学术投稿

T细胞淋巴瘤DNA疫苗的实验研究

张明智;李继昌;董子明;李兴山;王秋萍

关键词:T淋巴瘤, TCR, 重组质粒, DNA疫苗, 免疫反应
摘要:目的:研究T细胞淋巴瘤TCR Vβ DNA疫苗诱发小鼠体液免疫反应.方法:将BALB/C小鼠随机分为pcDNA3.1组、pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+质脂体组和全硫代CpG组,共4组(每组6只),双侧股四头肌注射疫苗免疫,于第0、2、4周各免疫1次,共3次.每次免疫前及免疫开始后至第8周,取鼠血,应用间接免疫荧光法检测小鼠抗体生成情况.结果:pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+脂质体组小鼠血清中均产生了特异性抗体,抗体滴度在第4周开始增高,第6周时达到高峰.同一时间段相比,特异性抗体滴度后者显著高于前者.结论:证明了DNA重组质粒pcDNA3.1/TCR Vβ8可诱导小鼠产生特异性抗T细胞淋巴瘤TCR Vβ8抗体;CpG和脂质体增强了TCR Vβ8 DNA疫苗诱导的体液免疫反应.
中国免疫学杂志相关文献
  • 人胚胎干细胞的培养条件与鉴别的方法学研究

    目的:研究人胚肺成纤维细胞(human Embryonic Lung Fibroblast,HELF)饲养层对人胚胎干细胞(Human Embryonic Stem Cells,hES细胞)生长的作用,摸索适宜的hES细胞培养与识别方法.方法:以流产胎儿肺组织制备HELF饲养层,取生殖嵴或背肠系膜及其周围组织,获得由人原始生殖细胞(human Primordial Germ Cells,hPGCs)转化成的hES细胞.比较其在不同条件下的增殖行为,并通过生物学特性鉴别该细胞系.结果:HELF饲养层在LIF存在的条件下有利于支持hES细胞的体外生长;hES细胞碱性磷酸酶组织化学染色及端粒酶ELISA检测阳性;具有正常的核型;在体外发展为类胚体.结论:HELF饲养层和LIF的协同作用能支持hES细胞的生长;建立通过生物学特性鉴别hES细胞的方法.

    作者:姜景岩;孔北华;曲迅;马道新;孙丽;张友忠;王波;杨瑞芳;王明毅 刊期: 2003年第09期

  • 原发性高血压红细胞CR1分子粘附活性和胸腺素的免疫调整作用

    目的:探讨原发性高血压(EH)红细胞免疫(red cell immune adherence,RCIA)病理机制和胸腺素的非特异性免疫调整作用.方法:以酵母菌红细胞花环试验及PEG沉淀法测定99例EH者红细胞C3b受体(RCR)活性、红细胞粘附免疫复合物(RICR)指标及循环免疫复合物(CIC)含量.并使用小牛胸腺素随机对其中48例EH进行免疫治疗,同时与51例常规治疗EH者及30例正常人在治疗前后对照上述指标.结果:各期EH均出现RCR、RICR和CIC指标的显著异常(P<0.01或P<0.05).免疫治疗组12周后各上述指标较对照组有显著改善(P<0.01或P<0.05),且对Ⅰ期EH的调整效果优于Ⅲ期组.结论:RCIA功能障碍参与了EH动脉壁炎症损害的免疫病理过程.使用胸腺素对调整上述免疫异常具有一定作用.

    作者:黄美先;张玉芳;缪群;朱华;泮韵峰 刊期: 2003年第09期

  • 牛膝多糖体外诱导人T细胞表达IFN-γ和IL-4蛋白的机制探讨

    目的:探讨牛膝多糖免疫调节作用的机制.方法:使用牛膝多糖在不同浓度或在不同时间内对人T细胞进行体外诱导培养,用ELISA方法测定培养上清液的IFN-γ及IL-4的蛋白表达情况.结果:1人T细胞受不同浓度ABPS刺激时, IFN-γ分泌水平随ABPS浓度递增,在400 μg/ml时,IFN-γ表达量高(P<0.05),而IL-4的分泌始终处于低水平(P>0.05).2人T细胞在ABPS刺激不同时间后,IFN-γ分泌水平逐步增高,在48小时时与其他各时间点比较,有非常显著的差异(P<0.001),而IL-4的分泌始终处于低水平(P>0.05).结论:1ABPS能诱导人T细胞分泌IFN-γ,该作用呈时间、剂量依赖性变化,而抑制IL-4的分泌.2在蛋白表达水平上证实ABPS能够促进Th1类细胞因子的分泌,而抑制Th2类细胞因子的分泌.

