张颖;吴玉萍
目的制备OVA66蛋白和其抗体,探讨其检测肿瘤的应用价值.方法应用原核表达技术和Ni2+亲和层析法,制备纯化的OVA66蛋白,经SDS-PAGE电泳鉴定,将纯化蛋白加佐剂免疫家兔,获得抗OVA66蛋白抗血清,并应用Westem Blot测定其滴度和特异性.利用OVA66蛋白和其抗体分别建立ELISA和免疫组化法,测定正常人和肿瘤患者的血清OVA66抗体水平和肿瘤组织标本中OVA66蛋白表达量.结果获得的高纯度OVA66蛋白和高滴度、特异性抗OVA66抗血清.ELISA检测显示,正常人和肿瘤患者血清抗体水平存在显著性差异(P<0.001).正常人组OD均值为0.20±0.05,肿瘤患者组OD均值为0.36±0.12,肿瘤患者中阳性率为40%(46/116).免疫组化法结果表明,肿瘤组织标本阳性率达81%(34/42),而正常组织均为阴性.结论应用OVA66蛋白和其抗血清建立的检测方法,为临床肿瘤辅助诊断的应用奠定基础.
作者:杨振熙;李美星;尤强;陈影;张惠珍;葛海良 刊期: 2005年第02期
晚近的研究表明,炎症在动脉粥样硬化性疾病的发生、发展中起着重要的作用.许多炎症标志物能够很好的预测健康人群、冠心病患者未来发生心血管事件的危险性[1].这些炎症标志物包括:P-选择素、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性细胞黏附因子-1(SICAM-1)、C反应蛋白(CRP)等.CRP被认为是炎症标志物中预测冠脉事件的强指标[2].CRP与其他炎症标志物相比,由于测定方法的标准化和可以在市场买到试剂盒而受到广泛关注[3].本文就CRP和冠心病的关系研究进展作一概述.
作者:赵梦华;石建平;田洪森 刊期: 2005年第02期
目的在烟草中高效表达抑肽酶(bpti).方法克隆抑肽酶基因,以烟草叶片为外植体,通过根癌农杆菌将其导入烟草,经卡那霉素抗性筛选和PCR扩增检测基因的整合;抽提转染植株叶片中的抑肽酶,进行活性测定.结果抗性植株整合并高效表达了抑肽酶.结论构建的含抑肽酶基因的植物表达载体pBI121+bpti具有正确的阅读框,并能在异源植物中表达.
作者:耿学军;常伟勤;范伟全;杨莉莉;贺巾超;马杰;颜炜群 刊期: 2005年第02期
目的探讨定量组织速度成像(QTVI)技术评价原发性高血压性心脏病患者左心室心肌舒张功能的价值.方法应用QTVI获取25例正常人和47例原发性高血压心脏病患者左室长轴方向左室前壁(aw)、后壁(pw)、下壁(iw)、侧壁(lw)及前间隔(as)和后间隔(ps)的心肌多普勒速度曲线,分别比较舒张早期峰值速度(Ve)、左房收缩速度(Va)和舒张后期正向波速度(Vev).结果对照组的组织多普勒曲线舒张期表现为有规律的负向波e、a,并且负向波的峰值速度Ve>Va.在e、a之间是小的舒张后期正向波ev,Vev在侧壁、前壁和后壁大于室间隔.高血压向心性肥厚组的组织多普勒曲线失去此规律,各个室壁的Ve较对照组均减小,差别显著(P<0.01).Vev在侧壁、前壁和后壁较对照组减小也有统计学意义(P<0.05).Va与对照组比较差异没有统计学意义(P>0.05).结论QTVI定量评价高血压心脏病患者左心室心肌舒张功能具有客观、便捷等优点,为临床判断病情及预后提供有效参考.
