汪一萍
目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定血清中胆汁酸亚组份的方法及探讨几种黄疸患者的胆汁酸各组份 水平的变化.方法建立HPLC法测定胆汁酸亚组份的方法,对所建立的方法进行精密度、准确度、灵敏度及线性范围的评价.用所建立的HPLC法分离、测定几种黄疸患者血清中的6种胆汁酸并进行比较.结果HPLC法测定胆汁酸各组份的低检测限为3.125μmol/L;在浓度为3.5~100μmol/L内,其日内变异小于10%,日间变异小于15%(除TLCA外),各胆汁酸的回收率在93.3%~106.1%之间(除TLCA外).几种黄疸患者的胆汁酸均高于正常对照组.结论所建立的HPLC法适用于临床血清胆汁酸的分析.胆汁酸亚型分析有助于黄疸的鉴别诊断.
作者:李贵星;李萍 刊期: 2004年第02期
目的通过测定肾病综合征(NS)患者血小板糖蛋白及血清脂质、凝血指标,旨在为临床治疗NS提供有用的参考指标.方法利用流式细胞仪检测了45例NS患者(其中伴静脉血栓者9例,无静脉血栓者36例)的血小板糖蛋白(CD62p、CD63),同时仪器法测定了Plt、TC、HDL、LDL、TG、PT、APTT、TT、Fib.结果NS患者CD62p、CD63、Plt、TC、LDL、TG、Fib显著高于正常对照组,且CD62p、CD63、Plt、TC、LDL、TG、Fib等伴静脉血栓者显著高于无静脉血栓组;但NS患者HDL、APTT明显低于正常对照组,PT、TT变化并不明显.血小板CD62P与Plt、PT、APTT、Fib成正相关,CD63与Plt、APTT、Fib成正相关,且血小板CD62P与CD63之间呈正相关性.结论NS患者学习包办糖蛋白测定,对NS病情分析和预防静脉血栓有重要的临床参考价值.
作者:邱莲女;周永列;林慧君 刊期: 2004年第02期
由于p53基因在近半数的人类肿瘤细胞中频繁缺失和突变而倍受重视.大量研究表明,野生型p53基因活性缺失与肿瘤发生密切相关.因此,p53基因被视为经典的抑癌基因.近年来,随着对p53基因广泛深入的研究,p53家族的其他成员不断被发现,其中p73基因是p53基因家族中被发现的第一个成员.由于p73蛋白与p73蛋白在序列上的同源性和功能上的相似性,p73基因作为p53基因家族的一个新成员,一面世即被作为候选抑癌基因,受到各国研究者的广泛重视.
作者:李雨静;高善玲 刊期: 2004年第02期
目的进一步探讨正常成人骨髓巨核细胞和其他有核细胞分类计数的参考值.方法骨髓液用EDTA-K2液抗凝,吸取5μl制成约2×3.5或2.5×3 cm(7 cm2)的厚薄涂片,用光镜分类计数全片巨核细胞换算成涂片单位面积,其他有核细胞计数500只换算成百分比.结果巨核细胞在一个单位面积(1.5×3 cm,4.5 cm2)中为17~102(51.00±26.25)只,习惯涂片多数面积(7 cm2)为26~166(79.12±40.83)只和每1μl为5~33只.粒系细胞总数为45.8~60.2(54.08±4.50)%,有核红细胞为17.0~33.2(25.46±4.64)%,粒红比值为1.4~3.4:1(2.19±0.57:1).结论积累正常人骨髓巨核细胞和其他有核细胞参考值有助于提高细胞形态学的正确分析和诊断.
作者:郭云武;卢兴国;李早荣;朱蕾;赵小英;徐根波;许晓华 刊期: 2004年第02期
分子生物学是当今生命科学中热门的前沿学科,尽管它在恶性血液病中的应用尚处于起始阶段,对细胞学诊断的影响也还有限.但是愕然回首,它已深深地影响到我们对细胞形态学和细胞遗传学,以及它们与临床之间诸多联系的理解,对肿瘤细胞生物行为和临床行为之间的了解,分子生物学检查能提供精确的证据、超前的信息和崭新的视角.本文就B系细胞白血病的相关基因重排与临床表型之间的关系作一综述.
