《中国免疫学杂志》编辑部
高迁移率族蛋白B1（ High mobility group box 1， HMGB1）是20世纪70年代发现的一种蛋白质，因其在电泳时迁移率高而得名［1］。 HMGB1是一种高度保守的单链多肽，含215个氨基酸残基，分子量约30 kD，普遍存在于哺乳动物细胞中。早期研究表明，HMGB1是一种非组蛋白核蛋白，在核内能够识别和结合DNA，参与DNA的转录、复制、修复以及细胞运动等［2］。近年来研究认为， HMGB1还是一种重要的胞外损伤相关分子（ Damage－associated molecular pattern，DAMP），在细胞外发挥细胞因子的功能［3］，可以启动固有和适应性免疫应答，参与神经系统炎症、肿瘤和自身免疫病等急慢性炎症的发生过程［4－6］ 。
作者：张国俊；于莉莉；宋向凤 刊期： 2016年第08期
作者：《中国免疫学杂志》编辑部 刊期： 2016年第08期
目的：本研究探讨自噬抑制剂3－甲基腺嘌呤（3－methyladenine，3－MA）对喜树碱（Camptothecin，CPT）诱导的Hela细胞凋亡的影响。方法：用四甲基偶氮唑盐比色法（ MTT方法）检测CPT对Hela细胞作用的佳药物浓度和时间，以及不同药物对Hela细胞增殖活性的影响；用免疫印迹及免疫荧光检测不同药物作用于Hela细胞后，Hela细胞自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3（microtubule－associated protein 1 light chain 3，LC3）、p62及凋亡相关蛋白的变化；DAPI核染色观察细胞凋亡。结果：CPT作用于Hela细胞后，Hela细胞增殖活性明显下降，并且可诱导自噬现象的发生。 CPT和3－MA联合作用较单独CPT作用Hela细胞的增殖活性降低，细胞自噬水平下降，凋亡率明显升高。结论：CPT在诱导Hela细胞凋亡的同时可诱导自噬，通过3－MA抑制自噬可增强Hela细胞对CPT作用的敏感性。
作者：王晓娜；任来峰；赵安江；杨万霞；任云青 刊期： 2016年第08期
目的：探讨模型UC大鼠血中前列腺素－E2（PG－E2）、白三烯B4（LT－B4）、血小板活化因子（PAF）及血管内皮生长因子（ VEGF）的水平，及经过美沙拉秦、酪酸梭菌、蒙脱石散治疗干预后上述四个因子的变化情况，以了解这四个炎性因子在模型UC大鼠血中的意义及上述三种药物对这四个炎性因子的干扰效果。方法：将100只大鼠随机分成正常组、模型组、美沙拉秦组、酪酸梭菌组、蒙脱石散组，用酶联免疫吸附试验分别检测各组小鼠血中第12天血中的PG－E2、LT－B4、PAF、VEGF的含量，并进行统计学分析。结果：①模型组、美沙拉秦组、酪酸梭菌组、蒙脱石散组较正常组的DAI及血清PG－E2、LT－B4、PAF、VEGF含量均升高，差异有统计学意义（ P＜0．05）。②与模型组比较，美沙拉秦组、酪酸梭菌组、蒙脱石散组的DAI及血清PG－E2、LT－B4、PAF、VEGF含量均降低，差异有统计学意义（ P＜0．05）。③美沙拉秦、酪酸梭菌、蒙脱石散的治疗效果比较，美沙拉秦及蒙脱石散疗效较好，差异有统计学意义（ P＜0．05） ，美沙拉秦与蒙脱石散疗效无差异。结论：①在TNBS／乙醇法诱导的UC大鼠血清中PG－E2、LT－B4、PAF、VEGF表达增高，与炎症呈正相关。②美沙拉秦、酪酸梭菌、蒙脱石散可下调模型大鼠促炎因子PG－E2、LT－B4、PAF、VEGF的表达，这可能与UC大鼠肠道炎症的缓解，促进大鼠UC的恢复有关。
