学术投稿

浅谈原位杂交的体会

蒋海鹰;颜亚晖;郑晖

关键词:原位分子杂交, 实验条件, 技术原理, 操作过程, 验证, 控制, 方法
摘要:原位分子杂交技术原理十分简单,但在操作过程中,实验条件的控制对结果的影响甚大,作者在大量的实际工作中摸索出一套比较成熟的方法,并经多次验证,结果满意,现介绍如下.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 肾门微小高分化脂肪肉瘤1例

    患者男,35岁.因双腰部间歇性胀痛2周入院,无尿路刺激症.查体:双肾叩击痛阳性.静脉肾盂造影提示:双肾积水,以右侧为甚.右侧肾逆行肾盂造影提示:右侧输尿管中上段迂曲狭窄伴右肾积水.抗结核治疗1周,患者疼痛加剧,于1999年7月21日行右肾切除术,术中仔细查看腹膜后及肾周脂肪囊均未触及明确的肿块.手术后第1天少尿,之后4天无尿,患者自动出院.

    作者:陈美英;杨生兰;哈英娣 刊期: 2001年第06期

  • 表面活性剂对结核杆菌染色效果的影响

    作者在对传统的Ziehl-Neelsen抗酸染色法改良的基础上,研究不同浓度的TritonX-100、Tween-20、Tween-80 3种表面活性剂对结核杆菌着色的影响,以期获得更佳的显示结核杆菌效果的方法.

    作者:卢立军;眭翔;王一平;韩勇;粱晓俐 刊期: 2001年第06期

  • 膀胱炎性假瘤——假肉瘤性肌纤维母细胞增生

    目的:探讨膀胱炎性假瘤的病理学特征.方法:描述4例膀胱炎性假瘤的临床病理及免疫组化特征并复习有关文献.结果: 男女各2例患者,年龄分别为36、27、36、8岁.肿瘤直径分别为3、4、3及5 cm.主要临床症状为肉眼血尿或排尿困难.组织学检查:肿瘤主要成分为梭形细胞, 胞质嗜酸性,有大的卵圆形至梭形泡状核,有1~2个明显的核仁.分裂象少见,无不典型核分裂.3例免疫表型:3例Vim呈弥漫阳性;α-SMA(2例)及MSA(1例)局部少数细胞阳性;2例AE1/AE3多数细胞呈阳性.Des、Myo及EMA均阴性.3例术后分别随访40、16、14个月无复发,1例为近期病例.结论:病损为一种良性、非肿瘤性肌纤维母细胞增殖,要避免误诊为恶性.

    作者:刘群;张传森;刘风军;李凤芝;高钟禹 刊期: 2001年第06期

  • 软组织黏液样肿瘤一些少见和新类型的病理诊断

    软组织黏液样肿瘤也是病理诊断容易误诊的一大类异质性肿瘤.事实上,此类肿瘤的诊断有时较其它细胞形态的软组织肿瘤更困难,特别是有时良恶性难分.基于此故,笔者复习文献简介如下.

    作者:郭立新 刊期: 2001年第06期

  • 乳腺癌组织中β1 integrin与MMP-2表达的临床病理意义

    目的:探讨β1 integrin与MMP-2在乳腺癌组织中表达的临床病理意义及相互联系.方法:采用S-P法对乳腺癌组织进行β1 integrin和MMP-2单克隆抗体的免疫组化染色.结果:本组乳腺癌β1 integrin和MMP-2表达率分别为84.0%(80/94例)和94.8%(92/97例).β1 integrin的表达与浸润性导管癌的病理分级有关,Ⅰ、Ⅱ级组其中度以上表达高于Ⅲ级组(χ2=3.92,P<0.05).本组乳腺癌β1 integrin表达与MMP-2的表达之间有明显的相关性,在β1 integrin 2+强度以上表达者中,其MMP-2中强度以上表达率高于1+以下者(χ2=4.70 ,P<0.05).结论:结果显示β1 integrin的表达强度与乳腺癌细胞的粘附性有很大的关系, 并且β1 integrin与MMP之间的活动可能有内在的联系.

    作者:皋岚湘;刘光;丁华野;邓永江 刊期: 2001年第06期

  • 先天性腹壁缺损36例尸体解剖和组织学观察

    目的:探讨腹壁缺损的病理形态学变化.方法:对 36 例腹壁缺损进行尸体解剖,按照 Hartwig 方法分型,并对 24例不同组织和胎盘进行组织学观察.结果:36例腹壁缺损多伴有其它畸形,包括肢体、颜面、神经管、泌尿生殖及消化和心血管系统.腹壁缺损皮肤-膜移行区为复层扁平上皮逐渐向单层上皮过渡,间质由丰富胶原纤维变为疏松的结缔组织,证实了羊膜-外胚层过渡带的存在.5例肾脏和1例脑组织中发现钙化病灶.胎盘表现绒毛发育不同步,绒毛间质水肿或纤维化,有血管增生、血栓形成等变化,部分病例提示有绒毛炎.13例孕母曾有TORCH感染,11例胎儿脏器TORCH PCR-DNA扩增检测阳性.结论:在胚胎腹壁形成期, 如果受到某些致畸因素的干扰,除发生腹壁缺损外,还将出现多种复杂畸形.腹壁缺损的致畸因素不能除外TORCH如巨细胞病毒等感染的可能.

