孙懿;刘惠兰
采用0.25、0.50、0.75 mmol/L的二价锰和三价锰分别对神经瘤细胞(SH-SY5Y)染毒24 h,通过线粒体特异性染料罗丹明123进行荧光标记,利用激光扫描共聚焦显微镜观察染毒细胞的膜电位变化,并与未染毒的细胞对照组进行比较.结果表明二价锰和三价锰均可引起线粒体膜电位的改变(P<0.05),且随剂量增高,有降低趋势.此外,在0.50 mmol/L和0.75 mmol/L剂量下,三价锰引起的线粒体膜电位改变比二价锰更为明显.提示线粒体膜电位的改变是锰神经细胞毒性作用的重要环节.
作者:刘祯;李国君;张杰;周春艺;李鹏高;赵春礼;杨慧;Wei Zheng;景鹏 刊期: 2002年第01期
为克隆表达人芳香族左旋氨基酸脱羧酶的基因,以了解此基因在多巴胺代谢过程中的作用,从人类胎儿黑质组织中提取总RNA,以RT-PCR方法扩增1 442 bp的cDNA片段,将此片段克隆于pGEM-T载体中,经过特异性限制性内切酶酶切分析片段正确后,进行全序列分析.结果表明克隆的cDNA与GenBank上的序列相比完全一致,得到了编码正确的人AADC的cDNA全序列.
作者:张智;赵焕英;段德义;徐群渊;杨慧 刊期: 2002年第01期
为探讨提高动脉瘤栓塞效果的途径,用显微吻合静脉袋移植的方法,建立犬的动脉瘤模型.分别以醋酸纤维素(CAP)和可控弹簧圈(WEDC)栓塞动脉瘤模型,在术后24 h、2周和2月进行造影复查,并在栓塞后不同时期,分别抽取动物进行光镜、电镜和免疫组化的病理学研究.结果:WEDC栓塞效果显著优于CAP(P<0.01),且无相关并发症;CAP组12枚动脉瘤中,4枚栓塞后出现载瘤动脉的狭窄或闭塞,2枚栓塞后1周内破裂出血.病理检查发现WEDC动脉瘤腔内24 h后被弹簧圈和疏松的血栓所填充;CAP栓塞的动脉瘤腔内被CAP致密填塞,但早期动脉瘤壁急性化学损伤明显.从栓塞后2周开始,2组动脉瘤颈部逐渐被新生的内皮组织所封闭,动脉瘤内部的血栓开始机化,但CAP组的炎症反应明显强于WEDC组,动脉瘤壁的损伤进一步加重,破裂动脉瘤的破裂点附近的瘤壁严重破坏.栓塞后2个月,2组动脉瘤内的血栓都被被纤维组织代替,动脉瘤颈部被完整的内皮组织所封闭.结果提示:WEDC仍然是目前安全可靠的动脉瘤栓塞材料,CAP因为其化学腐蚀作用和使用中控制困难,还有待于进一步改进.
作者:杨新健;吴中学;王忠诚;李佑祥;孙异临;尹可;唐军;刘作勤 刊期: 2002年第01期
为探讨功能性子宫出血的原因,采用组织学和免疫组织化学方法,对功能性子宫出血的内膜与正常内膜进行了组织学和CD34及层粘连蛋白(LN)的比较观察.组织学观察显示:功能性子宫出血的内膜发育呈不同步状态,并有不同程度的局灶性出血,出血部位的血管多呈断裂像.经图像分析仪测定显示:出血内膜组织的血管内皮细胞CD34和血管基膜的LN阳性反应明显减弱.提示功能性子宫出血与血管中CD34和LN的减少有关.
作者:张国境;路欣;许晴;上官芳芳;翁静;朱西庚;田素杰 刊期: 2002年第01期
为提高对小儿卡波希肉瘤 (Kaposi sarcoma,KS)的认识,对14例非洲小儿KS的临床资料、HIV抗体检测结果和组织病理学结果进行分析.结果:14例患儿活组织病理学观察均符合KS诊断,其中12例(85.71%)HIV抗体阳性.HIV抗体阳性的患儿中,婴幼儿组(6月~3岁)5例(41.7%),4~6岁1例(8.3%),7~9岁3例(25.0%),10~14岁3例(25.0%);淋巴结型KS占75%,皮肤型占25%.提示:小儿HIV感染相关型KS并不少见,以婴幼儿组发病率高,以淋巴结型KS为主要临床表现类型;应提高对本病的认识,及时诊断患儿.
