学术投稿

逆转录病毒介导系统感染原代培养人皮肤成纤维细胞

张清华;艾民;蒋知新;沙杭;高毅;卢海

关键词:逆转录病毒, 人皮肤成纤维细胞, 细胞重编程, 诱导多潜能干细胞
摘要:目的 利用包装生产逆转录病毒感染原代培养人皮肤成纤维细胞,为细胞重编程提供技术保证.方法 利用组织块贴壁法体外原代培养人皮肤成纤维细胞.包装生产携带绿色荧光蛋白GFP基因的逆转录病毒上清液.收集逆转录病毒上清液感染原代培养人皮肤成纤维细胞,利用荧光显微镜观察逆转录病毒感染成纤维细胞.结果 体外成功原代培养出人皮肤成纤维细胞.293T细胞包装生产携带GFP基因的逆转录病毒上清液.包装生产后逆转录病毒成功地感染原代培养人皮肤成纤维细胞.结论 逆转录病毒介导系统是人皮肤成纤维细胞重编程的有效基因转移载体.
中国老年学杂志相关文献
  • 逆转录病毒介导系统感染原代培养人皮肤成纤维细胞

    目的 利用包装生产逆转录病毒感染原代培养人皮肤成纤维细胞,为细胞重编程提供技术保证.方法 利用组织块贴壁法体外原代培养人皮肤成纤维细胞.包装生产携带绿色荧光蛋白GFP基因的逆转录病毒上清液.收集逆转录病毒上清液感染原代培养人皮肤成纤维细胞,利用荧光显微镜观察逆转录病毒感染成纤维细胞.结果 体外成功原代培养出人皮肤成纤维细胞.293T细胞包装生产携带GFP基因的逆转录病毒上清液.包装生产后逆转录病毒成功地感染原代培养人皮肤成纤维细胞.结论 逆转录病毒介导系统是人皮肤成纤维细胞重编程的有效基因转移载体.

    作者:张清华;艾民;蒋知新;沙杭;高毅;卢海 刊期: 2012年第11期

  • 重症监护室老年患者急性生理和慢性健康评估评分及其与甲状腺功能五项的相关性

    老龄病人由于各系统器官组织结构及生理功能随增龄而衰退,并且呈进行性不可逆变化,因此,老年人疾病发生、发展和转归均与年轻人不同,其临床表现也有明显特征,容易发生危重症,且预后较差[1].

    作者:欧阳琳;侯粲;伍国宝 刊期: 2012年第11期

  • 太极拳锻炼对老年高血压患者血清TNF-α和IL-6水平的影响

    研究认为细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)参与了高血压病的发生、发展过程[1].本研究观察太极拳锻炼对老年高血压患者血清TNF-α和IL-6水平的影响,探讨其降低血压的作用机制.

    作者:陈辉;周亚娜 刊期: 2012年第11期

  • 碱性成纤维细胞生长因子修复功能及其应用研究进展

    碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是目前已知强的促细胞生成因子,在促血管生成、创伤愈合和组织损伤修复过程中作用巨大,同时也在胚胎发育以及肿瘤的形成过程中有重要的作用[1].

    作者:赵宇;孙立伟;姜锐;申野 刊期: 2012年第11期

  • 阿托伐他汀钙在急性冠脉综合征中应用的研究进展

    急性冠脉综合征(ACS)是一组由急性心肌缺血引起的临床综合征,包括不稳定性心绞痛、急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)、急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI),是造成人类致死、致残的严重心血管事件;其病理基础为冠状动脉内的不稳定斑块破裂,继而血小板活化、血栓形成.