作者:陈丽波;高东梅;孙志霞;宋军;伊莲花 刊期: 2005年第02期
目的了解人肺巨细胞癌亚系PLA-801C和PLA-801D目前的体内自发转移特性,为进行下一步研究提供具体数据及所需模型.方法采用肿瘤细胞动物皮下接种的方法,建立肿瘤自发性转移动物模型,实验结束时处死动物行病理学检查,统计成瘤率及转移率.结果两株细胞的成瘤率均为100%.腋窝皮下接种组PLA-801C和PLA-801D的淋巴结转移率分别为0,33.33%,肺转移率分别为100%,66.67%.左后腿皮下接种PLA-801D的裸鼠淋巴结及肺部的转移率分别为16.67%,41.67%.已与前人所验证的结果明显不同.结论本文分析了这两株细胞的成瘤性和转移性变化的原因,并认为这两株细胞在转移特性上仍存在明显差异,仍具有用于肿瘤转移领域研究的重要价值.
作者:吴炜新;王冠军;陈晓;林海;白欧;才子斌;见华 刊期: 2005年第02期
目的探讨肾移植受者尿液中供者细胞DNA的检测在诊断急性排斥反应的应用及其价值.方法以供者为男性、受者为女性的35例肾移植受者为研究对象,定期收集尿液标本,从中提取DNA,利用聚合酶链反应检测Y染色体上特异的基因片段DYZ-1.结果手术第1日受者的尿液中即有供者细胞出现,随着时间的推移,尿液中供者细胞DNA的基因表达强度逐渐减弱,直至术后1个月,只有5例(14.3%)受者的尿液中供者细胞DNA的基因表达消失,其中1例(20%)发生急性排斥反应;另外30例(85.7%)受者的尿液中仍有供者细胞DNA的基因表达,其中7例(23.3%)发生了急性排斥反应;存活3个月以上发生急性排斥反应9例患者,7例(77.8%)的尿液标本中能检测到供者细胞DNA,抗排斥治疗结束后1个月,71.4%转为阴性;9例肾功能良好的稳定期受者,仅1例(11.1%)的受者尿液中DYZ-1基因阳性.结论长期存活的肾移植受者尿中供者细胞DNA的检测可以作为诊断急性排斥反应一种方法.
作者:洪泉;王伟刚;周洪澜;傅耀文 刊期: 2005年第02期
目的探讨核因子NF-κBp65、血管内皮生长因子(VEGF)在胶质瘤中的表达及其与微血管密度的关系.方法应用免疫组化S-P法对53例胶质瘤、5例正常脑组织中NF-κBp65、VEGF及微血管密度(MVD)进行检测.结果53例胶质瘤中NF-κBp65阳性表达率为56%(30/53),VEGF阳性表达率为52%(28/53),二者在正常脑组织中不表达;胶质瘤MVD值(42.14±2.06)高于正常脑组织MVD值(8.51±1.95),NF-κBp65、VEGF的表达及MVD均与胶质瘤恶性度有关(P<0.05),NF-κBp65表达与VEGF表达及MVD有关(P<0.05).结论NF-κBp65是一种与胶质瘤相关的癌蛋白,NF-κBp65对VEGF表达可能有正向调节作用,从而促进了肿瘤血管的生成.
作者:张丽红;何旭;李一雷;李玉林 刊期: 2005年第02期
目的观察2型糖尿病患者血、尿转化生长因子β1(TGF-β1)变化,探讨TGF-β1与糖尿病肾病关系及其检测的临床意义.方法对79例2型糖尿病患者和20例健康人,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ⅡASIA)同时检测血和尿中TGF-β1浓度.结果与正常对照比较,糖尿病患者血TGF-β1(45.57±21.78 vs 24.58±12.61 ng/ml)、尿TGF-β1(61.68±35.92 vs 19.89±13.06ng/mmol.Cr)均增高,差异有显著意义,随肾病进展血、尿TGF-β1增高愈明显.在正常、微量和大量白蛋白尿糖尿病患者之间,血、尿TGF-β1水平存在显著差异;血TGF-β1、尿TGF-β1与24h尿白蛋白排泄率呈正相关(r=0.397,P<0.05;r=0.537,P<0.05).结论糖尿病患者血、尿TGF-β1明显升高,并与糖尿病肾病进展一致.血、尿TGF-β1可以作为糖尿病肾病敏感的早期诊断指标之一.
