冉张申；郭洪霞；李湘奇
目的：检测microRNA－634（miR－634）在肝癌中的表达水平及其对肝癌细胞常见生物学行为的调控作用。方法：采用实时荧光定量PCR（RT－qPCR）法检测肝癌细胞系（HepG2、SMMC7721、Bel7402、Bel7404、SNU739）、69例肝癌组织及匹配癌旁组织中miR－634的相对定量，分析miR－634表达与肝癌患者性别、年龄、肿瘤直径、分化程度、Child－Pugh分级、BCLC分期、门静脉癌栓及肝外转移的关系，同时构建miR－634的真核表达载体并转染肝癌细胞系，采用活细胞计数试剂盒CCK－8、流式细胞仪Annexin V／PI双染法和Transwell侵袭实验检测转染miR－634对细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。结果：与正常人肝细胞系 L－02相比，肝癌细胞的 miR－634水平均降低（ P＜0．05），表达量依次为 HepG2＞SNU739＞Bel7402＞Bel7404＞SMMC7721；69例肝癌组织的miR－634水平为（0．253±0．019），低于匹配癌旁组织（ P＜0．05），且与肿瘤直径、分化程度、BCLC分期、门静脉癌栓及肝外转移均有关（P＜0．05）。过表达组转染24～96 h后的miR－634水平持续升高，与对照组和空转染组的差异有统计学意义（ P＜0．05）；与对照组和空转染组相比，转染组的增殖抑制率、凋亡率均升高，但穿膜细胞数降低，差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论：miR－634在肝癌组织和细胞中均为低表达，且与临床病理参数有关，上调其水平可抑制肝癌细胞增殖及侵袭并诱导凋亡，对于肝癌防治有重要借鉴价值。
作者：李飞；李德新；周广朋 刊期： 2016年第08期
目的：探讨桥本甲状腺炎（ HT）超声弹性评分和弹性系数与甲状腺自身免疫功能的相关性。方法：216例桥本甲状腺炎患者，采用GE LOGIQ3型彩色多普勒超声诊断仪获得满意弹性图像后，评定弹性评分及弹性系数；化学发光法检测甲状腺功能及甲状腺过氧化物酶抗体（ TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（ TgAb）滴度，分别分析甲状腺超声弹性评分和弹性系数与甲状腺自身抗体相关性。结果：216例HT患者血清促甲状腺激素（ TSH）、TGA、TPO明显升高，TgAb的滴度与弹性系数呈正相关，r＝0．54，P＜0．01；TgAb与弹性评分呈正相关，r＝0．496，P＜0．01；TPOAb与弹性应变系数呈正相关，r＝0．77，P＜0．01， TPOAb与弹性评分呈正相关，r＝0．73，P＜0．01。结论：实时超声弹性成像评分结合甲状腺自身免疫功能检测，有助于提高桥本甲状腺炎诊断的正确性。
作者：冉张申；郭洪霞；李湘奇 刊期： 2016年第08期
目的：检测前列腺癌患者miRNA－15a的表达情况，探讨其在前列腺癌诊断的意义。方法：选择2014年1月至2015年1月本院泌尿外科收治的前列腺癌患者血清及肿瘤组织36例，良性前列腺增生患者（Prostatic hyperplasia，BPH）血清40例，健康对照血清40例。 miRNA－15a表达采用实时定量聚合酶链反应（Real－time PCR）技术检测。结果：miRNA－15a在前列腺癌患者、良性前列腺增生患者和健康对照血清的表达量分别为（0．193±0．081）、（0．359±0．04）和（0．376±0．037），miRNA－15 a在前列腺癌患者血清中的表达量显著低于良性前列腺增生患者和健康对照（ P＜0．05），在BPH组和对照组中的表达差异无统计学意义（ P＞0．