    作者:季敬璋;彭颖;吕建新 刊期: 2003年第09期

  • 抗核糖体抗体阳性判断标准的探讨

    目的:分析针对分子量为38 kD和/或15/16.5 kD多肽抗原的抗核糖体抗体(anti-ribosomal antibodies)与SLE的关系,探讨抗核糖体抗体的阳性判断标准及其在SLE中的检出情况.方法:收集病人血清262例,包括SLE115例、RA57例、硬皮病20例、MCTD39例及其他免疫性疾病31例,用免疫印迹法(Western-blot)检测其抗ENA抗体谱.结果:分别以同时出现38 kD和16.5/15 kD蛋白条带以及出现38 kD蛋白条带为判断抗核糖体抗体阳性的标准,则该抗体对诊断SLE的敏感性和特异性结果分别为28.7%(33/115)、96.6%(142/147)及17.4%(20/115)、97.3%(143/147),两者比较敏感性有显著性差异(P<0.05),特异性无显著性差异(P>0.05);仅38 kD分子阳性的14例样本中,SLE占大多数,显著多于其它疾病(71.4%比28.6%,P<0.05);38 kD分子阳性同时伴抗Sm抗体阳性者多于抗Sm抗体阴性者,但无显著性差异(64.3%比35.7%,P>0.05).结论:抗核糖体抗体38 kD分子与SLE密切相关,而与抗Sm抗体相关性不强.以38 kD为主要抗原多肽判断抗核糖体抗体,不仅可以提高该抗体的阳性检出率,同时也不会降低其对SLE诊断的特异性,该判断方法值得推广应用.

    作者:彭晓东;王兰兰;武永康;张瑞薇;刘瑾 刊期: 2003年第09期

  • 自体疣移植治疗复发性尖锐湿疣

    生殖器尖锐湿疣为性病常见病,治疗方法有刮除、CO2激光、冷冻等,但术后均有较高的复发率.近二年我科对复发型尖锐湿疣给予疣刮除加自体疣移植术,并与单纯疣刮除进行比较,取得了较好疗效,现报道如下.

    作者:孙嫦娥;朱秀芳 刊期: 2003年第09期

  • 女性慢性生殖道炎症与抗精子免疫的相关研究

    目的:研究生殖道慢性感染状态下抗精子免疫应答的机制,为防治抗精子免疫性不孕提供依据.方法:1病例选择:诊断为慢性宫颈炎或/和慢性盆腔炎,有正常性生活的妇女50例.对照组为有正常性生活并排除急慢性生殖道炎症的妇女10例;2观察指标:宫颈粘液病原体检测:包括细菌、真菌、解脲支原体(UU)与人型支原体(MH)培养,沙眼衣原体(CT);血清ASAb总Ig测定(ELISA法);外周血淋巴细胞亚群(红细胞花环法);宫颈粘液白细胞介素2(IL-2).结果:1慢性生殖道炎症组血清抗精子抗体(ASAb)水平显著高于对照组(P<0.05);解脲支原体(UU)或/和沙眼衣原体(CT)感染与ASAb有高度相关性(P<0.01);2慢性生殖道炎症并抗精子抗体阳性组的妇女CD8+细胞减少,CD4+/CD8+比值升高,而宫颈粘液中IL-2 水平显著升高,与ASAb阴性患者及正常对照组比较均有显著差异(P<0.01).结论:女性慢性生殖道炎症可导致体内体液免疫与细胞免疫异常,并诱导抗精子抗体的产生.

    作者:余琦;罗颂平;邓高丕;许丽绵 刊期: 2003年第09期

  • 清解宁对白细胞-血管内皮细胞粘附的影响

    白细胞-血管内皮(HUVEC)细胞粘附在免疫应答与炎症中均有重要作用.黄连解毒汤及主要成分小檗碱、黄芩苷等能抑制白细胞与HUVEC的粘附及粘附分子的表达[1].我们将上述成分组成清解宁,研究其对白细胞-HUVEC粘附及粘附分子的影响.

