脐血中高水平的造血因子的来源.方法:应用抗粒单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)和抗粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的单克隆抗体对19例健康产妇足月分娩的胎盘组织的冰冻切片进行免疫组织化学染色.以耳鼻咽喉科摘取的鼻息肉组织做对照.结果:胎盘郎汉斯细胞及合体细胞呈现阳性反应,而阴性对照无反应.结论:胎盘滋养层细胞可能是产生脐血中GM-CSF和G-CSF的主要细胞.
作者：刘桂兰；于国青；虞有智；回允中 刊期： 1998年第06期
1 材料与方法研究对象:健康对照组214例,均为女性,年龄21～68岁,平均47岁.共分为5个年龄组,21～30岁(44例)、31～40岁(70例)、41～50岁(31例)、51～60岁(35例)、61～68岁(34例).乳癌根治术前组共56例,年龄32～89岁,平均48岁,按UICC分期,Ⅰ期20例,Ⅱ期26例,Ⅲ期7例,Ⅳ期3例,均为首发病例.乳癌根治术后组,为1995年7月至1997年6月检测的369例乳癌根治术后的患者,共629例血清标本.年龄34～90岁,平均50岁,随诊时间1～24个月,平均10.2个月.其中无复发转移346例,确诊为局部复发2例,有远处转移者21例.
作者：冯疏影；徐玉秀；朱鹰；夏铁安 刊期： 1998年第06期
1 资料与方法1985年至1996年在北京医科大学第一医院外科诊断为原发性直肠癌并接受局部切除治疗的患者共17例,随访16例,其中男5例,女11例.中位年龄59岁(35～69岁).随访中位时间61个月(12～138个月).
作者：罗斌；王文治 刊期： 1998年第06期
目的:了解胎膜早破时测定粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF)的临床意义.方法:测定64例胎膜早破产妇在分娩时母血清及脐血清的G-CSF和C-反应蛋白(c-reacting protein, CRP)水平,同时以64例正常产妇做对照.结果:观察组母及脐血清G-CSF阳性分别为10和12例,较对照组4和5例增高,P＜0.05;血清G-CSF和CRP都异常或脐血清任何一项测定异常时,75%～100%新生儿发病;观察组与对照组分别有26与16例新生儿发病,P＜0.05.结论:胎膜早破时测定G-CSF对预测新生儿的发病有一定的临床价值.
作者：刘玉洁；郑新芝 刊期： 1998年第06期
有关聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)技术应用研究的重点,是利用其能够短时间内在体外扩增出数百万个特异性靶DNA序列拷贝的特点,对感染者体内含量极低的病原体核酸模板(如乙型肝炎病毒HBV、丙型肝炎病毒HCV等)进行量化测定,从而为病毒、支原体、细菌等人类致病因子相关性疾病的诊断和治疗提供准确有力的实验室依据.本文建立了一种利用核酸固相杂交及酶免疫技术(EIA)量化测定HBV-DNA的PCR扩增产物的新方法,该方法具有灵敏、特异、准确、快速、简便,并可量化反映病毒模板量等优点,可广泛应用于HBV感染相关疾病的诊断和治疗监测,现报告如下.
作者：仝文斌；高巍；费然；冯百芳；陶其敏 刊期： 1998年第06期
目的:制备邻苯二甲酸酐(phthalic anhydride, PA)大鼠哮喘模型,探讨细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)与PA哮喘气道炎症的关系.方法:用PA免疫大鼠制备哮喘模型,观察哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的变化及支气管肺组织的病理改变;用Northern杂交方法检测哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA的表达.结果:哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞数较对照组显著增加,支气管肺组织炎性细胞浸润程度较对照组增加,支气管粘膜皱缩加重;哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA 比对照组表达增高,表达量与炎性细胞的改变呈显著正相关.结论:哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA表达量的增高不仅与哮喘气道炎症的发生有关,还与哮喘气道炎性细胞浸润的严重程度有密切关系.