作者:俞丹凤;卢兴国 刊期: 2004年第02期
目的研究转人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因骨髓基质细胞系在体外扩散盒中的表达.方法采用阳离子脂质体介导法将构建好的真核表达载体pIRESIneo/hGM-CSF导入人骨髓基质细胞系HFCL,建立转基因人骨髓基质细胞系HFCL/hGM-CSF,用Southern blot和Northern blot方法分别检测其基因组DNA整合和mRNA转录,并将其移入体外扩散盒中,用ELISA法检测其蛋白表达量.结果Southern blot和Northem blot分析表明hGM-CSF基因已整合到HFCL细胞基因组DNA中,在mRNA水平上可以检测到其表达,移入扩散盒的HFCL/hGM-CSF细胞稳定分泌hGM-CSF,量为51.6±0.5 ng/106细胞/天.结论转hGM-CSF基因骨髓基质细胞可以在体外扩散盒中持续稳定表达hGM-CSF,为进一步体内实验奠定了基础.
作者:陈晓;马俐君;王冠军 刊期: 2004年第02期
乳腺癌为一常见病,多发病,近年来其发病率和死亡率均呈上升趋势.但其与乳腺纤维腺瘤,纤维腺病的诊断和鉴别诊断还存在一些棘手问题,给临床治疗和预后评估造成困难.同时,据文献报道端粒酶活性,雌激素与乳腺癌组织发生关系密切[1,2],故我们采用端粒酶活性原位标记技术(ISLT)对乳腺癌进行临床病理研究,探索其在病理诊断上的意义及其与雌激素受体(ER),孕激素受体(PR)之间的关系.
作者:曹修淮;冯德云;姚岐;何小乔;李璇 刊期: 2004年第02期
目的研究C-kit(CD117)原癌基因在白血病细胞上的表达规律和意义.方法采用CD45/55C双参数(对数)散点图设门法进行三色流式细胞术分析.结果急性髓细胞白血病(AML)患者CD117表达率为59.6%;慢性髓细胞白血病(CML)CD117表达率为16.7%,且都为急变期;急性淋巴细胞性白血病(ALL)极少表达,慢性淋巴细胞性白血病(CLL)不表达;干细胞性白血病(AUL)、双表型白血病(BAL)高表达.结论CD117有助于鉴别诊断髓系白血病,并能作为慢粒病程监测的指标.
作者:陈葆国;李伯利;干灵红;罗文达 刊期: 2004年第02期
目的探讨胸水和血清细胞角蛋白片段19(cytokeratin 19 fragment,CK-19)和其它生化指标的检测在肺癌特异性实验室诊断中的临床意义.方法采用ELISA法检测45例临床确诊的各种肺癌患者、50例非肿瘤性肺及支气管疾病患者血清和胸水中CK-19水平,30例健康体检者血清CK-19水平,同时采用本室常规方法测定了以上患者血清及胸水和健康对照组血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)及其同功酶(LD-1)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)、C反应蛋白(C-response protein,CRP)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)和白蛋白(albumin,ALB)水平,并进行相关性分析.结果肺癌患者血清和胸水中CK-19、CEA、LDH和LD-1水平均明显高手非癌性肺疾病患者和正常健康对照组(P<0.05),而ADA水平均低于非癌性肺疾病患者和健康对照组(P<0.05).非癌性肺疾病患者血清和胸水CRP水平明显高于肺癌组和健康对照组(P<0.05).相关性分析显示,胸水中CK-19水平与血清CK-19水平高度相关(r=0.868,肺癌组;r=0.5462,非癌性肺疾病组).胸水和血清CK-19对肺癌的诊断敏感性、特异性和准确性分别为93.3%和71.1%、91.7%和87.5%、92%和81.6%.结论胸水和血清CK-19检测对肺癌的诊断是一个较好的指标,联合检测其它相关生化指标有助于临床诊断.