    作者:任钧国;邱全瑛;郝钰;娄金丽;何秀娟 刊期: 2003年第09期

  • 抗人膀胱癌/抗VEGF双功能基因抗体制备及体外效应研究

    目的:研究制备抗人膀胱癌和抗血管内皮生长因子的双功能抗体,用以导向抑制肿瘤新生血管的形成.方法:在制备抗人膀胱癌和抗血管内皮细胞生长因子单克隆抗体的基础上制备双功能抗体.结果:双功能抗体的IC50为10-9.5,抗血管内皮生长因子抗体的IC50为10-8.9,抗人膀胱移行细胞癌单克隆抗体的IC50为10-8.3.结论:双功能抗体的有效率明显高于单克隆抗体.

    作者:刘禄成;郭航;范海涛;朱德淳;李然伟;李香云 刊期: 2003年第09期

  • 受体相关蛋白对实验性自身免疫性重症肌无力的乙酰胆碱受体的作用

    目的:探讨受体相关蛋白(Rapsyn)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物终板乙酰胆碱受体的作用.方法:用基因工程的方法制备提取pcDNA-Rapsyn,并将其注入动物肌肉左大腿外侧,右大腿相应部位注射相同剂量的空白质粒(Vector),以方波刺激使其进入细胞膜内,2周后用单克隆抗体35(mAb35)诱导出EAMG模型并进行症状评估,mAb35诱导48小时后取双大腿外侧肌,用放射免疫法检测AChR,并计算出AChR的损失率.结果:在EAMG模型中,被pcDNA-Rapsyn预处理的肌肉AChR损失率明显低于未经处理的肌肉.结论:Rapsyn蛋白对EAMG模型的AChR有保护作用.

    作者:张旭;Mario Losen;Marc De Baets 刊期: 2003年第09期

  • 分子佐剂C3d增强hCGβ基因免疫体液免疫效应

    目的:该实验室前期工作已成功构建真核表达质粒pcDNA3-hCGβ、pcDNA3-hCGβ-C3d3且证明其能在真核表达系统中有效表达.通过动物DNA免疫,以期证实分子佐剂C3d增强免疫避孕疫苗免疫原性.方法:抽提与纯化pcDNA3、pcDNA3-hCGβ、pcDNA3-hCGβ-C3d3质粒,进行动物DNA免疫.免疫剂量分别为5、10、20 pmol,共免疫2次,每次间隔3周.末次免疫后6周采血,用间接ELISA分析实验动物外周血抗hCGβ抗体效价.结果:C3d分子佐剂能明显提高抗hCGβ抗体滴度;且其作用呈剂量依赖性.结论:分子佐剂确实能增强hCGβ免疫原性;此结果将有助于免疫避孕疫苗的技术进步及实际应用.

    作者:赵欣荣;李大金;蔡立荣;孙晓溪 刊期: 2003年第09期

  • Fas死亡信号激发域cDNA的克隆、表达及体外生物学效应

    目的:克隆及表达Fas死亡信号激发域(Fas Activation Domain,FasAD)片段,获得具有生物学活性的Fas AD多肽.方法:应用半巢式逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增Fas死亡信号激发域cDNA片段,构建Intein表达型原核表达载体FasAD-pTYB12,应用IMPACTTM-CN系统表达及进行一步法亲合层析分离、纯化FasAD多肽.结果:DNA序列测定显示克隆的FasAD cDNA碱基排列顺序与Genebank(M67454)所示完全一致.重组表达载体FasAD-pTYB12经IPTG诱导,成功表达可溶性融合蛋白,进一步分离、纯化获得分子量约5 000的FasAD多肽,Westem blot显示FasAD多肽能被兔抗人Fas多抗识别.初步的生物学活性鉴定显示,该FasAD多肽抑制rhFasL诱导的细胞凋亡的生物学活性高可达70%.结论:可利用IMPACTTM-CN系统制备Fas死亡信号激发域的小分子量多肽,为深入研究Fas结构与功能的关系及与配体的相互作用提供了相关的实验基础,为进一步开发相关的生物免疫调节剂提供了实验依据.

