应用实时RT-PCR技术的mRNA定量分析

杨建荣；陈晓东

关键词：应用, 实时, 分子生物学技术, 定量分析, 基因转录水平, 肿瘤细胞, 表达水平, 检测, 基因功能研究, 生物动力学, 肿瘤进展, 耐药基因, 临床诊断, 基因治疗, 化疗疗效, 存活状态, 外周血, 评价, 调节, 病菌

摘要：1 mRNA定量的意义特定基因的表达水平可反映细胞的生长、存活状态,对特定基因转录水平的定量分析已成为基因功能研究的核心部分[1].近,分子生物学技术的飞速发展使得mRNA定量分析用于临床诊断成为现实,其应用涉及面很广,包括检测肿瘤细胞耐药基因的调节与表达、化疗疗效的分析、基因治疗的生物动力学与转录、表达水平的研究;并提供了评价肿瘤进展,检测外周血中肿瘤细胞的有效手段;此外,RNA定量分析还可用于病菌、病毒的检测[2-6].

中国实验诊断学杂志相关文献

环枢椎骨折的X线平片与CT诊断

环椎、枢椎在解剖结构上具有一定的特殊性.过去,对环枢椎骨折通常靠普通X线检查.在诊断上有一定的局限性,CT机的应用,大大弥补了普通X线的不足.本文通过对25例患者的回顾性分析、对照,现报告如下.1 一般资料本文收集1997年～2000年间25例环枢椎骨折的患者,男18例,女7例,年龄16～45岁,平均年龄31岁,其中坠落伤14例,车祸8例,其他3例.

作者：郭士伟；黄成；王景宇刊期： 2002年第03期
慢性乙肝患者淋巴细胞亚群检测及临床应用

慢性乙肝患者对乙肝病毒存在不同程度的免疫耐受,是乙型肝炎慢性化的重要机理.消除患者对乙肝病毒的耐受状态,提高对病毒的免疫力是治疗乙肝的关键.有关免疫治疗结论不一,我们对在1994-1995年,收治的乙型肝炎患者检测治疗前后外周血淋巴细胞亚群CD4+、CD8+水平和CD4+/CD8+比值,以及乙肝病毒标记物的变化,并且随访1～5年.发现治疗前CD4+水平和CD4+/CD8+比值,对预测胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的疗效有重要价值,现报道如下.

作者：王长嘉；韩伟；刘宇琼；路洪艳；房长茂刊期： 2002年第03期
急性一氧化碳中毒患者血浆超氧化物歧化酶与碳氧血红蛋白相关性研究

急性一氧化碳(CO)中毒为我国北方冬季常见病,因发病急,病情较重,部分病例预后凶险,造成神经系统的不同程度损害后遗症,对其发病的原因,中毒表现,神经系统改变,已有较多研究,但对血浆超氧化物歧化酶(SOD)的改变及与碳氧血红蛋白(Hb-CO)的相关关系尚未见报道,为此本文就急性CO中毒患者血浆SOD的改变,以及与HbCO的关系,作了比较观察.

作者：杜简秋；崔俊彪；刘淑杰；王淑侠；安然刊期： 2002年第03期
甲状腺功能减退症并发急性心肌梗死1例

甲状腺功能减退症(甲减)易并发动脉粥样硬化及冠心病,既往有冠心病的患者,合并甲减可加速病情发展,可导致心肌梗死,但是,甲减的早期临床表现缺乏特异性,常易漏诊或误诊,本文报告1例甲减并发急性心肌梗死.