    作者:王立强 刊期: 2012年第11期

  • 无创正压机械通气对急性左心衰老年患者NT-proBNP与白介素6的影响

    目的 评价无创正压机械通气(NPPV)在治疗急性左心衰时,对患者N端前体脑钠肽(NT-proBNP)与白介素6(IL-6)的影响.方法 采用随机分组的方法,将91例急性左心衰患者分为NPPV组和对照组,分别为45例和46例,观察治疗24h后血清NT-proBNP、IL-6与血流动力学、氧动力学参数的变化.结果 治疗24h后,NPPV组患者的NT-proBNP、IL-6、中心静脉压(CVP)水平均较治疗前明显降低(均P<0.05),左室射血分数(LVEF)、动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、氧输送(DO2)及氧耗量(VO2)水平较治疗前明显上升(P<0.05);对照组患者的NT-proBNP、IL-6、CVP水平均较治疗前明显降低(均P<0.01),PaO2、PaCO2和DO2水平较治疗前明显升高(均P<0.01).两组间比较,NPPV组NT-proBNP、IL-6、CVP、PaO2、PaCO2、DO2及VO2改善幅度均明显大于对照组(P<0.05).结论 适当参数的NPPV治疗,可降低急性左心衰患者MT-proBNP及IL-6水平,改善血流动力学及氧动力学.

    作者:蒋宇;俞锐敏;陈芳;赵雅红 刊期: 2012年第11期

  • 降脂通络软胶囊对不稳定型心绞痛患者C反应蛋白的影响

    不稳定型心绞痛(UA)由于其具有独特的病理生理机制及临床预后,如果不能恰当及时的治疗,患者可能发展为急性心肌梗死.而炎症反应在此起着重要作用.目前认为炎症的特异性血清标志物C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)等在急性冠脉综合征(ACS)中增高,对急性冠脉事件的发生有相关性[1].

    作者:李中玮;宋磊 刊期: 2012年第11期

  • 吉林省老年肾结石患者结石成分分析

    目的 初步探讨吉林省老年肾结石患者结石成分及结石分析的临床意义.方法 选取该院2008年9月至2011年5月因肾铸形结石行经皮肾镜钬激光碎石术治疗的105例患者作为研究对象.其中男78例,女27例,年龄50-68岁,男性平均年龄(57.9±12.5)岁,女性平均年龄(62.6±11.3)岁,所有结石标本均采用LIIR型结石红外光谱自动分析仪分析并根据结果指导预防结石复发.选取2006年1月至2008年8月86例行经皮肾镜钬激光碎石术的老年患者作为对照组,该组患者均未行结石成分分析而接受一般的预防指导.结果 在结石总体构成比上,一水草酸钙结石71例(67.62%),碳酸磷灰石结石57例(54.29%),无水尿酸结石11例(10.48%),二水草酸钙结石38例(36.19%),六水磷酸铵镁结石19例(18.09%),尿酸铵结石2例(1.90%),二水磷酸氢钙结石1例(0.95%),一水尿酸钠结石2例(1.90%).在结石的组合成分上,混合性结石76例(72.38%),单一成分结石29例(27.62%).试验组平均随访18.6个月,复发率为8.57%.对照组平均随访24个月,复发率为18.6%,两组间复发率差异有统计学意义.结论 结石成分分析对于了解老年肾结石患者结石成因、预防结石复发具有重要意义.

    作者:管旌旌;胡敬海;王晓庆;王晓雪;芦志华 刊期: 2012年第11期

  • 结直肠癌缺失基因功能区诱导结肠癌细胞凋亡

    目的 检测结直肠癌缺失(DCC)基因功能区转染表达后对结肠癌细胞SW1ll6凋亡的诱导作用.方法 通过脂质体法将含有DCC基因胞内区功能域(3727-3792 bp)的重组表达载体pIRES2-EGFP-DCC转染到结肠癌细胞SWI116,MTT比色法检测细胞增殖情况,TUNEL、AO/EB染色法检测细胞凋亡情况.结果 转染SWl116细胞36 h后,MTT比色法检测结果表明实验组细胞数目低于对照组,并且具有显著性差异;AO/EB染色及TUNEL法检测结果表明实验组有大量凋亡细胞,对照组未见凋亡细胞.结论 DCC基因的胞内功能域(3727-3792 bp)具有诱导结肠癌细胞凋亡的作用.

