颜文贞;陈群;朱美玉;王慧英
目的探讨血清HCG、P检测在IVF-ET中作为妊娠结果的预测价值.方法回顾分析143例采用体外授精-胚胎移植(IVF-ET)周期患者的妊娠结果与ET后第14天的血清HCG、P水平.结果临床妊娠组HCG、P水平均显著高于生化妊娠组和未妊娠组(P<0.01).生化妊娠组HCG显著高于未妊娠组(P<0.01),而P则与未妊娠组无明显差异(P>0.05).持续妊娠组HCG、P水平显著高于流产组(P<0.01).多胎组HCG水平显著高于单胎组(P<0.01),而P则与单胎组无明显差异(P>0.05).以HCG≥100IU/L且P≥20μg/L作为临床妊娠的预测标准,阳性预期值为100%,阴性预期值为91.34%,敏感性为81.25%,特异性为100%;以HCG>500IU/L作为多胎妊娠的预测标准,阳性预期值为66.67%,阴性预期值为76.19%,敏感性为66.67%,特异性为76.19%.结论在IVF-ET周期中ET后第14天血清HCG、P在预测妊娠结果方面具有重要临床价值.
作者:黄娟华;刘炜培;张羽虹;李颖嫦 刊期: 2004年第02期
目的通过研究食管癌的HPV16感染阳性率及抑癌基因P16、P53表达的影响,探讨HPV16感染在食管癌病因学的作用.方法取食管癌手术切除标本30例及内镜下取慢性食管炎并非典型增生标本和正常食管黏膜标本各30例,应用PCR方法检测各标本HPV16的感染阳性率,并用免疫组织化学方法分别检测各组中的P53和P16基因突变率.结果食管癌组HPV16感染阳性率46.67%显著高于癌前病变组23.33%和正常组3.33%(P<0.05),癌前病变组与正常组的HPV16感染率比较差异有显著性(P<0.05).食管癌组中HPV16阳性的P53、P16突变率85.71%、78.57%显著高于HPV16阴性的P53、P16突变率50.0%、37.5%(P<0.05),在癌前病变组HPV16阳性组与阴性组的比较差异无显著性,在正常对照组中未发现有突变.结论HPV16感染在粤西食管癌的发病中具有明显的相关性,它可能通过引起P53、P16突变而发挥作用.
作者:陈捷;周宇;李杰;吴平 刊期: 2004年第02期
细胞化学染色,是指通过化学处理,在显微镜下显示(定位)细胞某种化学成分的技术.此法原先是用在组织切片方面,称为组织化学.20世纪中期,这种技术在血液学实验室颇为盛行,对于血液细胞的识别,特别是在白血病相关的细胞鉴别方面,发挥过相当大的作用.但到了20世纪后期,由于缺乏后继的新技术开发、日常工作中需求不多、方法本身的特异性不够强、难以标准化以及没有成套商品化试剂供应等原因,这一技术没有多大发展.有的已逐渐被淘汰,有的正在被免疫学技术(如免疫组化显示技术、流式细胞术等)和分子生物学技术(如PCR)所取代.但个别项目,仍有一些新发现和新进展.
作者:朱忠勇 刊期: 2004年第02期
作者: 刊期: 2004年第02期
目的通过对正常人及肿瘤患者血清中IL-12以及IL-12P40含量的检测,观察其分子对NK细胞抗肿瘤细胞细胞毒效应的影响,探讨IL-12、IL-12P40分子在NK细胞抗肿瘤功能上的免疫调节作用.方法ELISA酶联免疫法检测IL-12、IL-12P40分泌水平以及MTT释放法检测NK细胞毒活性.结果①肿瘤患者外周血PBMC中CD3+、CD56+细胞阳性率低于对照组(P<0.05).②肿瘤患者NK细胞对NK敏感细胞K562以及NK不敏感细胞Raji和Ddaudi的杀伤活性均低于正常对照组(P<0.05).③正常人外周血NK细胞经含肿瘤患者血清培养后,NK细胞杀伤活性明显下降(P<0.05).④在肿瘤患者血清中,IL-12分泌水平为143.31±0.93pg/ml,高于对照组84.97±3.7pg/ml(P<0.05);IL-12P40含量为224.90±0.7pg/ml,高于对照组32.56±0.7pg/ml(P<0.05).⑤正常人NK细胞经不同浓度(1μg/ml、5μg/ml以及10μg/ml)IL-12诱导后,在5μg/ml、10μ/ml浓度NK细胞杀伤率均高于对照组;在肿瘤患者中,仅高剂量(10g/ml)IL-12组的杀伤率高于对照组.⑥这种诱导增高的NK细胞杀伤率可被外源性IL-12P40的加入而下调.结论肿瘤患者血清中IL-12P40含量的增高可能与肿瘤密切相关的NK细胞功能下降有关.