作者:王秀兰;张长淮 刊期: 2002年第01期
为建立啮齿类动物中枢神经系统多潜能干细胞体外分离培养及分化鉴定的方法,将孕18 d胚胎大鼠海马及脑室下区组织分离,体外经EGF和bFGF刺激下扩增,然后撤除GFs培养;通过免疫细胞化学方法染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向.结果:培养的部分细胞在特定生长因子的作用下可分裂、复制,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin,并在撤除生长因子后向神经细胞和胶质细胞分化.结果表明,啮齿类动物海马及室下区存在着具有多向分化潜能的神经干细胞,其在神经发生或损伤过程中的作用尚需进一步探讨.
作者:刘暌;王红云;王忠诚;李艺影;张亚卓 刊期: 2002年第01期
急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)的发病机制十分复杂,近年来大量的实验研究证实,其发病机制除自身消化外,还有磷脂酶A和血栓素A2(TXA2)、胰蛋白酶和抗胰蛋白酶系统、溶酶体酶、氧自由基、胰血循环障碍和细胞膜稳定性、炎症介质等因素[1].特别是胰腺微循环障碍在本病发病中的作用越来越受到重视.
作者:赵敏;陈瑞芬 刊期: 2002年第01期
自1997年8月至1999年4月应用国产KDE-2D型碎石机治疗上尿路结石病人1000例,其中男731例,女269例,男∶女为2.72∶1;年龄5~81岁.结石共1136枚,其中肾结石248枚(铸型32枚),输尿管结石888枚(上段385枚,中段57枚,下段446枚).结石大小0.3 cm×(0.5~2.5) cm×4.0 cm.其中肾、输尿管和膀胱(KUB)平片不显影结石155枚.治疗方法:采用国产KDE-2D型碎石机,为X线定位水囊式机型,共治疗1534次.所有病人均未行任何麻醉,工作电压6.9~14.6 kV,每次治疗次数300~3500次.
作者:张弋;孙玉成;王健;李进;高伟;王升晗 刊期: 2002年第01期
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)实验研究的观察方法,主要包括脊髓功能观察、神经电生理检查和组织学观察等[1,2].脊髓功能观察,例如Tarlov运动分级法和斜坡法,虽比较直观,但是这种方法需要动物的配合,并且存在人为的主观因素干扰[3].诱发电位测定(神经电生理检查的主要方法)一直被认为是一种评价脊髓功能完整性的客观、可靠的指标[1~4].诱发电位(EP)是指人工或自然的刺激所引起的中枢神经的电位变化,可大体分为感觉诱发电位(sensory evoked potential,SEP)和运动诱发电位(motor evoked potential,MEP)[1].
作者:邵雪梅;张茂先 刊期: 2002年第01期
Downregulation of nitric oxide in the brain of mice during their hypoxic preconditioning.J Appl Physiol 91:1193~1198,2001.An animal model of hypoxic preconditioning was produced in mice by repeated exposure to autohypoxic condition.The animals' tolerance times to hypoxia were 1.7,1.8,2.1 and 2.3 times longer in runs 2,3,4 and 5,respectively,than that in run 1,and their oxygen consumption and heart and respiration rates were progressively and significantly slowed down during the repetitive exposure to hypoxia.L-arginine concentration,nitric oxide (NO) synthase-positive cells,NO synthase activity,and NO content in the whole brain and the subregions telencephalon,diencephalons,and brain stem were significantly increased during the first exposure and were,instead of continuing to increase,significantly decreased in run 4 after the second and third exposure.Tolerance times under the hypoxic condition were significantly shortened and prolonged when preadministration of L-arginine and its analog,respectively,was made.These results indicate that NO in the brain is downregulated under condition of hypoxic preconditioning and negatively involved in increased tolerance to hypoxia.
