学术投稿

产肠毒素霍乱弧菌的快速鉴定及基因分型

王军;李跃旗;刘雪松;石建时;于玺华

关键词:弧菌, 霍乱, 聚合酶链反应, 基因型
摘要:目的:为适应临床诊断和食品检测的需要,探讨快速检测霍乱弧菌及其分型的方法.方法:用聚合酶链反应(PCR)检测霍乱弧菌肠毒素(CTX)A2-B亚单位靶序列基因,结合随机扩增多态性DNA(RAPD),对霍乱弧菌进行基因分型.结果:检测的3株O139群霍乱弧菌、3株El Tor生物型和4株古典生物型均含有(CTX)A2-B亚单位基因,核苷酸序列分析证实其同源(97.1%~98.9%).RAPD中用普通引物将不同弧菌分成2种基因谱;即①O139群和E1 Tor型;②古典型.用重复序列引物进一步将霍乱弧菌分成3型,即①O139群;②E1 Tor型;③古典型.重复实验结果稳定.结论:用PCR结合RAPD检测霍乱弧菌并对其进行分型,操作简便、快速、敏感而且准确,对临床诊断、食品检测和流行病学调查具有一定的实用性.
解放军医学院学报杂志相关文献
  • p53、bcl-2和增殖细胞核抗原在胃癌前病变中表达的分析

    1材料和方法1.1材料1.1.1癌变组在诊断胃癌之前,与癌发生部位相同的粘膜活检病理诊断为中度以上肠上皮化生(18例)或异型增生(34例)的标本,共52例,均为男性,年龄60~79岁(平均67.3岁),随访时间为1年~11年5个月(平均为3年8个月).

    作者:伍银桥;王孟薇;尤纬缔;吴本俨;祝庆孚 刊期: 2001年第04期

  • p(3HB-co-3HH)对哺乳类动物骨髓干细胞生物学行为的影响

    目的:通过观察3-羟基丁酸、3-羟基己酸嵌段共聚[poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate),p(3HB-co-3HH)]对犬骨髓干细胞生物学行为的影响,探索p(3HB-co-3HH)作为组织工程支架材料在哺乳类动物体内应用的可行性.方法:应用p(3HB-co-3HH)在DMEM培养液中的浸出液(0.1 g/ml)培养犬骨髓干细胞,绘制细胞生长曲线,MTT测定及用FCM对细胞周期时相进行分析,并在p(3HB-co-3HH)薄膜上培养骨髓干细胞,观察细胞形态.结果:在细胞培养的第2~5 d,细胞增殖明显;MTT测定相对增殖率102%,细胞毒性0级;FCM检测结果显示p(3HB-co-3HH)浸出液培养组增殖期细胞为22.18%,对照组为16.12%.骨髓干细胞在p(3HB-co-3HH)薄膜上培养48 h后观察呈簇状粘附生长.结论:p(3HB-co-3HH)浸出液对犬骨髓干细胞无毒性,细胞在p(3HB-co-3HH)表面生长良好,可作为新型组织工程支架材料在哺乳类动物体内进行进一步研究及应用.

    作者:孙明学;胡平;黄靖香;高峰;卢世璧 刊期: 2001年第04期

  • 细胞因子激活骨髓免疫细胞的实验研究

    目的:通过对骨髓单个核细胞在体外与不同细胞因子培养,了解不同细胞因子对骨髓淋巴细胞的激活能力和对骨髓干祖细胞的损伤情况.方法:将IL-1、IL-2、T-IFN、CD3单抗进行不同组合后,在体外与骨髓单个核细胞分成对照组、IL-2组、CD3-AK、CIK组进行培养.培养过程中观察细胞形态和数量的变化,并在培养后检测免疫活性细胞的细胞毒性和造血干细胞的保存情况.结果:培养过程中对照组细胞数量减少;IL-2组细胞数量变化不明显;CD3-AK组、CIK组细胞数量显著增多,并出现较多的集聚成簇的淋巴样细胞,培养后其细胞毒性明显强于对照组及IL-2组,但细胞数量增加和细胞毒性无明性差异.培养后各组造血干细胞保存情况约60%~87%.结论:IL-2、CD3单抗在体外与骨髓单个核细胞培养后,即能激活免疫细胞增殖,又能保留足够的造血干细胞.

    作者:靳海杰;黄文荣;李续建;张伯龙;高春记;达万明 刊期: 2001年第04期

  • 我院高学历人员现状分析及对策

    近年来,不少博士、硕士等高学历人员进入医院,并逐步成为医院建设的中坚力量.加强对这些高学历人员的培养和管理,对于增强医院的竞争力,加快医院发展步伐至关重要.笔者结合我院高学历技术干部队伍的情况,对高学历人员的现状进行分析,并提出几点意见,供同行们参考.