作者：赵振东；刘镜愉；丁丽华；陈明 刊期： 1998年第06期
目的:研究自制转流管在动物背驮式肝移植中的转流效果.方法:16只狗中8只为供体,另8只行原位背驮式肝移植,用涂有聚氨酯的乳胶管实现门静脉及下腔静脉血的转流,监测循环及肠管瘀血情况,取出转流管后观察有无凝血块.结果:手术均能完成,历时3～5 h.插管过程无出血,肠管无瘀血.无转流管原因引起的循环不稳.涂层内侧无凝血块.转流管接口及尖端涂层有破裂,与乳胶管之间有少量血凝块.结论:自制转流管抗凝效果良好,满足动物实验的转流要求.但涂层与乳胶管粘和不牢,破裂后血液进入形成凝块.
作者：宋世兵；侯宽永；张同琳；袁炯；修典荣；石晶 刊期： 1998年第06期
我室以前的研究发现,在束缚应激大鼠和小鼠血清中能产生1种抑制正常淋巴细胞转化的大分子蛋白质,相对分子质量为1.55×105和3.70×105,并且证明该蛋白的生成受中枢神经系统的调控[1].随后又发现应激大鼠外周淋巴组织(脾和淋巴结)匀浆提取物亦可抑制淋巴细胞转化,进一步的研究表明这种抑制物的生化特性和相对分子质量与血清中的应激免疫抑制蛋白相类似,并证明血中应激免疫抑制蛋白来源于外周淋巴组织[2].上述结果是我室首先发现并已在国内外报道.本文利用部分纯化的应激免疫抑制蛋白作抗原,制备出抗应激免疫抑制蛋白的单克隆抗体,并利用此单抗从另一侧面证实血清中应激免疫抑制蛋白与淋巴组织产生的抑制蛋白是同一物质.
作者：李乐群；邵黎；吴晓婷；黄庆军；邓玉兰；丁桂凤；范少光 刊期： 1998年第06期
目的:用卵巢癌抗独特型单链抗体6B11 scFv代替肿瘤抗原免疫动物,观察是否诱导动物产生特异性体液免疫反应.方法:将6B11 scFv交联钥孔虫戚虫血蓝素,辅以弗氏佐剂反复免疫BALB/c小鼠,制备抗血清.采用间接法ELISA,竞争抑制ELISA及免疫流式细胞法分析抗血清特性.结果:经ELISA检测显示,由6B11 scFv刺激产生的抗-抗独特型单链抗体(Ab3)能与6B11 scFv和卵巢癌组织抗原OC166-9特异性结合.竞争抑制ELISA表明,Ab3能有效抑制卵巢癌单抗COC166-9(Ab1)与OC166-9的特异性结合.免疫流式分析结果可见, Ab3能与表达卵巢癌抗原的人卵巢癌细胞系OV1细胞表面结合而不能与无卵巢癌抗原表达的人宫颈癌细胞系HeLa细胞表面结合.从以上结果可以证明Ab3与Ab1的抗原结合特性相同.结论:6B11 scFv能代替卵巢癌抗原诱导动物产生特异性体液免疫反应,具有模拟抗原的作用,为6B11 scFv作为卵巢癌抗独特型单链抗体疫苗的实际应用提供依据.
作者：刘玉英；钱和年；冯捷；付天云；叶雪；姚煜 刊期： 1998年第06期
目的:研究肺癌MDM2蛋白表达与p53突变之间的关系.方法:用免疫组化检测125例肺癌p53和MDM2蛋白表达,以聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法检测p53基因第5～8外显子的突变.结果:PCR-SSCP检测阳性的52例肺癌MDM2阳性率为19.2%;而阴性的73例肺癌MDM2蛋白阳性率为35.6%.统计学检验显示肺癌MDM2蛋白表达与p53突变之间呈负相关(χ2=3.98,P<0.05);MDM2蛋白阳性与肺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、分化程度、临床分期和p53蛋白表达无显著相关性.结论:MDM2过度表达可能在p53基因没有突变肺癌的发生过程中起重要作用.
作者：张骏；郑杰；方伟岗；李红梅；由江峰；王洁良；吴秉铨 刊期： 1998年第06期
目的:观察自体-2000型血液回收机临床应用效果.方法:用自体-2000型血液回收机对128例患者行外科手术中自体血液回输.并对患者术前血、术中回收血、术后静脉血进行血常规化验及血液生化检验,对回收血做形态观察.结果:128例患者平均每例回收原血1 850 ml,经血液回收机处理后获得浓缩血615 ml,均回输给病人.术后血常规、多项生化检查及血浆电解质检查结果均达到正常水平.除3例因室颤、严重心功能不全死亡(与血液回收机无关)外,其余病人术后恢复顺利,结论:自体-2000型血液回收机能有效减少术中血液的丢失,减少输血后并发症.