    作者:张旭浩;焦海展;吴亚冉;张凯峰;门丽慧;赵青;韩博;巩春玲;丛中一 刊期: 2012年第11期

  • 嗅成鞘细胞与神经干细胞共移植对阿尔茨海默病大鼠的治疗作用

    目的 探讨嗅成鞘细胞(OECs)对神经干细胞(NSCs)移植治疗大鼠阿尔茨海默病(AD)的影响.方法 SD大鼠双侧海马注射Aβ1-40,建立AD大鼠模型.实验动物分为4组;NSCs移植组、NSCs与OECs移植组、AD模型组、正常对照组,每组30只.从SD胎鼠(孕16-18 d)取材,在体外分别培养和共培养OECs与NSCs,并将共培养的OECs与NSCs移植于AD大鼠大脑;观察各组大鼠行为学、移植细胞存活、迁移和分化以及宿主脑海马突触素表达的变化.结果 ①行为学测试:NSCs与OECs移植组潜伏期明显缩短、过平台次数明显增加,与NSCs移植组、AD模型组有显著性差异(P<0.05).②根据标记跟踪,植入的NSCs乌OECs大量存活,从注射部位分别向两侧海马区及其周围皮质迁移.③免疫荧光检测:植入NSCs能在AD脑内分化为神经元、神经胶质细胞以及少量胆碱能神经元,NSCs与OECs移植组分化为神经元的分化率13.97%,与NSCs移植组8.35%差异显著(P<0.05).④海马突触素表达:NSCs与OECs移植组IA值高,与NSCs移植组、AD模型组有显著性差异(P<0.05).结论 嗅成鞘细胞通过改善植入神经干细胞在AD脑内的存活、迁移和分化能力以及与宿主脑的联系,提高NSCs移植治疗大鼠AD的效果.

    作者:姚柏春;孙天敏;冯娜;王军;唐慕湘;王金勇;王配军 刊期: 2012年第11期

  • 老年女性尿失禁患者的生活质量及发病影响因素

    目的 调查老年女性尿失禁患者的生活质量,分析影响尿失禁发病的相关因素.方法 2010年3月至2011年5月老年女性尿失禁患者86例为观察组,另选取86例无尿失禁症状的正常人群为对照组.应用尿失禁患者生活质量评价量表(I-QOL)进行生活质量调查,并对影响尿失禁发病的相关因素进行多因素分析.结果 老年女性尿失禁患者生活质量总分与三个维度得分均显著低于对照组(P<0.05);观察组中尿失禁会影响老年女性患者从事家务的能力,会限制其户外锻炼的内容和范围,同时还会影响夜间睡眠、如厕和饮水等日常生活活动.而对照组中偶尔漏尿对日常生活影响不大,两组比较差异显著(P<0.05);体重指数(BMI)、分娩次数、尿路感染、子宫脱垂、收入水平与是否合并慢性呼吸系统疾病是影响老年女性尿失禁发生率的独立因素.结论 老年女性尿失禁会导致其生活质量在一定程度上的下降,临床医护工作者应指导其积极及时就医,早日改善生理状况,提高生活质量.

