吕治；彭国丽；苏建荣
目的 通过抑制低氧诱导因子-1α转录活性,研究低氧诱导因子-1α在低氧诱导的细胞死亡中的作用.方法 ①将PC12细胞接种于12孔板,在20％常氧和3％低氧环境中培养24h,在光镜下拍照并应用计数方法记录PC12细胞的生长情况.②将PC12细胞接种于96孔板,在常氧和低氧环境中培养24h后,用细胞活力检测剂(a novel tetrazolium compound,3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl) -2- (4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium inner salt,MTS)检测PC12细胞的生长情况.③在常氧和低氧条件下分别用5 nmol/L、50 nmol/L、500 nmol/L的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24 h和48 h后,用MTS法检测细胞活力.结果 ①细胞计数和MTS法检测细胞活力的结果均显示3％的低氧条件可明显诱导PC12细胞死亡.②不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24h之后,低氧和常氧的细胞活力没有显著区别.③不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞48 h之后,低氧不再促进细胞死亡,相反,低氧条件处理的细胞活力明显好于常氧.结论 低氧会促使PC12细胞死亡,棘霉素抑制HIF-1α的转录活性24h后,低氧对PC12细胞的促死亡作用减弱；48 h后,低氧组的细胞活力还可超过常氧组.这表明,低氧下过量的HIF-1α转录激活对细胞是有害的.
作者：李冉；王勇；宫晓丽；范明；王晓民；朱玲玲；汪璇 刊期： 2012年第02期
目的 观察同型半胱氨酸血症对兔颈动脉平滑肌细胞氧化损伤,进而从细胞及分子水平探讨同型半胱氨酸血症对活体动物平滑肌细胞的氧化损伤的发病机制.方法 以高蛋氨酸饮食饲喂新西兰大白兔,3个月后分离颈动脉,分离得到的兔颈动脉平滑肌用胰蛋白酶消化处理,取消化后的细胞进行培养.采用黄嘌呤氧化比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活力.用可见光比色法测定细胞内过氧化氢(catalase,CAT)的活力.结果 在高蛋氨酸饮食作用下,兔颈动脉平滑肌细胞内CAT、SOD的含量明显增高,与2％的蛋氨酸低饲喂浓度及对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 同型半胱氨酸血症可加速动脉血管壁平滑肌细胞的增生,并可能在一定剂量范围内造成动脉血管壁平滑肌细胞的氧化损伤加重,使机体动脉粥样硬化的进程加速.
作者：李燕；张春来；卢峰；王立忠；姜玉凤 刊期： 2012年第02期
目的 构建野生型(BβArg448)和突变型(BβLys448)纤维蛋白原稳定表达细胞系,为进一步研究BβArg448Lys基因多态性的病理生理学意义及相关蛋白功能研究提供实验基础.方法 以含纤维蛋白原野生型Bβ链cDNA全长的表达载体pMLP-FGB(448G)为模板,采用PCR定点突变技术构建BβLys448表达载体,即突变型质粒pMLP-FGB(448A).应用脂质体转染及药物加压筛选的方法,将纤维蛋白原Aα链、野生型/突变型Bβ链、γ链表达载体共同转染至CHO-K1细胞,RT-PCR检测各条链mRNA的表达.结果 野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系在转录水平构建成功.结论 野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞等在转录水平构建成功,为进一步体外研究BβArg448Lys所致纤维蛋白原的结构与功能异常奠定了基础.