作者：张明礼；刘燕；宋乃庆；陶凉；吴栋；张仁尧；胡秉忠；陈鸿义 刊期： 1998年第06期
目的:了解豚鼠内淋巴囊表面的脉管及其粘膜下层结构对内耳功能的影响.方法:用碳素墨水加0.1 mol*L-1甲醛进行左心室灌注,将豚鼠的颞骨标本用冬青油透明并进行显微检查及透射电镜检查.结果:内淋巴囊表面有非常丰富的血管网,而且与乙状窦有很密切的联系.内淋巴囊周围被毛细血管、微静脉、静脉和个别微动脉形成的一个细密的环状血管网所包绕.毛细血管周围有丰富的淋巴窦.毛细血管与淋巴窦构成一个完整、细密的网状结构.结论:内淋巴囊不仅是代谢非常活跃的器官,而且粘膜下丰富的淋巴窦与血管网可缓解压力变化对内淋巴造成的影响,借此来维持内淋巴的内环境稳定.提示梅尼埃病可能就是各种原因引起内淋巴囊血液循环障碍,使内淋巴囊的物质交换功能障碍,从而产生内淋巴积水.
作者：余力生；谢大鹤；于德林；王德炳 刊期： 1998年第06期
钙离子通道是一个大分子的跨膜蛋白质,在心肌细胞的静息电位和动作电位的形成中起着非常重要的作用.不同来源的组织中均存在着钾离子通道,它们之间除了结构上的不同外,也存在着功能上的差异.不同进化程度、不同种系动物的电压依赖性钾离子通道在结构上也有很大的不同.因此,研究人心肌和其它组织的钾离子通道,对于进一步研究钾离子通道在不同组织中的作用以及钾离子通道开放剂和阻断剂的作用机制是至关重要的.
作者：谭焕然 刊期： 1998年第06期
目的:研究重度妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘绒毛组织中内皮素-1(ET-1)mRNA的表达,探讨ET-1与妊高征的关系.方法:用地高辛标记的内皮素-1 cDNA探针对重度妊高征患者及正常对照组产妇胎盘绒毛组织总RNA行斑点印迹杂交.利用Leica QWIN图像处理及分析系统测量每个杂交点的平均光密度值.结果:妊高征组患者胎盘绒毛组织ET-1 mRNA的表达较正常妊娠组明显增高.结论:重度妊高征患者胎盘绒毛组织ET-1表达增强可能引起全身血管痉挛,导致妊高征,同时也可能与妊高征易并发胎儿宫内发育迟缓有关.
作者：佟秀琴；李诗兰；赵扬玉；张小为；王蔼明 刊期： 1998年第06期
目的:寻找更好的方法诊断和治疗角化脱屑型手足癣.方法:对174例临床拟诊为角化脱屑型手足癣的患者采用改良KONCPA法进行真菌学检查,并与KOH法、真菌培养法进行对照.受试患者随机予以伊曲康唑0.2 g,2/d,用7 d(Ⅰ组);0.2 g,2/d,用14 d(Ⅱ组);特比萘芬0.25 g,1/d,用14 d(Ⅲ组);质量分数为0.01的萘替芬霜外用30 d(Ⅳ组)及0.01(质量分数)特比萘芬霜外用30 d(Ⅴ组)进行治疗.结果:KOH法检查真菌阳性率为62.4%,真菌培养法为86.78%,改良KONCPA法为100%(P<0.001).Ⅰ组治愈8例(8/30),有效13例(13/30);Ⅱ组治愈31例(31/51),有效42例(42/51);Ⅲ组治愈22例(22/33),有效32例(32/33);Ⅳ组治愈22例(22/36),有效35例(35/36);Ⅴ组治愈17例(17/24),有效24例(24/24).结论:(1)改良KONCPA法明显优于KOH法与真菌培养法;(2)萘替芬霜或特比萘芬霜可作为首选药;(3)伊曲康唑0.2 g,2/d,14 d疗法明显优于7 d疗法;(4)特比萘芬治疗角化脱屑型手足癣临床疗效优于伊曲康唑.