作者:吕国蔚;刘宏雁 刊期: 2002年第01期
利用高密度无血清培养肝细胞,以观察体外肝细胞形态和分化特点、白蛋白合成及其mRNA表达,为生物人工肝提供理想的肝细胞来源.结果:培养肝细胞48 h后逐渐形成肝板样网络结构,伴胆小管形成.原位杂交显示所培养肝细胞具有良好的白蛋白mRNA表达.结果提示高密度无血清培养的肝细胞可形成类似体内肝细胞的形态和功能,可为生物人工肝提供理想的肝细胞来源.
作者:张先杰;孙家邦;孙海晨;李非 刊期: 2002年第01期
为观察透析过程中不同透析膜对凝血纤溶作用的影响,对12例维持性血液透析患者采用交叉设计,使用铜仿膜和聚砜膜透析器透析,应用ELISA法检测透析过程中凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(TAT)、纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PAP)、D-二聚体的动态变化,并用扫描电镜观察透析后透析器表面凝血情况.结果显示,用2种透析膜血透过程中TAT、PAP、D-二聚体均显著高于透析前水平,用铜仿膜透析TAT、PAP、D-二聚体均显著高于用聚砜膜.提示,从凝血纤溶激活看,聚砜膜生物相容性好于铜仿膜,长期使用生物相容性好的透析器可能会减少出凝血并发症.
作者:孙懿;刘惠兰 刊期: 2002年第01期
一氧化氮是重要的肺动脉压介导/调节因子.测定一氧化氮的变化具有重要的临床和实验意义.由于一氧化氮的半衰期仅3~5 s,较难测定,故多采用测定其合成关键酶一氧化氮合酶(nitricoxide synthase,NOS)的方法来反映一氧化氮的变化.国内外现多采用冰冻切片进行免疫组化染色[1~3]测定NOS,但此方法存在切片厚,结构易变形,染色效果及定位不够理想,标本不易长期保存等缺点.1998年9月至2000年4月,我们在肺动脉高压机制的研究中,采用石蜡切片方法进行NOS的免疫组化染色,克服了冰冻切片带来的不足,取得了较好的实验效果.
作者:刘国贞;栾丽英;周光德;陈瑞芬;宋爱利 刊期: 2002年第01期
为探讨分娩过程中引起新生儿锁骨骨折的有关因素,对我院17年间分娩的32 740例活产婴儿中发生锁骨骨折的141例进行回顾性分析.结果:阴道难产组新生儿锁骨骨折发生率高于阴道顺产组,随新生儿体质量增加,新生儿锁骨骨折发生率增高.新生儿锁骨骨折临床表现为患侧锁骨上窝肿胀、骨擦音;X线摄片为确诊手段.
作者:姜桂英;吴庆庆 刊期: 2002年第01期
为研究APP-11肽对糖尿病(DM)大鼠肾脏病变的保护作用,用链脲菌素诱发大鼠糖尿病,皮下注射APP-11肽4周,进行血尿素氮、肌酐、24 h尿白蛋白测定,并取肾脏皮质切片进行电镜观察.结果,DM大鼠血糖升高,胰岛素降低,血尿素氮增加,尿白蛋白排出量明显增加.电镜显示肾小球基底膜增厚,内皮细胞孔增大,足突断裂融合.应用APP-11肽组虽然未见血糖及其调节激素的改变,但尿素氮和尿白蛋白排出量明显减少;肾皮质超微结构趋于正常.结果提示APP-11肽对DM肾病具有明显改善作用,但有关机制还有待进一步研究.
作者:贾克宝;赵志伟;张人玲;艾厚喜;赵咏梅;姬志娟;孙异临;盛树力 刊期: 2002年第01期
为探讨18F-FDG(脱氧萄葡糖)PET脑显像对Alzheimer病(AD)的诊断和评价程度的标准,对AD组患者和正常老年组行静脉注射18F-FDG后行PET脑断层显像,求出双侧额叶、顶叶、颞叶、枕叶、小脑皮质、基底节和丘脑的单位容积平均计数值,然后计算出各结构计数与小脑计数的比值.结果显示,正常对照组(19例)大脑各叶皮质、基底节和丘脑的计数分别与小脑计数的比值相当稳定,变异范围较窄,变异系数2.78%~8.95%.以正常对照组顶叶、额叶、颞叶皮质与小脑计数比值的均数减去2个标准差作为判断代谢异常减低的界值,则轻度、中度、重度AD患者的灵敏度分别为66.7%(4/6),85.7%(6/7),100%(4/4);正常对照组无1例被误诊为AD,特异性为100%.17例AD患者大脑皮质放射性减低的范围随痴呆程度加重而扩大.轻度AD只有顶叶受累,中度和重度AD颞叶和额叶也受累,其中左额叶与小脑的计数比值减低程度是区别中度和重度AD的重要指标.结果表明,将顶叶、额叶、颞叶与小脑计数比值减低的范围和程度相结合,可以诊断AD并对AD痴呆程度做出较准确的评价.