作者：林媛；李积凤；刘杰；牛梦林；孙然；王军；刘岩；王辰 刊期： 2012年第02期
目的 脑电图(electroencephalogram,EEG)是通过脑电描记仪将脑自身微弱的生物电放大记录成为一种脑电谱图,以帮助诊断疾病的一种现代辅助检查方法.早期对闭眼和睁眼差异的研究结果多集中在位于枕叶-顶叶的α波的幅度的变化,闭眼幅度大于睁眼.本文主要探讨单侧眼睛(左眼和右眼)分别睁开和闭合时所引起的七波段脑电图谱:Delta(0.5～3.5 Hz),Theta(4～7 Hz),Alpha-1 (7.5～9.5 Hz),Alpha-2( 10～12 Hz),Beta-1(13～23Hz),Beta-2(24～34 Hz) and Gamma(35～45 Hz)的差异.方法 受试者为15名健康男性(年龄19～27岁),静息状态下,在安静舒适的室内环境中,将随机单侧睁眼闭眼(左开/左闭,右开/右闭)作为刺激,采用电脑自动记录七波段脑电图(128-导EEG).结果 静息状态下的脑电区域能量:中间频率波段alpha-1与alpha-2闭眼时明显高于睁眼时( alpha-1,P =0.038；alpha-2,P=0.02),而比较单侧睁眼闭眼alpha-1与alpha-2时,差异无统计学意义(alpha-1,P =0.502；alpha-2,P=0.984),其他波段差异无统计学意义.结论 闭眼情况下α波功率显著高于睁眼,而在比较七波段单侧眼睛睁闭时,差异无统计学意义,说明单侧外界光线刺激引起的对侧大脑半球及视觉皮质的变化,经过视交叉传入,胼胝体整合两边的头脑反应是一种持续性变化(2 min),从而使两侧EEG区域能量图一致.
作者：王坤；崔维棋；李国珍；陈昭燃 刊期： 2012年第02期
目的 观察胰岛素对一氧化碳(carbon monoxide,CO)中毒后迟发性脑病(delayed neuropsychologic sequelae,DNS)大鼠认知功能及脑神经元凋亡的影响,为临床防治一氧化碳中毒后迟发性脑病提供新的思路.方法 采用大鼠腹腔注射CO气体法制备模型.将中毒后存活的大鼠采用抽签法随机分为CO中毒模型组,CO中毒模型+胰岛素组.胰岛素组给予1.2mL胰岛素葡萄糖溶液(2 U/Kg胰岛素、2g/kg葡萄糖)快速腹腔注入,连续给药7d;模型组、对照组腹腔注射等剂量的0.9％氯化钠注射液,连续7 d.采用Morris水迷宫检测各组大鼠1～5周逃避潜伏期,TUNEL法检测各组大鼠5周神经元凋亡情况.结果 腹腔注入CO后,模型组大鼠出现认知功能下降,脑神经细胞凋亡明显；胰岛素组大鼠认知功能改善,脑组织病理损害减轻,细胞凋亡减轻.结论 胰岛素能够改善大鼠认知功能,抑制神经元凋亡,改善存活神经元的细胞形态,对大鼠CO中毒后迟发性脑病具有一定的神经保护作用.
作者：廖秋菊；王晶；秦俭 刊期： 2012年第02期
目的 探究去甲肾上腺素对大鼠结肠黏液分泌的影响以及肾上腺能β受体在大鼠结肠黏膜的分布.方法 采用酶联免疫吸附测定法检测去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对结肠黏液分泌的影响；用免疫荧光组织化学方法观察黏蛋白2(mucin2,MUC2)及β肾上腺能受体在结肠黏膜的分布；实时定量PCR方法检测β肾上腺能受体在大肠结肠黏膜的表达；同时采用阿利新蓝/过碘酸雪夫染色方法检测黏液细胞在结肠黏膜的分布；使用激光共聚焦显微镜观察β2肾上腺能受体与MUC2在结肠黏液细胞的共存.结果 去甲肾上腺素可刺激大鼠远端结肠黏膜的黏液释放增加,比对照组增加约247％.免疫荧光组织化学结果显示β1和β3肾上腺能受体在结肠黏膜有弱表达,β2肾上腺能受体为高表达.β1和β2肾上腺能受体mRNA表达相对量与免疫荧光组织化学一致.黏蛋白MUC2主要表达在结肠隐窝的黏液细胞内,且与β2肾上腺能受体有共存.结论 β2肾上腺能受体与MUC2在结肠黏液细胞共存；去甲肾上腺素可促进结肠黏液分泌.