    作者:张士涛;张献怀;宋益平;黄春霞;马芙芹 刊期: 2001年第04期

  • PD098059抑制血管紧张素Ⅱ对心肌细胞活力的影响

    目的:观察分裂酶原激活的蛋白激酶系统(MAPK)特异阻断剂PD098059对心肌细胞活力与增殖能力的影响,探讨细胞内信号传递通路的阻断是否能有效地干预细胞能量代谢,为寻找新的心衰的预防与治疗药物提供实验依据.方法:利用培养的乳鼠心肌细胞,根据活细胞线粒体在能量代谢过程中可作用于MTT产生蓝紫色结晶产物formazan这一原理,应用比色法测定血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对培养心肌细胞的活力的影响和PD098059的干预作用.结果:与对照组相比,AngⅡ在12 h之内使formazan产物的OD值逐渐上升,12 h达到高峰,此后开始下降,至24 h已低于正常水平,它们的OD值之间均有显著的统计学差异(P<0.05或0.01),PD098059可以显著的拮抗AngⅡ对心肌细胞活力的影响.结论:该结果提示PD098059可以显著的拮抗AngⅡ对心肌细胞活力的影响.这对了解AngⅡ在心功能不全代偿和心衰发生中的作用及临床上应用细胞内信号系统阻断剂治疗和预防心衰具有重要参考价值.

    作者:陈光辉;祝善俊;祝之明;叶梅;刘莉 刊期: 2001年第04期

  • +Gz对颞下颌关节影响的动物实验模型

    目的:建立持续性高加速度(+Gz)重复作用下颞下颌关节变化的动物模型.方法:将雄性Wistar大鼠随机分成3组,对照组、+1 Gz组和+10 Gz组,每组12只.应用六九型动物离心机,离心加速度曲线为梯形,+10 Gz峰值持续时间为30 s,G值增长率约为0.5 G/s,间隔+1 Gz 60 s,连续每天5次,每周4 d,共3周.结果:在实验中大鼠能逐渐适应固定和持续性高加速度(+Gz)重复作用,同时,成功地复制出颞下颌关节疾病的病理表现.结论:本动物模型重复性好,是研究正加速度对颞下颌关节影响比较理想的动物模型.

    作者:尹音;田慧颖;胡敏;马良;姚军;孙振宇;侯军;李传兵 刊期: 2001年第04期

  • 实验性兔眼aPVR房水经葡萄膜巩膜流出量的测定

    目的:探讨前部增生性玻璃体视网膜病变(anterior proliferative vitreoretinopathy,aPVR)病理状态下房水经葡萄膜巩膜流出量的变化,从房水动力学的角度揭示aPVR引起慢性低眼压的发病机制.方法:利用培养的同种兔皮肤成纤维细胞制作aPVR引起慢性低眼压的动物模型.于术后14 d、28 d和56 d分别测定房水经葡萄膜巩膜流出量(uveoscleraloutfloW,Fu).结果:术后2周,实验组和对照组房水经葡萄膜巩膜流出量无明显差别,但均明显高于正常组;术后4周、8周实验组房水经葡萄膜巩膜流出量明显高于对照组.结论:在aPVR病理状态下,低眼压的形成与房水经葡萄膜巩膜流出量增加有关.

    作者:刘百臣;张卯年;刘铁城;彭秀军;赵玉兰;廖杰 刊期: 2001年第04期

  • 加强和改进医学高级人才思想政治工作的实践与思考

    新形势以及思想政治工作的现实状况,要求我们必须大力加强和改进思想政治工作.笔者结合研究生队思想政治工作具体实际进行了有益的探索,研究有针对性地做好思想政治工作的有效方法,使思想政治工作真正落到实处,取得实效.

    作者:郝燕燕 刊期: 2001年第04期

  • 特大交腿皮瓣修复小腿深度烧伤1例

    1临床资料男性患者,34岁,农民,因煤气中毒右小腿烧伤后肿痛15 d收入院.患者因煤气中毒晕到后烧伤右小腿,伤后约10 min被他人发现救起,于当地医院给予吸氧及外用烧伤灵抗感染治疗,15 d后转入我院.查体:体温37℃,脉博:82/min,呼吸:18/min,血压:16/12 kPa,体重:70kg.烧伤创面主要位于右小腿胫前约25 cm×10 cm,创基呈黑色干性坏死,胫骨外露约15 cm×2 cm,呈灰白色,痂下有少许脓性分泌物,有恶臭味,坏死界限清楚,足背动脉博动好,末梢血运好,足趾活动灵活,活动时小腿疼痛加重.