作者：何山；刘凯；黄永坤 刊期： 2016年第08期
目的：探讨淫羊藿和女贞子提取物对骨质疏松症（ OP）大鼠性激素功能水平的影响。方法：50只3月龄雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、提取物低剂量组、提取物中剂量组、提取物高剂量组共5组，每组10只，除正常组外，其他4组以维甲酸灌喂15 d制作OP模型，造模成功后正常组和模型组灌服生理盐水，提取物低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按50 mg／kg、100 mg／kg、200 mg／kg灌服淫羊藿和女贞子提取物混合物，均持续3周。测量各组骨密度（BMD），左侧股骨切片采用苏木精和伊红（ HE）染色观察股骨病理学改变并测定骨小梁组织形态相关参数，免疫组织化学分析激素受体蛋白表达。结果：正常组股骨全部、股骨上端、股骨下端BMD显著高于模型组，提取物中剂量组和高剂量组股骨全部、股骨上端、股骨下端BMD显著高于模型组，提取物低剂量组股骨全部BMD显著高于模型组，差异均有统计学意义（ P＜0．05或P＜0．01）；与模型组比较，提取物各组骨小梁数量有了显著增加，完整性、连续性明显好转，相关参数比较结果显示，正常组Tb．N、Tb．Ar、Tb．Th显著大于模型组，Tb．Sp显著小于模型组，提取物中剂量组和高剂量组Tb．N、Tb．Ar、Tb．Th显著大于模型组，Tb．Sp显著小于模型组，提取物低剂量组，Tb、Ar、Tb、Th显著大于模型组，差异均具有统计学意义（ P＜0．05或P＜0．01）；正常组AR、ER蛋白表达量明显高于模型组，而提取物高剂量组AR、ER蛋白表达量较模型组显著上升，差异有统计学意义（ P＜0．05或P＜0．01）。结论：淫羊藿和女贞子提取物能够增加维甲酸诱导的OP大鼠BMD，逆转骨组织病理结构，上调性激素受体蛋白表达，对维甲酸诱导的OP大鼠具有潜在的保护作用。
作者：李凝旭；涂艳；沈莹；覃艳琼；雷超；柳湘洁 刊期： 2016年第08期
IL－37作为白细胞介素－1（ IL－1）家族的新成员，与IL－1家族成员拥有类似的β链结构。重组IL－37前体通过蛋白酶－1剪切处理后可以转化为成熟的IL－37。 IL－37是目前唯一没有发现鼠同系物的IL－1家族成员。研究人员在骨髓、肝脏、胸腺、肺等组织中均检测到IL－37的表达，并且发现其参与了多种炎症性疾病和免疫性疾病的发生发展。 IL－37对多种类型细胞的免疫反应也发挥了抑制作用。本文将结合近关于IL－37的功能和生物学研究进展，就IL－37在各种疾病中的作用进行综述。
作者：吴万通；丁红梅；冯晓明 刊期： 2016年第08期
目的：获得特异性检测复合前列腺特异性抗原（c－PSA）的单克隆抗体配对，建立基于化学发光c－PSA 免疫定量试剂。方法：利用市购c－PSA 抗原免疫6 周龄雌性BALB／c 小鼠，间接法ELISA 差异筛选抗c－PSA、游离前列腺特异性抗原（f－PSA）、总前列腺特异型抗原（t－PSA）的抗体，抗体配对后化学发光定量检测血清中c－PSA 蛋白。结果：获得抗体配对1A10／7D6－SAE，经c－PSA 标准品及临床血清样本初步筛选，该抗体配对适用于基于化学法发光的免疫反应定量检测试剂的开发；血清阳性样本与阴性样本检测结果显示具有统计学意义（P＜0．000 1）；阳性样本定量结果与Siemens 公司复合前列腺特异性抗原测定试剂盒（直接化学发光法）的相关系数为0．97；线性范围为0．1 ～100 ng／ml；检测灵敏度为0．005 ng／ml。结论：成功筛选获得特异性检测c－PSA 的抗体配对，并开发c－PSA 化学发光免疫定量试剂，其检测能力与国际主流试剂相当。