作者：李晓峰；张悦；李蕴；朱进霞 刊期： 2012年第02期
在研究人类银屑病复杂表型与发病机制的过程中,由于缺乏自然发生的可模拟银屑病的疾病模型,该研究曾一度停滞.但随着对银屑病发病机制认识的不断深入,现已模拟出多种在组织水平、细胞水平以及分子水平与银屑病较为相似的模型.本文通过对多种银屑病相关模型的总结与评价,分析各模型的优势与局限,为银屑病发病机制、药物筛选及治疗提供参考.
作者：底婷婷；赵京霞；李萍 刊期： 2012年第02期
目的 探讨反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、转录反转录协同实验(transcription revere concerted,TRC)在诺如病毒(norovirus,NVs)性胃肠炎检测中的应用,为NVs检测提供更快捷的检测方法.方法 收集2007年2月～2007年3月北京地区各医院及各区疾控中心病毒性胃肠炎患者粪便样本364例,分别采用RT-PCR方法和TRC方法进行NVs核酸检测,并以RT-PCR方法为标准对TRC方法进行评价,计算其灵敏度、特异性等指标；通过一致性Kappa检验,评价两种方法的一致性.结果 应用TRC方法检测364例病毒性胃肠炎患者粪便样本,NVs检测总阳性率为43.96％ (160/364)；其中,NVs Ⅰ型(genegroup Ⅰ,GGⅠ)阳性率3.85％(14/364),NVsⅡ型(genegroupⅡ,GGⅡ)阳性率40.11％(146/364)；在阳性样本中,78.58％的NVs GGⅠ和89.73％的NVs GGⅠ在20min内检出,明显缩短了检出时间.其中男女两组差异无统计学意义(x2=0.465,P=0.495).按年龄分组,其中阳性率高的为50～59岁组,其阳性率为63.63％,阳性率低的为10～19岁组,其阳性率为18.93％,通过x2检验,除10～19岁组检出率低于各组外,其余各组间检验结果差异无统计学意义.结论 与RT-PCR方法相比,TRC方法检测NVs敏感度高、特异性强,操作简便易行,适用性强.
作者：吕虹；高志勇；张国军；闫惠平；康熙雄 刊期： 2012年第02期
目的 确定阴道主要角色菌的分离率与细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)的关系,建立BV的分子诊断方法.方法 采用临床Amsel标准筛选91例BV患者、82例健康对照妇女.采集阴道分泌物标本提取细菌基因组DNA,采用细菌特异性16SrRNA基因PCR检测标本中的卷曲乳酸杆菌、阴道加德纳菌、人型支原体等11种角色菌.比较上述细菌分离率与BV发生的关系.通过统计学分析建立佳的用于BY诊断细菌检测组合.结果 与BV密切相关的阴道细菌有纤毛菌属、阴道阿托波菌属、巨球菌属、羞怯动弯杆菌属、普雷沃菌属.上述细菌的分离率在2组样本的差异具有统计学意义(P＜0.01).以联合检测阴道阿托波菌属、纤毛菌属、普雷沃菌属作为BV的判断标准时,敏感性为93.41％,特异性为78.05％.结论 BV为多种微生物混合感染性疾病,通过PCR方法检测主要致病菌或致病菌组合,可以有效地对BV进行快速分子诊断.
