学术投稿

抗人膀胱癌/抗VEGF双功能基因抗体制备及体外效应研究

刘禄成;郭航;范海涛;朱德淳;李然伟;李香云

关键词:膀胱癌, 血管内皮细胞生长因子, 双功能抗体
摘要:目的:研究制备抗人膀胱癌和抗血管内皮生长因子的双功能抗体,用以导向抑制肿瘤新生血管的形成.方法:在制备抗人膀胱癌和抗血管内皮细胞生长因子单克隆抗体的基础上制备双功能抗体.结果:双功能抗体的IC50为10-9.5,抗血管内皮生长因子抗体的IC50为10-8.9,抗人膀胱移行细胞癌单克隆抗体的IC50为10-8.3.结论:双功能抗体的有效率明显高于单克隆抗体.
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  • 过继转输急性心肌梗死大鼠脾细胞介导心肌损伤

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    作者:陶荣;廖玉华;程翔;胡燕;王敏;王朝晖 刊期: 2003年第09期

  • 糖尿病周围神经病变IL-1β,TNF-α的介导作用

    糖尿病随着病程的延长,常伴有周围神经损害,这是由于各种因素造成周围神经髓鞘脱失,自身抗原成份暴露而引起免疫病理反应.在这过程中,细胞因子被认为参与了其中的作用.为此我们检测了30例Ⅱ型糖尿病周围神经病变病人IL-1β、TNF-α,探讨其在病理过程中的作用,现报告如下.

    作者:周微雅;李妮;陈晖;钟华;余劲明 刊期: 2003年第09期

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    作者:任士卿;郝洪军;王薇薇;袁锦楣 刊期: 2003年第09期

  • 抗人膀胱癌/抗VEGF双功能基因抗体制备及体外效应研究

    目的:研究制备抗人膀胱癌和抗血管内皮生长因子的双功能抗体,用以导向抑制肿瘤新生血管的形成.方法:在制备抗人膀胱癌和抗血管内皮细胞生长因子单克隆抗体的基础上制备双功能抗体.结果:双功能抗体的IC50为10-9.5,抗血管内皮生长因子抗体的IC50为10-8.9,抗人膀胱移行细胞癌单克隆抗体的IC50为10-8.3.结论:双功能抗体的有效率明显高于单克隆抗体.

    作者:刘禄成;郭航;范海涛;朱德淳;李然伟;李香云 刊期: 2003年第09期

  • 自体疣移植治疗复发性尖锐湿疣

    生殖器尖锐湿疣为性病常见病,治疗方法有刮除、CO2激光、冷冻等,但术后均有较高的复发率.近二年我科对复发型尖锐湿疣给予疣刮除加自体疣移植术,并与单纯疣刮除进行比较,取得了较好疗效,现报道如下.

    作者:孙嫦娥;朱秀芳 刊期: 2003年第09期

  • 人Bcl-2蛋白的基因克隆、表达及初步活性分析

    目的:以特定形式对高度疏水性的人Bcl-2(hBcl-2)蛋白进行可溶性表达,获得非疏水性hBcl-2蛋白并具备生物学结合活性,为进一步研究hBcl-2三维结构并在此基础上研发特异性小分子药物提供充足的蛋白样品.方法:用PCR方法对hBcl-2基因进行克隆重组,插入原核表达载体pET28a(+)中.用Western Blot和MALDI-TOF生物质谱鉴定,采用荧光极化方法进行活性测定.结果:重组hBcl-2在E.Coli中实现了高效、可溶性的融合表达,重组蛋白经纯化至电泳纯,具备了与Bcl-2家族Bak蛋白BH3功能域特异结合的能力,表明原核表达的重组hBcl-2具有较好的结合活性.结论:成功地对重组hBcl-2蛋白进行了可溶性表达和活性测定.