作者:荆春艳;叶山东;陈燕;任佰龄 刊期: 2005年第02期
现代医学的进步随之带来的试验技术的先进,使对人类疾病的认识、诊断和治疗越来越依赖实验室检验,许多的诊疗决定完全是根据实验室检验结果来定论,因此实验室结果的准确性在医疗实践中至关重要.但在实际工作中,临床医务人员只重视检验结果的分析,而往往忽略了分析前的影响因素,给疾病的诊断造成错误的判断.为了使检验结果有效地用于临床,医务人员包括实验室工作人员必须充分了解实验项目在体内的生物学影响因素和标本采集的质量保证.笔者根据有关资料[1~3]与临床体会综述影响生化试验分析前的重要因素.
作者:周雪艳 刊期: 2005年第02期
针吸细胞学用于男性泌尿生殖器疾病诊断报道甚少,笔者对睾丸、附睾、阴茎等肿物353例进行针吸细胞学检查,认为针吸细胞学检查,对男性生殖系统疾病诊断,具有简单、快速、安全、经济、有效的特点,深受泌尿科医生和患者的欢迎,具体报道如下.
作者:李升;周丽艳;曲灿华;刘亚波;陆景阳;张菊影 刊期: 2005年第02期
目的研究血清层粘连蛋白(Laminin,LN)与宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及宫颈癌的关系,并进一步探讨手术和放疗两种治疗方法对血清层粘连蛋白的影响.方法用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定11例健康妇女和62例宫颈病变患者血清LN含量.结果CINⅠ-Ⅱ级病人血清LN值与正常健康妇女血清LN值无显著差异(P>0.10);CINⅢ级病人及宫颈浸润癌患者治疗前血清LN值显著高于正常组(P<0.05).经过手术或放疗治疗后其血清LN值显著下降(P<0.05);宫颈浸润癌患者其血清LN值与其临床病理期别(F=3.02<F0.05(2,50),P>0.05)及有无淋巴结转移(P>0.10)无关而与癌变细胞组织学分化程度有关,即随分化程度降低其血清LN值有升高的趋势.结论血清LN值可以作为宫颈癌早期诊断指标,并作为肿瘤细胞分化程度的参考.
作者:程娇影;崔满华;王进达 刊期: 2005年第02期
目的研究重组腺病毒介导RECK基因转染大肠癌细胞后基因的表达情况,并观察转染细胞浸润能力变化.方法构建了RECK基因的复制缺陷型重组腺病毒载体adRECK,以adRECK转染大肠癌癌细胞株后,用RT-PCR法检测RECK基因在大肠癌中的表达.并用Boyden小室测试转染细胞的侵袭性.结果RECK基因在转染细胞中有效的表达.被转染细胞浸润能力明显下降.结论重组腺病毒介导RECK基因能够在大肠癌细胞中有效的表达,转染病毒的大肠癌浸润能力明显下降.
作者:杨德君;孟子辉;张纯海;王巍;鞠险峰 刊期: 2005年第02期
右心室(右室)梗死是心肌梗死的一种特殊类型,在诊断和治疗上有许多不同于左室梗死之处,临床上有时被误诊或漏诊.本文将我院2000~2002年收治的182例急性心肌梗死病例进行筛选,共发现11例门诊(急诊)收入院的误诊或漏诊的急性右室心肌梗死患者,占6.04%,旨在探讨、分析临床上急性右室心肌梗死误诊、漏诊的原因.
作者:徐丹;李岩松 刊期: 2005年第02期
目的建立检测大鼠TGF-β1 mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法.方法摸索SYBRGreen Ⅰ工作液的配制方法,筛选PCR反应液,优化反应中引物和MgCl2的浓度,以actin为对照,建立大鼠TGF-β1 mR-NA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法并检测大鼠肾皮质TGF-β1 mRNA表达水平.结果SYBR GreenⅠ工作液,40倍水溶液稳定性好,佳反应稀释度为1:10000.大鼠TGF-β1表达水平的SYBR Green荧光定量PCR方法,TGF-β1和actin的佳MgCl2反应浓度分别为2.5 mM和3.5 mM,引物浓度分别为0.8 μM和0.5 μM,特异扩增产物的熔解温度分别为88.1和88.6℃,因此选择在85℃时收集荧光信号.正常大鼠TGF-β1的Ct值在29.03,actin的Ct值在24.86,扩增效率分别为0.995和1.08.结论通过优化反应条件和特异性分析,成功地建立了特异、敏感的大鼠TGF-β1 mRNA SYBRGreen Ⅰ荧光定量RT-PCR.SYBRGreen Ⅰ荧光定量PCR快速、敏感、特异、经济,可以满足临床和科研的需要.