    作者:单志刚;贾晓明;付长志;张进军;苏立翔;李奇军;邹宏亮 刊期: 2001年第04期

  • 恶性胸腺瘤广泛胸内转移存活5年1例

    1临床病例男性患者,47岁,1993年5月查体发现右前纵隔肿瘤,MIR示为囊性占位性病变,肿瘤为7 cm×5 cm×4 cm,临床诊断胸腺肿瘤,于1993年6月16日在胸腔镜下行肿瘤切除术,术中无意切破肿瘤,流出褐色液体,在镜下全切肿瘤并行胸腔冲洗;术后病理报告为纤维组织囊壁,可见上皮细胞.术后患者未予任何治疗,一直正常上班.1994年10月复查,MRI示右上纵隔4.5 cm×4 cm× 3.5 cm实性肿块,右侧后胸膜多个转移灶,临床诊断恶性胸腺瘤并胸内广泛转移,于1995年11月29日开胸行肿瘤切除术,术中见肿瘤大直径8 cm×7 cm×6 cm;小直径0.5 cm,共20余个;术后病理为恶性胸腺瘤.

    作者:周桂霞;王秋华 刊期: 2001年第04期

  • 周围动脉闭塞性疾病的旁路手术治疗

    目的:探讨周围动脉闭塞性疾病的动脉旁路手术治疗方法.方法:65例周围动脉闭塞性疾病,采用彩色多普勒及动脉造影检查确定病变范围.52例术前应用超声多普勒血流仪行节段动脉压测定和计算踝/肱指数.根据动脉狭窄或闭塞病变范围,实施动脉旁路重建.术中自体大隐静脉移植38例,人工血管移植27例.结果:48例患者随访6~36个月,经彩色多普勒及动脉造影检查,通畅率为83.5%,踝/肱指数由术前平均0.41达到0.88.结论:动脉旁路术是治疗动脉闭塞性疾病的有效的手术方法,动脉流人、流出道的畅通,是手术成功的关键.多节段性动脉闭塞病变,可设计多平面分段旁路转流术或通过动脉内膜剥脱扩大流出道口径,可取得好的效果.

    作者:晋援朝;梁发启;宁莫凡;葛进;王岭 刊期: 2001年第04期

  • 人心肌肌凝蛋白重链的制备研究

    目的:探讨制备人心肌肌凝蛋白重链(MHC)的方法,为制备其抗体提供抗原.方法:采用改良法制备人心肌MHC,通过SDS-PAGE及Western印迹分析其纯度及抗原特性.结果:①SDS-PAGE显示,纯化的人心肌MHC呈现只有-分子量较大的代表人心肌MHC带的典型图像;②Western印迹显示,200 ku处有一典型的感光带.结论:所用的改良法能有效地提取纯化人心肌MHC,可满足制备其抗体的需要.

    作者:刘德新;李小鹰 刊期: 2001年第04期

  • 减压后脑肿大早期弥散加权和T2加权MRI的实验研究

    目的:观察减压后脑肿大早期弥散加权和T2加权MRI的变化过程,探讨减压后脑肿大早期是否发生脑水肿.方法:应用弥散加权和T2加权MRI对6只猫作实验前和减压后2 h、4 h、6 h动态观察.结果:MRI均显示减压后肿大的脑组织明显向对侧移位,且随时间推移,移位程度加重;减压后2 h,肿大的脑组织在弥散加权MRI上就呈现为低强度信号区;减压后4 h,肿大的脑组织在T2加权MRI上才呈现为高信号区.结论:减压后脑肿大早期(<2 h)肿大的脑组织就发生了血管源性水肿.

    作者:朱儒远;许百男;周定标;安宁豫;张志鉴 刊期: 2001年第04期

  • 原位PCR检测肝外胆管癌组织内HCV RNA及其意义

    1材料和方法1.1材料 51例肝外胆管癌来自解放军总医院,常规石蜡包埋.引物位于5'端非编码区.外引物:上游引物,5'GGCGACACTCCACCATAGATC3',下游引物,5'GGTGCACGGTCTACGAGACCT3'.内引物:上游引物,5'CTGTGAGGAACTACTGTCTTC3',下游引物,5'CCCTATCAGGCAGTACCACAA 3'.

    作者:陈明易;黄志强;陈乐真;高亚兵;彭瑞云;王德文 刊期: 2001年第04期

  • 肢体硬度测量对筋膜间室综合征的诊断作用

    目的:通过对肢体肿胀硬度的测量,探求筋膜间室综合征的无创性诊断方法.方法:用706代血浆注入6条狗的胫前外侧筋膜间室内,使其压力上升而建立筋膜间室综合征模型,测定狗后腿的组织压和肢体硬度.结果:随着组织压的升高,肢体硬度逐渐增加.肢体硬度与组织压呈正相关,二者之间的回归方程为:Y=-2.452+0.344X.结论:通过测量肢体硬度可以推算出筋膜间室内组织压,其优点是无创伤,可长时间、连续监测.

