外周血B淋巴细胞免疫表型分析及临床应用

胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附法结合使用在乙型肝炎检测中的应用

胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附法(ELISA)单独用于乙型肝炎的检测,已广泛应用于临床.由于二者标记物、灵敏度、特异性等方面的不同,在检测方面体现出不同的优缺点,二者结合使用,在乙型肝炎检测中,尤其在乙型肝炎特殊模式出现时,给临床检验带来了很大的方便.

作者：庄严；李绪黎 刊期： 2004年第02期

ICAM-1在脊髓缺血再灌注损伤后表达变化及意义

目的探讨细胞间粘附分子-1在大鼠脊髓缺血再灌注损伤后表达变化及其意义.方法采用Zivin法建立脊髓缺血再灌注损伤模型.以GAPDH为内参照物,应用半定量RT-PCR方法、免疫组化及免疫荧光激光共聚焦显微镜定性、定量测定脊髓微血管内皮细胞表面ICAM-1mRNA表达变化.结果正常脊髓微血管内皮细胞表面仅有微量的ICAM-1表达,单纯缺血不引起ICAM-1表达.再灌注后损伤区ICAM-1表达发生了改变;再灌注4 h,ICAM-1 mRNA表达量明显升高,再灌注12 h其在单位微血管面积上的荧光强度约比单纯缺血组增加了1/2.提示脊髓损伤后微血管内皮细胞初始ICAM-1表达增加是由再灌注损伤激发,其后延迟递增表达增强,说明ICAM-1参与了脊髓再灌注损伤的炎症病理过程.结论ICAM-1可做为脊髓I/R后炎症反应程度的监测指标.

作者：臧虎；杨小玉；景元海；朱庆三 刊期： 2004年第02期

血清HCG、P检测对IVF-ET后妊娠结果的预测价值

目的探讨血清HCG、P检测在IVF-ET中作为妊娠结果的预测价值.方法回顾分析143例采用体外授精-胚胎移植(IVF-ET)周期患者的妊娠结果与ET后第14天的血清HCG、P水平.结果临床妊娠组HCG、P水平均显著高于生化妊娠组和未妊娠组(P＜0.01).生化妊娠组HCG显著高于未妊娠组(P＜0.01),而P则与未妊娠组无明显差异(P＞0.05).持续妊娠组HCG、P水平显著高于流产组(P＜0.01).多胎组HCG水平显著高于单胎组(P＜0.01),而P则与单胎组无明显差异(P＞0.05).以HCG≥100IU/L且P≥20μg/L作为临床妊娠的预测标准,阳性预期值为100%,阴性预期值为91.34%,敏感性为81.25%,特异性为100%;以HCG＞500IU/L作为多胎妊娠的预测标准,阳性预期值为66.67%,阴性预期值为76.19%,敏感性为66.67%,特异性为76.19%.结论在IVF-ET周期中ET后第14天血清HCG、P在预测妊娠结果方面具有重要临床价值.

作者：黄娟华；刘炜培；张羽虹；李颖嫦 刊期： 2004年第02期

神经鞘氨醇磷酸胆碱对原代培养人真皮成纤维细胞DNA合成影响

目的观察神经鞘氨醇磷酸胆碱(Sphingosylphosphorylcholine,SPC)对原代培养人真皮成纤维细胞DNA合成的影响.方法利用儿童包皮组织行人真皮成纤维细胞原代培养,采用不同浓度SPC处理培养的细胞,测定3H-TdR掺入量.结果SPC浓度为2μM时,3H-TdR掺入量明显高于对照组(P＜0.05),5μM时3H-TdR掺入量达高峰,而后逐渐降低,20μM时3H-TdR掺入量为低.结论在一定浓度范围内SPC能明显促进原代培养人真皮成纤维细胞DNA的合成,在人类皮肤创伤愈合的治疗领域中,是一个很有应用前景的物质.

作者：朱明姬；蒋忠民；丛宪玲；丛建军；李增勋；陈远耀 刊期： 2004年第02期

Dieulafoy病19例临床诊断分析

目的探讨Dieulafoy病发病情况、诊断及治疗方法.方法回顾性分析19例Dieulafoy病的临床表现、诊断、治疗方法及疗效.结果全部病例均是突发上消化道大出血;初次胃镜检查确诊12例(63.2%),第二次检查确诊4例,术中探查确诊3例;13例经一次内镜下止血成功,1例经二次内镜下止血成功,4例行外科手术.结论急诊胃镜是诊断Dieulafoy病首选方法;治疗首选内镜下止血,内镜下止血不成功,立刻外科手术.