作者：王凤艳；张明秋刊期： 2002年第03期
SLE患者外周血Tc1/Tc2与CD4/CD25双阳性细胞关联性分析

目的分析SLE患者外周血CD8淋巴细胞分泌的细胞因子与CD4/CD25双阳性细胞反应格局与疾病的关联性.方法用三色免疫荧光单细胞染色法检测了11例SLE患者外周血CD8T细胞分泌的细胞因子与CD4/CD5双阳性细胞的表达.结果所检测11例SLE患者中有3例表现为Tc0,即同时分泌IFN-γ和IL-4的Tc细胞.4例以分泌IFN-γ为主,为Tc1,4例以分泌IL-4为主,为Tc2.同时测定了SLE病人与正常对照组CD4/CD25双阳性细胞群发现CD4/CD25双阳性细胞群在活动期SLE中显著低下[(17.54±4.11%)%,而对照组为(35.42±3.30)%].结论SLE患者外周血中CD8亚群表现为异质性,且与CD4/CD25双阳性细胞有关.至于其在SLE发病中的意义正在进一步研究中.

作者：邱潮林；费新娣；周翔；梅虹；李宁丽；王树军；马安伦；余奇文；张冬青刊期： 2002年第03期
子宫颈上皮样平滑肌瘤1例

患者,女性,36岁,因性交后偶有阴道出血3年,突发性阴道出血1天,于2000年9月14日人院.B超显示子宫大小正常,宫颈内见3.0 cm×2.8 cm×2.5 cm中低回声肿块.妇科检查:外阴正常,子宫前位,大小正常,宫颈外口扩张,突出一带蒂的核桃大实质性肿物,质稍硬,灰红色,表面有活动性出血.由根部切除肿瘤送病理.临床诊断:宫颈粘膜下平滑肌瘤.

作者：周小斐；朱宇；隋明刊期： 2002年第03期
全氟辛烷对角膜影响的实验研究

目的观察全氟辛烷残留前房时对角膜的影响,探讨取出残留前房全氟辛烷的适宜时间.方法向实验组兔眼前房中注入全氟辛烷,观察不同时间内角膜在裂隙灯显微镜、光镜、扫描电镜下和台盼蓝、茜素红染色后的变化.结果实验组的角膜2周时只在扫描电镜下出现变化,4周时的检查结果显示角膜明显改变.结论全氟辛烷长时间残留眼内可引起角膜内皮细胞的损伤,应尽早取出前房内的全氟辛烷.

作者：赵振全；赵梅生；宋跃刊期： 2002年第03期
充血性心力衰竭患者甲状腺激素水平与心功能的关系

目的观察32例充血性心力衰竭(CHF)患者甲状腺激素的水平及与心功能的关系.方法CHF患者32例,男18例,女14例,平均年龄58岁,于入院后采血进行甲状腺激素水平的测定,超声心动图检查测定射血分数(EF)及心功能.结果甲状腺激素的水平随心功能不同而有变化,心功能Ⅳ级时T3、T4、FT3均明显降低,与Ⅱ级、Ⅲ级心功能相比有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05),而TSH、FT4、rT3在心功能Ⅳ级与Ⅱ级、Ⅲ级间无明显差异.相关性分析表明,EF与rT3呈负相关(r=-0.74);EF与TSH呈负相关(r=-0.68);EF与FT3/FT4呈正相关(r=0.59).结论CHF时甲状腺激素的代谢发生了明显变化,而且心功能参数与甲状腺激素的水平有明显的相关关系.

作者：季汉华；那开宪；康苏平；张玉春；张薇；侯新燕；王欣平；蔡起蔷刊期： 2002年第03期
腹膜透析前后患者的血脂和脂蛋白(a)水平及与冠状动脉心脏病关系的探讨

