马靖;殷敏智;沈萍;陈洁枫;金晓婷;张忠德
目的 观察miR-21抑制剂在5-氟尿嘧啶(5-FU)抑制肠癌细胞增殖中的作用,并探讨其分子机制.方法 采用qRT-PCR技术检测肠癌组织中miR-21的表达;应用CCK-8试剂盒检测肠癌细胞的增殖活力;运用Western blot法检测细胞中PTEN和AKT的磷酸化表达水平.结果 肠癌组织中,miR-21的表达高于正常大肠组织;利用miR-21抑制剂联合5-FU处理肠癌细胞HT-29和LoVo,细胞增殖活力显著低于单独使用5-FU处理组(P <0.001);Western blot检测结果表明:miR-21抑制剂联合5-FU处理细胞后,抑癌基因PTEN的表达水平升高,AKT的磷酸化水平降低.结论 miR-21抑制剂可显著增强肠癌细胞对5-FU的敏感性.
作者:龙卫国;郑芳;丁伟;王耀辉;孙军锁;吴建农 刊期: 2014年第02期
患者男性,33岁,5天前进食后出现右上腹疼痛,伴肩背部放射痛.遂去当地医院就诊,腹部B超:脂肪肝,胆囊炎;诊断为“胆囊炎”,并积极予以补液抗炎、抑酸等对症治疗,症状仍未缓解,遂来我院就诊.查体:生命体征平稳,巩膜无黄染;腹稍平坦,左右对称,无静脉曲张,未见胃肠蠕动波;全腹软,未扪及肿块,肝脾肋下未触及,右上腹压痛,无明显反跳痛,墨菲征阴性.辅助检查:腹部B超:轻度脂肪肝,胆囊炎.上腹部CT:胆囊炎,肝内胆管扩张.当日查血常规:嗜酸细胞百分比55.5%(0.5%~5%),嗜酸细胞计数6.79×109个/L[(0.2 ~0.5)×109个/L].生化检查:谷丙转氨酶484 U/L(0 ~55 U/L),谷草转氨酶471 U/L(0 ~37 U/L),谷氨酰转酞酶1 090 U/L(8 ~58 U/L),总胆红素137.4μmol/L(3~21 μmol/L),直接胆红素102.5μmol/L(0~ 7.5 μmol/L).术中见胆囊张力大、囊壁水肿增厚明显,胆道狭窄,胆囊三角处炎症水肿,胆囊内胆泥淤积,肝脏呈胆汁淤积样改变,肝内各级胆管见大量蜘蛛网样粗细不一纤维样物.胆囊及胆总管未见结石及虫卵,行胆囊切除术并在肝脏边缘取组织行病理活检.
作者:刘香;曹广亚;欧阳雪 刊期: 2014年第02期
目的 探讨细胞蜡块在晚期腺癌诊断及肺腺癌个体化治疗中的应用价值.方法 收集细胞学制片后剩余的细胞标本制备蜡块,行HE染色;同时选择TTF1、Napsin A、CK7、CK20、Villin、CDX2等抗体,对来源不明的肿瘤细胞进行免疫组化标记,并对明确诊断肺腺癌的病例,采用ARMS法检测EGFR基因突变.结果 72例患者中,64例有恶性细胞,8例有异型腺样细胞.64例恶性细胞中腺癌50例,鳞状细胞癌4例,小细胞癌8例,膀胱癌1例,白血病1例.不同组织类型的肿瘤细胞在石蜡切片中具有特征性表现,腺癌细胞呈腺样、乳头状或单个散在排列;鳞状细胞癌呈典型组织学表现,可见细胞间桥;小细胞癌的形态与细胞涂片相似.50例腺癌的免疫组化结果及临床证实为肺腺癌29例,胃腺癌4例,大肠癌3例,卵巢腺癌5例,乳腺癌2例,胆囊癌1例,睾丸卵黄囊瘤转移1例;1例临床提示肺占位,但免疫组化标记不表达任何抗体;4例起源不明.8例异型腺样细胞的免疫组化标记显示异型细胞为增生的间皮细胞.29例肺腺癌中,22例采用ARMS法进行EGFR基因检测,结果显示EXON-19 E746_A750del(1)(2)突变和EXON-21 L858R突变各5例,突变阳性率为45.4% (10/22).结论 利用细胞学剩余标本制备蜡块,结合免疫组化标记和分子病理技术有助于晚期肿瘤的诊断,并为个体化治疗方案的选择提供帮助.
