柳影；陈儇；毕晓颖；李志超；袁长吉
目的 构建含衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)的原核表达载体,经转化E.coli以表达CPAF融合蛋白,研究其生物学功能.方法 从病料中克隆得到CPAF的原始基因,将PCR产物经纯化连接到pMD18-T,将重组质粒pMD-CPAF经NdeI和BamHI双酶切,与用相同酶消化的原核表达载体pET42b(+)连接,建立pET42b(+)-CPAF表达载体,阳性克隆经鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,经亲和纯化、离子交换纯化、分子筛纯化融合蛋白,进行SDS-PAGE分析,Western印迹检测.结果 经酶切鉴定和测序分析证实原核表达质粒构建正确.SDS-PAGE和Western印迹结果显示在70 kD处呈现单一蛋白条带,pET42b(+)-CPAF重组载体在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达了CPAF天然蛋白,目的蛋白占全菌体蛋白的20%左右,采用镍柱的亲和纯化后,可达70%左右.结论 经DNA测序、SDS-PAGE、Western印迹检测表明成功构建了能够稳定表达可溶性CPAF的菌株,并获得纯化CPAF的方法,为今后CPAF的研究及应用奠定了基础.
作者：王飞；朱庆三；苗旭漫；胡宁宁；李霄；金宁一 刊期： 2010年第05期
男性乳腺癌非常少见,占男性所有癌症发病的0.1% ～0.2%,占所有乳腺癌的0.5%～1%~([1]).由于其低发病率,男性乳腺癌的诊治经验远远少于女性乳腺癌,临床上对男性乳腺癌的诊治多借鉴于女性乳腺癌的诊治经验.但乳腺癌是一种激素依赖性肿瘤,由于激素水平的不同,男性乳腺癌临床特点有别于女性乳腺癌,具有独特的生物学特性,老年男性乳腺癌又有别于年轻男性乳腺癌.目前,关于老年男性乳腺癌的诊治经验报道很少,本文收集了我院肿瘤医院自1993年4月至2007年4月期间收治的行手术治疗的男性乳腺癌病例资料,选择其中的16例60岁以上男性乳腺癌病例,对其临床特点、诊断和治疗进行分析,以丰富我国老年男性乳腺癌的防治资料.
作者：张慧明；张保宁；赵平 刊期： 2010年第05期
无痛内镜技术近年广泛应用,麻醉药物的配伍多采用联合麻醉的方法,即丙泊酚联合芬太尼、力月西,临床上疗效满意~([1]).但对于年龄≥80岁高龄老人,由于多合并心脑血管等疾病,麻醉及内镜诊疗风险较大.本研究旨在探讨联合麻醉技术在高龄老人内镜诊疗中应用的安全性.
作者：王丽波；徐红；张建广；孙岩 刊期： 2010年第05期
良性前列腺增生症(BPH)是老年男性常见的疾病之一,严重影响老年男性的生活质量和身体健康,且BPH多合并心、脑、肺等脏器疾病.传统的开放性前列腺摘除手术,因较大的创伤性、痛苦性等缺陷临床上已越来越少应用,经尿道前列腺电切术(TURP)一直是BPH手术治疗的金标准,但其也存在较多危险的并发症如TURP综合征等~([1]).
作者：王伟；李覃；李辉；李彤 刊期： 2010年第05期
目的 将甲型流感病毒M2蛋白胞外区(M2e)基因与人血清白蛋白(HSA)基因融合,以构建高效分泌表达的毕赤酵母菌株.方法 通过RT-PCR扩增HSA基因,构建pPICZα-HSA质粒,将人工合成的M2e序列与pPICZα-HSA质粒分别经BstBI 和KpnI 酶切消化后连接,构建真核表达载体pPICZα-HSA/M2e,线性化后电转化毕赤酵母X-33.用PCR法筛选Zeocin抗性阳性的克隆,SDS-PAGE和Western印迹法筛选高表达HSA/M2e菌株.结果 经RT-PCR法克隆的HSA基因序列与GenBank登录的cDNA序列一致,构建的pPICZα-HSA/M2e真核表达载体,经电转化获得Zeocin抗性阳性的克隆.SDS-PAGE和Western印迹分析证实了甲醇诱导的培养基上清中含有HSA/M2e,分子量约为68 kD.结论 成功构建了分泌表达重组HSA/M2e融合蛋白的毕赤酵母菌株,为进一步研究其生物学活性奠定了基础.