作者:陈涛;钟淑卿;林勇平;刘忠民;陈柏铭 刊期: 2004年第02期
目的探讨急性髓细胞白血病和多发性骨髓瘤患者的血清VEGF水平与疾病发展的关系.方法应用酶联免疫吸附技术和Envision免疫组化二步法,分别检测41例次成人急性髓细胞白血病和19例次多发性骨髓瘤患者的血清VEGF水平,以及部分患者的骨髓血管生成情况.分析治疗前后血清VEGF水平的差异性,及其与患者骨髓微血管数、部分实验室检查指标、患者临床疗效的相关性.结果AML和MM患者血清VEGF水平在经过化疗获得缓解或部分显效后显著低于初发时水平(P<0.01).AML各亚型M2、M3、M4和M5患者的血清VEGF水平差异无统计学意义(P值=0.126),但均显著低于MM初发患者的血清VEGF水平(P<0.01).AML、MM初发患者血清VEGF水平与初发时的骨髓微血管数之间无显著相关性.结论血清VEGF水平与疾病的活动性相关,可能在一定程度上反映疾病的状态.有效的化疗可能通过抑制白血病细胞增殖,下调VEGF的分泌.
作者:王晨;钟济华;滕晔;黄洪晖;韩洁英;陈芳源;欧阳仁荣 刊期: 2004年第02期
目的Otospiralin基因是表达于内耳支持细胞,该基因表达下调可导致耳聋.本文旨在调查otospiralin这种特异表达于耳蜗组织的基因突变是否会导致人类非综合征性耳聋.方法采用PCR-SSCP的方法,对151例先天性耳聋的病例和1个感音神经性耳聋家系进行otospiralin编码区序列的基因突变位点的筛选.结果150例患者和50例正常人样本有正常PCR扩增产物,但SSCP分析没有一例有异常迁移带.结论表达于耳蜗间质的成纤维细胞的otospiralin基因没有与耳聋连锁的突变位点.推测这个基因在内耳的表达缺乏可能是毛细胞丢失的主要原因.
作者:王苹;周余来;杜波;杜宝东 刊期: 2004年第02期
患者,女,15岁,于1997年7月11日头晕乏力,颈部淋巴结肿大,肝、脾未及.血常规:WBC13.2×109/L,Hb67 g/L,PLT89×109/L,原始,幼稚淋巴细胞占65%,成熟淋巴细胞占17%;骨髓象:骨髓增生极度活跃,原始、幼稚细胞占0.97,POX阳性率0%,PAS阳性率55%,为粗颗粒型,ANAE阳性率88%(胸腺样).形态多为圆形,大小不一,多数偏大;核圆形、椭圆形,可见凹陷、折叠,核染色质较粗,致密或疏松,核仁0~3个,较清晰;浆量中等,染淡兰色,确诊为ALL-L2.予VDLP方案化疗1疗程达完全缓解,此后巩固化疗6个疗程,一直未复发,处于完全缓解状态.
作者:于茂莲;刘源 刊期: 2004年第02期
作者: 刊期: 2004年第02期
目的为研究子宫内膜异位症(EMT)提供理想的动物模型.方法采用外科诱导法对60只大鼠行建模手术.在术后的第4、6和8周动态观察病灶的生长情况,运用光镜、电镜进行组织学观察.结果建模成功率在60%(36/60)左右,生长良好的囊肿内壁有内膜上皮细胞生长,病灶随移植时间的推延先逐渐增大之后又有缩小的趋势(P<0.05),同一时间内子宫旁韧带处病灶明显大于腹壁处和子宫Y型分叉处(P<0.05),同一时间内腹壁处和子宫Y型分叉处病灶比较无差别(P>0.05).结论将动物自体子宫内膜移植到子宫旁韧带、腹壁处或子宫Y型分叉处形成了子宫内膜异位病理模型,是子宫内膜异位症的实验研究的简便方法,其生理特点与正常子宫内膜基本相同.
作者:王强;王冰;李荷莲 刊期: 2004年第02期
bcl-6基因是近年来研究较多的一类与NHL发生有关的癌基因,检测其突变和重排以及Bcl-6蛋白的表达,可能对DLBCL预后估计具有指导意义.
