李贵星；李萍
目的评价聚合酶链反应-探针杂交-酶显色方法,检测结核分支杆菌.方法收集131例活动性肺结核患者和30例非结核呼吸系疾病患者的痰标本以双盲法进行痰涂片抗酸染色检查,结核菌培养、PCR-探针杂交-酶显色法、PCR-琼脂糖凝胶电泳技术检查对比.结果涂片法、培养法、PCR-探针杂交-酶显色法的敏感性分别为26.72%、41.22%、70.23%,PCR-探针杂交-酶显色法的敏感性显著高于培养法和涂片法(P＜0.01).PCr-探针杂交-酶显色法和PCR琼脂糖凝胶电泳法的敏感性分别为70.23%、70.99%,特异性分别为96.67%、86.67%,前者特异性比后者高,且PCR-探针杂交-酶显色法只检出结核分支杆菌和牛型分支杆菌.结论PCR-探针杂交-酶显色技术检测结核分支杆菌灵敏度高,特异性好,简便快速,同时能筛检非结核分支杆菌.因此,该技术具有很强的临床应用价值.
作者：熊国亮；雷建平；张慧慧；刘珍琼；周萍珍 刊期： 2004年第02期
细胞化学染色,是指通过化学处理,在显微镜下显示(定位)细胞某种化学成分的技术.此法原先是用在组织切片方面,称为组织化学.20世纪中期,这种技术在血液学实验室颇为盛行,对于血液细胞的识别,特别是在白血病相关的细胞鉴别方面,发挥过相当大的作用.但到了20世纪后期,由于缺乏后继的新技术开发、日常工作中需求不多、方法本身的特异性不够强、难以标准化以及没有成套商品化试剂供应等原因,这一技术没有多大发展.有的已逐渐被淘汰,有的正在被免疫学技术(如免疫组化显示技术、流式细胞术等)和分子生物学技术(如PCR)所取代.但个别项目,仍有一些新发现和新进展.
作者：朱忠勇 刊期： 2004年第02期
目的探讨胸水和血清细胞角蛋白片段19(cytokeratin 19 fragment,CK-19)和其它生化指标的检测在肺癌特异性实验室诊断中的临床意义.方法采用ELISA法检测45例临床确诊的各种肺癌患者、50例非肿瘤性肺及支气管疾病患者血清和胸水中CK-19水平,30例健康体检者血清CK-19水平,同时采用本室常规方法测定了以上患者血清及胸水和健康对照组血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)及其同功酶(LD-1)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)、C反应蛋白(C-response protein,CRP)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)和白蛋白(albumin,ALB)水平,并进行相关性分析.结果肺癌患者血清和胸水中CK-19、CEA、LDH和LD-1水平均明显高手非癌性肺疾病患者和正常健康对照组(P＜0.05),而ADA水平均低于非癌性肺疾病患者和健康对照组(P＜0.05).非癌性肺疾病患者血清和胸水CRP水平明显高于肺癌组和健康对照组(P＜0.05).相关性分析显示,胸水中CK-19水平与血清CK-19水平高度相关(r=0.868,肺癌组;r=0.5462,非癌性肺疾病组).胸水和血清CK-19对肺癌的诊断敏感性、特异性和准确性分别为93.3%和71.1%、91.7%和87.5%、92%和81.6%.结论胸水和血清CK-19检测对肺癌的诊断是一个较好的指标,联合检测其它相关生化指标有助于临床诊断.
作者：陈涛；钟淑卿；林勇平；刘忠民；陈柏铭 刊期： 2004年第02期
目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定血清中胆汁酸亚组份的方法及探讨几种黄疸患者的胆汁酸各组份 水平的变化.方法建立HPLC法测定胆汁酸亚组份的方法,对所建立的方法进行精密度、准确度、灵敏度及线性范围的评价.用所建立的HPLC法分离、测定几种黄疸患者血清中的6种胆汁酸并进行比较.结果HPLC法测定胆汁酸各组份的低检测限为3.125μmol/L;在浓度为3.5～100μmol/L内,其日内变异小于10%,日间变异小于15%(除TLCA外),各胆汁酸的回收率在93.3%～106.1%之间(除TLCA外).几种黄疸患者的胆汁酸均高于正常对照组.结论所建立的HPLC法适用于临床血清胆汁酸的分析.胆汁酸亚型分析有助于黄疸的鉴别诊断.
作者：李贵星；李萍 刊期： 2004年第02期
目的观察神经鞘氨醇磷酸胆碱(Sphingosylphosphorylcholine,SPC)对原代培养人真皮成纤维细胞DNA合成的影响.方法利用儿童包皮组织行人真皮成纤维细胞原代培养,采用不同浓度SPC处理培养的细胞,测定3H-TdR掺入量.结果SPC浓度为2μM时,3H-TdR掺入量明显高于对照组(P＜0.05),5μM时3H-TdR掺入量达高峰,而后逐渐降低,20μM时3H-TdR掺入量为低.结论在一定浓度范围内SPC能明显促进原代培养人真皮成纤维细胞DNA的合成,在人类皮肤创伤愈合的治疗领域中,是一个很有应用前景的物质.