作者：牟旭鹏；韦安慧；申茉函；孔宁；颜炜群 刊期： 2010年第05期
目的 比较年轻鼠和老年鼠脾CD4~+CD25~+T细胞的数量及功能变化.方法 采用流式细胞分析法,检测脾CD4~+CD25~+ T细胞比例及其Foxp3和GITR表达;通过3H-TdR掺入测定脾CD4~+CD25~+T细胞的功能.结果 老年鼠脾CD4~+CD25~+T细胞的百分数明显增加,但是其抑制功能明显降低,并且表面GITR表达降低.结论 随着年龄的增加,小鼠脾CD4~+CD25~+T细胞抑制功能降低.
作者：王弘珺；李质馨；田洪艳；徐冶；朱辛为；杨柳 刊期： 2010年第05期
原发性甲状腺功能减退症(甲减)是由于各种原因造成甲状腺合成、分泌甲状腺激素缺乏,机体的代谢和身体的各个系统功能减退,而引起的临床综合征.近年来陆续有原发性甲减患者心肌酶谱增高的个案报道~([1,2]),亦有研究~([3])显示甲减时血总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平增高,但对原发性甲减患者心肌酶谱、血脂水平的升高及甲状腺素治疗后对其动态影响缺乏系统性的研究资料.
作者：张红；吕述军；陆卫平；高鹏霞；胡长军；刘影 刊期： 2010年第05期
目的 在建立裸鼠皮下U251胶质瘤模型基础上,通过体内实验及相关形态学研究,分析氯化甲基汞(MMC)的抗脑胶质瘤作用.方法 制备裸鼠皮下U251胶质瘤模型,随机分为对照组和实验组,实验组裸鼠注射U251脑胶质瘤细胞1 w后,每天灌胃给予10 mg/kg体重MMC,连续5 d,对照组给予相同体积的生理盐水.全部裸鼠于肿瘤接种后14 d处死.结果 大体病理显示实验组肿瘤体积明显小于对照组,病理组织学观察发现实验组U251胶质瘤细胞生长密度较对照组低,并可见细胞体积变小、核固缩等凋亡的形态学改变.透射电镜显示实验组肿瘤细胞发生核固缩、染色质周边化、核断裂、胞浆空泡变性等改变,实验组瘤体汞含量明显高于对照组.结论 MMC对裸鼠U251胶质瘤细胞增殖具有明显的抑制作用,其机制可能是通过诱导胶质瘤细胞凋亡实现的,相关分子机制有待进一步深入研究.
作者：柳影；陈儇；毕晓颖；李志超；袁长吉 刊期： 2010年第05期
目的 制备水溶性CdTe量子点-广谱抗细胞角蛋白单克隆抗体(QDs-MAb)荧光探针,并对其特异免疫性识别能力和荧光稳定性进行检测.方法 在EDC偶联剂的作用下,将水溶性CdTe量子点与广谱细胞角蛋白单克隆抗体(Pan CK)进行了连接;对肝癌细胞HepG2采用免疫细胞化学法和QDs-MAb单抗荧光探针直接免疫荧光标记法观察比较Pan CK蛋白在细胞内的分布;将量子点与传统的荧光染料FITC的荧光强度和荧光稳定性进行了比较.结果 QDs-MAb单抗荧光探针对HepG2细胞内的Pan CK分子具有特异性的识别能力;与FITC相比,QDs-MAb荧光探针荧光度更强,光化学稳定性更好,激发光连续照射30 min及室温放置3 d后均未见明显淬灭.结论 本实验成功制备了QDs-MAb荧光探针,为半导体量子点用于上皮来源的肿瘤细胞内Pan CK分子的相关检测提供了科学依据.
作者：隋玉杰；王茜；王雅丽；吴枚；郑锦花；杜珍武；张玉成；张桂珍 刊期： 2010年第05期
目的 探讨六味地黄丸对老年复发性口疮(ROU)的疗效.方法 采用六味地黄丸治疗老年ROU(阴虚火旺型),并对患者治疗前后T淋巴细胞亚群的变化及临床疗效进行观察,并与常规治疗组和健康者进行比较.结果 两组患者治疗前CD3、CD4、CD4/CD8比率均显著低于健康(P＜0.01),CD8均明显高于健康组(P＜0.01);两组间相比无明显差异(P＞0.05).观察组治疗后CD3、CD4、CD4/CD8比率均明显高于治疗前(P＜0.01),与健康组相比无明显差异(P＞0.05),观察组治疗前后CD8无明显变化(P＞0.05).对照组治疗前后CD3、CD4、CD8、CD4/CD8无明显差异(P＞0.05).两组治疗后总有效率存在显著性差异(P＜0.01).治疗后观察组患者主要症状和体征均有明显改善,与治疗前相比具有明显差异(P＜0.01).治疗后对照组患者:平均溃疡与疼痛自评分均明显降低,与治疗前相比有明显差异(P＜0.05);治疗后其各项躯体伴随症状均无明显改善,与治疗前相比无明显差异(P＞0.05).结论 六味地黄丸具有纠正老年ROU(阴虚火旺型)患者T淋巴细胞亚群的平衡失调,调节自身免疫功能,增强机体抗病能力的作用.