作者：杜建时；李长锋；张斌；郑泽霖 刊期： 2004年第02期

ALL自身外用血干细胞移植术后由MDS转为AML

患者,女,15岁,于1997年7月11日头晕乏力,颈部淋巴结肿大,肝、脾未及.血常规:WBC13.2×109/L,Hb67 g/L,PLT89×109/L,原始,幼稚淋巴细胞占65%,成熟淋巴细胞占17%;骨髓象:骨髓增生极度活跃,原始、幼稚细胞占0.97,POX阳性率0%,PAS阳性率55%,为粗颗粒型,ANAE阳性率88%(胸腺样).形态多为圆形,大小不一,多数偏大;核圆形、椭圆形,可见凹陷、折叠,核染色质较粗,致密或疏松,核仁0～3个,较清晰;浆量中等,染淡兰色,确诊为ALL-L2.予VDLP方案化疗1疗程达完全缓解,此后巩固化疗6个疗程,一直未复发,处于完全缓解状态.

作者：于茂莲；刘源 刊期： 2004年第02期

Bcl-6基因与弥漫性大B细胞淋巴瘤

bcl-6基因是近年来研究较多的一类与NHL发生有关的癌基因,检测其突变和重排以及Bcl-6蛋白的表达,可能对DLBCL预后估计具有指导意义.

作者：段鹏；杨华 刊期： 2004年第02期

胆管损伤的预防和损伤性胆管狭窄的处理专题研究讨会暨中外专家论文报告会

作者： 刊期： 2004年第02期

肾性贫血血常规检查红系统指数变化特点及临床意义

贫血是临床上常见的由多种不同原因或疾病引起的一种症状[1],而肾性贫血是由肾脏疾病引起的贫血.本文重点研究肾性贫血血常规检查红系统变化的特点及临床意义.

作者：缪晓丽；王丽颖；张桂荣；刘冰；韩忠宝 刊期： 2004年第02期

坐骨神经损伤后神康灵对脊髓前角神经元的保护作用的初步观察

目的探讨坐骨神经损伤后神康灵对脊髓前角神经元的保护作用.方法采用28只成年体重为200g的Wistar大鼠,随机分成2组(实验组和对照组),分别于术后6、8周通过扫描电镜检测脊髓前角神经元的形态和超微结构的变化;脊髓前角切片HE染色,从而探讨神康灵对坐骨神经损伤后脊髓前角神经元的保护作用.结果6和8周时,实验组脊髓前角神经元变性的程度明显小于对照组;存活的数量明显多于对照组.结论神康灵对坐骨神经损伤后的脊髓前角神经元有明显的保护作用.

作者：季守贤；魏壮；谢升伟；尹维田 刊期： 2004年第02期

筛查非综合征性耳聋患者的内耳特异表达蛋白otospiralin基因突变

目的Otospiralin基因是表达于内耳支持细胞,该基因表达下调可导致耳聋.本文旨在调查otospiralin这种特异表达于耳蜗组织的基因突变是否会导致人类非综合征性耳聋.方法采用PCR-SSCP的方法,对151例先天性耳聋的病例和1个感音神经性耳聋家系进行otospiralin编码区序列的基因突变位点的筛选.结果150例患者和50例正常人样本有正常PCR扩增产物,但SSCP分析没有一例有异常迁移带.结论表达于耳蜗间质的成纤维细胞的otospiralin基因没有与耳聋连锁的突变位点.推测这个基因在内耳的表达缺乏可能是毛细胞丢失的主要原因.

作者：王苹；周余来；杜波；杜宝东 刊期： 2004年第02期

正常成人骨髓巨核细胞和其他有核细胞分类计数报告

目的进一步探讨正常成人骨髓巨核细胞和其他有核细胞分类计数的参考值.方法骨髓液用EDTA-K2液抗凝,吸取5μl制成约2×3.5或2.5×3 cm(7 cm2)的厚薄涂片,用光镜分类计数全片巨核细胞换算成涂片单位面积,其他有核细胞计数500只换算成百分比.结果巨核细胞在一个单位面积(1.5×3 cm,4.5 cm2)中为17～102(51.00±26.25)只,习惯涂片多数面积(7 cm2)为26～166(79.12±40.83)只和每1μl为5～33只.粒系细胞总数为45.8～60.2(54.08±4.50)%,有核红细胞为17.0～33.2(25.46±4.64)%,粒红比值为1.4～3.4:1(2.19±0.57:1).结论积累正常人骨髓巨核细胞和其他有核细胞参考值有助于提高细胞形态学的正确分析和诊断.