作者：张文娟；桑菊花；蔡永明；陈周 刊期： 1998年第06期
目的:探讨不同氧流量对异氟烷的消耗量和体内摄取的影响.方法:24例异氟烷全身麻醉的病人,按新鲜氧流量不同随机分为3组.氧流量分别为2.0、1.0和0.3 L*min-1.以微量泵向呼吸环路吸入远端输入异氟烷,调节输入速度使肺泡异氟烷浓度维持在低肺泡有效浓度的1.1倍.监测异氟烷吸入及呼出体积分数,以吸-呼体积分数差作为摄取指标,观察异氟烷的消耗量及体内摄取量的变化.结果:异氟烷的消耗量随氧流量的增大而明显增加;体内摄取量各组间差异无显著性.结论:在维持相同低肺泡有效浓度时,异氟烷的消耗量随着新鲜氧流量的增加而增加;体内对异氟烷的摄取量与新鲜氧流量的大小无关.
作者：戴旻；杨拔贤；许幸；杨天明 刊期： 1998年第06期
目的:探讨细胞间隙通讯和细胞钙离子信号传导系统在非遗传毒性致癌物的遗传外致癌过程中的作用.方法:应用划痕染料示踪技术(SLDT)和fluo-3荧光标记法,测定微囊藻毒素、佛波酯(TPA)、苯巴比妥钠3种非遗传毒性致癌物对BALB/c 3T3细胞间隙通讯功能和细胞内游离Ca2+离子浓度的影响.结果:3种非遗传毒性致癌物均可不同程度抑制细胞间隙通讯功能,并呈良好的剂量效应关系.TPA和微囊藻毒素可明显诱导细胞内游离钙离子浓度升高,但在试验剂量下苯巴比妥钠未见引起细胞内Ca2+离子浓度的明显改变.结论:细胞间隙通讯系统可能是3种非遗传毒性致癌物的共同作用位点,对细胞Ca2+系统的影响以TPA类非遗传毒性致癌物为主.
作者：王红兵；刘世杰 刊期： 1998年第06期
目的:制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183-B2单域(重链可变区,VH)抗体,以用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗.方法:将已分离的VH基因克隆入噬菌粒表达载体pFUW80中,将重组子转化琥珀突变抑制菌株XL1-BLue,经辅助噬菌体M13 K07援救后包装成噬菌体颗粒,表达产物通过ELISA测定活性.结果:VH基因克隆入噬菌粒pFUW80,双酶切鉴定见预期大小片段,表明克隆成功.表达产物经ELISA测定,待测值高出阴性对照2.5倍.结论:该抗人卵巢癌小分子单域抗体具有与相应卵巢癌抗原发生特异结合的能力,有望用于卵巢癌放射免疫显像和导向治疗.
作者：周萍；冯捷；黄华梁；钱和年；蒋欣；付天云；叶雪 刊期： 1998年第06期
RAD18基因是人类基因组计划研究的重要模式生物--啤酒酵母的复制后修复上位显性组的重要成员,其编码的产物RAD18蛋白与RAD6蛋白在体内形成紧密的复合物.鉴于DNA修复基因在进化上具有很强的保守性,为探讨RAD18基因在高等动物细胞中存在的意义,我们以全长的RAD18基因为探针,应用染色体原位杂交技术及RNA印迹技术对多种细胞如KGY444(裂殖酵母)、S2(果蝇)、NIH3T3(小鼠)、A10(大鼠)、COS-7(猴)、293(人)等及Wistar大鼠多种组织进行了研究.染色体原位杂交结果显示,上述各种细胞均有很强的RAD18基因杂交信号,而质粒载体片段杂交对照则无信号.RNA印迹杂交结果表明,上述各种细胞及Wistar大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑等组织均有RAD18基因表达.这说明RAD18基因无论是在生物进化上,还是在维持细胞的正常功能方面均具有重要意义.本工作为今后克隆哺乳动物及人类该基因同源基因提供了理论依据.
作者：吴皎辉；韩云；朱应葆 刊期： 1998年第06期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