作者：朱明姬；蒋忠民；丛宪玲；丛建军；李增勋；陈远耀 刊期： 2004年第02期
目的评价血管内皮细胞、凝血、纤溶、血小板活化指标在血栓性疾病诊断中的价值.方法对51例血栓性疾病患者、21例非血栓性疾病患者以及35例正常人,分别以ELISA法检测其血管性血友病因子(vWF:Ag)、组织因子(TF)、凝血酶原片段1+2(F1+2)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA:Ag)、血栓烷B2(TXB2)和以发色底物法检测纤溶酶原激活物抑制剂活性(PAI:Ac)及α2-纤溶酶抑制剂活性(α2-PI:Ac)等.结果血栓病组与非血栓病组患者的t-PA:Ag、PAI:Ac、α2-PI:Ac、vWF:Ag、F1+2都较对照组高(P＜0.05),其中α2-PI:Ac、vWF:Ag、F1+2在血栓病组和非血栓病组之间无显著性差异(P＞0.05);血栓病组的血浆TXB2、TF较非血栓病组偏高,但无显著性差异(P＞0.05);常规止凝血试验如PT、APTT、FIB和PLT在血栓病组和非血栓病组之间均无显著性差异(P＞0.05).t-PA:Ag的诊断敏感度、特异度、诊断比数比以及ROC曲线下面积分别为66.7%、66.7%、4.0和0.690,而PAI:Ac分别为94.1%、60.7%、24.7和0.849.结论本研究结果提示,PAI:Ac在诊断血栓性疾病中的敏感度较高,其次为t-PA,但需扩大样本进行前瞻性研究和证实;其它指标包括vWF:Ag、α2-PI:Ac、TF、F1+2、TXB2以及常规检测指标包括PT、APTT、FIB和PLT用作血栓性疾病的诊断指标敏感度欠佳.本研究结果还提示血栓性疾病实验诊断指标的应用价值可能与患者是否用药及标本收集的质量密切相关.
作者：颜存粮；彭黎明；江虹；唐宁；刘芳 刊期： 2004年第02期
分子生物学是当今生命科学中热门的前沿学科,尽管它在恶性血液病中的应用尚处于起始阶段,对细胞学诊断的影响也还有限.但是愕然回首,它已深深地影响到我们对细胞形态学和细胞遗传学,以及它们与临床之间诸多联系的理解,对肿瘤细胞生物行为和临床行为之间的了解,分子生物学检查能提供精确的证据、超前的信息和崭新的视角.本文就B系细胞白血病的相关基因重排与临床表型之间的关系作一综述.
作者：俞丹凤；卢兴国 刊期： 2004年第02期
目的进一步探讨正常成人骨髓巨核细胞和其他有核细胞分类计数的参考值.方法骨髓液用EDTA-K2液抗凝,吸取5μl制成约2×3.5或2.5×3 cm(7 cm2)的厚薄涂片,用光镜分类计数全片巨核细胞换算成涂片单位面积,其他有核细胞计数500只换算成百分比.结果巨核细胞在一个单位面积(1.5×3 cm,4.5 cm2)中为17～102(51.00±26.25)只,习惯涂片多数面积(7 cm2)为26～166(79.12±40.83)只和每1μl为5～33只.粒系细胞总数为45.8～60.2(54.08±4.50)%,有核红细胞为17.0～33.2(25.46±4.64)%,粒红比值为1.4～3.4:1(2.19±0.57:1).结论积累正常人骨髓巨核细胞和其他有核细胞参考值有助于提高细胞形态学的正确分析和诊断.
作者：郭云武；卢兴国；李早荣；朱蕾；赵小英；徐根波；许晓华 刊期： 2004年第02期
目的探讨Dieulafoy病发病情况、诊断及治疗方法.方法回顾性分析19例Dieulafoy病的临床表现、诊断、治疗方法及疗效.结果全部病例均是突发上消化道大出血;初次胃镜检查确诊12例(63.2%),第二次检查确诊4例,术中探查确诊3例;13例经一次内镜下止血成功,1例经二次内镜下止血成功,4例行外科手术.结论急诊胃镜是诊断Dieulafoy病首选方法;治疗首选内镜下止血,内镜下止血不成功,立刻外科手术.