作者:张丽华;王雪晴;王国庆;徐迎红;郝悦悦 刊期: 2014年第02期
患者男性,54岁.因“发现后纵隔肿物半个月,无明显诱因突发胸痛半天”入院.查体:右侧胸廓略饱满,右后背部叩击痛,双肺呼吸音清,未闻及明显干湿哕音.实验室检查:血红蛋白125 g/L,红细胞3.84×1012/L,白细胞6.9×109/L,血小板161×109/L.生化检查:总胆红素58.70 μmol/L,直接胆红素11.79 μmol/L,尿酸457.7μmol/L,余无异常.CT检查示:T9-T11水平脊柱右侧后纵隔旁见一大小28 mm×70 mm长椭圆形高密度影,边缘清,下缘分离,呈结节状改变(图1),增强扫描有强化.直肠远端内部可见小结节样软组织密度影,增强后可见强化.
作者:张梅;黄文斌;郑后珍;袁菊;史志丹;张雁 刊期: 2014年第02期
目的 探讨新生儿胰岛母细胞增生症伴高胰岛素血症低血糖的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断.方法 对2例新生儿胰岛母细胞增生症行HE、免疫组化染色,光镜下观察,并复习相关文献.结果 HE染色见病变胰腺组织中,弥漫或局灶胰岛数量增多,部分体积增大,形状及大小不规则.免疫组化染色示大量神经内分泌标记阳性的细胞分布于胰岛或单个散在分布于胰腺组织.结论 新生儿胰岛母细胞增生症伴有高胰岛素低血糖,临床及影像学诊断困难,组织病理学检查可确诊,能够给予及时正确的治疗,挽救新生儿生命.
作者:马靖;殷敏智;沈萍;陈洁枫;金晓婷;张忠德 刊期: 2014年第02期
目的 探讨胰岛素生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF-1 R)、IGFBP-3在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)发病机制中的作用和临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测183例CRC组织和61例正常结直肠黏膜中IGF-1R、IGFBP-3的表达.结果 (1)IGF-1R在CRC中的阳性率(69.4%)显著高于对照组(26.2%),P<0.001;IGFBP-3在CRC中的阳性率(78.1%)显著低于对照组(95.1%),P =0.003;(2)IGF-1R在CRC中的表达与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移均呈正相关(P<0.05);IGFBP-3在CRC中的表达与CRC TNM分期、淋巴结转移均呈负相关(P<0.05),与其它因素无关(P>0.05);(3)IGF-1R与IGFBP-3的表达呈负相关(P=0.005).结论 IGF-1R和IGFBP-3在CRC中的表达与多项临床病理参数具有相关性.联合检测IGF-1R、IGFBP-3有望成为CRC评估预后的生物学指标,为CRC的治疗提供新靶点.
作者:康军朋;郭淑芹;张云良;朱春英;张英福;李倩;候燕燕 刊期: 2014年第02期
患者女性,41岁,因“阴道排液伴异味,性交后阴道出血2个月”入院.B超示:子宫腔及子宫颈内中等回声,性质待定.遂行子宫腔诊刮术,诊刮组织病理检查提示:子宫内膜腺癌.近2天右下腹胀痛,为求进一步治疗而入院.术中所见:子宫如孕6周大小,表面光滑,右侧输卵管壶腹部肿大增粗,左侧输卵管及双侧卵巢外观正常.术中探查右半结肠回盲部可见一7cm×6cm×5 cm大小肿物,肝、脾、胃、肾及大网膜表面光滑无结节.考虑回盲部恶性肿瘤可能性大,行筋膜外子宫切除+双侧附件切除+腹膜后淋巴结清扫术+右半结肠切除术.
作者:刘洪博;韩轶超;张文超;张宪军;宋永祯 刊期: 2014年第02期
患者女性,70岁.因“头痛6个月伴复视呕吐3个月”入院.有糖尿病病史6年,患者6个月前无明显诱因下渐感头痛,以左侧顶部明显,近3个月逐渐加重,伴有反复呕吐,双眼视力下降,有复视现象.外院头颅MRI示鞍区占位,病程中患者无四肢抽搐,无意识障碍.临床诊断拟为垂体瘤,行肿块切除术.
作者:杜军;李恒;王志华 刊期: 2014年第02期
增生性肌炎是一种自限性、良性反应增生性疾病.病变常发生于横纹肌间质,主要影响躯干及肩胛带的扁平肌,特别是胸肌、背阔肌等.由于病变发展快,常在数天~2周内发展到高峰,且病变均由不成熟的纤维母细胞样的梭形细胞构成,并可见核分裂象,故临床及病理诊断方面均可能误诊为恶性肿瘤.而细针吸取细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)作为一种简便、快速且相对微创的病理学检查方法,对大多数增生性肌炎可进行准确诊断,以减少和避免不必要的手术.本文回顾性分析12例增生性肌炎应用细针吸取细胞学诊断的特点及价值,现报道如下.