05），前列腺癌患者血清miRNA－15 a表达在不同PSA表达水平、Gleason评分、临床分期、有无远处转移之间差异有统计学意义（P＜0．05），与其他病理因素无关（P＞0．05）；前列腺癌患者肿瘤组织中的miRNA－15a的表达与PSA表达水平、Gleason评分、临床分期、有无远处转移之间差异有统计学意义（ P＜0．05），与其他病理因素无关（ P＞0．05）。结论：miRNA－15 a低表达参与了前列腺癌的发生、发展过程，是前列腺癌辅助诊断及治疗的潜在的指标。
作者：姚春红；袁新初；刘冲；邓建平 刊期： 2016年第08期
目的：本研究探讨自噬抑制剂3－甲基腺嘌呤（3－methyladenine，3－MA）对喜树碱（Camptothecin，CPT）诱导的Hela细胞凋亡的影响。方法：用四甲基偶氮唑盐比色法（ MTT方法）检测CPT对Hela细胞作用的佳药物浓度和时间，以及不同药物对Hela细胞增殖活性的影响；用免疫印迹及免疫荧光检测不同药物作用于Hela细胞后，Hela细胞自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3（microtubule－associated protein 1 light chain 3，LC3）、p62及凋亡相关蛋白的变化；DAPI核染色观察细胞凋亡。结果：CPT作用于Hela细胞后，Hela细胞增殖活性明显下降，并且可诱导自噬现象的发生。 CPT和3－MA联合作用较单独CPT作用Hela细胞的增殖活性降低，细胞自噬水平下降，凋亡率明显升高。结论：CPT在诱导Hela细胞凋亡的同时可诱导自噬，通过3－MA抑制自噬可增强Hela细胞对CPT作用的敏感性。
作者：王晓娜；任来峰；赵安江；杨万霞；任云青 刊期： 2016年第08期
目的：分析中国北京男男同性恋艾滋病感染者HLA－A、HLA－B、HLA－C 基因频率以及HLA 基因分型与疾病进展关系。方法：序列特异性引物的PCR 扩增（PCR－sequence specific primer typing，PCR－SSP）对310 名随机中国北京男男同性恋艾滋病感染者HLA－A、HLA－B、HLA－C 基因进行分型，采用HIV Molecular Immunology Database 中HLA Analysis Tools 方法计算等位基因频率。结果：在北京男男同性恋艾滋病感染者队列中，HLA－A*1101（34．52％）基因频率高，其次为HLA－A*0201（31．94％）、HLA－C*0102（27．10％）以及HLA－A*2402（26．45％）。根据艾滋病感染者1 年内CD4 细胞计数变化来判断感染者是否为快速进展者，结果发现快速进展者134 例，非快速进展者176 例。快速进展者中存在低水平的HLA－B*4403（快速进展者1．12％，非快速进展者为4．27％，P ＝0．0276），HLA－B*1511（非快速进展者5．98％，快速进展者2．25％，P ＝0．0282），HLA－B*5701（非快速进展者2．56％，快速进展者0．37％，P＝0．0491）表达，而HLA－C*0304 则在快速进展者中高表达（非快速进展者4．56％，快速进展者8．96％，P＝0．0319）。结论：本研究获得了中国北京男男同性恋艾滋病感染者HLA－A、HLA－B、HLA－C 基因的等位基因分布频率数据，并发现HLA－B*4403、HLA－B*1511、HLA－B*5701 与延缓艾滋病疾病进展有关，而HLA－C*0304 则与加速艾滋病疾病进展相关。
作者：孙坚萍；孙焕芹；刘宁；刘桂海；丛佳；张永宏 刊期： 2016年第08期
