徐光勋;潘承恩;刘青光
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)实验研究的观察方法,主要包括脊髓功能观察、神经电生理检查和组织学观察等[1,2].脊髓功能观察,例如Tarlov运动分级法和斜坡法,虽比较直观,但是这种方法需要动物的配合,并且存在人为的主观因素干扰[3].诱发电位测定(神经电生理检查的主要方法)一直被认为是一种评价脊髓功能完整性的客观、可靠的指标[1~4].诱发电位(EP)是指人工或自然的刺激所引起的中枢神经的电位变化,可大体分为感觉诱发电位(sensory evoked potential,SEP)和运动诱发电位(motor evoked potential,MEP)[1].
作者:邵雪梅;张茂先 刊期: 2002年第01期
为了解吸入麻醉药异氟烷和七氟烷对缺血神经元的保护作用和对c-fos、bcl-2基因表达的影响,将大鼠右大脑中动脉和双侧颈总动脉分别结扎1 h,造成脑缺血再灌模型,缺血期间分别吸入异氟烷和七氟烷.然后分别检测脑梗死体积、海马组织神经元凋亡变化和c-fos、bcl-2基因表达情况.结果显示:缺血期间吸入麻醉药组脑梗死体积、凋亡神经元细胞数和c-fos mRNA表达水平显著低于缺血组,而bcl-2 mRNA表达水平吸入麻醉药组和缺血组之间没有明显差别.表明异氟烷和七氟烷对缺血神经元有保护作用,能衰减c-fos mRNA表达,但对bcl-2 mRNA的表达无明显影响.
作者:张家瑾;张辉;邵新立;翟晶 刊期: 2002年第01期
为探讨18F-FDG(脱氧萄葡糖)PET脑显像对Alzheimer病(AD)的诊断和评价程度的标准,对AD组患者和正常老年组行静脉注射18F-FDG后行PET脑断层显像,求出双侧额叶、顶叶、颞叶、枕叶、小脑皮质、基底节和丘脑的单位容积平均计数值,然后计算出各结构计数与小脑计数的比值.结果显示,正常对照组(19例)大脑各叶皮质、基底节和丘脑的计数分别与小脑计数的比值相当稳定,变异范围较窄,变异系数2.78%~8.95%.以正常对照组顶叶、额叶、颞叶皮质与小脑计数比值的均数减去2个标准差作为判断代谢异常减低的界值,则轻度、中度、重度AD患者的灵敏度分别为66.7%(4/6),85.7%(6/7),100%(4/4);正常对照组无1例被误诊为AD,特异性为100%.17例AD患者大脑皮质放射性减低的范围随痴呆程度加重而扩大.轻度AD只有顶叶受累,中度和重度AD颞叶和额叶也受累,其中左额叶与小脑的计数比值减低程度是区别中度和重度AD的重要指标.结果表明,将顶叶、额叶、颞叶与小脑计数比值减低的范围和程度相结合,可以诊断AD并对AD痴呆程度做出较准确的评价.
作者:苏玉盛;马云川;张新卿;李德鹏;张琳瑛;尚建文 刊期: 2002年第01期
为研究聚酰胺-胺(PAMAM)树状大分子对弱酸性亲脂性药物烟酸的增溶作用,合成了以乙二胺为核的1.0~6.0代(G)PAMAM树状大分子,研究了不同pH值、不同质量浓度的树状大分子对烟酸增溶的影响.结果:pH值、质量浓度均影响PAMAM树状大分子溶液对烟酸的增溶效果.提示:增溶的主要原因是由于树状大分子的氨基与烟酸的羧基之间存在静电作用,PAMAM树状大分子可作为亲脂性弱酸性药物的增溶剂.
作者:叶玲;张锦楠;周玉兰;顾微;刘永利;扈金平;朴东旭 刊期: 2002年第01期
急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)的发病机制十分复杂,近年来大量的实验研究证实,其发病机制除自身消化外,还有磷脂酶A和血栓素A2(TXA2)、胰蛋白酶和抗胰蛋白酶系统、溶酶体酶、氧自由基、胰血循环障碍和细胞膜稳定性、炎症介质等因素[1].特别是胰腺微循环障碍在本病发病中的作用越来越受到重视.