    作者:武卫平;朱清於 刊期: 2001年第06期

  • 三氧化二砷诱导人结肠癌LoVo细胞凋亡的细胞生物学研究

    目的:观察三氧化二砷(As2O3)对结肠癌LoVo细胞体外生长的影响.方法: 选用不同剂量As2O3处理LoVo细胞后,通过光镜、电镜、MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞术研究As2O3 对LoVo细胞生长的影响.结果: As2O3具有抑制LoVo细胞生长和其凋亡的作用,这种作用主要在低浓度(0.5~2.0 μmol/L)产生,而在高浓度(5.0~10.0 μmol/L)可引起细胞死亡.结论: As2O3有明显抑制LoVo 细胞生长的作用,并诱导细胞凋亡,其作用机制尚不清楚.

    作者:魏晓莹;郑杰;张东生;张建民 刊期: 2001年第06期

  • 激光扫描共聚焦显微镜观察免疫组化染色标本

    激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy ,LSCM)是近代发展起来的一种新型高精度的显微镜系统,它在显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,对于组织内或细胞内部微细结构的观察以及生物样品的定性、定量和定位观察均有很大的优越性[1,2].目前文献报道多限于活细胞生物样品的检测,对于固定的组织和细胞,特别是免疫组化染色后标本的观察很少涉及.作者拟就免疫组化染色后标本在激光扫描共聚焦显微镜的观察作一简单介绍.

    作者:吴名耀;吴贤英;郑瑞明;李乔山 刊期: 2001年第06期

  • 小儿Alport综合征的临床病理分析

    目的:探讨小儿遗传性肾炎(Alport's syndrome,AS)的临床病理尤其是超微病理特征和鉴别诊断.方法:收集我科小儿肾活检标本820例,对其中诊断为AS的7例肾活检进行了光镜、特殊染色(PAS、PASM和Masson染色)、免疫组化(IgA、IgM、IgG和补体C3)和电镜的系统观察,着重对其超微病理进行了详尽的观测, 并结合临床病史进行了分析.结果:7例小儿AS的肾活检光镜下主要表现为局灶性系膜细胞增生, 间质有泡沫细胞形成.电镜下小球基膜可见增厚、变薄及两者相间改变,见特征性的基膜板层状分裂、蓝编状及花纹状改变,其内常有圆形的微粒,小球内未见电子致密物沉着,免疫组化小球内未见明确的免疫复合物沉着.结论:电镜是诊断AS的重要手段,AS的诊断主要通过电镜,但必须强调要与常规的病理组织学、免疫组化,尤其是临床病史紧密结合方可确诊.

    作者:马捷;张泰和;周晓军;陆珍凤;孙桂勤 刊期: 2001年第06期

  • 细胞膜之间的蛋白颗粒计数

    众所皆知,细胞膜之间的膜蛋白颗粒即脂质双分子中镶嵌的蛋白微粒,这些微粒用常规透射电镜技术则无法观察到.自1970年电镜冷冻蚀刻法(freeze etching)发展以来,已成为研究包括膜间蛋白颗粒、细胞表面连接在内等生物膜结构的重要方法[1].作者自1993年以来利用该技术分别对正常人与Duchenne型肌营养不良症(DMD)及其携带者的红细胞及骨骼肌细胞膜间蛋白颗粒进行定量计数研究[2,3],观察其在不同状态下颗粒数的变化,以进一步阐明其发病机制.本文主要探讨影响蛋白颗粒计数的因素及其意义.因各组的实验、颗粒计数及统计方法都相似,且该病的骨骼肌与红细胞结果一致,而红细胞具有取材方便等优点[4],故以正常人与DMD携带者红细胞之间的膜蛋白颗粒数比较为例详加介绍.

    作者:钟秀容;陈文列;吴翊钦;林曦;陈莲云;慕容慎行;林珉妮;王柠 刊期: 2001年第06期

  • 微小组织冷冻切片方法的改进

    快速冷冻切片是一种在术中做出病理诊断以便决定进一步治疗方案的快速诊断技术.然而在临床实践中,常因组织微小,制作不出良好的切片而难以作出病理诊断.我们在实践工作中摸索出一种快速简便的微小组织冷冻切片方法,介绍如下.

    作者:朱玉红;吕增华;闫曰莲 刊期: 2001年第06期

  • p170、p27在非小细胞肺癌的表达及其与化疗的关系

    目的:探讨p170、p27在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及化疗对上述两种基因表达的影响.方法:采用免疫组化S-P法检测了3组共56例NSCLC(其中腺癌26例,鳞癌30例)患者p170、p27的表达.结果:(1)未化疗组(A组)p170阳性率为50%(10/20);化疗后(B组)阳性率为77.78%(14/18);未化疗但经随访了解以后化疗效果不佳组(C组)为88.89%(16/18).B、C两组与A组比较差异均有显著性(P<0.01,P<0.05).(2)p27 3组差异无显著性,但肺鳞癌阳性指数(LI)与腺癌及癌周正常支气管上皮3者差异有显著性(P<0.05).结论:检测肺癌组织中p170表达对肺癌化疗有重要指导意义,并可提示疗效.p27基因表达与化疗无关,但与组织类型有关.