目的：探讨淫羊藿和女贞子提取物对骨质疏松症（ OP）大鼠性激素功能水平的影响。方法：50只3月龄雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、提取物低剂量组、提取物中剂量组、提取物高剂量组共5组，每组10只，除正常组外，其他4组以维甲酸灌喂15 d制作OP模型，造模成功后正常组和模型组灌服生理盐水，提取物低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按50 mg／kg、100 mg／kg、200 mg／kg灌服淫羊藿和女贞子提取物混合物，均持续3周。测量各组骨密度（BMD），左侧股骨切片采用苏木精和伊红（ HE）染色观察股骨病理学改变并测定骨小梁组织形态相关参数，免疫组织化学分析激素受体蛋白表达。结果：正常组股骨全部、股骨上端、股骨下端BMD显著高于模型组，提取物中剂量组和高剂量组股骨全部、股骨上端、股骨下端BMD显著高于模型组，提取物低剂量组股骨全部BMD显著高于模型组，差异均有统计学意义（ P＜0．05或P＜0．01）；与模型组比较，提取物各组骨小梁数量有了显著增加，完整性、连续性明显好转，相关参数比较结果显示，正常组Tb．N、Tb．Ar、Tb．Th显著大于模型组，Tb．Sp显著小于模型组，提取物中剂量组和高剂量组Tb．N、Tb．Ar、Tb．Th显著大于模型组，Tb．Sp显著小于模型组，提取物低剂量组，Tb、Ar、Tb、Th显著大于模型组，差异均具有统计学意义（ P＜0．05或P＜0．01）；正常组AR、ER蛋白表达量明显高于模型组，而提取物高剂量组AR、ER蛋白表达量较模型组显著上升，差异有统计学意义（ P＜0．05或P＜0．01）。结论：淫羊藿和女贞子提取物能够增加维甲酸诱导的OP大鼠BMD，逆转骨组织病理结构，上调性激素受体蛋白表达，对维甲酸诱导的OP大鼠具有潜在的保护作用。
作者：李凝旭；涂艳；沈莹；覃艳琼；雷超；柳湘洁 刊期： 2016年第08期
目的：考察黄连解毒汤含药血清对RAW264．7巨噬细胞自噬的影响，初步探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法：采用大、中、小剂量黄连解毒汤水煎剂灌胃干预SD大鼠，制备含药血清；经MTT法观察含药血清对细胞增殖的影响后，选择各剂量浓度为20％的含药血清干预体外培养的巨噬细胞，采用荧光定量PCR方法检测自噬相关基因Beclin1和mTOR的mRNA表达水平；Western blot检测Beclin1、p－mTOR蛋白的表达变化。结果：与正常对照组血清相比，黄连解毒汤含药血清干预后诱导了Beclin1 mRNA及蛋白的表达，抑制了mTOR mRNA及p－mTOR蛋白的表达。结论：黄连解毒汤含药血清可诱导RAW264．7巨噬细胞自噬相关基因Beclin1的表达、抑制mTOR的表达，这可能是该方抗动脉粥样硬化作用的重要机制之一。
作者：于红红；吴玛莉；张智伟；陈瑞；吴云；段智璇；田维毅 刊期： 2016年第08期
沙门菌（ Salmonella ）属于肠道致病菌，是一种重要的食物源性病原体，其具有广泛感染的宿主谱，在公共卫生方面具有重要的意义。用沙门菌作为重组疫苗的载体具有安全、免疫方式类似自然感染等无可比拟的优越性。弱毒的沙门菌活疫苗可以经口服途径表达传递重组的抗原到机体的黏膜表面，从而诱导机体产生保护性的免疫应答来对抗病原体的感染。近年来，出现的许多令人振奋的医学新发现和新技术都是以减毒的沙门菌作为载体来实现的。本文结合国内外近年来构建的一些沙门菌减毒菌株进行说明，为进一步研制安全高效的沙门菌弱毒疫苗以及将其用作活载体表达外源基因的研究奠定基础。
作者：陈松彪；张春杰；程相朝 刊期： 2016年第08期