作者：詹炉停；温桂平；赵敏；依含；刘江武；郭小怡；林海军；黄刘女；夏宁邵；郑子峥 刊期： 2016年第08期
目的：建立实时定量PCR方法检测同一个体两条不同的HLA－C等位基因的表达水平。方法：构建HLAⅠ类等位基因外显子2和3数据库，设计等位基因特异性系列引物，建立等位基因定量PCR方法；在数据库和835例汉族人外周血标本中对方法进行理论和实验验证；检测并比较20对肝癌和癌旁组织标本中HLA－C等位基因的表达水平。结果：本实验设计的20对引物能检测23种杂合基因型中不同的HLA－C等位基因，覆盖汉族人群中出现频率大于0．96％的个体；55％（11／20）的肝癌组织中HLA－C位点两条等位基因表达水平变化不一致。结论：成功建立了针对汉族人群的HLA－C等位基因表达水平的检测方法；肝癌组织中普遍存在着两条HLA－C等位基因表达水平变化不一致的现象。
作者：王文君；陆森；吴士超；缪凤琴；潘宁；张建琼 刊期： 2016年第08期
目的：通过构建青霉素诱导的大鼠癫痫动物模型，探讨STAT3及IL－6在青霉素诱导的癫痫大鼠模型中的表达。方法：腹腔注射不同剂量的青霉素，制备癫痫动物模型，观察各组大鼠脑电图及行为学，荧光定量PCR方法检测各组动物IL－6及STAT3的mRNA表达量；ELISA法检测血清中IL－6的分泌量； Western blot检测各组动物STAT3的蛋白表达。结果：500 U／kg和800 U／kg青霉素腹腔注射均出现癫痫行为学发作症状及典型的癫痫脑电波，癫痫发作率为100％；和对照组比较，模型组大鼠IL－6以及STAT3 mRNA水平明显升高，血清中IL－6分泌增加，STAT3蛋白表达水平无显著性差异，但p－STAT3蛋白表达水平显著增加。结论：在青霉素诱导的大鼠癫痫模型中，STAT3及IL－6起着重要的作用。
作者：陈恩；林琳；吕赛平；陈杰妮；陈纯静；邹学森 刊期： 2016年第08期
目的：探讨夏天无注射液参与脑缺血再灌注大鼠神经保护的NF－κB介导机制。方法：随机将雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、夏天无注射液1．0 ml／kg的低剂量组、2．5 ml／kg 的中剂量组、5 ml／kg 的高剂量组及NF－κB 抑制剂（BAY11－7082）组。脑缺血再灌注24 h后，2，3，5氯化三苯基四唑（TTC）染色检测各组大鼠脑梗死重量百分比；免疫组织化学技术及Western blot技术检测各组的磷酸化NF－κB表达变化。结果：TTC发现：不同剂量的夏天无注射液及BAY可以减轻脑梗死的总量，其中，高剂量组、中剂量组及抑制剂组之间效果无差异，但三者效果均较低剂量组明显；免疫组化发现：主要在模型组中的海马CA1区细胞核中发现磷酸化NF－κB 表达，而CA3区的表达量较少。 Western blot 检测发现：不同剂量的夏天无注射液可以模拟BAY11－7082的作用，降低磷酸化NF－κB蛋白的表达量。结论：夏天无注射液可能减轻大鼠脑缺血再灌注后梗死程度，其机制可能是通过抑制NF－κB的过度磷酸化。
作者：徐祖才；张莎莎；梁涛；王静；彭燕；张骏 刊期： 2016年第08期