作者：吕治；彭国丽；苏建荣 刊期： 2012年第02期
目的 探讨急性脑梗死患者血清淀粉样蛋白A( serum amyloid A,SAA )的临床和预后价值.方法 选取广东省惠州市第三人民医院神经内科2009年10月1日至2010年10月1日收治的100例急性脑梗死患者,收集其静脉血样本作为病例组,酶联免疫吸附法测定患者治疗前和治疗21 d时SAA浓度,放射免疫比浊法测定C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)浓度；选择50例正常体检者作为对照组.予患者综合治疗,并在入院及治疗21 d时进行美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分,判断其神经功能缺损情况,利用Pearson相关系数对SAA浓度与NIHSS评分进行分析,探究SAA在急性脑梗死患者中的临床和预后价值.结果 病例组治疗前SAA浓度为(18.05±6.77)mg/L,明显高于治疗后(7.81±2.66) mg/L及对照组(7.49±4.49) mg/L(P均＜0.05)；病例组治疗前CRP浓度为(15.08±4.32) mg/L,明显高于治疗后(6.05±2.20) mg/L及对照组(5.5±3.34)mg/L(P均＜0.05).21 d时病例组NIHSS评分比入院时明显下降(11.07±4.2vs7.78±2.89,P＜0.05).急性脑梗死患者急性期SAA浓度,而非CRP浓度,与NIHSS评分差值呈正相关(r=0.612,P＜0.05).结论 急性脑梗死患者血清SAA、CRP浓度均明显升高,可作为判断病情活动的重要指标,急性期SAA浓度与治疗前后NIHSS差值显著相关,提示SAA可作为判断急性脑梗死患者的预后的指标.
作者：吴修信；李立新；廖品君；苑媛 刊期： 2012年第02期
目的 检测食管鳞状细胞癌组织及配对癌旁组织中c-Met蛋白的表达情况,探讨c-Met的表达与食管鳞状细胞癌患者临床病理特点的相关性.方法 收集87对甲醛固定,石蜡包埋的食管鳞状细胞癌及配对的癌旁组织标本,所有病例均经病理证实,同时收集患者的临床资料.采用免疫组化的方法检测组织中c-Met的表达情况.结果 c-Met主要表达于细胞膜.表现为胞膜呈棕黄色染色.87例食管鳞癌组织中有29例(33.3％)呈阳性表达.配对癌旁组织中未见c-Met表达.c-Met的表达与食管鳞状细胞癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床病理分期(tumor-node-metastasis,TNM)存在显著相关性(分别为P=0.017,P=0.000,P =0.000),而与患者的性别、年龄、肿瘤细胞分化程度、肿瘤大小等无明显相关性(P＞0.05).结论 c-Met在部分食管鳞癌组织中呈高表达,且与患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期存在显著相关性,c-Met的高表达可以作为高侵袭性食管鳞癌的分子标志物.
作者：刘春涛；朱圣韬；田月；张澍田 刊期： 2012年第02期
目的 探讨丘脑神经节胶质细胞瘤(ganglioglioma,GG)的临床特点、治疗和预后.方法 对6例经手术和病理证实的丘脑神经节胶质细胞瘤患者的临床资料进行回顾性分析并复习文献.结果 丘脑神经节胶质细胞瘤主要临床表现为颅内压增高和偏身运动感觉障碍,患者平均发病年龄12.5岁.6例肿瘤镜下全切除2例,近全切除3例,大部切除1例.术后3例出现对侧肢体偏身运动感觉障碍加重.6例患者平均随访29个月,2例恢复正常工作,3例生活可自理,1例间变性神经节胶质细胞瘤患者复发后死亡.结论 丘脑神经节胶质细胞瘤由于缺乏特异的临床症状和神经影像学表现,术前诊断困难,明确诊断需要组织病理学检查.手术治疗是主要的治疗方法,间变性神经节胶质细胞瘤预后差,术后应长期严密随访.
作者：耿素民；张力伟；郝淑煜；吴震；贾桂军；张俊廷 刊期： 2012年第02期
帕金森病(Parkinson's disease,PD)是以中脑黑质多巴胺能神经元变性缺失为主要病理特征的一种神经退行性疾病,临床表现主要有静止性震颤、肌强直、运动减少和姿势反射障碍等[1-2].PD多在40岁以后发病,随着老龄化日益加重,其发病率呈现出明显上升趋势[3-5].研究显示PD发展过程中的行为改变表现出慢性进展的特点,这与多巴胺能神经元发生慢性进行性退变有关[1-7].目前,有关PD模型实验大部分来自于啮齿类低等动物模型,缺乏高等灵长类动物试验[5-8],其原因是对高等灵长类动物PD模型行为学变化缺乏客观有效的评价方法[9-10].