作者：郭云武；卢兴国；李早荣；朱蕾；赵小英；徐根波；许晓华 刊期： 2004年第02期

血栓前体蛋白用于诊断脑梗死的观察研究

目的探讨血栓前体蛋白(TpP)是否可用于脑梗死的辅助诊断.方法对76例脑梗死患者和108例健康人行血栓前体蛋白检测,比较2组间差异.并观察脑梗死患者其他指标,包括血液流变学(观察全血粘度的高、中、低切变率和血浆粘度)、总胆固醇和甘油三酯,对比它们同血栓前体蛋白的关系.结果脑梗死组76例患者中有44例增高,占57.9%,平均水平7.4±3.9mg/L.对照组108例中有18例增高,占16.7%,平均水平3.9±2.5 mg/L.经统计,2组的阳性率(x2检验)和TpP平均水平(t检验)差异均有统计意义(P＜0.01).脑梗死组76例患者按照TpP增高与正常分为2组,其血液流变学、总胆固醇、甘油三酯经统计除血浆粘度P＜0.01差异有显著意义外,其余差异均无显著意义(P＞0.01).结论虽然TpP在脑梗死患者增高,且具有统计学意义.但增高比例并不是很高,只有57.9%,且对照组也有16.7%的人增高,距临床诊断所要求的特异性、准确性还有一定的差距,要作为脑梗死的诊断和预测指标还有待商榷.但作为一项凝血方面的检测指标,可以象血液流变学那样为临床诊断和治疗提供一定的参考.

作者：陈克林；王浩；王岩 刊期： 2004年第02期

两种不同AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒获得及鉴定

目的构建及包装由全长5.1kbAFP启动子和低氧反应元件(HRE)与0.3kbAFP启动子两者组合的杂合0.3kbAFP启动子控制下表达HIV vpr基因的两种重组非复制型腺病毒.方法采用细菌内同源重组腺病毒载体制备方法和PacI酶切、PCR、Southern Blot鉴定方法.结果构建及包装出由这两种AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒,经PacI酶切、PCR和Southern Blot基因整合分析证明构建成功.结论我们成功构建了的全长5.1kbAFP启动子和HRE与0.3kbAFP启动子两者组合的杂合0.3kbAFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒,为使HIV vpr基因更好的用于肝癌特异性基因治疗提供了可能和基础.

作者：魏强；李凡；王健伟；郭丽；洪涛 刊期： 2004年第02期

外周血B淋巴细胞免疫表型分析及临床应用

目的了解中国健康成人外周血B淋巴细胞各种免疫表型标志的参考范围,为临床正确诊断B淋巴细胞增殖性疾病提供基础信息.方法采用全血溶解法和SSC/CD19设门技术以三色流式细胞术对来自41位健康成人EDTA-K2抗凝静脉血进行免疫表型分析.结果正常人外周血B淋巴细胞几乎全部表达CD22、CD20、CD62L、CD40、CD24、CD79b、CD79a、和FMC-7分子,而CD11a、CD80、CD103、CD10、CD40L、CD54、CD95L、CD86、和CD95几乎不表达(平均阳性率＜10%=),CD18、CD44、CD23、CD5、CD11c、和CD43的表达较低,78%的B细胞为IgD阳性,κ/λ比例为1.26.结论中国人和西方人群之间在某些B细胞标志方面存在的差异,在临床工作中不宜直接套用国外的标准.对B淋巴细胞增殖性疾病的免疫分型及MRD检测,必须考虑国内人群正常B细胞群体中各种标志的表达情况.

作者：徐瑞龙；郑昭璟 刊期： 2004年第02期

CS型血红蛋白H病复合β地中海贫血的实验研究

目的探讨血红蛋白H病复合β地中海贫血(β-地贫)的实验诊断.方法用血红蛋白电泳对患者作血红蛋白组份定量测定,红细胞形态观察协助鉴别诊断,PCR扩增作α与β地贫基因分型,DNA测序用于检测αCS基因突变位点.结果先证者血红蛋白电泳检出微量Hb Bart's与Hb Constant Spring(HbCS),但未发现HbH带,常法PCR扩增仅检测-SEA基因与ⅣS-Ⅱ-654位点突变双杂合子,DNA测序结果显示,无缺失的α珠蛋白基因上αCS位点存在T→C突变,临床表现为血红蛋白H病.结论血红蛋H病复合β-地贫时可检测不到HbH(β4)区带.HbA2的准确定量分析与红细胞形态的仔细观察有助于该病的分析.该病的发现,为认识我国地贫的高度异质性提供了新的资料,对临床及时准确诊断该病有重要意义.

作者：吴教仁；向筑 刊期： 2004年第02期

C-kit原癌基因在白血病细胞上的表达分析

目的研究C-kit(CD117)原癌基因在白血病细胞上的表达规律和意义.方法采用CD45/55C双参数(对数)散点图设门法进行三色流式细胞术分析.结果急性髓细胞白血病(AML)患者CD117表达率为59.6%;慢性髓细胞白血病(CML)CD117表达率为16.7%,且都为急变期;急性淋巴细胞性白血病(ALL)极少表达,慢性淋巴细胞性白血病(CLL)不表达;干细胞性白血病(AUL)、双表型白血病(BAL)高表达.结论CD117有助于鉴别诊断髓系白血病,并能作为慢粒病程监测的指标.