    作者:卢山珊;朱启建;王群姬 刊期: 2001年第06期

  • 血管内淋巴瘤

    目的:探讨血管内淋巴瘤的临床病理特征. 方法:对1例血管内淋巴瘤进行免疫表型分析及原位杂交检测与EB病毒的关系,并文献复习. 结果:女性, 48岁,不明原因发热伴体重下降3个月,CT扫描示子宫肿块而行子宫加双侧附件切除.病理学检查发现瘤细胞位于血管内,伴少许管周浸润.瘤细胞免疫表型CD45(LCA)和CD20(L26)呈阳性表达.原位杂交显示EBERs阴性.患者经CHOP联合化疗后获得完全缓解.结论:血管内淋巴瘤是一种极罕见的B细胞肿瘤,此瘤的诊断只能依赖病理学检查,治疗上应予以积极联合化疗.

    作者:刘艳辉;庄恒国;林华欢;林秋雄;骆新兰 刊期: 2001年第06期

  • 寒区野外家兔烧冻复合伤睾丸病变观察

    在高寒地区野外常见意外事故烧伤后再发冻伤,形成烧冻复合伤.由于烧伤或冻伤的程度不同,除了引起局部组织不同程度的损伤外,同时可导致机体其它脏器的损害而合并一系列并发症[1].作者介绍实验动物(家兔)在野外寒冷自然条件下,造成烧冻复合伤时,睾丸的组织学变化,为临床早期救治提供依据.

    作者:隆孝才;王昌成;朱海荣;李启华;龚正禄;马海 刊期: 2001年第06期

  • 消除组织切片中甲醛色素方法的探讨

    在组织切片中,常见体内各种生理性和病理性色素以及组织离体后经化学试剂溶液的固定、染色过程中产生的各种色素,如甲醛色素、汞、铬和苏木精的沉着物等.在组织切片中这些色素多不溶于水、乙醇和二甲苯中.

    作者:肖志芸 刊期: 2001年第06期

  • 细支气管肺泡癌的临床病理

    流行病学研究显示肺腺癌正越来越常见,在某些地区已成为常见的类型[1,2].细支气管肺泡癌为腺癌的特殊类型,具有独特的临床病理特征,文献报道占肺癌的1%~9%,且呈逐渐增加趋势.

    作者:袁键群;许敬尧 刊期: 2001年第06期

  • 子宫内膜间质肉瘤23例临床病理分析

    目的:分析子宫内膜间质肉瘤临床病理学特点.方法:收集子宫内膜间质肉瘤23例资料并进行回顾性研究,对其形态学变化进行观察并与随访资料进行对比研究.结果:描述了子宫内膜间质肉瘤侵袭性生长、瘤细胞异型性、核分裂象等组织学特性;提出子宫内膜间质肉瘤的合理分级及与其它疾病的鉴别诊断要点.结论:对子宫内膜间质肉瘤的病理诊断、分级、预后有实际意义.

    作者:彭朝龙 刊期: 2001年第06期

  • 中等分化肝细胞肝癌病理形态特征、PCNA和DNA指数与预后的关系

    肝细胞肝癌(HCC)术后转移和复发率高, 肿瘤细胞的分化是影响预后的重要原因,但即使同为中等分化的HCC,患者的生存期差异亦很大。我们收集51例具随访资料的中等分化的HCC病例,对其病理形态特征、PCNA指数、DNA指数进行综合分析。

    作者:曾文姣;张农;许杰;周信达;张月娥 刊期: 2001年第06期

  • 分化抗原和细胞因子受体在肺癌中表达的意义

    近年来研究发现所谓同一组织来源的肿瘤,实是形态、功能和代谢各异的多种细胞群体混合物,而不同组织来源的肿瘤却在某种程度上呈现类似的形态与功能特征.作者用免疫组化方法检测了49例肺癌的鳞分化(S)、腺分化(A)、神经内分泌分化(NE)3种分化抗原--细胞角蛋白17(CK17)、细胞角蛋白18(CK18)、嗜铬素A(CgA)以及表皮细胞生长因子受体(EGFR)的表达,探讨各型肺癌的发生、分化特点以及抗原异质性表达规律.

    作者:杜钺;唐建武;宋波;聂惠玲 刊期: 2001年第06期

  • 用微波的黑色素染色方法

    目前常用Masson-Fontana黑色素染色法效果、着色感观良好,但是其浸染时间太长,需12~18 h,甚至更长的时间,给快速诊断带来诸多不便.作者在日常染色中,以Gomori氨银液代替M-F液配合微波进行染色,操作简便,着色时间短,取得了满意的效果,现介绍如下.

    作者:陈倪勇;梁建中 刊期: 2001年第06期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会