作者:龚平;张玲;郭华雄 刊期: 2014年第02期
细针吸取细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)是一种简便快速、创伤性小并较为准确的细胞病理学诊断方法.该方法通过细针吸取采集标本,对人体实质性器官的肿瘤及非肿瘤性病变的诊断及筛查有极大的临床意义.由于其具有诊断准确、快速、简单易行、创伤性小等特点,很容易被广大患者接受.传统做法通过离心、涂片、染色的切片进行基本初筛,目前应用很广泛,但仍存在诸多不足之处,尤其在免疫细胞化学和原位杂交检测中,如EB病毒检测(EBER检测)应用中,传统涂片的细胞有时较少,易出现假阴性;涂片厚薄不均而致阳性物质定位不清出现假阳性;更不能连续切片及永久性保留标本[1];细胞学涂片面积大,容易造成试剂浪费;细胞蜡块可弥补上述不足.细针穿刺微小组织的双重包埋制片法已有报道[2].因此,本文采用细针吸取的细胞标本利用Histogel(组织胶)-石蜡双重包埋切片法,效果良好,提高了淋巴组织病变的确诊率,为临床提供较为准确、及时的治疗方案.现报道如下.
作者:万丽;王小玉;卢山珊;何秋香 刊期: 2014年第02期
目的 探讨不一致性淋巴瘤的临床病理学特征.方法 对1例不一致性前纵隔弥漫性大B细胞淋巴瘤和右锁骨上淋巴结结节硬化型Hodgkin淋巴瘤的病理特征进行观察并复习相关文献.结果 患者女性,34岁,前纵隔无痛性包块及右锁骨上淋巴结肿大.镜下观察前者中等大小或较大的瘤细胞呈弥漫状排列,胞质丰富淡染,核呈圆形泡状,核分裂象多见;后者淋巴结由胶原纤维分隔成结节状,内见散在的陷窝细胞、少量R-S细胞、爆米花细胞等,背景为大量炎细胞.免疫表型:前者Pax-5、CD20、CD79a均呈强阳性,Ki-67增殖指数为80%;后者Pax-5、CD30肿瘤细胞均呈强阳性,Ki-67增殖指数为60%,CD15部分肿瘤细胞呈阳性.结论 不一致性淋巴瘤极为罕见,表现形式多样,临床特征及病理学特征因各个部位的淋巴瘤类型不同而各异,治疗方案及预后根据恶性程度更高的类型而定.
作者:王建容;张醇;陈春燕;阎晓初 刊期: 2014年第02期
1 临床资料本次读片资料由第四军医大学西京医院病理科提供,通讯读片编号B6-16.患者女性,56岁,1年前发现右乳外上方有一似“花生米”大小、可活动、无疼痛的包块,当地医院行包块切除术.4个月后患者右侧腋下出现一包块,3 cm×2 cm大小,与周围界清,可活动,患者伴隐痛不适,遂来我院就诊.乳腺钼靶摄片:双侧乳腺体退化不全,内可见点状钙化,右侧乳腺外上方有类圆形高密度肿块影,腋窝见肿大淋巴结.
作者:韩铭;郭双平 刊期: 2014年第02期
目的 探讨与胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)耐药相关的微小RNA(miRNA).方法 收集4例伊玛替尼耐药GIST和3例恶性GIST,运用Agilent人miRNA寡核苷酸基因芯片V3.0(955个已知miRNA)进行检测,选取耐药组与恶性组间3个差异表达明显的miRNA,再应用RT-PCR技术在21个扩大样本中验证基因芯片筛选的结果.结果 耐药组与恶性组相差倍数2倍以上(P<0.05),差异表达的miRNA有13个,上调者5个,下调者8个.其中差异明显的3个分别为miR-15a、miR-1280、miR-320a,前者在耐药组中上调,后两者下调.RT-PCR技术在扩大样本中验证后发现miR-320a在两组中的差异与基因芯片的结果基本相符.结论 通过miRNA芯片初步筛选和在扩大样本中的验证,发现miR-320a在耐药组与恶性组之间表达差异有显著性,提示miR-320a可能与GIST在甲磺酸伊玛替尼治疗过程中的耐药性有关.
作者:石园;王翠众;侯英勇;何德明;沈坤堂;谭云山 刊期: 2014年第02期
患者男性,75岁,因“喉癌肿物切除术后7年,呼吸困难2个月”入院.纤维喉镜检查示:双侧声带有菜花状肿物.颈部增强CT示:喉部软组织占位,双侧颈部多发肿大淋巴结.临床诊断:喉癌术后复发.临床摘取右侧颈部肿大淋巴结2枚送检.