作者:赵敏;陈瑞芬 刊期: 2002年第01期
为了克隆人多巴胺D2受体(D2R)基因以用于帕金森病的治疗,从人胎脑中提取总RNA,并逆转录成cDNA;设计一对引物用PCR方法扩增目的cDNA片段,并将其重组于pGEM-T载体中,酶切鉴定插入片段后,进行全序列测定.结果表明从人胎脑纹状体扩增出至少2种长度的cDNA片段,其中一个片段全长1445 bp,序列与GenBank(NM000795)登录的序列完全相同;另一片段为1305 bp,在第6外显子开始处有140 bp的缺失,与已知的D2R 3种转录体均不相同,可能为一种新的D2R转录体.
作者:赵焕英;段德义;张智;徐群渊;杨慧 刊期: 2002年第01期
采用EnVisionTM免疫组化方法,观察肝癌模型Wistar大鼠肝静脉阻断后肝癌及癌周组织、邻近肝叶、肺组织粘附分子-1(ICAM-1)的表达变化,采用免疫测定法观察血浆中ICAM-1的变化,以探讨肝静脉阻断对肝癌生长、侵袭和转移的影响.发现:肝静脉阻断后肝癌组织ICAM-1的表达率为18.8%(9/48),较对照组(66.7%,8/12)明显下调(P<0.01);癌周组织ICAM-1的阳性表达率为33.3%(16/48),肝左中叶ICAM-1的阳性表达率为39.6%(19/48),与对照组比较均未见差异,而肺组织ICAM-1的表达率为70.8%(34/48),明显高于对照组(25.0%,3/12),P<0.05).肝静脉阻断后血浆ICAM-1含量明显高于肝静脉阻断前(P<0.01),对照组手术前后血浆ICAM-1含量无明显变化.结果提示肝癌肝静脉阻断可促进癌细胞向远隔器官(肺组织)转移.
作者:徐光勋;潘承恩;刘青光 刊期: 2002年第01期
10~15日龄雄性昆明小鼠(提取SCs)和10日龄胚胎(提取PGCs).将PGCs以同样的浓度分别接种于铺有SCs饲养层和胚胎成纤维细胞饲养层的平皿中.培养至第7天,接种在SCs饲养层的PGCs发育成集落的数量是胚胎成纤维细胞饲养层中PGCs的5倍.PGCs集落体积也略大于胚胎成纤维细胞饲养层中的集落.PGCs集落呈鸟巢状,主要分布于SCs表面,细胞紧密聚集,边界清楚.AKP检测:从生殖嵴分离、提纯的PGCs和培养皿中生长的PGCs集落均呈AKP染色阳性.
作者:路欣;许晴;孟庆峰;上官芳芳;史小林 刊期: 2002年第01期
一氧化氮是重要的肺动脉压介导/调节因子.测定一氧化氮的变化具有重要的临床和实验意义.由于一氧化氮的半衰期仅3~5 s,较难测定,故多采用测定其合成关键酶一氧化氮合酶(nitricoxide synthase,NOS)的方法来反映一氧化氮的变化.国内外现多采用冰冻切片进行免疫组化染色[1~3]测定NOS,但此方法存在切片厚,结构易变形,染色效果及定位不够理想,标本不易长期保存等缺点.1998年9月至2000年4月,我们在肺动脉高压机制的研究中,采用石蜡切片方法进行NOS的免疫组化染色,克服了冰冻切片带来的不足,取得了较好的实验效果.
作者:刘国贞;栾丽英;周光德;陈瑞芬;宋爱利 刊期: 2002年第01期
薄层层析法是一种常用的化学分析方法,用以往的薄层层析法分离菠菜中的5种色素(叶绿素a、叶绿素b、叶黄素、胡萝卜素和姜黄素),存在着提取不完全、分离效果差、展开剂毒性大等问题[1~4],不适合在教学中使用.本实验改进了传统的菠菜色素的提取和分离方法,采用丙酮-石油醚体系为提取剂,选择乙酸乙酯-石油醚-丙酮体系作展开剂,不但有效地提取分离了菠菜中5种色素,而且所用试剂毒性小,适于化学实验教学中使用.