目的：探讨TLR7激动剂（Toll like receptor 7 agonist，Tlr7a）替代IFN－γ体外培养细胞因子诱导杀伤性细胞（ Cytokine－induced killer cell ，CIK）抗肿瘤的免疫效应。方法：分离健康人外周血单个核细胞，在体外诱导CIK。分两组：CIK组和Tlr7a－CIK组。对各组分别进行免疫杀伤性研究，检测细胞免疫表型并分析对K562肿瘤细胞的杀伤活性。结果：CD56＋细胞在Tlr7a－CIK组显著增加（P＜0．05），Tlr7a－CIK组杀伤活性较CIK组显著增强（P＜0．05）。结论：Tlr7a可以替代IFN－γ促进CIK细胞杀伤肿瘤。
作者：李旺；陈艳媛；魏志璋；王宇环；罗晓玲；高东 刊期： 2016年第08期
目的：探究前期合成的含噻唑烷－4－酮的免疫调节剂CH2b 对葡萄糖－6－磷酸异构酶（ Glucose－6－phosphate isomerase，GPI）混合肽段诱导的类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）小鼠发病的影响。方法：hGPI325－339、hGPI469－483多肽片段与完全弗氏佐剂充分乳化后，于DBA／1小鼠尾根部多点皮下注射，并用百日咳毒素加强免疫。然后分别用α－半乳糖神经酰胺（α－GalCer）和CH2b对模型小鼠进行干预，监测各组小鼠体重变化和足踝关节肿胀变化情况，关节组织苏木精－伊红（Hematoxylin－eosin staining，HE）染色法观察炎细胞浸润情况，流式细胞技术（Fluorescence－activated cell sorting，FACS）检测全血中iNKT细胞频率变化，微量样本多指标流式蛋白定量技术（Cytometric bead array，CBA）检测血清中细胞因子TNF－α、IL－6、IL－4、IFN－γ水平。结果：与GPI混合肽段诱导的模型组相比，α－GalCer和免疫调节剂CH2b均可显著改善模型小鼠的体重增长缓慢、关节肿胀情况（P＜0．05）；炎性细胞浸润减少；且二者均可以显著提高RA小鼠体内iNKT细胞的频率，与模型组相比，差异有统计学意义（P＜0．05）；α－GalCer、CH2b组可以降低模型小鼠炎症高峰期TNF－α、IL－6、IFN－γ水平，两组结果差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：免疫调节剂CH2b通过激活iNKT细胞影响炎性细胞因子的分泌，缓解GPI混合肽段诱导的关节炎。
作者：刘嘉琳；张雪娇；杨飞；娄永富；孟明；陈冬志 刊期： 2016年第08期
目的：比较分析磁微粒化学发光法与酶联免疫吸附法测定抗PR3抗体、抗MPO抗体的检测结果。方法：分别采用磁微粒化学发光法（ A方法）和酶联免疫吸附法（ B方法）对166例自身免疫病患者血清、50例健康者血清中抗PR3抗体、抗MPO抗体进行定量检测，对检测结果进行统计分析。结果：A方法测定高、中、低质控血清的批内和批间重复性优于B方法，A、B方法测定质控血清的准确度均符合要求；A、B方法测定抗PR3抗体、抗MPO抗体临床样本的线性相关系数r分别为0．9878，0．9896；A、B方法的检测结果采用kappa分析，kappa系数分别为0．897和0．882。结论：磁微粒化学发光法（ A方法）测定抗PR3抗体、抗MPO抗体优于酶联免疫吸附法（ B方法），更符合临床应用要求。
作者：张立娟 刊期： 2016年第08期
作者：《中国免疫学杂志》编辑部 刊期： 2016年第08期