目的：研究HSP70－TKD诱导的自然杀伤细胞（ NK）体外对细胞表面HSP70表达不同的胰腺癌细胞和结肠癌细胞的迁移作用差异。方法：用干细胞培养基富集人外周血单个核细胞（ Peripheral blood mononuclear cell ，PBMC）至第10天加入2μg／ml TKD，4 d后用流式细胞仪检测NK细胞表面杀伤性受体CD94／NKG2C的表达情况；应用流式分选将胰腺癌细胞系Colo357和结肠癌细胞系CW2分为HSP70高表达细胞亚系Colo＋、CW2＋和HSP70低表达细胞亚系Colo－、CW2－；Transwell小室实验检测HSP70－TKD诱导的NK细胞对这4种细胞的迁移能力，MTT法检测HSP70－TKD诱导的NK细胞对这4种细胞的杀伤活性。结果：流式结果显示 NK细胞在干细胞培养基中培养14天可大量增殖，细胞纯度高达（92．50±1．25）％；经HSP70－TKD诱导后，NK细胞表面杀伤性受体CD94／NKG2C的表达明显增加；经流式分选后，Colo＋、Colo－细胞表面HSP70的表达分别为（78．2±2．2）％和（27．3±1．2）％，而CW2＋、CW2－细胞表面HSP70的表达分别为（91．1±2．5）％和（18．2±1．0）％；HSP70－TKD诱导的NK细胞对Colo＋迁移率为（68．6±2．8）％，明显高于对Colo－的迁移率（22．8±1．5）％，NK细胞对CW＋迁移率为（73．5±2．7）％，明显高于对CW2－的迁移率（18．2±1．3）％；HSP70－TKD诱导的NK细胞对Colo＋、Colo－的杀伤活性有显著性差异，当效靶比为20∶1时，杀伤活性分别为（61．2±3．0）％、（24．5±1．5）％， NK对CW2＋、CW2－的杀伤活性有显著性差异，当效靶比为20∶1时，杀伤活性分别为（63．8±3．2）％、（22．4±1．8）％。结论：HSP70－TKD诱导的NK细胞是一种新型、高效的免疫活性细胞，在体外易向HSP70表达阳性的肿瘤细胞迁移。
作者：汪相如；陈蓉明；龚福生；应敏刚；郑秋红 刊期： 2016年第08期
医学免疫学作为一门重要的基础医学课程，既是生命科学领域的前沿学科，也是一门实践性、综合性很强的临床应用学科［1］，其理论和技术已渗透并融入医学各个学科及领域，因此学好免疫学对于医学生来说至关重要。但是免疫学理论抽象、难懂，知识前后交叉，使学生对知识的理解、记忆困难，不易系统全面的掌握，所以被认为是难学的课程之一。而以教师讲授为主的传统教学模式常常使学生出现厌学情绪甚至放弃的想法，那么如何提高教学效果，激发学生学习兴趣，变被动学习为主动学习，是免疫学教学改革亟待解决的问题。
作者：单颖；姜东 刊期： 2016年第08期
目的：探讨ADAM33基因多态性与青岛地区汉族成人哮喘的相关性。方法：采用SNaPshot方法检测研究对象ADAM33基因rs2280090、rs487377、rs2787094共3个位点的基因多态性。结果：rs2280090、rs487377和rs2787094基因型频率在哮喘组与对照组间差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论：ADAM33基因rs2280090、rs487377和rs2787094多态性与青岛地区汉族成人哮喘无相关关系。
作者：薛卫林；周兆山；王燕青；吉中强；张小燕；梁文华 刊期： 2016年第08期
IL－37作为白细胞介素－1（ IL－1）家族的新成员，与IL－1家族成员拥有类似的β链结构。重组IL－37前体通过蛋白酶－1剪切处理后可以转化为成熟的IL－37。 IL－37是目前唯一没有发现鼠同系物的IL－1家族成员。研究人员在骨髓、肝脏、胸腺、肺等组织中均检测到IL－37的表达，并且发现其参与了多种炎症性疾病和免疫性疾病的发生发展。 IL－37对多种类型细胞的免疫反应也发挥了抑制作用。本文将结合近关于IL－37的功能和生物学研究进展，就IL－37在各种疾病中的作用进行综述。