    作者:胡美茹;张学敏;靳宝锋;兰雨;沈倍奋 刊期: 2003年第09期

  • 活动性类风湿关节炎患者sICAM-1、sVCAM-1的变化及意义

    目的:测定活动性类风湿关节炎(RA)患者血清中sICAM-1、sVCAM-1水平,探讨sICAM-1、sVCAM-1与IL-1、TNF、IFN-γ及病情的关系.方法:用酶联免疫分析法(ELISA)检测30例活动性RA患者与30例健康对照者sICAM-1、sVCAM-1、IL-1、TNF、IFN-γ水平.结果:RA患者血清sICAM-1、sVCAM-1、IL-1、TNF、IFN-γ水平明显高于正常对照组(P<0.001),sICAM-1与IL-1、IFN-γ正相关,与RF亦呈正相关,sVCAM-1与IL-1、TNF、IFN-γ正相关,与ESR、CRP、Stock指数正相关.结论:RA患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平显著升高,sICAM-1、sVCAM-1可能参与RA发病过程,sICAM-1可作为判断病情严重性的指标,sVCAM-1可作为观察病情活动性的指标.

    作者:吴华香;王彩花;朱永良 刊期: 2003年第09期

  • 抗核糖体抗体阳性判断标准的探讨

    目的:分析针对分子量为38 kD和/或15/16.5 kD多肽抗原的抗核糖体抗体(anti-ribosomal antibodies)与SLE的关系,探讨抗核糖体抗体的阳性判断标准及其在SLE中的检出情况.方法:收集病人血清262例,包括SLE115例、RA57例、硬皮病20例、MCTD39例及其他免疫性疾病31例,用免疫印迹法(Western-blot)检测其抗ENA抗体谱.结果:分别以同时出现38 kD和16.5/15 kD蛋白条带以及出现38 kD蛋白条带为判断抗核糖体抗体阳性的标准,则该抗体对诊断SLE的敏感性和特异性结果分别为28.7%(33/115)、96.6%(142/147)及17.4%(20/115)、97.3%(143/147),两者比较敏感性有显著性差异(P<0.05),特异性无显著性差异(P>0.05);仅38 kD分子阳性的14例样本中,SLE占大多数,显著多于其它疾病(71.4%比28.6%,P<0.05);38 kD分子阳性同时伴抗Sm抗体阳性者多于抗Sm抗体阴性者,但无显著性差异(64.3%比35.7%,P>0.05).结论:抗核糖体抗体38 kD分子与SLE密切相关,而与抗Sm抗体相关性不强.以38 kD为主要抗原多肽判断抗核糖体抗体,不仅可以提高该抗体的阳性检出率,同时也不会降低其对SLE诊断的特异性,该判断方法值得推广应用.

    作者:彭晓东;王兰兰;武永康;张瑞薇;刘瑾 刊期: 2003年第09期

  • Fas死亡信号激发域cDNA的克隆、表达及体外生物学效应

    目的:克隆及表达Fas死亡信号激发域(Fas Activation Domain,FasAD)片段,获得具有生物学活性的Fas AD多肽.方法:应用半巢式逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增Fas死亡信号激发域cDNA片段,构建Intein表达型原核表达载体FasAD-pTYB12,应用IMPACTTM-CN系统表达及进行一步法亲合层析分离、纯化FasAD多肽.结果:DNA序列测定显示克隆的FasAD cDNA碱基排列顺序与Genebank(M67454)所示完全一致.重组表达载体FasAD-pTYB12经IPTG诱导,成功表达可溶性融合蛋白,进一步分离、纯化获得分子量约5 000的FasAD多肽,Westem blot显示FasAD多肽能被兔抗人Fas多抗识别.初步的生物学活性鉴定显示,该FasAD多肽抑制rhFasL诱导的细胞凋亡的生物学活性高可达70%.结论:可利用IMPACTTM-CN系统制备Fas死亡信号激发域的小分子量多肽,为深入研究Fas结构与功能的关系及与配体的相互作用提供了相关的实验基础,为进一步开发相关的生物免疫调节剂提供了实验依据.