作者:陈英剑;胡成进;赵苗青 刊期: 2005年第02期
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种带负电的非胶原性骨基质糖蛋白,OPN由多种组织细胞合成与分泌,广泛的分布于多种组织和细胞中,包括骨,肾,肌肉,膀胱及自然杀伤细胞[1].骨细胞、破骨细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞、多种肿瘤细胞及不同成熟阶段的成骨细胞均能合成和分泌OPN分子[2],近年来OPN作为一种机体反应蛋白,在各器官系统的作用逐渐引起人们的关注.
作者:范哲;李鸿雁;龙毅;刘娅 刊期: 2005年第02期
目的探讨内镜下早期大肠癌的分型与APC、P53基因突变的关系.方法应用PCR-SSCP方法对本院内镜下及病理诊断的54例早期大肠癌患者的APC及P53基因突变进行检测,并对内镜下的不同形态大肠早期癌分组进行比较.结果隆起型(Ⅰ型)和表面隆起型(Ⅱa型)组与表面平坦型(Ⅱb型)、表面凹陷型(Ⅱc型)、还有混合型(Ⅱa+Ⅱc和Ⅱc+Ⅱa型)组进行比较,APC基因的突变率明显增高,存在显著差异(P<0.05),而P53基因的突变率在两组间没有显著差异.结论我们推测平坦及凹陷型的表浅型早期大肠癌与隆起型有不同的基因突变途径.
作者:张斌;吴晓冬;李长锋;杨蕾;李丹丹;张德恒 刊期: 2005年第02期
目的探讨CT血管造影(CTA)在脑动脉瘤诊断、治疗中的价值.方法对21例可疑动脉瘤病人进行CTA检查,开始的8例同时进行数字减影血管造影(DSA)检查,将CTA与DSA的检查结果相互比较,并与术中所见进行对照.结果21例可疑动脉瘤病人共检出23个动脉瘤并经手术证实,出现假阳性动脉瘤1个.CTA可以显示动脉瘤的形态、瘤体指向、动脉瘤与载瘤动脉的关系,为手术提供便利.结论CTA具有快速、微创、经济、提供的信息量大、检查人员接受辐射小等优点,可以作为蛛网膜下腔出血及可疑动脉瘤病人的首选检查方法.但CTA不能连续观测脑循环过程及进行血管内操作.
作者:朴颖哲;尹卫 刊期: 2005年第02期
BAG-1基因是BAG基因家族的重要成员,于1995年发现[1],可以通过其功能域与多种信号因子(如Bcl-2,热休克蛋白Hsp70和Hsc70,RAF-1激酶等)相互作用,目前已成为生命科学领域的研究热点.因此,深入研究BAG-1基因结构、功能及其分子调控机制,对揭示细胞生长调控机理及肿瘤发生机制和探索新的肿瘤治疗方法均具有重要意义[2].
作者:朴春南;刘光伟;龚守良 刊期: 2005年第02期
目的通过检测Th2型趋化因子受体CCR4在移植肝脏急性排斥反应中的表达,探讨Th2型细胞在肝移植急性排斥反应中的作用机制.方法根据Banff病理分级将原位肝移植术后肝穿刺活检标本分成4组,应用RT-PCR方法半定量分析各组标本中CCR4的mRNA水平.结果轻度排斥组中11例CCR4高水平表达;中度排斥组中6例、未排斥组中5例CCR4中度水平表达;正常对照组、重度排斥组CCR4均轻度表达.结论肝移植免疫微环境中CCR4的表达可能与免疫耐受的诱导有关;Th1/Th2细胞的极化是影响免疫耐受诱导的关键因素.
作者:孟醒初;张家颖;朱志军;宋燕 刊期: 2005年第02期
应用二维及彩色多普勒超声(CDFI)对31例下肢静脉血栓患者进行了追踪观察,分析,旨在分析深静脉血栓的形成及演变过程中,彩色多普勒超声的诊断价值.
作者:刘艳玲;何艳慧;赵海军;伊莲花 刊期: 2005年第02期