目的观察经腹膜透析前后患者的血清脂类、载脂蛋白、脂蛋白(a)[LP(a)]水平,并探讨与冠状动脉心脏病之间的关系.方法采用日立7170型全自动生化分析仪,日本第一化学药品株式会和中科院中生公司的试剂,对67例尿毒症患者进行腹膜透析前后的血清脂类、载脂蛋白、LP(a)水平检测.结果67例腹膜透析后6个月内的患者血清脂蛋白(a)为308±202mg/L,较82例对照组134±109mg/L,有显著性差异(P＜0.001),与腹膜透析前患者血清脂蛋白(a)331±199mg/L比较,经统计学处理,无显著性差异(P＞0.05),其中38例腹膜透析患者在透析后6个月、1年、2年分别检测了血清Lp(a)水平,其值分别为284±221 mg/L,263±207 mg/L和246±201 mg/L,它们之间无显著性差异.67例腹膜透析患者在透析前和透析后检测脂类、脂蛋白、载脂蛋白,其TC、LDL-C、ApoB较自身透析前呈增高水平(P＜0.001,P＜0.05,P＜0.05).TG、HDL-C、ApoAI透析后较透析前增高(P均＞0.05).结论腹膜透析患者血清Lp(a)水平明显增高,约是正常对照的2.4倍,其值在透析过程中无明显变化,透析前后发生冠心病的患者与未发生冠心病的患者血清Lp(a)水平无显著性差异,未见尿毒症患者血清Lp(a)与冠心病的发生有显著的相关性,TC、LDL-C、ApoB透析后较透析前呈明显增高,有显著性差异.TG、HDDL-C、ApoAI透析后较透析前也有增高,无显著性差异.

作者：李国权；郑丹侠刊期： 2002年第03期
电离辐射生物标志的检测及其在临床诊断中的意义

随着核科学的进步及核技术和放射性同位素的广泛应用,推动了放射医学及其相关学科的发展,从而为电离辐射所致机体损伤或疾病的诊断和治疗提供更加合理的方案.特别是,1980年以来我国对主要的放射性疾病拟定了国家诊断标准和处理原则及内外照射的估算方法等,使放射性疾病的诊断和处理日趋完善.

作者：龚守良；林承赫刊期： 2002年第03期
几种新生儿疾病时尿系列酶活性改变

新生儿肾脏发育尚不成熟,易受窒息、缺血缺氧、感染等因素的影响,在应急状态下发生损害和功能失调.新生儿疾病伴随肾功能障碍较为常见,目前临床上仍沿用传统的方法,以少尿、血尿素和血肌酐升高来判断新生儿疾病合并肾功能受累,尚缺乏早期较敏感的指标.

作者：韩平治；丁进芳；陈虹；周爱华；常若云；王彦刊期： 2002年第03期
9例黄色肉芽肿性肾盂肾炎诊断分析

黄色肉芽肿性肾盂肾炎是一种很少见的肾盂内特异性炎症,自1916年首次被报道以来,国内外偶见有报道,由于该病非常少见,所以对其认识不足,治疗前不易做出正确诊断,现就此病诊断及鉴别诊断方面加以探讨.

作者：魏来德；李胜文；张士伟；林相国；那万里刊期： 2002年第03期
应用荧光PCR技术检测6500例患者血清HBV DNA的实验研究

目的揭示血清乙肝病毒标志物(HBVM)与血清HbV DNA含量相关性.方法采用ELISA法对血清、HB-VM进行检测;对HBVM阳性6500例患者血清采用荧光PCR法定量检测HBV DNA.结果在HBVM阳性的6500例血清中,有3 982例占61.3%,HBVM标志物阳性者血清均有HBV DNA阳性.血清HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性者HBVDNA阳性率占96.9%,大于106copies/mi者占72.1%,HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性者HBV DNA阳性率占21.9%,HBVDNA定量大于103copies/ml,且小于等于104copies/ml者占78.1%.结论血清HBVM阳性患者中约60%的血清HBVDNA阳性,且HBeAg阳性中HBV DNA阳性率及血清HBV DNA均明显高于抗-HBe阳性者.在抗-HBs、抗-HBc阳性者血清内也有HBV DNA阳性者,采用荧光PCR定量检测HBV DNA技术先进结果准确.