    作者:冯晓勤;周淑芸;宁运山;马骊;王小宁 刊期: 2003年第09期

  • AFP异质体检测及其临床应用价值

    目的:探讨甲胎蛋白(AFP)异质体检测对原发性肝癌、良性肝病的临床应用价值.方法:根据小扁豆凝集素对AFP亲和力不同,采用亲和免疫电泳印迹法检测AFP-L3;化学发光免疫分析法检测AFP.结果:以AFP-L3≥15%作为PHC的诊断标准,其敏感性为91.1%,与慢性肝病鉴别诊断的特异性为95.0%,AFP-L3含量与血清AFP浓度及原发性肝癌癌灶大小无关.结论:AFP-L3结合AFP检测对原发性肝癌,尤其是小肝癌的早期诊断和与良性肝病的鉴别诊断具有重要的临床应用价值.

    作者:李招云;吴晓宇;赖卫强;莫经刚;戴岳楚;高琳 刊期: 2003年第09期

  • ERK1/2信号传导途径参与调控NK细胞的杀伤活性

    目的:阐明NK细胞系持续活化的信号通路ERK1/2在调节NK细胞增殖和杀伤活性中可能发挥的作用.方法:制备NK-92和YT细胞的全细胞提取物,进行Western blot,检测在细胞系中持续活化的信号传导途径,信号通路特异性阻断剂PD098059阻断ERK1/2活化,MTT方法评价ERK1/2在调节NK细胞杀伤和增殖活性中发挥的作用,RT-PCR检测阻断试剂作用前后杀伤相关分子表达水平的变化.结果:2个代表性的NK细胞系(YT,IL-2非依赖;NK-92,IL-2依赖)中存在ERK1/2(p44/42MAPK)、NF-κB和STAT3信号通路的持续磷酸化,去除IL-2和血清较长时间后仍保持活化状态,而其它信号途径(STAT1、STAT6、PI-3K、p38MAPK)则未见活化.特异性阻断剂PD098059 200 μmol/L阻断ERK1/2活化后,NK细胞杀伤K562靶细胞的能力显著降低,但细胞的增殖活性不受影响.RT-PCR证实,PD098059阻断ERK1/2抑制NK细胞毒活性的同时,杀伤相关分子IFNγ、FasL、perforin的表达水平也不同程度地下调.结论:NK细胞系中持续性活化的ERK1/2主要传递与NK细胞细胞毒性相关的信号,并不参与调节细胞的增殖,该途径通过控制杀伤相关分子IFNγ、FasL、perforin的基因表达从而主导NK对靶细胞的杀伤.

    作者:梁淑娟;孙汭;魏海明;冯进波;许晓群;田志刚 刊期: 2003年第09期

  • 人胚胎干细胞的培养条件与鉴别的方法学研究

    目的:研究人胚肺成纤维细胞(human Embryonic Lung Fibroblast,HELF)饲养层对人胚胎干细胞(Human Embryonic Stem Cells,hES细胞)生长的作用,摸索适宜的hES细胞培养与识别方法.方法:以流产胎儿肺组织制备HELF饲养层,取生殖嵴或背肠系膜及其周围组织,获得由人原始生殖细胞(human Primordial Germ Cells,hPGCs)转化成的hES细胞.比较其在不同条件下的增殖行为,并通过生物学特性鉴别该细胞系.结果:HELF饲养层在LIF存在的条件下有利于支持hES细胞的体外生长;hES细胞碱性磷酸酶组织化学染色及端粒酶ELISA检测阳性;具有正常的核型;在体外发展为类胚体.结论:HELF饲养层和LIF的协同作用能支持hES细胞的生长;建立通过生物学特性鉴别hES细胞的方法.