作者:张继英;马安伦;聂红;柏峻;余奇文;张冬青 刊期: 2004年第02期
胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附法(ELISA)单独用于乙型肝炎的检测,已广泛应用于临床.由于二者标记物、灵敏度、特异性等方面的不同,在检测方面体现出不同的优缺点,二者结合使用,在乙型肝炎检测中,尤其在乙型肝炎特殊模式出现时,给临床检验带来了很大的方便.
作者:庄严;李绪黎 刊期: 2004年第02期
尿沉渣存在血小板(Plt)的临床意义在国内未曾见过报道,采用中国军事医学科学院、鼠抗人血小板糖蛋白Ⅱb/ⅢaCD41单克隆抗体,以间接免疫荧光技术、在尿沉渣中找到了血小板,并对其临床价值加以探讨,结论是尿沉渣血小板的存在与肾小球损伤程度有关.
作者:马东辉;张鉴清 刊期: 2004年第02期
分子生物学是当今生命科学中热门的前沿学科,尽管它在恶性血液病中的应用尚处于起始阶段,对细胞学诊断的影响也还有限.但是愕然回首,它已深深地影响到我们对细胞形态学和细胞遗传学,以及它们与临床之间诸多联系的理解,对肿瘤细胞生物行为和临床行为之间的了解,分子生物学检查能提供精确的证据、超前的信息和崭新的视角.本文就B系细胞白血病的相关基因重排与临床表型之间的关系作一综述.
作者:俞丹凤;卢兴国 刊期: 2004年第02期
目的研究转人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因骨髓基质细胞系在体外扩散盒中的表达.方法采用阳离子脂质体介导法将构建好的真核表达载体pIRESIneo/hGM-CSF导入人骨髓基质细胞系HFCL,建立转基因人骨髓基质细胞系HFCL/hGM-CSF,用Southern blot和Northern blot方法分别检测其基因组DNA整合和mRNA转录,并将其移入体外扩散盒中,用ELISA法检测其蛋白表达量.结果Southern blot和Northem blot分析表明hGM-CSF基因已整合到HFCL细胞基因组DNA中,在mRNA水平上可以检测到其表达,移入扩散盒的HFCL/hGM-CSF细胞稳定分泌hGM-CSF,量为51.6±0.5 ng/106细胞/天.结论转hGM-CSF基因骨髓基质细胞可以在体外扩散盒中持续稳定表达hGM-CSF,为进一步体内实验奠定了基础.
作者:陈晓;马俐君;王冠军 刊期: 2004年第02期
目的探讨血红蛋白H病复合β地中海贫血(β-地贫)的实验诊断.方法用血红蛋白电泳对患者作血红蛋白组份定量测定,红细胞形态观察协助鉴别诊断,PCR扩增作α与β地贫基因分型,DNA测序用于检测αCS基因突变位点.结果先证者血红蛋白电泳检出微量Hb Bart's与Hb Constant Spring(HbCS),但未发现HbH带,常法PCR扩增仅检测-SEA基因与ⅣS-Ⅱ-654位点突变双杂合子,DNA测序结果显示,无缺失的α珠蛋白基因上αCS位点存在T→C突变,临床表现为血红蛋白H病.结论血红蛋H病复合β-地贫时可检测不到HbH(β4)区带.HbA2的准确定量分析与红细胞形态的仔细观察有助于该病的分析.该病的发现,为认识我国地贫的高度异质性提供了新的资料,对临床及时准确诊断该病有重要意义.
作者:吴教仁;向筑 刊期: 2004年第02期
目的探讨胸水和血清细胞角蛋白片段19(cytokeratin 19 fragment,CK-19)和其它生化指标的检测在肺癌特异性实验室诊断中的临床意义.方法采用ELISA法检测45例临床确诊的各种肺癌患者、50例非肿瘤性肺及支气管疾病患者血清和胸水中CK-19水平,30例健康体检者血清CK-19水平,同时采用本室常规方法测定了以上患者血清及胸水和健康对照组血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)及其同功酶(LD-1)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)、C反应蛋白(C-response protein,CRP)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)和白蛋白(albumin,ALB)水平,并进行相关性分析.结果肺癌患者血清和胸水中CK-19、CEA、LDH和LD-1水平均明显高手非癌性肺疾病患者和正常健康对照组(P<0.05),而ADA水平均低于非癌性肺疾病患者和健康对照组(P<0.05).非癌性肺疾病患者血清和胸水CRP水平明显高于肺癌组和健康对照组(P<0.05).相关性分析显示,胸水中CK-19水平与血清CK-19水平高度相关(r=0.868,肺癌组;r=0.5462,非癌性肺疾病组).胸水和血清CK-19对肺癌的诊断敏感性、特异性和准确性分别为93.3%和71.1%、91.7%和87.5%、92%和81.6%.结论胸水和血清CK-19检测对肺癌的诊断是一个较好的指标,联合检测其它相关生化指标有助于临床诊断.