作者:段鹏;杨华 刊期: 2004年第02期
目的观察短暂脑缺血发作(TIA)患者外周血血小板膜糖蛋白CD61、CD62P的表达及其临床意义,并探讨阿司匹林对血小板表面膜糖蛋白的作用.方法应用流式细胞术,用单克隆抗体作分子探针测定20例TIA患者的CD61、CD62P的分子表达,包括进展及未进展为脑梗塞的病人,并依其是否常规口服阿司匹林将其分两组,患者组内及患者与18例健康成年人所测结果进行比较.结果(1)TIA组血小板CD62P阳性表达率与健康对照组比较P<0.01;(2)进展为脑血栓形成的患者与未进展为脑血栓形成的患者比较P<0.01;(3)TIA组常规口服阿司匹林患者与未常规口服阿司匹林的患者相比P<0.01;(4)TIA组男性与女性血小板CD62P阳性表达率相比P>0.05.结论血小板活化是短暂脑缺血发生的重要因素,且活化程度越高,越容易形成血栓,而CD61、CD62P能较好反映血小板活化,故可较早预测TIA并估计其演变趋势;同时,阿司匹林对CD61、CD62P表达有较为明显的抑制作用.
作者:陈加俊;孙景春;韩雪梅 刊期: 2004年第02期
目的探讨血清HCG、P检测在IVF-ET中作为妊娠结果的预测价值.方法回顾分析143例采用体外授精-胚胎移植(IVF-ET)周期患者的妊娠结果与ET后第14天的血清HCG、P水平.结果临床妊娠组HCG、P水平均显著高于生化妊娠组和未妊娠组(P<0.01).生化妊娠组HCG显著高于未妊娠组(P<0.01),而P则与未妊娠组无明显差异(P>0.05).持续妊娠组HCG、P水平显著高于流产组(P<0.01).多胎组HCG水平显著高于单胎组(P<0.01),而P则与单胎组无明显差异(P>0.05).以HCG≥100IU/L且P≥20μg/L作为临床妊娠的预测标准,阳性预期值为100%,阴性预期值为91.34%,敏感性为81.25%,特异性为100%;以HCG>500IU/L作为多胎妊娠的预测标准,阳性预期值为66.67%,阴性预期值为76.19%,敏感性为66.67%,特异性为76.19%.结论在IVF-ET周期中ET后第14天血清HCG、P在预测妊娠结果方面具有重要临床价值.
作者:黄娟华;刘炜培;张羽虹;李颖嫦 刊期: 2004年第02期
贫血是临床上常见的由多种不同原因或疾病引起的一种症状[1],而肾性贫血是由肾脏疾病引起的贫血.本文重点研究肾性贫血血常规检查红系统变化的特点及临床意义.
作者:缪晓丽;王丽颖;张桂荣;刘冰;韩忠宝 刊期: 2004年第02期
目的制备原核表达的OVA12纯化蛋白,研究正常人与肿瘤患者血清中抗OVA12抗体水平的差异.方法克隆OVA12的cDNA至pGEMT载体中,经测序确证后,将该基因插入原核表达载体pET32a(+)中,并转化至E.coli表达菌BL21(DE3)中,诱导6×His融合蛋白表达,经Ni2+亲和层析及胶回收技术纯化蛋白,并将蛋白免疫动物制备兔抗OVA12蛋白抗体;采用ELISA、Dot blot、Western blot法比较正常人及肿瘤患者血清中抗体水平的差异.结果获得纯化OVA12蛋白及高滴度的兔抗血清;ELISA法测定显示,正常人组OD均值为0.17±0.07,肿瘤患者组OD均值为0.32±0.15,两组之间有显著性差异(P<0.0001),并选择其中样本经Western blot、Dot blot加以进-步证实.结论成功克隆OVA12基因,并获得纯OVA12蛋白和高滴度的兔抗血清;ELISA等方法测定肿瘤患者与正常人血清中OVA12抗体水平有明显差异,为临床检测的应用奠定基础.
作者:尤强;程琳玲;王颖;王树军;张惠珍;沈天伟;葛海良 刊期: 2004年第02期
目的研究糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应,求证氧化应激在糖尿病肾病发病机制中的作用.方法将实验动物分为正常组与糖尿病组,用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,8周后检测两组大鼠血糖、血脂、尿蛋白、肾重/体重等各指标的变化以及肾组织中丙二醛(MDA)的含量,铜、锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的活性.结果与正常组相比,糖尿病组血糖、血脂、尿蛋白、肾重/体重等指标明显增高,肾皮质MDA含量亦增加,而肾脏抗氧化酶的活性则降低.结论糖尿病大鼠肾脏存在氧化应激反应,肾组织抗氧化酶缺乏在糖尿病肾病发病机制中起重要作用.
作者:屈智慧;王旭渤;李永勇;毕黎琦 刊期: 2004年第02期