    作者:李青 刊期: 2012年第11期

  • 糖尿病骨质疏松大鼠AGEs的表达及其与TGF-β1的相关性

    目的 探讨糖尿病骨质疏松大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)的表达情况及其与组织生长因子(TGF)-1β1的相关性.方法 以Sprague-Dawley (SD)大鼠作为实验材料,在实验前大鼠适应性喂养1 w,然后将其随机分为正常对照组(n=12)和糖尿病组(n=12),其中糖尿病组大鼠通过腹腔内注射STZ诱导建立糖尿病骨质疏松动物模型;测定两组大鼠血清中AGEs和TGF-β1的含量.结果 糖尿病组大鼠造模后,血清AGEs含量为(5.81±1.20) U/ml,对照组大鼠血清AGEs含量为(1.28±3.37) U/ml,两组比较差异具有统计学意义(t=6.57,P<0.05).正常对照组大鼠骨组织TGF-β1蛋白表达强且广泛,糖尿病组的TGF-β1表达均散而且淡染,而且糖尿病组的TGF-β1蛋白表达染色平均光密度明显低于对照组,且差异有统计学意义(p<0.05).血清AGEs与TGF-β1呈显著负相关,相关系数为-0.693(P<0.05).结论 糖尿病大鼠血清AGEs含量较对照组明显升高,而且与TGF-β1呈显著负相关,这表明通过抑制AGEs而引起TGF-β1的过表达在糖尿病中起到骨保护的作用.

    作者:单光宇;薛昊罡 刊期: 2012年第11期

  • 国产拉西地平治疗原发性轻中度高血压的Meta分析

    目的 利用Meta分析探讨国产拉西地平治疗原发性高血压的有效性及安全性.方法 计算机检索Cochrane图书馆临床对照试验资料库(2011年第2期)、Ovid-medline全文数据库(1966-2011.06)、PubMed数据库(1948-2011.06)、EMBASE数据库(1966-2011.06)、中国学术文献总库(CNKI)(1993.10—2011.06)、万方数字化期刊库(1998.01-2011.06)及维普数据库(1989~2011.06),手工检索相关文献,按纳入与排除标准选择试验、评价质量,提取资料,并用RevMan4.2软件对数据进行Meta分析.结果 共初检出114篇文献,经筛选终纳入12篇13项关于拉西地平与其他抗高血压药物治疗原发性高血压的文献.同质性检验,有效性:x2=12.72,df=12,P=0.39,合并OR=1.92,95% CI(1.39,2.66),Z=3.95,P<0.0001;安全性:x2=15.55,df=12,P=0.21,合并OR=0.52,95% CI(0.37,0.73),Z=3.75,P=0.0002.Meta分析结果显示拉西地平与其他抗高血压药物总有效率和不良反应发生率的差异有统计学意义.结论 国产拉西地平治疗原发性高血压具有较好的有效性及安全性.

    作者:刘运阳;秦玲;吴海帝;徐国良 刊期: 2012年第11期

  • 紫外线照射对果蝇凋亡相关基因reaper、grim、hid表达的影响

    目的 探讨紫外线照射对果蝇凋亡相关基因reaper(rpr),grim,hid表达的影响.方法 收集8h内羽化果蝇,雌雄分开培养至10日龄,紫外线照射0,0.5,1,1.5,2h.提取果蝇总RNA,运用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测各组果蝇rpr、grim、hid基因的表达.结果 对照组果蝇rpr、grim、hid基因表达较弱,照射后rpr、grim 、hid基因的表达量呈现先增后减的趋势.结论 紫外线照射可增加果蝇凋亡相关基因rpr,grim,hid的表达,可能是其诱导细胞凋亡的分子机制之一,但照射达到一定时间,基因表达减弱,可能是其引起衰老的原因.

