孙颖;路方红;温培娥;刘振东;孙尚文;赵颖馨;王淑建
目的 研究青藤碱(SIN )对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制,为SIN预防和治疗肺癌提供实验依据.方法 SIN高(1.0 mmol/L)、中(0.5 mmol/L)、低(0.25 mmol/L)剂量组及空白对照组分别处理体外培养的人肺癌细胞系A549细胞后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测处理24、48、72 h后A549细胞的增殖活性;采用流式细胞仪测定各剂量组SIN作用48 h后细胞周期;采用流式细胞术和TUNNEL方法检测细胞凋亡.结果 高、中、低剂量组SIN处理A549细胞48、72 h后,细胞增殖明显受到抑制,且呈时间、剂量依赖性.SIN处理组G_1期细胞比例明显增加,与空白对照组比较有统计学意义.SIN处理组细胞凋亡率也较对照组升高,呈剂量依赖性.TUNNEL法可见凋亡细胞的阳性反应.结论 SIN在体外能有效抑制肺癌细胞生长,其机制与其阻滞细胞周期于G_1期、诱导细胞凋亡有关.
作者:姜廷枢;李胜岐 刊期: 2010年第05期
目的 将已构建完成的携带增强绿色荧光蛋白基因的TSLC1真核表达载体转染到HepG2细胞中,观察其对HepG2肝癌细胞的作用.方法 脂质体Lipofectamine 2000介导重组载体转染到HepG2肝癌细胞中,经G418筛选建立稳定转染细胞株,分别采用RT-PCR、免疫组化法和Western印迹法检测其表达;同时检测细胞周期、凋亡及caspase-3酶活性.结果 与对照组比较,RT-PCR方法可见转染组细胞TSLC1 mRNA表达明显增多(P<0.05),免疫组化和Western印迹法可见转染组细胞TSLC1蛋白表达明显增高(P<0.05);流式细胞仪检测发现转染组G_0/G_1期细胞显著增多,而S期细胞明显降低(P<0.05),转染组细胞凋亡比例明显比对照组多(P<0.05);caspase-3酶活性显著增多(P﹤0.05).结论 本实验成功建立了稳定转染TSLC1的HepG2细胞株,并证实TSLC1能够阻滞细胞周期,促进凋亡及提高caspase-3酶活性.
作者:肖钟迪;王雅丽;房学东 刊期: 2010年第05期
目的 了解农村老年人尿失禁(UI)患病情况及其对生活质量的影响,为制定防治策略提供科学依据.方法 采用整群抽样的方法抽取天津市蓟县所辖的两个乡(镇)卫生院≥60岁的743名老年人,按统一设计的调查问卷,以面对面询问的方式进行入户调查,分析农村老年人UI患病情况及对生活质量的影响.结果 天津蓟县农村老年人UI患病率33.38%,随年龄增长UI患病率呈升高趋势(χ_(for trend)~2=2.19,P=0.029),女性患病率高于男性(43.15% vs.22.75%,χ~2=34.70,P<0.000 1).UI患病持续年限的中位数为5年,患病<5年者多,占46.77%.167名老年女性患者中,155人(92.81%)初次出现症状是在绝经后.248名老年UI患者中,29.84%(74名)认为对从事家务劳动有影响,24.60%(61名)认为对参加户外活动有影响,45.16%(112名)需经常更换内裤,6.05%(15名)因UI故意减少饮水量,8.88%(22名)不愿去没有公共卫生间的场所.因UI而感到情绪低落、焦虑不安和难堪的患者分别占23.39%(58/248)、18.55%(46/248)和31.05%(77/248).结论 天津蓟县农村老年人UI患病率较高,对患者日常生活的各个方面及心理健康均有影响,应引起卫生行政部门及广大医务工作者的重视.
作者:石婧;刘雪荣;夏丛旺;刘东富;乌正赉;于普林 刊期: 2010年第05期
目的 探讨天津市和平区退休老年人饮食状况的影响因素及相关疾病. 方法 对天津市和平区982例年龄在60岁以上的退休老年人的饮食状况进行流行病学调查,采用自制的问卷调查表和体格检查相结合的方法获得数据.结果 天津市和平区退休老年人饮食状况与老年人性别、体重指数 (BMI)和身体健康状况有密切的关系.结论 养成良好的、健康的饮食习惯可提高老年人生活质量.