红细胞渗透脆性试验（ RBC fragility test ）是利用不同浓度的低张氯化钠（Sodium chloride，NaCl）溶液来测定红血球细胞膜渗透压的耐受性。当红血球处于低张溶液中时，水分会移入细胞内，使得红血球膨胀，随着NaCl浓度降低，红血球逐渐胀大破裂而释出血红素，出现溶血（ Hemolysis ）现象。然而，红血球细胞膜渗透压的耐受性跟细胞表面积与体积比（ Surface area to volume ratio ，S／V）有关，S／V 比值较大之红血球对低张溶液的耐受性较高，相反地，比值较小者对低张溶液的耐受性较低，容易导致红血球破裂，即红细胞渗透脆性增加［1，2］。
作者：程群英；邹春标 刊期： 2016年第08期
作者：《中国免疫学杂志》编辑部 刊期： 2016年第08期
目的：探讨桥本甲状腺炎（ HT）超声弹性评分和弹性系数与甲状腺自身免疫功能的相关性。方法：216例桥本甲状腺炎患者，采用GE LOGIQ3型彩色多普勒超声诊断仪获得满意弹性图像后，评定弹性评分及弹性系数；化学发光法检测甲状腺功能及甲状腺过氧化物酶抗体（ TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（ TgAb）滴度，分别分析甲状腺超声弹性评分和弹性系数与甲状腺自身抗体相关性。结果：216例HT患者血清促甲状腺激素（ TSH）、TGA、TPO明显升高，TgAb的滴度与弹性系数呈正相关，r＝0．54，P＜0．01；TgAb与弹性评分呈正相关，r＝0．496，P＜0．01；TPOAb与弹性应变系数呈正相关，r＝0．77，P＜0．01， TPOAb与弹性评分呈正相关，r＝0．73，P＜0．01。结论：实时超声弹性成像评分结合甲状腺自身免疫功能检测，有助于提高桥本甲状腺炎诊断的正确性。
作者：冉张申；郭洪霞；李湘奇 刊期： 2016年第08期
目的：研究柚皮苷对人宫颈癌Hela细胞体外增殖的影响及相关机制研究。方法：用不同浓度的柚皮苷处理体外培养人宫颈癌Hela细胞，采用 MTT法检测处理24、48、72 h后Hela 细胞的增殖情况，流式细胞仪测定细胞凋亡率， Hoechst 33258染色观察细胞凋亡情况，同时Western blot观察环氧合酶－2（COX－2）表达的相对量。结果：与对照组相比，柚皮苷低剂量组细胞抑制率无显著差异（ P＞0．05），柚皮苷中剂量组和高剂量组细胞抑制率显著增高（ P＜0．05）；柚皮苷低剂量组细胞凋亡率无显著差异（P＞0．05），柚皮苷中剂量组和高剂量组细胞凋亡率显著增高（P＜0．05），同时柚皮苷中剂量和高剂量组可观察到明显的细胞凋亡现象；柚皮苷低剂量组细胞COX－2表达的相对量无显著差异（ P＞0．05），柚皮苷中剂量组和高剂量组细胞COX－2表达的相对量显著降低（ P＜0．05）；结论：柚皮苷能抑制宫颈癌细胞生长，且随其浓度增加抑制作用增强，其机制可能与其抑制COX－2蛋白表达，促进细胞凋亡相关。
作者：杨文静；王璐；孙锐 刊期： 2016年第08期
目的：考察黄连解毒汤含药血清对RAW264．7巨噬细胞自噬的影响，初步探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法：采用大、中、小剂量黄连解毒汤水煎剂灌胃干预SD大鼠，制备含药血清；经MTT法观察含药血清对细胞增殖的影响后，选择各剂量浓度为20％的含药血清干预体外培养的巨噬细胞，采用荧光定量PCR方法检测自噬相关基因Beclin1和mTOR的mRNA表达水平；Western blot检测Beclin1、p－mTOR蛋白的表达变化。结果：与正常对照组血清相比，黄连解毒汤含药血清干预后诱导了Beclin1 mRNA及蛋白的表达，抑制了mTOR mRNA及p－mTOR蛋白的表达。结论：黄连解毒汤含药血清可诱导RAW264．7巨噬细胞自噬相关基因Beclin1的表达、抑制mTOR的表达，这可能是该方抗动脉粥样硬化作用的重要机制之一。