作者：刘玉军；鲁强；陈庆友；张进禄 刊期： 2012年第02期
目的 监测并比较神经内外科脑脊液标本培养阳性的细菌流行病学分布及耐药状况,以期对临床抗菌药物治疗提供依据.方法 对送检脑脊液标本进行细菌培养、鉴定及抗菌药物敏感(简称药敏)试验,比较病原菌分布和药敏结果.结果 1)细菌构成比比较:革兰阳性菌(G+菌)在神经外科中的比例(67.2％)高于神经内科(56.1％),铜绿假单胞菌在神经内科革兰阴性菌(G-菌)中所占比例(20.4％)高于神经外科(6.7％),鲍曼不动杆菌在神经外科G-菌中的比例(37.8％)高于神经内科(22.4％).2)细菌药敏:G+菌对万古霉素、利奈唑胺敏感率高,G-菌对亚胺培南、阿米卡星敏感.神经外科铜绿假单胞菌比神经内科对环丙沙星的敏感率更高.神经外科表皮葡萄球菌对利福平更敏感.结论 神经内外科中枢神经系统感染多为院内感染,以革兰阳性菌为主.监测并比较颅内感染病原菌分布及药敏情况,可为神经内外科颅内感染的预防和经验性抗菌药物治疗提供可靠数据资料.
作者：荆楠；唐明忠；刘志忠；康熙雄 刊期： 2012年第02期
Toll样受体(Toll like receptors,TLRs)是一类跨膜受体,主要表达于抗原提呈细胞及一些上皮细胞,通过识别特异性配体来激活免疫反应.除外源性配体外,TLRs还可识别一些内源性分子,信号的过度活化则可导致自身免疫性疾病.本文综述了TLRs的种类及配体、相应的信号通路及功能调节,重点介绍了TLRs在一些自身免疫性疾病中的研究现状,后探讨了TLRs在自身免疫性疾病治疗中的作用.
作者：马瑞敏；张国军；康熙雄 刊期： 2012年第02期
目的 通过对UF-1000i尿沉渣分析仪假阳性结果进行分析,获得实验室工作中排除假阳性检测的经验和方法.方法 采用抽签法随机收取住院患者晨尿样本500份,同时进行UF-1000i尿液沉渣流式自动分析仪(简称UF-1000i)、干化学和显微镜检测(镜检).UF-1000i检测异常者为阳性,其中UF-1000i检测异常而干化学和镜检正常者为假阳性,将2者检测的有形成分结果进行分析.结果 500份样本中,有178份阳性样本,其中有20份样本UF-1000i的主要检测项目均出现假阳性,其中红细胞(erythrocyte,RBC)、白细胞(leukocyte,WBC)、管型、上皮细胞(epithelial cells,EC)的假阳性率分别为10.8％、8.2％、23.1％、14.3％.结论 UF-1000i尿沉渣分析仪提高了尿液分析的过筛检查实验室检测效率,但对其阳性结果还需密切注意,应该避免假阳性结果.
作者：刘常军；刘婷；董矜；姜辉；田亚平 刊期： 2012年第02期
目的 探讨γ-谷氨酰基转移酶(gamma-glutamyltransferase,GGT)冰冻混合人血清候选标准物质制备方法的可行性,同时观察并分析其在-80℃保存的稳定性.方法 对收集的GGT血清按5个浓度水平进行混合过滤分装,同时分别在0、7、30、60、120、180、330、360、390、750 d测定GGT冰冻混合人血清候选标准物质,采用线性回归方差分析对测定结果进行稳定性检验,评价其稳定性.结果 在750 d以内,C1～C5线性回归方差分析的P值均＞0.05(C1～C5测定结果P值分别为0.886,0.753,0.585,0.571,0.945).结论 本实验室采用的GGT冰冻混合人血清候选标准物质制备方法简便易行,且候选人血清标准物质在750 d内稳定性良好.