作者:宋学英;杨华;张枫;卢映霞 刊期: 2002年第01期
为探讨提高动脉瘤栓塞效果的途径,用显微吻合静脉袋移植的方法,建立犬的动脉瘤模型.分别以醋酸纤维素(CAP)和可控弹簧圈(WEDC)栓塞动脉瘤模型,在术后24 h、2周和2月进行造影复查,并在栓塞后不同时期,分别抽取动物进行光镜、电镜和免疫组化的病理学研究.结果:WEDC栓塞效果显著优于CAP(P<0.01),且无相关并发症;CAP组12枚动脉瘤中,4枚栓塞后出现载瘤动脉的狭窄或闭塞,2枚栓塞后1周内破裂出血.病理检查发现WEDC动脉瘤腔内24 h后被弹簧圈和疏松的血栓所填充;CAP栓塞的动脉瘤腔内被CAP致密填塞,但早期动脉瘤壁急性化学损伤明显.从栓塞后2周开始,2组动脉瘤颈部逐渐被新生的内皮组织所封闭,动脉瘤内部的血栓开始机化,但CAP组的炎症反应明显强于WEDC组,动脉瘤壁的损伤进一步加重,破裂动脉瘤的破裂点附近的瘤壁严重破坏.栓塞后2个月,2组动脉瘤内的血栓都被被纤维组织代替,动脉瘤颈部被完整的内皮组织所封闭.结果提示:WEDC仍然是目前安全可靠的动脉瘤栓塞材料,CAP因为其化学腐蚀作用和使用中控制困难,还有待于进一步改进.
作者:杨新健;吴中学;王忠诚;李佑祥;孙异临;尹可;唐军;刘作勤 刊期: 2002年第01期
细胞某部位产生的局部电位虽然不能无衰减地传到远方,但可借助细胞的电缆特性扩布到数百微米以外的邻近部位[1].本实验室根据局部电流作用原理,利用对应记录胞内、外电位的方法来推断局部电位的起源.实践证明这种方法是简便可靠的.
作者:童学红;虞棻;李效义;谢燕;张淑华;张茂先;张英才 刊期: 2002年第01期
为建立啮齿类动物中枢神经系统多潜能干细胞体外分离培养及分化鉴定的方法,将孕18 d胚胎大鼠海马及脑室下区组织分离,体外经EGF和bFGF刺激下扩增,然后撤除GFs培养;通过免疫细胞化学方法染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向.结果:培养的部分细胞在特定生长因子的作用下可分裂、复制,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin,并在撤除生长因子后向神经细胞和胶质细胞分化.结果表明,啮齿类动物海马及室下区存在着具有多向分化潜能的神经干细胞,其在神经发生或损伤过程中的作用尚需进一步探讨.
作者:刘暌;王红云;王忠诚;李艺影;张亚卓 刊期: 2002年第01期
样品的预处理是生物材料样品中微量元素测定的重要环节,据文献[1~3]报道,预处理大都采用混合酸(HNO3∶HClO4=4∶1) 对生物样品进行消化,但此消化法存在以下不足:①所需消化温度偏高,有的内脏中脂肪含量较多,温度过高,反应过于猛烈,易爆,损失大;②操作过于烦琐.为防止炭化,需操作者不断进行监测和补加混酸,试剂消耗量大,且产生大量的有害气体,对环境的污染相当严重,对操作人员身体健康造成很大危害,而且消化后,赶酸费时.本研究对预处理方法进行了改进,现报道如下.
作者:张淑华;郭爱民;王晖;尹娜 刊期: 2002年第01期
为研究APP-11肽对糖尿病(DM)大鼠肾脏病变的保护作用,用链脲菌素诱发大鼠糖尿病,皮下注射APP-11肽4周,进行血尿素氮、肌酐、24 h尿白蛋白测定,并取肾脏皮质切片进行电镜观察.结果,DM大鼠血糖升高,胰岛素降低,血尿素氮增加,尿白蛋白排出量明显增加.电镜显示肾小球基底膜增厚,内皮细胞孔增大,足突断裂融合.应用APP-11肽组虽然未见血糖及其调节激素的改变,但尿素氮和尿白蛋白排出量明显减少;肾皮质超微结构趋于正常.结果提示APP-11肽对DM肾病具有明显改善作用,但有关机制还有待进一步研究.