    作者:应琼琼;刘婷;顾蔚 刊期: 2012年第11期

  • 益气活血法改善缺血性脑卒中急性期大鼠微循环障碍的机制

    目的 探讨内皮素(ET)、5-羟色胺(5-HT)、D-D二聚体(D-Dimer)、血栓烷素A2(TXA2)、前列环素l2(PGI2)、热休克蛋白70(HSP70) mRNA在缺血性脑卒中急性期(AIS)微循环障碍中的作用机制.方法 选用健康老年SD大鼠,采用多因素复合方法复制气虚血瘀证动物模型,颈总动脉结扎并改良线栓法复制脑缺血动物模型.将60只SD大鼠随机取15只做假手术组;余行AIS模型制备,术后45只随机取15只做模型组,余30只为治疗组.治疗组予腹腔注射黄芪注射液及灯盏细辛注射液,假手术组与模型组腹腔注射等量生理盐水;每日1次,疗程4d.各组大鼠均于治疗前、治疗后0、12、24、48、72、96 h作大鼠神经功能ZeaLonga评分,并于治疗前后检测ET、5-HT、D-Dimer、TXA2、PGI2、HSP70 mRNA水平.结果 治疗组24、48、72、96 h ZeaLonga评分与模型组同一时点评分差异有统计学意义(P<0.05).模型组治疗后的5-HT、TXA2、HSP70 mRNA水平与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05),治疗组治疗后的各指标水平与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后治疗组的ET、D-Dimer、TXA2、HSP70 mRNA水平与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05),治疗后治疗组D-Dimer水平与假手术组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 益气活血法能够改善AIS的整体神经功能评分;ET、5-HT、D-Dimer、TXA2、PGI2、HSP70 mRNA高表达是AIS微循环障碍的重要机制与指标.益气活血法能够通过调整各微循环指标的表达,尤其下调D-Dimer的高表达,改善AIS微循环,并促进整体神经功能的恢复.

    作者:邱乐;王新生;刘擎 刊期: 2012年第11期

  • Adv-shRNA抑制NRP2表达对胃癌SGC7901细胞增殖的影响

    目的 通过特异性抑制胃癌细胞株SGC7901中神经纤毛蛋白2(NRP2)基因的表达,检测RNA干扰片段对SGC7901细胞增殖能力的影响.方法 将NRP2的特异性RNA干扰腺病毒载体转染至胃癌细胞SCG7901 72 h后荧光显微镜观察转染情况;采用RT-PCR法检测转染后NRP2基因mRNA表达情况;MTT法检测胃癌细胞增殖情况;Westerm印迹检测转染后NRP2蛋白表达情况.结果 成功将NRp2-shRNA重组腺病毒载体转染至胃癌细胞SGC7901.各重组腺病毒转染组NRP2 mRNA水平均低于阴性对照组和空白组,其中以NRP2-shRNA-3抑制效应强.阴性对照组与空白组细胞增殖迅速,两组间无显著差异(P>0.05),实验组经腺病毒载体转染后细胞增殖程度显著减少,与前两组相比有显著差异(P<0.05).阴性对照组与空白组NRP2蛋白表达量明显高于实验组(P<0.01),而阴性对照组与空白组之间无显著差异(P>0.05).结论 重组腺病毒载体NRP2-shRNA可有效抑制胃癌细胞SCG7901中NRP2基因的mRNA和蛋白的表达,并在一定程度上抑制癌细胞增殖,可作为动物实验的理论基础和前期条件.

    作者:毛东;付晓光;陆航 刊期: 2012年第11期

  • 疲劳应激对血管内皮功能障碍大鼠脂蛋白相关磷脂酶A2含量和4型G蛋白耦联受体表达的影响及通络干预的作用

    目的 方法 探讨通络干预对疲劳应激致内皮功能障碍大鼠血清脂蛋白相关磷脂酶A2 (lp-PLA2)水平和主动脉4型G蛋白耦联受体(GPR4)表达的影响.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、疲劳应激组、人参组和通心络组.采用“基础饮食+负重力竭游泳”方法建立疲劳应激模型.通过游泳时间、爬杆时间评价模型建立,扫描电镜观察血管内皮形态,并检测一氧化氮(NO)、内皮素(ET)评价内皮功能;应用ELISA方法检测血清lp-PLA2水平,应用Real Time PCR和Western印迹分析检测主动脉GPR4 mRNA、蛋白表达水平.结果 疲劳应激组血管内皮结构损伤,内皮分泌NO明显减少,ET明显增加(均P<0.05).疲劳应激组血清lp-PLA2水平显著升高(P<0.01),主动脉GPR4 mRNA和蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.05).人参、通心络干预后,血清NO水平明显增加,血浆ET含量明显降低(均P<0.01);血清lp-PLA2水平明显下降(均P<0.01),主动脉GPR4表达水平显著下降(均P<0.05).结论 疲劳应激模型大鼠血管内皮出现明显损伤,血清lp-PLA2含量明显增加,主动脉GPR4 mRNA和蛋白表达水平明显升高.通络治疗能显著降低疲劳应激大鼠血清lp-PLA2水平,抑制主动脉GPR4 mRNA和蛋白表达,因此通络治疗可有效抑制ox-LDL对血管内皮的损伤.