作者:刘晓刚;蔡辉;吴艳;王丽宁;马郁琳;薛慧忠 刊期: 2014年第02期
目的 探讨伴有性索样分化的子宫内膜间质肉瘤(endometrial stromal sarcoma,ESS)的临床病理学特征、免疫表型及鉴别诊断.方法 对1例发生在子宫、卵巢、盆腔的伴有广泛性索样分化的ESS进行组织学观察、免疫组化标记并复习相关文献.结果 患者不规则阴道出血、自觉下腹包块1月余.镜检:肿瘤细胞呈浸润性生长,大小一致,排列紧密,呈短梭形或卵圆形,胞质少,浅伊红色,胞界不清,胞核卵圆形或梭形,核分裂象可见< 10个/10 HPF,瘤组织内可见丰富的子宫内膜螺旋样小动脉,未见坏死.灶性区伴少量平滑肌细胞分化.部分肿瘤细胞大小较一致,核卵圆形,呈互相吻合的梁状、索状及小巢状排列,类似性索分化.免疫表型:经典ESS区域CD10弥漫阳性,SMA及desmin阴性;性索样分化区CD99阳性,CD10阴性.结论 伴有性索样分化的ESS为低度恶性肿瘤,预后良好,诊断主要依靠病理学检查及免疫表型.治疗以手术切除为主,术后需密切随访.
作者:蹇顺海;文彬;黄一凡;刘钧 刊期: 2014年第02期
目的 探讨LASS2/TMSG-1基因沉默对PC-3M-2B4细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制.方法 将实验分为3组:空白对照组(仅转染PBS的PC-3M-2B4细胞)、无关阴性对照siRNA组及LASS2/TMSG-1 siRNA转染组.首先针对LASS2/TMSG-1基因,设计并合成siRNA;在脂质体介导下瞬时转染人前列腺癌PC-3M-2B4细胞24h后分别采用Western blot 和RT-PCR技术检测细胞内LASS2/TMSG-1蛋白及ATP6L mRNA表达水平;使用BCECF AM H+敏感荧光探针检测转染24、36、48、96 h后3组细胞的细胞内H+浓度;用MTT法检测细胞增殖;划痕修复实验和Transwell体外侵袭实验分别检测PC-3M-2B4细胞的迁移和侵袭能力.结果 转染LASS2/TMSG-1 siRNA 24 h后,LASS2/TMSG-1 siRNA组LASS2/TMSG-1蛋白表达与对照组相比下降65%,ATP6L mRNA表达水平与对照组比较提高75%.通过BCECF AM荧光探针检测LASS2/TMSG-1 siR-NA转染组细胞内H+浓度明显下降,且与空白对照组及无关阴性对照siRNA组相比,差异有统计学意义(P<0.05).MTT法检测显示,PC-3M-2B4细胞在转染24、48 h后,3组细胞生长速度无明显差异(P>0.05);转染72 h后LASS2/TMSG-1 siRNA转染组细胞生长速度明显升高,与空白对照组、无关阴性对照siRNA组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).划痕修复试验和Transwell体外侵袭实验显示,转染LASS2/TMSG-1 siRNA 24 h后,与空白对照组及无关阴性对照siRNA组相比,能显著促进细胞迁移和侵袭能力(P<0.05).结论 体外合成的siRNA能有效沉默LASS2/TMSG-1基因表达,同时上调V-ATPase质子泵中关键性亚基—ATP6L mRNA的表达水平,且基因沉默后其细胞内H+浓度下降,提示LASS2/TMSG-1基因可能与ATP6L相互作用、共同参与对细胞内pH值的影响,导致肿瘤细胞内外微环境的改变并影响肿瘤细胞的生物学行为,如增殖、迁移及侵袭能力.