作者:陈涛;钟淑卿;林勇平;刘忠民;陈柏铭 刊期: 2004年第02期
目的观察神经鞘氨醇磷酸胆碱(Sphingosylphosphorylcholine,SPC)对原代培养人真皮成纤维细胞DNA合成的影响.方法利用儿童包皮组织行人真皮成纤维细胞原代培养,采用不同浓度SPC处理培养的细胞,测定3H-TdR掺入量.结果SPC浓度为2μM时,3H-TdR掺入量明显高于对照组(P<0.05),5μM时3H-TdR掺入量达高峰,而后逐渐降低,20μM时3H-TdR掺入量为低.结论在一定浓度范围内SPC能明显促进原代培养人真皮成纤维细胞DNA的合成,在人类皮肤创伤愈合的治疗领域中,是一个很有应用前景的物质.
作者:朱明姬;蒋忠民;丛宪玲;丛建军;李增勋;陈远耀 刊期: 2004年第02期
目的研究C-kit(CD117)原癌基因在白血病细胞上的表达规律和意义.方法采用CD45/55C双参数(对数)散点图设门法进行三色流式细胞术分析.结果急性髓细胞白血病(AML)患者CD117表达率为59.6%;慢性髓细胞白血病(CML)CD117表达率为16.7%,且都为急变期;急性淋巴细胞性白血病(ALL)极少表达,慢性淋巴细胞性白血病(CLL)不表达;干细胞性白血病(AUL)、双表型白血病(BAL)高表达.结论CD117有助于鉴别诊断髓系白血病,并能作为慢粒病程监测的指标.
作者:陈葆国;李伯利;干灵红;罗文达 刊期: 2004年第02期
目的探讨DNA检测对急性淋巴细胞性白血病(ALL)诊断和治疗的临床意义.方法应用流式细胞术检测了35例急性淋巴细胞性白血病患者骨髓细胞DNA含量(DI)、倍体和细胞增殖活性(PI).结果ALL异倍体检出率为51.4%(18/35),其中亚二倍体8例,超二倍体10例;ALL组骨髓细胞G0/G1%高于对照组(P<0.05),而S%、PI值明显低于对照组(P<0.05).结论DNA含量检测和倍体分析对急性淋巴细胞性白血病的诊断、治疗是很有价值的临床生物学指标,有助于白血病的准确、客观诊断和判断预后.
作者:段秀梅;刘力华;谭岩;方艳秋;许淑芬 刊期: 2004年第02期
目的探讨Dieulafoy病发病情况、诊断及治疗方法.方法回顾性分析19例Dieulafoy病的临床表现、诊断、治疗方法及疗效.结果全部病例均是突发上消化道大出血;初次胃镜检查确诊12例(63.2%),第二次检查确诊4例,术中探查确诊3例;13例经一次内镜下止血成功,1例经二次内镜下止血成功,4例行外科手术.结论急诊胃镜是诊断Dieulafoy病首选方法;治疗首选内镜下止血,内镜下止血不成功,立刻外科手术.
作者:杜建时;李长锋;张斌;郑泽霖 刊期: 2004年第02期
目的评价血管内皮细胞、凝血、纤溶、血小板活化指标在血栓性疾病诊断中的价值.方法对51例血栓性疾病患者、21例非血栓性疾病患者以及35例正常人,分别以ELISA法检测其血管性血友病因子(vWF:Ag)、组织因子(TF)、凝血酶原片段1+2(F1+2)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA:Ag)、血栓烷B2(TXB2)和以发色底物法检测纤溶酶原激活物抑制剂活性(PAI:Ac)及α2-纤溶酶抑制剂活性(α2-PI:Ac)等.结果血栓病组与非血栓病组患者的t-PA:Ag、PAI:Ac、α2-PI:Ac、vWF:Ag、F1+2都较对照组高(P<0.05),其中α2-PI:Ac、vWF:Ag、F1+2在血栓病组和非血栓病组之间无显著性差异(P>0.05);血栓病组的血浆TXB2、TF较非血栓病组偏高,但无显著性差异(P>0.05);常规止凝血试验如PT、APTT、FIB和PLT在血栓病组和非血栓病组之间均无显著性差异(P>0.05).t-PA:Ag的诊断敏感度、特异度、诊断比数比以及ROC曲线下面积分别为66.7%、66.7%、4.0和0.690,而PAI:Ac分别为94.1%、60.7%、24.7和0.849.结论本研究结果提示,PAI:Ac在诊断血栓性疾病中的敏感度较高,其次为t-PA,但需扩大样本进行前瞻性研究和证实;其它指标包括vWF:Ag、α2-PI:Ac、TF、F1+2、TXB2以及常规检测指标包括PT、APTT、FIB和PLT用作血栓性疾病的诊断指标敏感度欠佳.本研究结果还提示血栓性疾病实验诊断指标的应用价值可能与患者是否用药及标本收集的质量密切相关.