作者：徐静；张建平；王清涛 刊期： 2012年第02期
目的 探究肠球菌GyrA基因突变和多重耐药泵与氟喹诺酮类药物耐药性的关系.方法 全部试验菌株使用VITEK 2-Compact仪器和GPI卡进行鉴定.通过PCR和单链构象多态性(SSCP)法检测对左氧氟沙星(Levo)与环丙沙星(Cip)耐药的30株粪肠球菌和10株屎肠球菌GyrA基因有无碱基发生突变,并通过基因测序确定其突变类型.检测了30株粪肠球菌在M-H琼脂中加入终浓度为20μg/mL利血平后Cip MIC值的改变.结果 PCR-SSCP分析结果表明40株对Levo和Cip同时耐药肠球菌均扩增出GyrA基因,其中有24株粪肠球菌和4株屎肠球菌的单链泳动带与粪肠球菌ATCC 29212和敏感菌株的单链泳动带相比较出现异常.其中粪肠球菌在第87位上有密码子改变:GAA变为GGA；屎肠球菌在第83位有密码子改变:AGT变为TAT,这些突变均可引起氨基酸的改变.在M-H琼脂中加入利血平可以提高部分粪肠球菌对环丙沙星的敏感性.结论 用PCR-SSCP法检测40株肠球菌的GyrA基因并通过测序分析,显示有70％(28株)肠球菌碱基发生了突变,说明GyrA基因喹诺酮类药物耐药决定区(QRDR)突变是肠球菌对氟喹诺酮类药物耐药的重要原因,此外还有药物泵出等耐药机制的存在.
作者：闫东辉；许淑珍；苏建荣 刊期： 2012年第02期
目的 探讨外周血中CD3 + CD4 - CD8 -( double negative T,DNT )细胞及T淋巴细胞亚群在慢性丙型肝炎(chronic hepatitis C,CHC)患者中的表达及意义.方法 利用流式细胞仪对92例CHC患者、93例正常健康人外周血中的DNT细胞及T细胞亚群进行检测,并对比分析两者的差异.结果 CHC患者DNT细胞百分比(8.57％±6.16％)高于正常对照组(6.78％±4.50％)(P＜0.05),其绝对数在两者间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).CHC患者CD4+％,CD4+/CD8+比值低于正常对照组(P值均＜0.001),CD8+％高于正常对照组(P＜0.001).结论 CHC患者DNT细胞百分比显著升高及T淋巴细胞亚群比例改变,可能是丙型肝炎病毒感染慢性化的重要原因之一.
作者：梁骑；焦艳梅；计云霞；李田；吴昊；张国元；唐中 刊期： 2012年第02期
目的 探讨他克莫司对大鼠肾缺血再灌注的保护作用.方法 选用Wistar雄性大鼠60只,采用抽签法随机分为3组(每组20只):假手术组、对照组、实验组.到达设定的不同灌注时间点取血和肾脏标本,测定血清肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肿瘤坏死因子α( tumor necrosis factor,TNF-α)；检测肾组织B细胞淋巴瘤(B cell lymphoma,Bcl-2)及病理情况.结果 在缺血45 min后再灌注2、6和24h时,实验组的Cr、BUN水平显著低于对照组(P＜0.05),而Bcl-2免疫反应强度显著高于对照组(P＜0.05).在再灌注的各时间点,实验组的血清TNF-α含量水平均显著低于对照组(P＜0.05).HE染色光镜下对照组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度重；实验组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度明显减轻；假手术组肾小管及肾小管上皮细胞未见明显改变.结论 他克莫司对大鼠肾缺血再灌注的保护作用可能是通过降低血清TNF-α表达水平和增加肾脏Bcl-2蛋白的表达,从而改善大鼠肾缺血再灌注损伤.
作者：武飞；刘致中 刊期： 2012年第02期
首都医科大学学报杂志
主管:北京市教育委员会
主办：首都医科大学