    作者:姜景岩;孔北华;曲迅;马道新;孙丽;张友忠;王波;杨瑞芳;王明毅 刊期: 2003年第09期

  • 复发性生殖器疱疹患者外周血趋化性细胞因子及其受体的研究

    目的:在单细胞水平上研究复发性生殖器疱疹(RGH)外周血T淋巴细胞上CCR2、CCR5、CXCR1、CXCR3的表达,并通过观察血清趋化性细胞因子的改变,探讨趋化性细胞因子及其受体在RGH发病机理中的作用.方法:采用ELISA法检测20例RGH患者及30例正常人血清中白细胞介素8(IL-8)、γ干扰素诱导的蛋白10(IP-10)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白12(MIP-12)活化后可调节的正常T细胞表达和分泌的因子(RANTES),巨噬细胞来源的趋化性细胞因子(MDC)等水平变化;同时用双色荧光标记的流式细胞术分析20例RGH患者外周血淋巴细胞表面趋化因子受体CCR2、CCR5、CXCR1、CXCR3的表达情况.结果:RGH患者血清RANTES水平低于正常对照组(P<0.05);外周血CXCR1+T淋巴细胞百分率高于正常对照组(P<0.05).结论:病毒反复感染机体后,抑制机体的免疫细胞产生RANTES并通过T淋巴细胞CXCR1+的高表达可能在RGH抗病毒感染的免疫机理中起重要作用.

    作者:张明霞;钱起丰 刊期: 2003年第09期

  • 原发性高血压红细胞CR1分子粘附活性和胸腺素的免疫调整作用

    目的:探讨原发性高血压(EH)红细胞免疫(red cell immune adherence,RCIA)病理机制和胸腺素的非特异性免疫调整作用.方法:以酵母菌红细胞花环试验及PEG沉淀法测定99例EH者红细胞C3b受体(RCR)活性、红细胞粘附免疫复合物(RICR)指标及循环免疫复合物(CIC)含量.并使用小牛胸腺素随机对其中48例EH进行免疫治疗,同时与51例常规治疗EH者及30例正常人在治疗前后对照上述指标.结果:各期EH均出现RCR、RICR和CIC指标的显著异常(P<0.01或P<0.05).免疫治疗组12周后各上述指标较对照组有显著改善(P<0.01或P<0.05),且对Ⅰ期EH的调整效果优于Ⅲ期组.结论:RCIA功能障碍参与了EH动脉壁炎症损害的免疫病理过程.使用胸腺素对调整上述免疫异常具有一定作用.

    作者:黄美先;张玉芳;缪群;朱华;泮韵峰 刊期: 2003年第09期

  • 复方片剂及单味药对化疗损伤小鼠细胞因子及NK细胞活性的影响

    本文对源自<中国药典>具有填精益髓之功效,有人参、当归、黄芪、白、茯苓、熟地等十二味中药组成的人参养荣丸,在保证有效成分不损失的条件下,实行剂型改革,由蜜丸变为片剂--人参养荣片(RSYRP),并建立了小鼠化疗损伤的实验模型[1].研究了该片剂及其组方中几种主要单味药对小鼠NK细胞活性及细胞因子(IL-1、IL-6 、IL-12、EPO、G-CSF)产生的影响,并与外源性G-CSF的作用进行比较.

    作者:胡涛;耿排力 刊期: 2003年第09期

  • TCR Vβ7基因转染PBLs的表达及抗肝癌的作用

    目的:将TCR Vβ7基因转化到淋巴细胞后研究肝癌细胞的生物学作用.方法:用RT-PCR的方法扩增出TCR Vβ7基因,克隆到表达载体pLXSN上,用脂质体转染的方法,将重组载体导入淋巴细胞,然后将淋巴细胞作用于肝癌细胞,淋巴细胞用流式细胞仪测表型和用激光共聚焦检测TCR Vβ7.1基因的表达,肝癌细胞作超微结构分析.结果:TCR Vβ7基因表达的跨膜蛋白显著增多,而且淋巴细胞增多(P<0.05),肝癌细胞出现凋亡.结论:TCR Vβ7亚家族具有识别肝癌抗原的作用并能激活T细胞的杀伤肝癌细胞的功能.