作者：孙林琳；刘建伟；徐伟 刊期： 2010年第05期
目的 应用蛋白质组学技术研究6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导SH-SY5Y细胞帕金森病(PD)模型中14-3-3蛋白的表达变化.方法 在建立6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞PD模型的基础上,分别提取6-OHDA实验组和对照组孵育24 h的细胞总蛋白,应用荧光差异双向凝胶电泳(DIGE)技术获得蛋白点的差异表达信息,运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)鉴定出差异蛋白质.结果 DIGE分析发现实验组有一个表达明显上调的差异蛋白质点(P＜0.05),经质谱分析鉴定确认为14-3-3蛋白.结论 6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞的PD模型中14-3-3蛋白表达上调,提示14-3-3蛋白上调可能与PD的发病机制有关.
作者：王丹萍；常明；解洪荣；田明秀；胡林森 刊期： 2010年第05期
目的 探讨芪蛭益肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)表达及肺组织超微结构的影响.方法 运用气管内滴注脂多糖加烟熏28 d法建立COPD大鼠模型,免疫组化法检测SP-A表达及透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构变化.结果 与空白组比较,模型组大鼠SP-A表达明显减少,有显著差异(P<0.01),肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构不完整;与模型组比较,芪蛭益肺颗粒治疗组大鼠SP-A表达明显增强,差异显著(P<0.01),肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构完整.结论 芪蛭益肺颗粒可显著提高模型大鼠SP-A表达,改善细胞超微结构,对COPD的发生起到预防保护作用.
作者：李金田；张莉；刘永琦；李娟；张毅；魏舒畅 刊期： 2010年第05期
目的 了解重庆市区某老年公寓老年人的焦虑情况,探讨老年公寓老人出现焦虑状态的流行病学特点及相关因素.方法 采用随机抽样的方法,于2007年4月～6月对重庆市8个主城区各抽取1所老年公寓(≥65岁的老人)进行调查,调查工具为症状自评量表,汉密尔顿焦虑量表和一般项目调查表等.结果 (1)性别、职业性质和教育程度三方面,健康组和疾病组比较有统计学差异(P＜0.05);(2)SCL-90量表中躯体化、焦虑、抑郁纬度,疾病组高于健康组,比较有统计学差异(P＜0.01);HAMA量表中躯体性焦虑、精神性焦虑两因子,疾病组和健康组比较有统计学差异(P＜0.001).(3)经Logistic回归分析,老年公寓中年龄大、文化程度低、丧偶、有躯体疾病和性格内向的老年人焦虑状态明显.结论 重庆市老人公寓老人焦虑状态明显;焦虑状态的发生与年龄、文化程度、婚姻状况、躯体疾病及性格有关.
作者：张皑频；曾宪祥；杨德兰 刊期： 2010年第05期
间断性低氧是阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)的典型病理生理过程,导致血氧饱和度时高时低,刺激外周化学感受器导致交感兴奋~([1]),从而使得心血管疾病的风险大大增加~([2]).老年人是心血管疾病的高危人群,故本文试探讨老年OSAS患者的低氧血症与非老年患者的不同之处,从睡眠呼吸紊乱的角度了解老年人的心血管疾病高危因素.
作者：林怡；顾洁 刊期： 2010年第05期
老年重度急性有机磷中毒(AOPP)并发急性呼吸衰竭的传统治疗方法是在使用呼吸机基础上给予阿托品,但却增加老年患者阿托品中毒死亡危险.因此近几年我科在AOPP的抢救过程中应用中枢性抗胆碱药东莨菪碱,发现其具有安全范围大,用量小等优点,但应用在老年AOPP并发的呼吸衰竭优剂量未见报道.因此本文主要探讨在老年AOPP并发呼吸衰竭的抢救过程中不同剂量东莨菪碱的治疗效果.
