聚合酶链反应-探针杂交-酶显色用于结核分支杆菌的检测

一种新的肿瘤相关蛋白-OVA12和抗体制备及其初步应用

目的制备原核表达的OVA12纯化蛋白,研究正常人与肿瘤患者血清中抗OVA12抗体水平的差异.方法克隆OVA12的cDNA至pGEMT载体中,经测序确证后,将该基因插入原核表达载体pET32a(+)中,并转化至E.coli表达菌BL21(DE3)中,诱导6×His融合蛋白表达,经Ni2+亲和层析及胶回收技术纯化蛋白,并将蛋白免疫动物制备兔抗OVA12蛋白抗体;采用ELISA、Dot blot、Western blot法比较正常人及肿瘤患者血清中抗体水平的差异.结果获得纯化OVA12蛋白及高滴度的兔抗血清;ELISA法测定显示,正常人组OD均值为0.17±0.07,肿瘤患者组OD均值为0.32±0.15,两组之间有显著性差异(P＜0.0001),并选择其中样本经Western blot、Dot blot加以进-步证实.结论成功克隆OVA12基因,并获得纯OVA12蛋白和高滴度的兔抗血清;ELISA等方法测定肿瘤患者与正常人血清中OVA12抗体水平有明显差异,为临床检测的应用奠定基础.

作者：尤强；程琳玲；王颖；王树军；张惠珍；沈天伟；葛海良 刊期： 2004年第02期

外周血B淋巴细胞免疫表型分析及临床应用

目的了解中国健康成人外周血B淋巴细胞各种免疫表型标志的参考范围,为临床正确诊断B淋巴细胞增殖性疾病提供基础信息.方法采用全血溶解法和SSC/CD19设门技术以三色流式细胞术对来自41位健康成人EDTA-K2抗凝静脉血进行免疫表型分析.结果正常人外周血B淋巴细胞几乎全部表达CD22、CD20、CD62L、CD40、CD24、CD79b、CD79a、和FMC-7分子,而CD11a、CD80、CD103、CD10、CD40L、CD54、CD95L、CD86、和CD95几乎不表达(平均阳性率＜10%=),CD18、CD44、CD23、CD5、CD11c、和CD43的表达较低,78%的B细胞为IgD阳性,κ/λ比例为1.26.结论中国人和西方人群之间在某些B细胞标志方面存在的差异,在临床工作中不宜直接套用国外的标准.对B淋巴细胞增殖性疾病的免疫分型及MRD检测,必须考虑国内人群正常B细胞群体中各种标志的表达情况.

作者：徐瑞龙；郑昭璟 刊期： 2004年第02期

HPV16感染对食管癌及P16、P53基因表达的影响

目的通过研究食管癌的HPV16感染阳性率及抑癌基因P16、P53表达的影响,探讨HPV16感染在食管癌病因学的作用.方法取食管癌手术切除标本30例及内镜下取慢性食管炎并非典型增生标本和正常食管黏膜标本各30例,应用PCR方法检测各标本HPV16的感染阳性率,并用免疫组织化学方法分别检测各组中的P53和P16基因突变率.结果食管癌组HPV16感染阳性率46.67%显著高于癌前病变组23.33%和正常组3.33%(P＜0.05),癌前病变组与正常组的HPV16感染率比较差异有显著性(P＜0.05).食管癌组中HPV16阳性的P53、P16突变率85.71%、78.57%显著高于HPV16阴性的P53、P16突变率50.0%、37.5%(P＜0.05),在癌前病变组HPV16阳性组与阴性组的比较差异无显著性,在正常对照组中未发现有突变.结论HPV16感染在粤西食管癌的发病中具有明显的相关性,它可能通过引起P53、P16突变而发挥作用.

作者：陈捷；周宇；李杰；吴平 刊期： 2004年第02期

成人恶性血液病患者血管内皮生长因子的血清水平分析

目的探讨急性髓细胞白血病和多发性骨髓瘤患者的血清VEGF水平与疾病发展的关系.方法应用酶联免疫吸附技术和Envision免疫组化二步法,分别检测41例次成人急性髓细胞白血病和19例次多发性骨髓瘤患者的血清VEGF水平,以及部分患者的骨髓血管生成情况.分析治疗前后血清VEGF水平的差异性,及其与患者骨髓微血管数、部分实验室检查指标、患者临床疗效的相关性.结果AML和MM患者血清VEGF水平在经过化疗获得缓解或部分显效后显著低于初发时水平(P＜0.01).AML各亚型M2、M3、M4和M5患者的血清VEGF水平差异无统计学意义(P值=0.126),但均显著低于MM初发患者的血清VEGF水平(P＜0.01).AML、MM初发患者血清VEGF水平与初发时的骨髓微血管数之间无显著相关性.结论血清VEGF水平与疾病的活动性相关,可能在一定程度上反映疾病的状态.有效的化疗可能通过抑制白血病细胞增殖,下调VEGF的分泌.