作者：高俊芬；张翠萍；孙庆国；王佳楠；桑颖刊期： 2002年第03期
嘌呤碱基与嘌呤核苷对吗啡耐受性影响的实验研究

阿片类是临床常用的镇痛性麻醉药,吗啡是其主要代表,吗啡的应用极易产生耐受性,因而也是具有滥用潜能的药品.本文从整体动物水平通过热敏感甩尾实验观察测定腺嘌呤、鸟嘌呤,腺苷、鸟苷对吗啡依赖大鼠耐受性的影响.关于嘌呤碱基或嘌呤核苷与吗啡作用关系的研究,国内外报道甚少.

作者：刘剑凯；洪敏；张纪周刊期： 2002年第03期
肿瘤特异性生长因子的检测及临床意义

肿瘤特异性生长因子(Tumor Specific Growth Factor,TSGF)是一种能促进恶性肿瘤组织的血管增生的肿瘤标志物,在恶性肿瘤形成早期,释放到血液中并达到一定浓度,对恶性肿瘤有特异性而与非恶性肿瘤细胞及血管的增生无明显关系.TSGF在恶性肿瘤的普查及早期诊断方面越来越引起临床的关注,本文对不同肿瘤患者的血清TSGF进行检测,旨在探讨其临床应用价值.

作者：李永军；王丽芳；曹青；郭欣；王崇刊期： 2002年第03期
MDS外周血细胞形态学观察及其意义

本文通过对28例骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrom,MDS)患者的外周血及骨髓象作回顾性分析,以评价MDS的外周骨髓造血异常之间的关系.1 对象与方法1.1 标本来源收集我院近几年收治并确诊的MDS 28例.

作者：张善辉；徐士荣；潘怀富；丁虹刊期： 2002年第03期
特殊表现的结核病4例误诊分析

结核病系常见病,多发病,典型表现容易诊断,但以某一症状为突出表现的结核病就较难诊断.现将收住的4例结核病典型误诊病例报告如下.1 典型病例1.1 结核性腹膜炎以突发右下腹转移性疼痛,麦氏点压痛而误诊为急性阑尾炎例1女,23岁.未婚.突发脐周疼痛,阵发性加剧并向右下腹转移,低热10 h人院.

作者：杨俊华；李康增刊期： 2002年第03期
艾滋病误诊为肺结核病1例

1 病历摘要患者,男性,35岁,曾有献血史,近半年来,反复发热、寒战,于2001年10月在我院门诊就医.患者于94年5月曾有2次采血史,当时为压积红细胞、血浆进行了还输.2000年4月7日,无诱因出现发热,体温37.5～39℃,无明显规律,明显消瘦、咳嗽,咯出物伴少许血液,曾在当地医院治疗,后转到北京某医院诊断为肺结核病,应用多种抗结核药,无明显效果.

作者：肖鑫刊期： 2002年第03期
西比灵对缺血性脑卒中患者血清中自由基的影响

目的证实西比灵对急性脑梗死患者血清中自由基的影响.方法选取急性脑梗死患者,随机分为一般治疗组、自由基清除剂治疗组、西比灵治疗组、自由基清除剂加西比灵治疗组,对各组患者于治疗前后进行疗效评定,于治疗前、治疗后3、7、15 d分别采静脉血,应用WSPS法测定LPO含量,化学发光法测定SOD活性.结果西比灵治疗组LPO含量降低,SOD活性稳定,自由基清除剂加西比灵组LPO含量降低更加明显.结论西比灵可抑制脑梗死患者脑组织内自由基的生成,与自由基清除剂联合应用疗效更加显著,可广泛用于脑梗死的临床治疗.

作者：刘松岩；邬巍；庞玉春；陈宇宏；李新刊期： 2002年第03期
端粒、端粒酶与消化道肿瘤

端粒的结构、功能,端粒酶的结构、功能及在癌变中的作用使之成为当前研究的热点.本文就端粒、端粒酶及其在消化道肿瘤中的表达、端粒酶检测及端粒酶抑制剂等方面做一综述.1 端粒与端粒酶1.1 端粒端粒是位于线形染色体末端的一种保护结构,Muller和Mcclintock在30、40年代就认识到了染色体的端粒.

作者：杜松涛；刘维藩刊期： 2002年第03期