作者：吴万通；丁红梅；冯晓明 刊期： 2016年第08期
目的：体外培养哮喘患儿外周血巨噬细胞，并从细胞的表型和功能方面观察巨噬细胞M1／M2 极化状态的变化，从而探讨巨噬细胞在哮喘发病中的作用。方法：选取50 例健康对照者与50 例哮喘患儿，收集哮喘患儿及健康对照组的血液，分离纯化得到巨噬细胞，体外给予10 ng／ml GM－CSF 的血清培养液培养，并在第7 天，收集细胞及上清，运用流式细胞技术检测巨噬细胞表型表达，ELISA 方法检测细胞上清IL－10、IL－12 含量变化，检测巨噬细胞吞噬外来性抗原及刺激淋巴细胞分化的能力。结果：与健康对照组相比，哮喘患儿外周血巨噬细胞表面表达的共刺激分子CD64、CD11c、CD40 明显降低，CD206、CD14 及CD23 明显升高（P 均＜0．05）；患儿巨噬细胞分泌的IL－10 明显降低（P＜0．05），IL－12 与对照组相比无显著变化（P＞0．05）；外周血巨噬细胞吞噬能力明显降低（P＜0．05）；将患儿巨噬细胞与T 淋巴细胞共培养，IL－4 含量明显升高，IFN－γ含量明显降低（P 均＜0．05）。结论：相比于健康对照组，哮喘患儿外周血巨噬细胞呈现M2 型，提示巨噬细胞与哮喘疾病具有很大的相关性。
作者：陈娜；庞保东 刊期： 2016年第08期
目的：探讨二乙基二硫代氨基甲酸酯（ DDC）对婴儿双歧杆菌超氧化物歧化酶（ SOD）活性的作用。方法：采用厌氧活化扩增法培养婴儿双歧杆菌，根据绘制出的适生长曲线，在平台生长期内加入不同浓度（200、1000μmol／L）的DDC作用一段时间（0、0．5、1、2、4、24 h），然后离心收集细菌、进行超声破碎，测定细菌裂解液中SOD的活性。作为阳性对照，我们也检测了DDC对小鼠肠道裂解液中SOD活性的影响。结果：我们发现上述不同浓度的DDC作用于婴儿双歧杆菌一定时间后，对其SOD活性无显著影响。动物实验表明DDC作用于小鼠一定时间后，与对照组相比，其SOD 活性显著降低（ P＜0．01）。结论：DDC影响小鼠体内SOD活性，但不影响婴儿双歧杆菌SOD的活性。推断婴儿双歧杆菌SOD抑制剂不是DDC， SOD抑制剂尚需进一步研究。
作者：罗燕；葛兰；陈红兵；杨平常；刘志刚；杨波 刊期： 2016年第08期
作者：《中国免疫学杂志》编辑部 刊期： 2016年第08期
红细胞渗透脆性试验（ RBC fragility test ）是利用不同浓度的低张氯化钠（Sodium chloride，NaCl）溶液来测定红血球细胞膜渗透压的耐受性。当红血球处于低张溶液中时，水分会移入细胞内，使得红血球膨胀，随着NaCl浓度降低，红血球逐渐胀大破裂而释出血红素，出现溶血（ Hemolysis ）现象。然而，红血球细胞膜渗透压的耐受性跟细胞表面积与体积比（ Surface area to volume ratio ，S／V）有关，S／V 比值较大之红血球对低张溶液的耐受性较高，相反地，比值较小者对低张溶液的耐受性较低，容易导致红血球破裂，即红细胞渗透脆性增加［1，2］。
作者：程群英；邹春标 刊期： 2016年第08期
目的：通过构建青霉素诱导的大鼠癫痫动物模型，探讨STAT3及IL－6在青霉素诱导的癫痫大鼠模型中的表达。方法：腹腔注射不同剂量的青霉素，制备癫痫动物模型，观察各组大鼠脑电图及行为学，荧光定量PCR方法检测各组动物IL－6及STAT3的mRNA表达量；ELISA法检测血清中IL－6的分泌量； Western blot检测各组动物STAT3的蛋白表达。结果：500 U／kg和800 U／kg青霉素腹腔注射均出现癫痫行为学发作症状及典型的癫痫脑电波，癫痫发作率为100％；和对照组比较，模型组大鼠IL－6以及STAT3 mRNA水平明显升高，血清中IL－6分泌增加，STAT3蛋白表达水平无显著性差异，但p－STAT3蛋白表达水平显著增加。结论：在青霉素诱导的大鼠癫痫模型中，STAT3及IL－6起着重要的作用。