作者：王晨；钟济华；滕晔；黄洪晖；韩洁英；陈芳源；欧阳仁荣 刊期： 2004年第02期

血清胆汁酸测定在黄疸鉴别中的应用

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定血清中胆汁酸亚组份的方法及探讨几种黄疸患者的胆汁酸各组份 水平的变化.方法建立HPLC法测定胆汁酸亚组份的方法,对所建立的方法进行精密度、准确度、灵敏度及线性范围的评价.用所建立的HPLC法分离、测定几种黄疸患者血清中的6种胆汁酸并进行比较.结果HPLC法测定胆汁酸各组份的低检测限为3.125μmol/L;在浓度为3.5～100μmol/L内,其日内变异小于10%,日间变异小于15%(除TLCA外),各胆汁酸的回收率在93.3%～106.1%之间(除TLCA外).几种黄疸患者的胆汁酸均高于正常对照组.结论所建立的HPLC法适用于临床血清胆汁酸的分析.胆汁酸亚型分析有助于黄疸的鉴别诊断.

作者：李贵星；李萍 刊期： 2004年第02期

血液细胞化学染色的现代认识和发展趋势

细胞化学染色,是指通过化学处理,在显微镜下显示(定位)细胞某种化学成分的技术.此法原先是用在组织切片方面,称为组织化学.20世纪中期,这种技术在血液学实验室颇为盛行,对于血液细胞的识别,特别是在白血病相关的细胞鉴别方面,发挥过相当大的作用.但到了20世纪后期,由于缺乏后继的新技术开发、日常工作中需求不多、方法本身的特异性不够强、难以标准化以及没有成套商品化试剂供应等原因,这一技术没有多大发展.有的已逐渐被淘汰,有的正在被免疫学技术(如免疫组化显示技术、流式细胞术等)和分子生物学技术(如PCR)所取代.但个别项目,仍有一些新发现和新进展.

作者：朱忠勇 刊期： 2004年第02期

肾性贫血血常规检查红系统指数变化特点及临床意义

贫血是临床上常见的由多种不同原因或疾病引起的一种症状[1],而肾性贫血是由肾脏疾病引起的贫血.本文重点研究肾性贫血血常规检查红系统变化的特点及临床意义.

作者：缪晓丽；王丽颖；张桂荣；刘冰；韩忠宝 刊期： 2004年第02期

在校女生月经期血清中白细胞介素-10的检测与此期机体免疫的相关研究

目的检测在校健康女生经期血清中白细胞素-10(IL-10),并探讨IL-10变化与月经期间机体免疫状态变化的相关性.方法41例在校健康女生月经期和40例在校健康女生非月经期血清IL-10的测定采用双抗体夹心ELISA检测法.结果在校健康女生月经周期内血清IL-10浓度分别为月经前期224.5±23.6、经期351.2±27.3、月经终末期103.6±21.7(pg/ml),非月经期血清IL-10浓度为92.5±21.6(pg/ml).月经期与非月经期女生相比较,在校健康女生月经期内血清II-10明显升高(P＜0.01),随着在校健康女生月经周期的改变逐渐下降至正常.结论IL-0检测值增高可能是月经期女生机体免疫状态的一种防御反应性变化.

作者：颜文贞；陈群；朱美玉；王慧英 刊期： 2004年第02期

两种不同AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒获得及鉴定

目的构建及包装由全长5.1kbAFP启动子和低氧反应元件(HRE)与0.3kbAFP启动子两者组合的杂合0.3kbAFP启动子控制下表达HIV vpr基因的两种重组非复制型腺病毒.方法采用细菌内同源重组腺病毒载体制备方法和PacI酶切、PCR、Southern Blot鉴定方法.结果构建及包装出由这两种AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒,经PacI酶切、PCR和Southern Blot基因整合分析证明构建成功.结论我们成功构建了的全长5.1kbAFP启动子和HRE与0.3kbAFP启动子两者组合的杂合0.3kbAFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒,为使HIV vpr基因更好的用于肝癌特异性基因治疗提供了可能和基础.