    作者:韩建科;魏聪;贾振华;常丽萍;王宏涛;张彦芬 刊期: 2012年第11期

  • 吲哚美辛预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后炎症反应的影响

    目的 探讨吲哚美辛预处理对大鼠脑缺血再灌注后脑组织白介素-1β(IL-1β)和C反应蛋白(CRP)表达的影响及作用机制.方法 成年雄性SD大鼠共84只,随机分成3组,为假手术组、脑缺血再灌注模型组及吲哚美辛预处理组,每组有28只.大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型通过用改良Longa线栓法来制备.对每组动物于缺血2h行再灌注,于再灌注6、12、24、48 h进行神经功能评分,并应用免疫组化法检测IL-1β及CRP的表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠局灶性脑缺血再灌注后缺血脑组织中IL-1β及CRP含量增加(P<0.05);与模型组相比,吲哚美辛预处理组IL-11β及CRP的含量减少(P<0.05),神经功能缺损评分降低(P<0.05).结论 吲哚美辛对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有脑保护作用,其作用机制可能与抑制脑内IL-1β及CRP的表达有关.

    作者:李和平;李惠勉 刊期: 2012年第11期

  • 老年高血压患者动态动脉硬化指数与颈动脉粥样硬化及微量白蛋白尿的相关性

    目的 观察老年高血压患者动态动脉硬化指数(AASI)与颈动脉粥样硬化及微量白蛋白尿(MAU)的相关性及AASI在老年高血压患者心血管风险评估中的作用.方法 172例行24h动态血压监测的住院老年高血压患者,根据文献方法计算AASI,以AASI<0.55或AASI≥0.55分为两组,比较各组颈动脉内中膜厚度(IMT)、颈动脉斑块指数及MAU的差异,以及与AASI的相关性.结果 两组比较,在AASI≥0.55组中,其IMT、颈动脉斑块指数及MAU水平显著高于AASI<0.55组(P<0.001);Pearson相关分析显示.AASI与IMT、颈动脉斑块指数及MAU呈显著正相关,其相关系数分别为:IMT(r=0.560,P<0.001)、颈动脉斑块指数(r=0.591,P<0.001)、MAU(r=0.538,P<0.001);控制年龄、平均收缩压、平均舒张压、血肌酐水平、eGFR等因素后,偏相关分析显示,AASI仍与IMT、颈动脉斑块指数及MAU显著相关;多元逐步回归分析显示IMT、颈动脉斑块指数及MAU均与AASI独立相关,其标准化偏回归系数分别为:0.260、0.252、0.337,P<0.001.结论 在老年高血压患者,AASI与IMT、颈动脉斑块指数及MAU水平呈显著正相关,AASI可作为老年高血压患者心脑血管事件风险的独立预测因素.

    作者:李明阳;靳英;陈蕾;张伟;刘波;王建昌 刊期: 2012年第11期

  • 浅表性膀胱癌术后两种膀胱灌注方法疗效比较

    膀胱癌是泌尿外科常见的恶性肿瘤之一.其大特点是易于复发,据相关文献报道,膀胱癌的复发率达45%以上[1];而且10%~30%的复发病例,伴有浸润能力增强和恶性程度增高[2].

    作者:付水;毕缓;穆中一 刊期: 2012年第11期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