作者：陈恩；林琳；吕赛平；陈杰妮；陈纯静；邹学森 刊期： 2016年第08期
目的：获得特异性检测复合前列腺特异性抗原（c－PSA）的单克隆抗体配对，建立基于化学发光c－PSA 免疫定量试剂。方法：利用市购c－PSA 抗原免疫6 周龄雌性BALB／c 小鼠，间接法ELISA 差异筛选抗c－PSA、游离前列腺特异性抗原（f－PSA）、总前列腺特异型抗原（t－PSA）的抗体，抗体配对后化学发光定量检测血清中c－PSA 蛋白。结果：获得抗体配对1A10／7D6－SAE，经c－PSA 标准品及临床血清样本初步筛选，该抗体配对适用于基于化学法发光的免疫反应定量检测试剂的开发；血清阳性样本与阴性样本检测结果显示具有统计学意义（P＜0．000 1）；阳性样本定量结果与Siemens 公司复合前列腺特异性抗原测定试剂盒（直接化学发光法）的相关系数为0．97；线性范围为0．1 ～100 ng／ml；检测灵敏度为0．005 ng／ml。结论：成功筛选获得特异性检测c－PSA 的抗体配对，并开发c－PSA 化学发光免疫定量试剂，其检测能力与国际主流试剂相当。
作者：詹炉停；温桂平；赵敏；依含；刘江武；郭小怡；林海军；黄刘女；夏宁邵；郑子峥 刊期： 2016年第08期
目的：研究柚皮苷对人宫颈癌Hela细胞体外增殖的影响及相关机制研究。方法：用不同浓度的柚皮苷处理体外培养人宫颈癌Hela细胞，采用 MTT法检测处理24、48、72 h后Hela 细胞的增殖情况，流式细胞仪测定细胞凋亡率， Hoechst 33258染色观察细胞凋亡情况，同时Western blot观察环氧合酶－2（COX－2）表达的相对量。结果：与对照组相比，柚皮苷低剂量组细胞抑制率无显著差异（ P＞0．05），柚皮苷中剂量组和高剂量组细胞抑制率显著增高（ P＜0．05）；柚皮苷低剂量组细胞凋亡率无显著差异（P＞0．05），柚皮苷中剂量组和高剂量组细胞凋亡率显著增高（P＜0．05），同时柚皮苷中剂量和高剂量组可观察到明显的细胞凋亡现象；柚皮苷低剂量组细胞COX－2表达的相对量无显著差异（ P＞0．05），柚皮苷中剂量组和高剂量组细胞COX－2表达的相对量显著降低（ P＜0．05）；结论：柚皮苷能抑制宫颈癌细胞生长，且随其浓度增加抑制作用增强，其机制可能与其抑制COX－2蛋白表达，促进细胞凋亡相关。
作者：杨文静；王璐；孙锐 刊期： 2016年第08期
目的：比较分析磁微粒化学发光法与酶联免疫吸附法测定抗PR3抗体、抗MPO抗体的检测结果。方法：分别采用磁微粒化学发光法（ A方法）和酶联免疫吸附法（ B方法）对166例自身免疫病患者血清、50例健康者血清中抗PR3抗体、抗MPO抗体进行定量检测，对检测结果进行统计分析。结果：A方法测定高、中、低质控血清的批内和批间重复性优于B方法，A、B方法测定质控血清的准确度均符合要求；A、B方法测定抗PR3抗体、抗MPO抗体临床样本的线性相关系数r分别为0．9878，0．9896；A、B方法的检测结果采用kappa分析，kappa系数分别为0．897和0．882。结论：磁微粒化学发光法（ A方法）测定抗PR3抗体、抗MPO抗体优于酶联免疫吸附法（ B方法），更符合临床应用要求。
作者：张立娟 刊期： 2016年第08期
中国免疫学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国免疫学会,吉林省医学期刊社