作者：陈葆国；李伯利；干灵红；罗文达 刊期： 2004年第02期

细胞角蛋白片段19和其他生化指标的检测在肺癌诊断中的应用

目的探讨胸水和血清细胞角蛋白片段19(cytokeratin 19 fragment,CK-19)和其它生化指标的检测在肺癌特异性实验室诊断中的临床意义.方法采用ELISA法检测45例临床确诊的各种肺癌患者、50例非肿瘤性肺及支气管疾病患者血清和胸水中CK-19水平,30例健康体检者血清CK-19水平,同时采用本室常规方法测定了以上患者血清及胸水和健康对照组血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)及其同功酶(LD-1)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)、C反应蛋白(C-response protein,CRP)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)和白蛋白(albumin,ALB)水平,并进行相关性分析.结果肺癌患者血清和胸水中CK-19、CEA、LDH和LD-1水平均明显高手非癌性肺疾病患者和正常健康对照组(P＜0.05),而ADA水平均低于非癌性肺疾病患者和健康对照组(P＜0.05).非癌性肺疾病患者血清和胸水CRP水平明显高于肺癌组和健康对照组(P＜0.05).相关性分析显示,胸水中CK-19水平与血清CK-19水平高度相关(r=0.868,肺癌组;r=0.5462,非癌性肺疾病组).胸水和血清CK-19对肺癌的诊断敏感性、特异性和准确性分别为93.3%和71.1%、91.7%和87.5%、92%和81.6%.结论胸水和血清CK-19检测对肺癌的诊断是一个较好的指标,联合检测其它相关生化指标有助于临床诊断.

作者：陈涛；钟淑卿；林勇平；刘忠民；陈柏铭 刊期： 2004年第02期

糖尿病大鼠肾脏氧化应激的实验研究

目的研究糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应,求证氧化应激在糖尿病肾病发病机制中的作用.方法将实验动物分为正常组与糖尿病组,用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,8周后检测两组大鼠血糖、血脂、尿蛋白、肾重/体重等各指标的变化以及肾组织中丙二醛(MDA)的含量,铜、锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的活性.结果与正常组相比,糖尿病组血糖、血脂、尿蛋白、肾重/体重等指标明显增高,肾皮质MDA含量亦增加,而肾脏抗氧化酶的活性则降低.结论糖尿病大鼠肾脏存在氧化应激反应,肾组织抗氧化酶缺乏在糖尿病肾病发病机制中起重要作用.

作者：屈智慧；王旭渤；李永勇；毕黎琦 刊期： 2004年第02期

血栓性疾病实验诊断指标的应用研究

目的评价血管内皮细胞、凝血、纤溶、血小板活化指标在血栓性疾病诊断中的价值.方法对51例血栓性疾病患者、21例非血栓性疾病患者以及35例正常人,分别以ELISA法检测其血管性血友病因子(vWF:Ag)、组织因子(TF)、凝血酶原片段1+2(F1+2)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA:Ag)、血栓烷B2(TXB2)和以发色底物法检测纤溶酶原激活物抑制剂活性(PAI:Ac)及α2-纤溶酶抑制剂活性(α2-PI:Ac)等.结果血栓病组与非血栓病组患者的t-PA:Ag、PAI:Ac、α2-PI:Ac、vWF:Ag、F1+2都较对照组高(P＜0.05),其中α2-PI:Ac、vWF:Ag、F1+2在血栓病组和非血栓病组之间无显著性差异(P＞0.05);血栓病组的血浆TXB2、TF较非血栓病组偏高,但无显著性差异(P＞0.05);常规止凝血试验如PT、APTT、FIB和PLT在血栓病组和非血栓病组之间均无显著性差异(P＞0.05).t-PA:Ag的诊断敏感度、特异度、诊断比数比以及ROC曲线下面积分别为66.7%、66.7%、4.0和0.690,而PAI:Ac分别为94.1%、60.7%、24.7和0.849.结论本研究结果提示,PAI:Ac在诊断血栓性疾病中的敏感度较高,其次为t-PA,但需扩大样本进行前瞻性研究和证实;其它指标包括vWF:Ag、α2-PI:Ac、TF、F1+2、TXB2以及常规检测指标包括PT、APTT、FIB和PLT用作血栓性疾病的诊断指标敏感度欠佳.本研究结果还提示血栓性疾病实验诊断指标的应用价值可能与患者是否用药及标本收集的质量密切相关.

作者：颜存粮；彭黎明；江虹；唐宁；刘芳 刊期： 2004年第02期