作者：魏强；李凡；王健伟；郭丽；洪涛 刊期： 2004年第02期

转hGM-CSF基因骨髓基质细胞在体外扩散盒中的表达

目的研究转人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因骨髓基质细胞系在体外扩散盒中的表达.方法采用阳离子脂质体介导法将构建好的真核表达载体pIRESIneo/hGM-CSF导入人骨髓基质细胞系HFCL,建立转基因人骨髓基质细胞系HFCL/hGM-CSF,用Southern blot和Northern blot方法分别检测其基因组DNA整合和mRNA转录,并将其移入体外扩散盒中,用ELISA法检测其蛋白表达量.结果Southern blot和Northem blot分析表明hGM-CSF基因已整合到HFCL细胞基因组DNA中,在mRNA水平上可以检测到其表达,移入扩散盒的HFCL/hGM-CSF细胞稳定分泌hGM-CSF,量为51.6±0.5 ng/106细胞/天.结论转hGM-CSF基因骨髓基质细胞可以在体外扩散盒中持续稳定表达hGM-CSF,为进一步体内实验奠定了基础.

作者：陈晓；马俐君；王冠军 刊期： 2004年第02期

坐骨神经损伤后神康灵对脊髓前角神经元的保护作用的初步观察

目的探讨坐骨神经损伤后神康灵对脊髓前角神经元的保护作用.方法采用28只成年体重为200g的Wistar大鼠,随机分成2组(实验组和对照组),分别于术后6、8周通过扫描电镜检测脊髓前角神经元的形态和超微结构的变化;脊髓前角切片HE染色,从而探讨神康灵对坐骨神经损伤后脊髓前角神经元的保护作用.结果6和8周时,实验组脊髓前角神经元变性的程度明显小于对照组;存活的数量明显多于对照组.结论神康灵对坐骨神经损伤后的脊髓前角神经元有明显的保护作用.

作者：季守贤；魏壮；谢升伟；尹维田 刊期： 2004年第02期

CS型血红蛋白H病复合β地中海贫血的实验研究

目的探讨血红蛋白H病复合β地中海贫血(β-地贫)的实验诊断.方法用血红蛋白电泳对患者作血红蛋白组份定量测定,红细胞形态观察协助鉴别诊断,PCR扩增作α与β地贫基因分型,DNA测序用于检测αCS基因突变位点.结果先证者血红蛋白电泳检出微量Hb Bart's与Hb Constant Spring(HbCS),但未发现HbH带,常法PCR扩增仅检测-SEA基因与ⅣS-Ⅱ-654位点突变双杂合子,DNA测序结果显示,无缺失的α珠蛋白基因上αCS位点存在T→C突变,临床表现为血红蛋白H病.结论血红蛋H病复合β-地贫时可检测不到HbH(β4)区带.HbA2的准确定量分析与红细胞形态的仔细观察有助于该病的分析.该病的发现,为认识我国地贫的高度异质性提供了新的资料,对临床及时准确诊断该病有重要意义.

作者：吴教仁；向筑 刊期： 2004年第02期

糖尿病大鼠肾脏氧化应激的实验研究

目的研究糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应,求证氧化应激在糖尿病肾病发病机制中的作用.方法将实验动物分为正常组与糖尿病组,用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,8周后检测两组大鼠血糖、血脂、尿蛋白、肾重/体重等各指标的变化以及肾组织中丙二醛(MDA)的含量,铜、锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的活性.结果与正常组相比,糖尿病组血糖、血脂、尿蛋白、肾重/体重等指标明显增高,肾皮质MDA含量亦增加,而肾脏抗氧化酶的活性则降低.结论糖尿病大鼠肾脏存在氧化应激反应,肾组织抗氧化酶缺乏在糖尿病肾病发病机制中起重要作用.

作者：屈智慧；王旭渤；李永勇；毕黎琦 刊期： 2004年第02期

胆管损伤的预防和损伤性胆管狭窄的处理专题研究讨会暨中外专家论文报告会

作者： 刊期： 2004年第02期

反应性噬血细胞综合征19例的临床及实验分析

反应性噬血细胞综合征(reaction hemophagocytic sydrome,RHS)是由T细胞介导的组织细胞增生异常的综合征.其临床特点为发热、肝脾和(或)淋巴结肿大、全血细胞减少、肝功能异常和凝血机制障碍.我们对近年来所诊断的19例噬血细胞综合征的临床及实验室检测结果进行回顾总结,现将结果报告如下.