作者:贾克宝;赵志伟;张人玲;艾厚喜;赵咏梅;姬志娟;孙异临;盛树力 刊期: 2002年第01期
采用0.25、0.50、0.75 mmol/L的二价锰和三价锰分别对神经瘤细胞(SH-SY5Y)染毒24 h,通过线粒体特异性染料罗丹明123进行荧光标记,利用激光扫描共聚焦显微镜观察染毒细胞的膜电位变化,并与未染毒的细胞对照组进行比较.结果表明二价锰和三价锰均可引起线粒体膜电位的改变(P<0.05),且随剂量增高,有降低趋势.此外,在0.50 mmol/L和0.75 mmol/L剂量下,三价锰引起的线粒体膜电位改变比二价锰更为明显.提示线粒体膜电位的改变是锰神经细胞毒性作用的重要环节.
作者:刘祯;李国君;张杰;周春艺;李鹏高;赵春礼;杨慧;Wei Zheng;景鹏 刊期: 2002年第01期
自1997年8月至1999年4月应用国产KDE-2D型碎石机治疗上尿路结石病人1000例,其中男731例,女269例,男∶女为2.72∶1;年龄5~81岁.结石共1136枚,其中肾结石248枚(铸型32枚),输尿管结石888枚(上段385枚,中段57枚,下段446枚).结石大小0.3 cm×(0.5~2.5) cm×4.0 cm.其中肾、输尿管和膀胱(KUB)平片不显影结石155枚.治疗方法:采用国产KDE-2D型碎石机,为X线定位水囊式机型,共治疗1534次.所有病人均未行任何麻醉,工作电压6.9~14.6 kV,每次治疗次数300~3500次.
作者:张弋;孙玉成;王健;李进;高伟;王升晗 刊期: 2002年第01期
利用高密度无血清培养肝细胞,以观察体外肝细胞形态和分化特点、白蛋白合成及其mRNA表达,为生物人工肝提供理想的肝细胞来源.结果:培养肝细胞48 h后逐渐形成肝板样网络结构,伴胆小管形成.原位杂交显示所培养肝细胞具有良好的白蛋白mRNA表达.结果提示高密度无血清培养的肝细胞可形成类似体内肝细胞的形态和功能,可为生物人工肝提供理想的肝细胞来源.
作者:张先杰;孙家邦;孙海晨;李非 刊期: 2002年第01期
为观察透析过程中不同透析膜对凝血纤溶作用的影响,对12例维持性血液透析患者采用交叉设计,使用铜仿膜和聚砜膜透析器透析,应用ELISA法检测透析过程中凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(TAT)、纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PAP)、D-二聚体的动态变化,并用扫描电镜观察透析后透析器表面凝血情况.结果显示,用2种透析膜血透过程中TAT、PAP、D-二聚体均显著高于透析前水平,用铜仿膜透析TAT、PAP、D-二聚体均显著高于用聚砜膜.提示,从凝血纤溶激活看,聚砜膜生物相容性好于铜仿膜,长期使用生物相容性好的透析器可能会减少出凝血并发症.
作者:孙懿;刘惠兰 刊期: 2002年第01期
神经节苷脂(gangliosides,Ggs)是一类含唾液酸的糖鞘脂,参与细胞膜上细菌毒素、病毒等受体的组成,并在细胞分化、黏附、癌基因转化、抑制肿瘤生长[1]、调节免疫反应、脊神经突触传递及细胞凋亡[2]等方面起作用.近来发现Ggs亦参与介导HIV-1入侵的细胞表面多分子复合体的组成[3].外源性Ggs可诱导体外神经分化和体内神经修复,因此对于多发性神经疾病(polyneuropathy)具有潜在治疗价值.
作者:谭延国;陈瑞 刊期: 2002年第01期