作者：杜建时；李长锋；张斌；郑泽霖 刊期： 2004年第02期
目的探讨血栓前体蛋白(TpP)是否可用于脑梗死的辅助诊断.方法对76例脑梗死患者和108例健康人行血栓前体蛋白检测,比较2组间差异.并观察脑梗死患者其他指标,包括血液流变学(观察全血粘度的高、中、低切变率和血浆粘度)、总胆固醇和甘油三酯,对比它们同血栓前体蛋白的关系.结果脑梗死组76例患者中有44例增高,占57.9%,平均水平7.4±3.9mg/L.对照组108例中有18例增高,占16.7%,平均水平3.9±2.5 mg/L.经统计,2组的阳性率(x2检验)和TpP平均水平(t检验)差异均有统计意义(P＜0.01).脑梗死组76例患者按照TpP增高与正常分为2组,其血液流变学、总胆固醇、甘油三酯经统计除血浆粘度P＜0.01差异有显著意义外,其余差异均无显著意义(P＞0.01).结论虽然TpP在脑梗死患者增高,且具有统计学意义.但增高比例并不是很高,只有57.9%,且对照组也有16.7%的人增高,距临床诊断所要求的特异性、准确性还有一定的差距,要作为脑梗死的诊断和预测指标还有待商榷.但作为一项凝血方面的检测指标,可以象血液流变学那样为临床诊断和治疗提供一定的参考.
作者：陈克林；王浩；王岩 刊期： 2004年第02期
目的了解中国健康成人外周血B淋巴细胞各种免疫表型标志的参考范围,为临床正确诊断B淋巴细胞增殖性疾病提供基础信息.方法采用全血溶解法和SSC/CD19设门技术以三色流式细胞术对来自41位健康成人EDTA-K2抗凝静脉血进行免疫表型分析.结果正常人外周血B淋巴细胞几乎全部表达CD22、CD20、CD62L、CD40、CD24、CD79b、CD79a、和FMC-7分子,而CD11a、CD80、CD103、CD10、CD40L、CD54、CD95L、CD86、和CD95几乎不表达(平均阳性率＜10%=),CD18、CD44、CD23、CD5、CD11c、和CD43的表达较低,78%的B细胞为IgD阳性,κ/λ比例为1.26.结论中国人和西方人群之间在某些B细胞标志方面存在的差异,在临床工作中不宜直接套用国外的标准.对B淋巴细胞增殖性疾病的免疫分型及MRD检测,必须考虑国内人群正常B细胞群体中各种标志的表达情况.
作者：徐瑞龙；郑昭璟 刊期： 2004年第02期
目的研究糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应,求证氧化应激在糖尿病肾病发病机制中的作用.方法将实验动物分为正常组与糖尿病组,用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,8周后检测两组大鼠血糖、血脂、尿蛋白、肾重/体重等各指标的变化以及肾组织中丙二醛(MDA)的含量,铜、锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的活性.结果与正常组相比,糖尿病组血糖、血脂、尿蛋白、肾重/体重等指标明显增高,肾皮质MDA含量亦增加,而肾脏抗氧化酶的活性则降低.结论糖尿病大鼠肾脏存在氧化应激反应,肾组织抗氧化酶缺乏在糖尿病肾病发病机制中起重要作用.
作者：屈智慧；王旭渤；李永勇；毕黎琦 刊期： 2004年第02期
目的探讨细胞间粘附分子-1在大鼠脊髓缺血再灌注损伤后表达变化及其意义.方法采用Zivin法建立脊髓缺血再灌注损伤模型.以GAPDH为内参照物,应用半定量RT-PCR方法、免疫组化及免疫荧光激光共聚焦显微镜定性、定量测定脊髓微血管内皮细胞表面ICAM-1mRNA表达变化.结果正常脊髓微血管内皮细胞表面仅有微量的ICAM-1表达,单纯缺血不引起ICAM-1表达.再灌注后损伤区ICAM-1表达发生了改变;再灌注4 h,ICAM-1 mRNA表达量明显升高,再灌注12 h其在单位微血管面积上的荧光强度约比单纯缺血组增加了1/2.提示脊髓损伤后微血管内皮细胞初始ICAM-1表达增加是由再灌注损伤激发,其后延迟递增表达增强,说明ICAM-1参与了脊髓再灌注损伤的炎症病理过程.结论ICAM-1可做为脊髓I/R后炎症反应程度的监测指标.
作者：臧虎；杨小玉；景元海；朱庆三 刊期： 2004年第02期
贫血是临床上常见的由多种不同原因或疾病引起的一种症状[1],而肾性贫血是由肾脏疾病引起的贫血.本文重点研究肾性贫血血常规检查红系统变化的特点及临床意义.