作者:徐晓艳 刊期: 2014年第02期
目的 探讨原发性结肠透明细胞腺癌(clear cell adenocarcinoma,CCA)的临床病理特征、免疫表型及鉴别诊断.方法 对1例原发性结肠CCA临床特征、病理学形态和免疫表型进行分析,并复习相关文献.另选取5例经典结肠管状腺癌和5例肾透明细胞癌作为对照.结果 患者男性,56岁,临床因黑便入院.全身检查未见结肠外其他器官占位性病变.结肠肿瘤是位于降结肠与乙状结肠交界处的隆起型肿物,肿物周围伴息肉样隆起,镜下见肿瘤由胞界清楚、胞质丰富的透明细胞组成,肿瘤细胞长柱状或多边形,胞质丰富,透明或空泡状,细胞核多位于基底部,胞核卵圆形或多角形、泡状,部分可见较明显的核仁.瘤细胞呈腺管状排列或相互融合呈筛状结构,部分瘤巢中央可见坏死.肿瘤侵及肠壁黏膜下层邻近肌层,未见脉管内癌栓,未见肠周淋巴结转移.免疫表型:CK20、CEA、CDX-2均呈阳性,CK7、CD10、RCCa、Pax-2、TTF-1均呈阴性.错配修复(mis-match repair,MMR)蛋白表达未见缺失(MLH1、MSH6、MSH2、PMS2均呈阳性).病理诊断为原发性结肠CCA.结论 原发性结肠CCA是一种非常少见的结肠癌,与普通结直肠腺癌及其他器官的透明细胞癌有某些形态上的重叠,免疫组化染色有助于诊断和鉴别诊断.
作者:王云帆;赵晓丽;王淑芳;马淑芳;饶晓松 刊期: 2014年第02期
在常规石蜡切片组织内已知抗原的检测中,利用酶消化打开抗原决定族以暴露被封闭的抗原,是免疫组化染色中常用的方法,亦是关键步骤.但不同的一抗要求的修复方法、温度及pH值不同,如CK7、CK20、EGFR、Laminin等需要胃酶消化的一抗做免疫组化染色时,底物pH值对结果影响显著.为此,作者在工作中进行探索,以了解上述抗体佳pH值.
作者:胡延涛;李从洋 刊期: 2014年第02期
目的 建立对树鼩枯否细胞(Kuffer cells,KCs)进行分离、原代培养和鉴定的方法.方法 经肝活检手术分别获取6只树鼩的肝组织,后采用胶原酶体外灌注结合机械法分离肝脏细胞,经差速离心法、Percoll梯度密度离心法及贴壁法分离、纯化KCs后进行原代培养,后通过细胞免疫组化、墨汁吞噬实验及透射电镜对KCs进行鉴定.结果 树鼩肝组织分离获得的KCs数量为(1.2±0.2) ×106个/g肝组织,细胞活力为90%,细胞纯度达85%以上.结论 本组建立的胶原酶体外灌注结合机械分离树鼩KCs的方法稳定实用,为同一研究个体的KCs进行多次分离培养和动态观察奠定基础.
作者:阮萍;杨春;欧超;骆成漂;秦虹;孙雯;李瑗 刊期: 2014年第02期
目的 检测自噬相关基因Beclin1、LC3和多药耐药基因LRP、GST-πr、TopoⅡ在大肠癌中的表达,探讨自噬对大肠癌多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的影响.方法 应用免疫组化EnVision法检测202例大肠癌中Beclin1、LC3、LRP、GST-π和TopoⅡ的表达,并结合临床病理参数进行分析.结果 Beclin1和LC3蛋白在大肠癌中的阳性率(90.10%、86.63%)均明显高于正常大肠黏膜(48.0%、40.0%),差异具有统计学意义(P<0.05),且LC3蛋白在中+低分化大肠癌中的表达(92.52%、90.00%)高于高分化大肠癌(72.73%),在淋巴结转移组的表达(94.31%)高于无淋巴结转移组(80.70%),差异具有统计学意义(P<0.05).LRP、GST-π和TopoⅡ在大肠癌中的阳性率分别为94.55%、71.78%和97.03%,且TopoⅡ在大肠癌男性患者中的表达(100%)略高于女性患者(93.88%),差异具有统计学意义(P<0.05).经Spearman相关性分析,在大肠癌中,Be-clin1蛋白表达与LC3、LRP及GST-π蛋白表达均呈正相关,相关系数分别为0.552、0.140和0.160(P <0.05);LC3蛋白表达与LRP、GST-π蛋白表达均呈正相关,相关系数分别为0.162和0.142(P <0.05).Kaplan-Meier生存分析显示,Beclin1阳性、LC3阳性、GST-π阴性、无淋巴结转移者5年生存率高于Beclin1阴性、LC3阴性、GST-π阳性及淋巴结转移者,多因素分析显示,LC3、GST-π和淋巴结转移是影响大肠癌患者术后生存的独立因素.结论 Beclin1、LC3在大肠癌组织中表达增加,可能与大肠癌的发生、发展及MDR有关;检测Beclin1、LC3蛋白表达对判断大肠癌的预后以及合理筛选有效的化疗药物具有重要参考价值.
作者:胡金龙;何双;孙晨博;吴淑华 刊期: 2014年第02期