作者:颜存粮;彭黎明;江虹;唐宁;刘芳 刊期: 2004年第02期
目的制备原核表达的OVA12纯化蛋白,研究正常人与肿瘤患者血清中抗OVA12抗体水平的差异.方法克隆OVA12的cDNA至pGEMT载体中,经测序确证后,将该基因插入原核表达载体pET32a(+)中,并转化至E.coli表达菌BL21(DE3)中,诱导6×His融合蛋白表达,经Ni2+亲和层析及胶回收技术纯化蛋白,并将蛋白免疫动物制备兔抗OVA12蛋白抗体;采用ELISA、Dot blot、Western blot法比较正常人及肿瘤患者血清中抗体水平的差异.结果获得纯化OVA12蛋白及高滴度的兔抗血清;ELISA法测定显示,正常人组OD均值为0.17±0.07,肿瘤患者组OD均值为0.32±0.15,两组之间有显著性差异(P<0.0001),并选择其中样本经Western blot、Dot blot加以进-步证实.结论成功克隆OVA12基因,并获得纯OVA12蛋白和高滴度的兔抗血清;ELISA等方法测定肿瘤患者与正常人血清中OVA12抗体水平有明显差异,为临床检测的应用奠定基础.
作者:尤强;程琳玲;王颖;王树军;张惠珍;沈天伟;葛海良 刊期: 2004年第02期
目的了解中国健康成人外周血B淋巴细胞各种免疫表型标志的参考范围,为临床正确诊断B淋巴细胞增殖性疾病提供基础信息.方法采用全血溶解法和SSC/CD19设门技术以三色流式细胞术对来自41位健康成人EDTA-K2抗凝静脉血进行免疫表型分析.结果正常人外周血B淋巴细胞几乎全部表达CD22、CD20、CD62L、CD40、CD24、CD79b、CD79a、和FMC-7分子,而CD11a、CD80、CD103、CD10、CD40L、CD54、CD95L、CD86、和CD95几乎不表达(平均阳性率<10%=),CD18、CD44、CD23、CD5、CD11c、和CD43的表达较低,78%的B细胞为IgD阳性,κ/λ比例为1.26.结论中国人和西方人群之间在某些B细胞标志方面存在的差异,在临床工作中不宜直接套用国外的标准.对B淋巴细胞增殖性疾病的免疫分型及MRD检测,必须考虑国内人群正常B细胞群体中各种标志的表达情况.
作者:徐瑞龙;郑昭璟 刊期: 2004年第02期
目的分析TGFβ1与周细胞在乳腺癌血管生成中的相互关系及作用.方法取50例手术切除乳腺癌新鲜标本,采用免疫组织化学染色、原位杂交技术,结合体视学分析方法,研究TGFβ1及周细胞在乳腺癌中的表达情况.结果TGFβ1蛋白质可表达在新生血管周细胞的胞浆中,同时也可表达于乳腺癌癌细胞及新生血管内皮细胞;TGFβ1mRNA主要表达在血管周细胞的胞浆中,只有极少数癌细胞呈弱阳性表达.乳腺癌中TGFβ1mRNA的表达与周细胞的表达正相关,P<0.01.结论提示周细胞通过TGFβ1参与血管生成的调节.
作者:王医术;周洪澜;李玉林;李一雷;王心蕊;张丽红;吴珊 刊期: 2004年第02期
目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定血清中胆汁酸亚组份的方法及探讨几种黄疸患者的胆汁酸各组份 水平的变化.方法建立HPLC法测定胆汁酸亚组份的方法,对所建立的方法进行精密度、准确度、灵敏度及线性范围的评价.用所建立的HPLC法分离、测定几种黄疸患者血清中的6种胆汁酸并进行比较.结果HPLC法测定胆汁酸各组份的低检测限为3.125μmol/L;在浓度为3.5~100μmol/L内,其日内变异小于10%,日间变异小于15%(除TLCA外),各胆汁酸的回收率在93.3%~106.1%之间(除TLCA外).几种黄疸患者的胆汁酸均高于正常对照组.结论所建立的HPLC法适用于临床血清胆汁酸的分析.胆汁酸亚型分析有助于黄疸的鉴别诊断.
作者:李贵星;李萍 刊期: 2004年第02期