作者：缪晓丽；王丽颖；张桂荣；刘冰；韩忠宝 刊期： 2004年第02期
目的探讨DNA检测对急性淋巴细胞性白血病(ALL)诊断和治疗的临床意义.方法应用流式细胞术检测了35例急性淋巴细胞性白血病患者骨髓细胞DNA含量(DI)、倍体和细胞增殖活性(PI).结果ALL异倍体检出率为51.4%(18/35),其中亚二倍体8例,超二倍体10例;ALL组骨髓细胞G0/G1%高于对照组(P＜0.05),而S%、PI值明显低于对照组(P＜0.05).结论DNA含量检测和倍体分析对急性淋巴细胞性白血病的诊断、治疗是很有价值的临床生物学指标,有助于白血病的准确、客观诊断和判断预后.
作者：段秀梅；刘力华；谭岩；方艳秋；许淑芬 刊期： 2004年第02期
目的研究C-kit(CD117)原癌基因在白血病细胞上的表达规律和意义.方法采用CD45/55C双参数(对数)散点图设门法进行三色流式细胞术分析.结果急性髓细胞白血病(AML)患者CD117表达率为59.6%;慢性髓细胞白血病(CML)CD117表达率为16.7%,且都为急变期;急性淋巴细胞性白血病(ALL)极少表达,慢性淋巴细胞性白血病(CLL)不表达;干细胞性白血病(AUL)、双表型白血病(BAL)高表达.结论CD117有助于鉴别诊断髓系白血病,并能作为慢粒病程监测的指标.
作者：陈葆国；李伯利；干灵红；罗文达 刊期： 2004年第02期
目的制备原核表达的OVA12纯化蛋白,研究正常人与肿瘤患者血清中抗OVA12抗体水平的差异.方法克隆OVA12的cDNA至pGEMT载体中,经测序确证后,将该基因插入原核表达载体pET32a(+)中,并转化至E.coli表达菌BL21(DE3)中,诱导6×His融合蛋白表达,经Ni2+亲和层析及胶回收技术纯化蛋白,并将蛋白免疫动物制备兔抗OVA12蛋白抗体;采用ELISA、Dot blot、Western blot法比较正常人及肿瘤患者血清中抗体水平的差异.结果获得纯化OVA12蛋白及高滴度的兔抗血清;ELISA法测定显示,正常人组OD均值为0.17±0.07,肿瘤患者组OD均值为0.32±0.15,两组之间有显著性差异(P＜0.0001),并选择其中样本经Western blot、Dot blot加以进-步证实.结论成功克隆OVA12基因,并获得纯OVA12蛋白和高滴度的兔抗血清;ELISA等方法测定肿瘤患者与正常人血清中OVA12抗体水平有明显差异,为临床检测的应用奠定基础.
作者：尤强；程琳玲；王颖；王树军；张惠珍；沈天伟；葛海良 刊期： 2004年第02期
目的通过测定肾病综合征(NS)患者血小板糖蛋白及血清脂质、凝血指标,旨在为临床治疗NS提供有用的参考指标.方法利用流式细胞仪检测了45例NS患者(其中伴静脉血栓者9例,无静脉血栓者36例)的血小板糖蛋白(CD62p、CD63),同时仪器法测定了Plt、TC、HDL、LDL、TG、PT、APTT、TT、Fib.结果NS患者CD62p、CD63、Plt、TC、LDL、TG、Fib显著高于正常对照组,且CD62p、CD63、Plt、TC、LDL、TG、Fib等伴静脉血栓者显著高于无静脉血栓组;但NS患者HDL、APTT明显低于正常对照组,PT、TT变化并不明显.血小板CD62P与Plt、PT、APTT、Fib成正相关,CD63与Plt、APTT、Fib成正相关,且血小板CD62P与CD63之间呈正相关性.结论NS患者学习包办糖蛋白测定,对NS病情分析和预防静脉血栓有重要的临床参考价值.
作者：邱莲女；周永列；林慧君 刊期： 2004年第02期
胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附法(ELISA)单独用于乙型肝炎的检测,已广泛应用于临床.由于二者标记物、灵敏度、特异性等方面的不同,在检测方面体现出不同的优缺点,二者结合使用,在乙型肝炎检测中,尤其在乙型肝炎特殊模式出现时,给临床检验带来了很大的方便.
作者：庄严；李绪黎 刊期： 2004年第02期
目的研究应用胶原纤维作为组织工程技术中细胞培养支架的可行性.方法未经预湿和经预湿处理的胶原纤维支架与人胚关节软骨细胞体外培养,采用光镜和电镜观察其亲水性及对细胞吸附力和细胞功能的影响.结果软骨细胞均匀地分布于胶原纤维支架内,经预湿处理后的支架细胞分布更为迅速均匀;软骨细胞吸附于支架纤维表面,细胞生长代谢旺盛,合成分泌细胞外基质.结论胶原纤维支架具有良好的亲水性,有利于软骨细胞的吸附和生长,可以作为组织工程技术中细胞培养的支架材料.
作者：陈昕；赵雷；闫晓明；周余来；颜炜群 刊期： 2004年第02期
中国实验诊断学杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院