    作者:冯晓勤;周淑芸;宁运山;马骊;王小宁 刊期: 2003年第09期

  • TCR Vβ7基因转染PBLs的表达及抗肝癌的作用

    目的:将TCR Vβ7基因转化到淋巴细胞后研究肝癌细胞的生物学作用.方法:用RT-PCR的方法扩增出TCR Vβ7基因,克隆到表达载体pLXSN上,用脂质体转染的方法,将重组载体导入淋巴细胞,然后将淋巴细胞作用于肝癌细胞,淋巴细胞用流式细胞仪测表型和用激光共聚焦检测TCR Vβ7.1基因的表达,肝癌细胞作超微结构分析.结果:TCR Vβ7基因表达的跨膜蛋白显著增多,而且淋巴细胞增多(P<0.05),肝癌细胞出现凋亡.结论:TCR Vβ7亚家族具有识别肝癌抗原的作用并能激活T细胞的杀伤肝癌细胞的功能.

    作者:肖兰凤;姚佳红;林月霞;罗利琼 刊期: 2003年第09期

  • 过继转输急性心肌梗死大鼠脾细胞介导心肌损伤

    目的:探讨自身免疫反应在急性心肌梗死(AMI)后心肌损伤中的作用.方法:复制AMI大鼠模型和假手术作对照,6周后将100×106~150×106脾细胞过继转输给同源近交大鼠;4周后检测受者大鼠血流动力学、组织病理和抗肌球蛋白重链(MHC)抗体.结果:AMI大鼠和转输大鼠(AMI-T组)(8/22只)血清中检测到抗MHC抗体,假手术大鼠和转输大鼠(Sham-T组)(0/20只)均为阴性(P<0.05);AMI-T组(n=10)大鼠发生心脏特异性炎症反应和心功能受损,Sham-T组心脏无异常变化.结论:AMI-T大鼠发生了淋巴细胞介导心肌损伤和心功能下降,心肌自身免疫反应可能是AMI后心室重塑的新颖机制.

    作者:陶荣;廖玉华;程翔;胡燕;王敏;王朝晖 刊期: 2003年第09期

  • 复方片剂及单味药对化疗损伤小鼠细胞因子及NK细胞活性的影响

    本文对源自<中国药典>具有填精益髓之功效,有人参、当归、黄芪、白、茯苓、熟地等十二味中药组成的人参养荣丸,在保证有效成分不损失的条件下,实行剂型改革,由蜜丸变为片剂--人参养荣片(RSYRP),并建立了小鼠化疗损伤的实验模型[1].研究了该片剂及其组方中几种主要单味药对小鼠NK细胞活性及细胞因子(IL-1、IL-6 、IL-12、EPO、G-CSF)产生的影响,并与外源性G-CSF的作用进行比较.

    作者:胡涛;耿排力 刊期: 2003年第09期

  • 免疫球蛋白治疗儿童难治性癫痫的近、远期疗效与体液免疫功能的研究

    目的:探讨人血免疫球蛋白治疗儿童难治性癫痫的近、远期疗效和体液免疫功能的变化.方法:对36例儿童难治性癫痫辅加人血免疫球蛋白治疗,随访6个月~1年,分别采用ELISA法和速率散射浊度法对36例病儿和22例健康儿童进行Ig、C3、C4 CH50的检测,并给予治疗前后配对比较.结果:36例病儿经辅加免疫球蛋白治疗后17例终止发作,5例显效,6例有效,8例无效,近期总有效率为77.8%.随访≥1年者28例(77.8%),其中13例(46.4%)复发,远期有效率为53.6%,临床显效时间在用药后1周内,EEG也出现同步显著改善.体液免疫的结果是治疗前癫痫组Ig中的IgG、IgM和C3、C4、CH50明显低于对照组(P<0.01);治疗后癫痫患儿IgG、IgM和C3、C4、CH50明显高于治疗前(P<0.01),特别是C3、C4、CH50升高为明显.半年后复检Ig和C3、C4、CH50又降低,配对比较差异有显著性(P<0.01).结论:癫痫患儿体液免疫功能明显低下,给予人血免疫球蛋白后77.8%病例近期临床发作得到控制,EEG转为正常或好转,也可使血IgG、IgM和C3、C4、CH50含量短期内升高,这可能是人血免疫球蛋白能有效治疗癫痫的机制之一.