作者：郑福禄；刘宇鹏 刊期： 2010年第05期
目的 研究青藤碱(SIN )对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制,为SIN预防和治疗肺癌提供实验依据.方法 SIN高(1.0 mmol/L)、中(0.5 mmol/L)、低(0.25 mmol/L)剂量组及空白对照组分别处理体外培养的人肺癌细胞系A549细胞后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测处理24、48、72 h后A549细胞的增殖活性;采用流式细胞仪测定各剂量组SIN作用48 h后细胞周期;采用流式细胞术和TUNNEL方法检测细胞凋亡.结果 高、中、低剂量组SIN处理A549细胞48、72 h后,细胞增殖明显受到抑制,且呈时间、剂量依赖性.SIN处理组G_1期细胞比例明显增加,与空白对照组比较有统计学意义.SIN处理组细胞凋亡率也较对照组升高,呈剂量依赖性.TUNNEL法可见凋亡细胞的阳性反应.结论 SIN在体外能有效抑制肺癌细胞生长,其机制与其阻滞细胞周期于G_1期、诱导细胞凋亡有关.
作者：姜廷枢；李胜岐 刊期： 2010年第05期
目的 通过对海马FAS、Bcl-2和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的观察,研究髙脂饮食对D半乳糖老化小鼠海马神经元退性变的影响.方法 ICR小鼠40只,随机分为正常对照组 (H组)、脑老化模型组 (A组)、脑老化模型髙脂饮食组 (B组)、高脂饮食对照组 (F组),每组10只.A、B组每日皮下注射半乳糖50 mg/kg体重.H、F组每日给动物注射0.2 ml生理盐水.10 w后,于Morris水迷宫实验结束后,小鼠脑行灌注固定,进行脑冰冻切片,用FAS、Bcl-2和BDNF抗体进行免疫组化染色.结果 Morris水迷宫实验测试结果显示A组逃避潜伏期显著大于其他各组(P<0.05);撤台后小鼠的记忆性搜台游泳路程结果在各组小鼠间均无显著差异;FAS免疫组化染色结果显示,B组小鼠海马阳性神经元数目与A组比较无显著差异(P>0.05),H、F组与A、B组比较,差异显著(P<0.05);Bcl-2染色结果显示,A组和B组Bcl-2阳性神经元数目显著低于H组(P<0.05),A组和B组之间、H组和F组之间阳性神经元数目无统计学意义;BDNF染色结果显示A、B和F组BDNF阳性神经元数目显著低于H组(P<0.05),且A组和B组之间也有显著差异,B组的阳性神经元数目显著少于A组(P<0.05).结论 D-半乳糖老化小鼠海马神经元的FAS表达明显升高,Bcl-2和BDNF表达明显下降,高脂饮食虽对脑内FAS、Bcl-2表达水平无明显影响,但可使脑内BDNF表达下调.
作者：王昊；李莉；刘霞；肖忠新；宋一志；陆涛；魏守刚 刊期： 2010年第05期
目的 研究基质金属蛋白酶(MMP)-2、-9在胃癌组织中的表达及相关性.方法 采用免疫组化法观察60例胃癌及20例胃正常黏膜石蜡标本中MMP-2、-9蛋白的表达情况.结果 MMP-2在胃癌组织中的表达率为75%,MMP-9在胃癌组织中的表达率为68.3%,均显著高于周围正常组织(P<0.05).MMP-2和-9的表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移及肿瘤临床分期相关(P<0.05).且MMP-2的表达与MMP-9的表达呈正相关(P<0.05).结论 MMP-2和-9在胃癌组织中显著高表达,与胃癌的浸润转移相关,其异常表达可能共同参与胃癌的发生、发展过程,检测MMP-2、-9可作为反映胃癌病理学特点的参考指标.
作者：陈进；郭子健；王卫理 刊期： 2010年第05期
目的 探讨细胞周期蛋白D_1(Cyclin D_1)和抑癌基因PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及其相关性.方法 应用免疫组织化学染色S-P法检测Cyclin D_1和PTEN在不同胃黏膜病变石蜡包埋标本的表达并进行相关性分析.结果 在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、不典型增生和胃癌中Cyclin D_1的表达率逐渐增高,PTEN的表达率逐渐降低,且差异有统计学意义(P<0.05);Cyclin D_1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的阳性表达率呈负相关.结论 Cyclin D_1、PTEN在胃癌的发生、发展中起协同作用,对其进行联合检测有助于胃癌的早期诊断.
作者：高绍芳；李佃贵；崔建从；郭敏；张纨 刊期： 2010年第05期
急性心肌梗死(AMI)后心室重构是梗死区的心肌发生扩张和变薄,非梗死区心肌代偿性变化,心肌节段变长,使左室整体扩大.急性心肌梗死后左室重构是反映心肌梗死后预后的敏感指标,也是远期发生心脏性死亡重要的危险因素之一,决定心肌梗死患者疾病与生命转归,因此心室重构的临床治疗已成为焦点与热点问题.
作者：常纯；马兰 刊期： 2010年第05期
中国老年学杂志
主管:中国老年学学会
主办：中国老年学学会 吉林省卫生厅