作者：凌励；周道银；惠小阳；林紫云；孙艳 刊期： 2004年第02期

B系急性淋巴细胞白血病与基因重排

分子生物学是当今生命科学中热门的前沿学科,尽管它在恶性血液病中的应用尚处于起始阶段,对细胞学诊断的影响也还有限.但是愕然回首,它已深深地影响到我们对细胞形态学和细胞遗传学,以及它们与临床之间诸多联系的理解,对肿瘤细胞生物行为和临床行为之间的了解,分子生物学检查能提供精确的证据、超前的信息和崭新的视角.本文就B系细胞白血病的相关基因重排与临床表型之间的关系作一综述.

作者：俞丹凤；卢兴国 刊期： 2004年第02期

P波离散度与阵发性心房纤颤的关系

P波离散度(Pd)是心房内存在部位依从性非均质电活动的标志,是引起房颤的重要的电生理学基础.大P波时限延长是房内或房间传导延缓的标志,而P波离散度是近年发现和提出的预测房性心律紊乱、阵发性心房纤颤的体表心电图一个新指标[1].对预测心房纤颤的发生有较高的敏感性和特异性[3].本研究观察了阵发性心房纤颤患者的大P波时限(Pmax)和Pd,并与非心房纤颤的患者比较,旨在探讨它们在预测阵发性心房纤颤方面的意义.

作者：王旭渤；于水 刊期： 2004年第02期

TGFβ1与周细胞在乳腺癌血管生成中的关系及意义

目的分析TGFβ1与周细胞在乳腺癌血管生成中的相互关系及作用.方法取50例手术切除乳腺癌新鲜标本,采用免疫组织化学染色、原位杂交技术,结合体视学分析方法,研究TGFβ1及周细胞在乳腺癌中的表达情况.结果TGFβ1蛋白质可表达在新生血管周细胞的胞浆中,同时也可表达于乳腺癌癌细胞及新生血管内皮细胞;TGFβ1mRNA主要表达在血管周细胞的胞浆中,只有极少数癌细胞呈弱阳性表达.乳腺癌中TGFβ1mRNA的表达与周细胞的表达正相关,P＜0.01.结论提示周细胞通过TGFβ1参与血管生成的调节.

作者：王医术；周洪澜；李玉林；李一雷；王心蕊；张丽红；吴珊 刊期： 2004年第02期

筛查非综合征性耳聋患者的内耳特异表达蛋白otospiralin基因突变

目的Otospiralin基因是表达于内耳支持细胞,该基因表达下调可导致耳聋.本文旨在调查otospiralin这种特异表达于耳蜗组织的基因突变是否会导致人类非综合征性耳聋.方法采用PCR-SSCP的方法,对151例先天性耳聋的病例和1个感音神经性耳聋家系进行otospiralin编码区序列的基因突变位点的筛选.结果150例患者和50例正常人样本有正常PCR扩增产物,但SSCP分析没有一例有异常迁移带.结论表达于耳蜗间质的成纤维细胞的otospiralin基因没有与耳聋连锁的突变位点.推测这个基因在内耳的表达缺乏可能是毛细胞丢失的主要原因.

作者：王苹；周余来；杜波；杜宝东 刊期： 2004年第02期

肾病综合征患者的血小板糖蛋白检测意义

目的通过测定肾病综合征(NS)患者血小板糖蛋白及血清脂质、凝血指标,旨在为临床治疗NS提供有用的参考指标.方法利用流式细胞仪检测了45例NS患者(其中伴静脉血栓者9例,无静脉血栓者36例)的血小板糖蛋白(CD62p、CD63),同时仪器法测定了Plt、TC、HDL、LDL、TG、PT、APTT、TT、Fib.结果NS患者CD62p、CD63、Plt、TC、LDL、TG、Fib显著高于正常对照组,且CD62p、CD63、Plt、TC、LDL、TG、Fib等伴静脉血栓者显著高于无静脉血栓组;但NS患者HDL、APTT明显低于正常对照组,PT、TT变化并不明显.血小板CD62P与Plt、PT、APTT、Fib成正相关,CD63与Plt、APTT、Fib成正相关,且血小板CD62P与CD63之间呈正相关性.结论NS患者学习包办糖蛋白测定,对NS病情分析和预防静脉血栓有重要的临床参考价值.

作者：邱莲女；周永列；林慧君 刊期： 2004年第02期