作者:苏玉盛;马云川;张新卿;李德鹏;张琳瑛;尚建文 刊期: 2002年第01期
细胞某部位产生的局部电位虽然不能无衰减地传到远方,但可借助细胞的电缆特性扩布到数百微米以外的邻近部位[1].本实验室根据局部电流作用原理,利用对应记录胞内、外电位的方法来推断局部电位的起源.实践证明这种方法是简便可靠的.
作者:童学红;虞棻;李效义;谢燕;张淑华;张茂先;张英才 刊期: 2002年第01期
为研究聚酰胺-胺(PAMAM)树状大分子对弱酸性亲脂性药物烟酸的增溶作用,合成了以乙二胺为核的1.0~6.0代(G)PAMAM树状大分子,研究了不同pH值、不同质量浓度的树状大分子对烟酸增溶的影响.结果:pH值、质量浓度均影响PAMAM树状大分子溶液对烟酸的增溶效果.提示:增溶的主要原因是由于树状大分子的氨基与烟酸的羧基之间存在静电作用,PAMAM树状大分子可作为亲脂性弱酸性药物的增溶剂.
作者:叶玲;张锦楠;周玉兰;顾微;刘永利;扈金平;朴东旭 刊期: 2002年第01期
为了克隆人多巴胺D2受体(D2R)基因以用于帕金森病的治疗,从人胎脑中提取总RNA,并逆转录成cDNA;设计一对引物用PCR方法扩增目的cDNA片段,并将其重组于pGEM-T载体中,酶切鉴定插入片段后,进行全序列测定.结果表明从人胎脑纹状体扩增出至少2种长度的cDNA片段,其中一个片段全长1445 bp,序列与GenBank(NM000795)登录的序列完全相同;另一片段为1305 bp,在第6外显子开始处有140 bp的缺失,与已知的D2R 3种转录体均不相同,可能为一种新的D2R转录体.
作者:赵焕英;段德义;张智;徐群渊;杨慧 刊期: 2002年第01期
为比较多种用于减少非周期生理信号序列中的随机误差的线性叠加法,分析心房肌细胞的钙离子荧光强度满足的分布函数,提取特征参数(斜率和时间常数),对6个豚鼠心房肌细胞,建立3种不同浓度的CGRP组和空白对照组,用共聚焦显微镜记录下24组心房肌细胞的钙离子荧光强度数据;对这些数据进行校准、叠加、非线性拟合和提取特征参数.叠加方法包括等权平均叠加、主分量叠加、奇异值分解和大似然叠加.选择Gamma分布函数作为拟合函数,使用小二乘法进行拟合,并从Gamma函数计算特征参数.结果:①给出4种叠加方法的加权系数,4种线性叠加法的加权系数比较接近,特别是主分量法、奇异值分解法和大似然法的加权系数几乎一样.对于主分量法,6个细胞的加权系数分别是0.162、0.171、0.167、0.162、0.170和0.168.②叠加后的荧光强度特征更加明显.③给出特征参数(斜率和时间常数).用主分量叠加法得到的3种不同浓度水平的CGRP组和空白对照组的斜率分别是1 277、1 326、2 039和818,时间常数分别是0.33、0.29、0.19和0.27.结果提示:对于只具有一个主要成分的实验数据,推荐使用主分量叠加法.这种方法比较简单,用它可以得到很好的叠加结果,拟合出很好的分布函数并提取出特征参数.
作者:阎岩;刘学宗;王先明;钮伟真 刊期: 2002年第01期