    作者:王志刚;张伯勋;刘郑生;王兵 刊期: 2001年第04期

  • 右肾原发性非霍其金病1例

    1临床病例女性患者,65岁,发热伴消瘦四月余,抗炎治无效收入院.体检:贫血貌,全身浅表淋巴结未及肿大,右肾区叩痛(一).化验:Hgb 51 g/L,ALP明显增高;尿LEU100×10-5/L,ERY 250×10-6/L,尿培养(一).影像学检查:静脉肾盂造影检查示右肾中部饱满;腹部CT平扫右肾中部肾实质增厚、限局性隆起,增强后右肾中部见一与正常肾实质界线清晰、相对低密度的类圆形团块影,部分突出于肾实质外,大小约3 cm×4 cm,密度均匀,CT值为84 Hu(正常肾组织CT值为114 Hu),腔静脉旁可见小淋巴结,肝脏、脾脏、胰腺正常;B超右肾均匀低回声实性占位病变.

    作者:杨蓉 刊期: 2001年第04期

  • 原发浅层巩膜血管瘤2例

    1临床病例例1,女,8岁,汉族,学生,因发现右眼肿物1月于1999年3月8日入院.1月前其母无意中发现患者右眼巩膜鼻上方一黑色肿物,患儿无眼红,眼痛,畏光,流泪等症状,家族中无类似病史,视力:右、左眼1.5;右眼巩膜处上象巩缘后约5 mm处可见一黑色肿物,形状不规则,近扁椭圆形,大小约5 mm×9 mm×3 mm,质硬,有完整包膜,底部固定于巩膜,不能推动,无压痛;其周围未见血管充盈;双眼屈光间质透明,双眼底未见异常,眼压:双眼均为1.57 kPa(14.57 mmHg),右眼巩膜透照见肿物透光试验阴性,肿物颞侧可见蚓状血管影,其他部位无血管影,B超示一囊性物,于巩膜层间,无明确血流,彩色多普勒检查肝胆脾胰肾等无血管瘤改变.

    作者:王凤翔;王大江;李国良;李哲 刊期: 2001年第04期

  • 胃癌组织中IL-6及其受体的测定和临床意义

    目的:检测胃癌组织中白细胞介素6(IL-6)及其受体的水平与胃癌细胞恶性程度、肿瘤大小、浸润转移的关系及其临床意义.方法:运用ELISA技术半定量、平行地检测了30例胃癌及其相应癌旁组织中IL-6及其受体的水平,并综合分析了IL-6及其受体与胃癌临床生物学指征的相关意义.结果:IL-6和IL-6R,在30例胃癌组织中,均显著高于相应的癌旁组织;在伴有淋巴结转移、浸润到肌层和浆膜层及临床分期较晚的胃癌组织中均明显增高;IL-6在分化低、肿瘤较大的胃癌组织中也显著增高.结论:在胃癌组织中,IL-6及IL-6R的水平明显增高,且与胃癌的临床生物学指征相一致.对IL-6/IL-6R水平的检测是预示胃癌细胞恶性程度和浸润转移的重要手段之一,有利于指导临床诊治,判定预后.

    作者:李冰;陈凛 刊期: 2001年第04期

  • 破骨细胞体外培养方法的建立与形态观察

    1材料和方法1.1 骨磨片制备新鲜牛股骨皮质锯成6 mm×6 mm×200 μm的小块,再磨成10μm厚.

    作者:吴宗键;王继芳;黄靖香 刊期: 2001年第04期

  • 心肌肌钙蛋白I荧光免疫测定的临床意义

    目的:为评价扩散分离免疫技术,荧光免疫定量测定心肌肌钙蛋白I(troponin I,TnI)的临床价值.方法:我们测定了60例健康成年献血员和30例非心肌梗死血清肌酸磷酸激酶(CK)增高者清晨空腹血清TnI,观察了10例急性心肌梗死患者血清TnI及其它心肌损伤标志物的动态变化.结果:健康成年献血员TnI 95%可信上限0.8 μg/L;非心肌梗死CK增高者中6例CK-MB也增高,无1例TnI超过正常上限者;急性心肌梗死患者胸痛发作后3~6 h TnI开始增高,12~24 h达峰值,168 h后仍有8例患者TnI高于正常.结论:TnI是目前特异性的心肌损伤标志物;TnI测定对判断心肌损伤与否有重要意义.

    作者:赵玉生;王士雯;傅蕾;李国君;李天德;刘景汉 刊期: 2001年第04期

解放军医学院学报杂志

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主管:解放军总医院-解放军医学院

主办:解放军总医院-解放军医学院