作者：于红红；吴玛莉；张智伟；陈瑞；吴云；段智璇；田维毅 刊期： 2016年第08期
目的：比较三种不同β受体阻滞剂对小鼠血管瘤（EOMA 细胞）细胞体内外的影响，初步探讨普萘洛尔对小鼠血管瘤的治疗作用及可能机制，为β受体阻滞剂治疗婴幼儿型血管瘤提供参考。方法：体外培养EOMA 细胞，用不同浓度美托洛尔、普萘洛尔、布托沙明作用EOMA 细胞，作用24 h。应用MTT 法检测细胞存活率、吖啶橙染色检测细胞凋亡情况，观察美托洛尔、普萘洛尔、布托沙明对EOMA 细胞体外增殖和凋亡的影响。体内实验将EOMA 细胞移植裸鼠，待肿瘤体积生长至100 mm3 ，将动物随机分为4 组，分别为对照组、美托洛尔组、布托沙明组和普萘洛尔组，药物组按2 mg／（kg?d）灌胃给药，对照组给予等体积的生理盐水（NS），每两天测量肿瘤体积大小。实验结束时收集血清，酶联免疫吸附实验检测血清中肿瘤坏死因子－α（TNF－α）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达水平。结果：体外实验显示，普萘洛尔作用24 h 后，EOMA 细胞存活率随剂量增加逐渐下降， 50 μmol／L 时有显著差异（P＜0．05），药物增加至800 μmol／L，细胞存活率接近10％。吖啶橙染色显示50 μmol／L 时凋亡细胞显著增多。美托洛尔、布托沙明作用24 h 后， 100 μmol／L 时细胞存活率与对照组相比有显著差异（P＜0．05）， 800 μmol／L 时细胞存活率下降至20％，明显高于相同浓度的普萘洛尔组，存在显著性差异（P＜0．05）。吖啶橙染色亦出现相似的规律。体内实验显示，实验结束时美托洛尔、布托沙明小鼠和普萘洛尔药物组的肿瘤体积分别为（1 642．8±89．3）、（1 529．3±119．1）和（752．7±46．5） mm3 ，与对照组小鼠的肿瘤体积（2 023．3±123．07） mm3 相比明显减少（P＜0．001）。美托洛尔、布托沙明小鼠和普萘洛尔药物组血清中VEGF 分别水平为（606．5±105．8）pg／ml、（534．3±243．2）pg／ml 和（420．1±123．7） pg／ml，明显低于PBS 对照组的［（825．8±145．7） pg／ml，（P＜0．05）］，TNF－α结果依次是（301．3±62．3） pg／ml、（305．1±53．8） pg／ml 和（288．8±59．5） pg／ml，明显低于正常对照组［（444±100．4） pg／ml，（P＜0．05）］。结论：三种β受体阻滞剂均可在体外有效抑制小鼠血管瘤EOMA 细胞的增殖并促进细胞凋亡普萘洛尔的这一作用较布托沙明和美托洛尔明显。三种β受体阻滞剂不同程度的抑制小鼠血管瘤的生长，其中普萘洛尔的抑制作用明显强于美托洛尔和布托沙明。三种β受体阻滞剂均可降低体内VEGF 和TNF－α的水平。提示普萘洛尔对小鼠血管瘤的作用可能与β1 和β2 受体协同作用有关，其治疗血管瘤的机制可能与VEGF 和TNF－α有关。
作者：徐仙赟；谢琼珺；彭威；宁慧婷；温俊程；王涛；马靓雯；郝彦斌；刘潜 刊期： 2016年第08期
中国免疫学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国免疫学会,吉林省医学期刊社