    作者:肖兰凤;姚佳红;林月霞;罗利琼 刊期: 2003年第09期

  • 八珍汤对环磷酰胺所致低白模型小鼠造血系统的影响

    八珍汤源于明代<正体类要>,由人参、茯苓、甘草、白术、当归、熟地、白芍、川芎组成,是四君子汤和四物汤的复方.祖国医学认为,气为血帅,血为气母,精生血,精血同源,互相资生,互为依存.四君子汤健脾益气、四物汤补血养血,八珍汤汇两方之功,奏两方之效.故八珍汤常用于病后失调、久病失治、失血过多等慢性消耗性疾病.近年来,对中药的重视程度日益增强,研究中药对造血及免疫功能低下动物产生的影响,将为临床治疗该类疾病扩大用药来源.

    作者:江南;罗霞;陈东辉;杨志荣 刊期: 2003年第09期

  • T细胞淋巴瘤DNA疫苗的实验研究

    目的:研究T细胞淋巴瘤TCR Vβ DNA疫苗诱发小鼠体液免疫反应.方法:将BALB/C小鼠随机分为pcDNA3.1组、pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+质脂体组和全硫代CpG组,共4组(每组6只),双侧股四头肌注射疫苗免疫,于第0、2、4周各免疫1次,共3次.每次免疫前及免疫开始后至第8周,取鼠血,应用间接免疫荧光法检测小鼠抗体生成情况.结果:pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+脂质体组小鼠血清中均产生了特异性抗体,抗体滴度在第4周开始增高,第6周时达到高峰.同一时间段相比,特异性抗体滴度后者显著高于前者.结论:证明了DNA重组质粒pcDNA3.1/TCR Vβ8可诱导小鼠产生特异性抗T细胞淋巴瘤TCR Vβ8抗体;CpG和脂质体增强了TCR Vβ8 DNA疫苗诱导的体液免疫反应.

    作者:张明智;李继昌;董子明;李兴山;王秋萍 刊期: 2003年第09期

  • 牛膝多糖体外诱导人T细胞表达IFN-γ和IL-4蛋白的机制探讨

    目的:探讨牛膝多糖免疫调节作用的机制.方法:使用牛膝多糖在不同浓度或在不同时间内对人T细胞进行体外诱导培养,用ELISA方法测定培养上清液的IFN-γ及IL-4的蛋白表达情况.结果:1人T细胞受不同浓度ABPS刺激时, IFN-γ分泌水平随ABPS浓度递增,在400 μg/ml时,IFN-γ表达量高(P<0.05),而IL-4的分泌始终处于低水平(P>0.05).2人T细胞在ABPS刺激不同时间后,IFN-γ分泌水平逐步增高,在48小时时与其他各时间点比较,有非常显著的差异(P<0.001),而IL-4的分泌始终处于低水平(P>0.05).结论:1ABPS能诱导人T细胞分泌IFN-γ,该作用呈时间、剂量依赖性变化,而抑制IL-4的分泌.2在蛋白表达水平上证实ABPS能够促进Th1类细胞因子的分泌,而抑制Th2类细胞因子的分泌.

    作者:季敬璋;彭颖;吕建新 刊期: 2003年第09期

  • 受体相关蛋白对实验性自身免疫性重症肌无力的乙酰胆碱受体的作用

    目的:探讨受体相关蛋白(Rapsyn)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物终板乙酰胆碱受体的作用.方法:用基因工程的方法制备提取pcDNA-Rapsyn,并将其注入动物肌肉左大腿外侧,右大腿相应部位注射相同剂量的空白质粒(Vector),以方波刺激使其进入细胞膜内,2周后用单克隆抗体35(mAb35)诱导出EAMG模型并进行症状评估,mAb35诱导48小时后取双大腿外侧肌,用放射免疫法检测AChR,并计算出AChR的损失率.结果:在EAMG模型中,被pcDNA-Rapsyn预处理的肌肉AChR损失率明显低于未经处理的肌肉.结论:Rapsyn蛋白对EAMG模型的AChR有保护作用.

    作者:张旭;Mario Losen;Marc De Baets 刊期: 2003年第09期

中国免疫学杂志

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主办:中国免疫学会,吉林省医学期刊社