    作者:许继平;李玉莲;苗丰莲;颜惠兰;孙昭辉 刊期: 2003年第09期

  • RhD放散型相关的等位基因的鉴定

    目的:为了探讨D放散型(Del)表型的分子基础.方法:采用序列分析方法分析26名Del表型个体RHD基因全长编码区和一名个体的RHD基因第7内含子部分序列;同时使用血清学方法检测全部个体的RhCcEe表型.结果:全部样品的第9外显子均存在RHD 1227G>A碱基突变,其余序列则与正常RHD基因一致,一名个体的第7内含子观察到一处碱基突变RHD IVS7+152c>a;血清学结果显示所有Del表型个体均为RhC抗原阳性个体.结论:由于1227A位于RHD基因第9外显子与第9内含子交界处,可能影响前RNA转录后mRNA的正常拼接,形成Del表型.

    作者:邵超鹏;Tobias J.Legler 刊期: 2003年第09期

  • 鞘内IgG合成不同计算公式的比较

    确定鞘内是否有IgG合成对神经系统疾病尤其是多发性硬化的诊断具有重要的价值.临床上有2种方法用于确定鞘内IgG合成:定性测定脑脊液中的寡克隆区带和通过计算公式定量计算是否有鞘内IgG合成.目前国内常用的计算公式为IgG指数和24小时IgG合成率(IgG SR).

    作者:任士卿;郝洪军;王薇薇;袁锦楣 刊期: 2003年第09期

  • T细胞淋巴瘤DNA疫苗的实验研究

    目的:研究T细胞淋巴瘤TCR Vβ DNA疫苗诱发小鼠体液免疫反应.方法:将BALB/C小鼠随机分为pcDNA3.1组、pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+质脂体组和全硫代CpG组,共4组(每组6只),双侧股四头肌注射疫苗免疫,于第0、2、4周各免疫1次,共3次.每次免疫前及免疫开始后至第8周,取鼠血,应用间接免疫荧光法检测小鼠抗体生成情况.结果:pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+脂质体组小鼠血清中均产生了特异性抗体,抗体滴度在第4周开始增高,第6周时达到高峰.同一时间段相比,特异性抗体滴度后者显著高于前者.结论:证明了DNA重组质粒pcDNA3.1/TCR Vβ8可诱导小鼠产生特异性抗T细胞淋巴瘤TCR Vβ8抗体;CpG和脂质体增强了TCR Vβ8 DNA疫苗诱导的体液免疫反应.

    作者:张明智;李继昌;董子明;李兴山;王秋萍 刊期: 2003年第09期

  • AFP异质体检测及其临床应用价值

    目的:探讨甲胎蛋白(AFP)异质体检测对原发性肝癌、良性肝病的临床应用价值.方法:根据小扁豆凝集素对AFP亲和力不同,采用亲和免疫电泳印迹法检测AFP-L3;化学发光免疫分析法检测AFP.结果:以AFP-L3≥15%作为PHC的诊断标准,其敏感性为91.1%,与慢性肝病鉴别诊断的特异性为95.0%,AFP-L3含量与血清AFP浓度及原发性肝癌癌灶大小无关.结论:AFP-L3结合AFP检测对原发性肝癌,尤其是小肝癌的早期诊断和与良性肝病的鉴别诊断具有重要的临床应用价值.

    作者:李招云;吴晓宇;赖卫强;莫经刚;戴岳楚;高琳 刊期: 2003年第09期

  • 八珍汤对环磷酰胺所致低白模型小鼠造血系统的影响

    八珍汤源于明代<正体类要>,由人参、茯苓、甘草、白术、当归、熟地、白芍、川芎组成,是四君子汤和四物汤的复方.祖国医学认为,气为血帅,血为气母,精生血,精血同源,互相资生,互为依存.四君子汤健脾益气、四物汤补血养血,八珍汤汇两方之功,奏两方之效.故八珍汤常用于病后失调、久病失治、失血过多等慢性消耗性疾病.近年来,对中药的重视程度日益增强,研究中药对造血及免疫功能低下动物产生的影响,将为临床治疗该类疾病扩大用药来源.

    作者:江南;罗霞;陈东辉;杨志荣 刊期: 2003年第09期

中国免疫学杂志

中国免疫学杂志

主管:中国科学技术协会

主办:中国免疫学会,吉林省医学期刊社