作者:高韡;杨晶;张志尧;陈欣 刊期: 2010年第05期
目的 探讨外源性野生型PTEN基因对人多发性骨髓瘤(MM)细胞株RPMI8226增殖、凋亡、侵袭活性的影响以及PTEN/FAK信号传导通路在细胞侵袭活性中的作用.方法 将携带人野生型PTEN及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP)体外转染至RPMI8226细胞.通过MTT法检测细胞生长曲线,Hoechst33342染色检测细胞凋亡,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测PTEN及FAK mRNA水平变化,Western印迹检测PTEN、FAK及p-FAK蛋白变化,Transwell小室检测RPMI8226细胞侵袭能力.结果 Ad-PTEN-GFP以感染复数为100转染RPMI8226细胞后,第4天达到大生长抑制率为42.01%,Ad-PTEN-GFP转染RPMI 8226细胞72 h后细胞凋亡率为(35.02±6.80)%,PTEN mRNA及蛋白表达升高,FAK mRNA以及FAK、p-FAK蛋白表达下调,与Ad-GFP组相比差异显著(P<0.01,P<0.05);Transwell小室结果显示,转染Ad-PTEN-GFP组漏入下室内及黏附于下室面细胞数量较Ad-GFP组显著减少(P<0.01).结论 转染野生型PTEN基因的RPMI8226细胞增殖受抑,凋亡增加,细胞侵袭力明显减弱,其作用可能与下调FAK、p-FAK表达有关.
作者:王素云;成志勇;邓凯;陈浩;姚丽;杨静慈;尚银涛;潘崚 刊期: 2010年第05期
目的 比较瑞舒伐他汀和阿托伐他汀在老年患者中的调脂抑炎作用.方法 选择75例老年血脂异常患者,随机分为A、B、C三组,A组服用阿托伐他汀(10 mg/d),B组服用瑞舒伐他汀(5 mg/d),C组服用瑞舒伐他汀(10 mg/d),三组均服药12 w.于治疗前、治疗4 w末、12 w末分别采空腹静脉血测TC,LDL-C,TG,HDL-C,IL-6,IL-10,TNF-α.结果 ①三组各项指标治疗前无差异(P>0.05);4 w末,TC,LDL-C,TG均降低,HDL-C均升高(P<0.01);12 w末,血脂未见变化(P>0.05).②4 w末,A,B两组TC,LDL-C比较无差异(P>0.05),C组TC,LDL-C较A、B两组降低(P<0.01).③4 w末,三组IL-6、TNF-α降低,IL-10升高(P<0.01);12 w末,炎症因子变化持续(P<0.01).④除12 w末C组TNF-α较B组稍低外,未见到三组炎症因子变化有差异(P>0.05).结论 ①阿托伐他汀和瑞舒伐他汀均有调脂抑炎作用,且抑炎作用是独立于调脂作用以外的.②瑞舒伐他汀5 mg/d和阿托伐他汀10 mg/d调脂效果类似,瑞舒伐他汀10 mg/d调脂作用大于阿托伐他汀10 mg/d.③瑞舒伐他汀与阿托伐他汀抑炎作用大致相当.
作者:熊浩伟;谢志泉 刊期: 2010年第05期
目的 构建含衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)的原核表达载体,经转化E.coli以表达CPAF融合蛋白,研究其生物学功能.方法 从病料中克隆得到CPAF的原始基因,将PCR产物经纯化连接到pMD18-T,将重组质粒pMD-CPAF经NdeI和BamHI双酶切,与用相同酶消化的原核表达载体pET42b(+)连接,建立pET42b(+)-CPAF表达载体,阳性克隆经鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,经亲和纯化、离子交换纯化、分子筛纯化融合蛋白,进行SDS-PAGE分析,Western印迹检测.结果 经酶切鉴定和测序分析证实原核表达质粒构建正确.SDS-PAGE和Western印迹结果显示在70 kD处呈现单一蛋白条带,pET42b(+)-CPAF重组载体在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达了CPAF天然蛋白,目的蛋白占全菌体蛋白的20%左右,采用镍柱的亲和纯化后,可达70%左右.结论 经DNA测序、SDS-PAGE、Western印迹检测表明成功构建了能够稳定表达可溶性CPAF的菌株,并获得纯化CPAF的方法,为今后CPAF的研究及应用奠定了基础.
作者:王飞;朱庆三;苗旭漫;胡宁宁;李霄;金宁一 刊期: 2010年第05期
良性前列腺增生症(BPH)是老年男性常见的疾病之一,严重影响老年男性的生活质量和身体健康,且BPH多合并心、脑、肺等脏器疾病.传统的开放性前列腺摘除手术,因较大的创伤性、痛苦性等缺陷临床上已越来越少应用,经尿道前列腺电切术(TURP)一直是BPH手术治疗的金标准,但其也存在较多危险的并发症如TURP综合征等~([1]).
作者:王伟;李覃;李辉;李彤 刊期: 2010年第05期
目的 探讨老年动脉僵硬度与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因多态性的相关性.方法 对437例老年人(年龄60~95岁)进行一般情况、实验室指标及臂-踝脉搏波传导速度(ba-PWV)的检测,并综合baPWV值及年龄-ba-PWV曲线,分为低baPWV组和高baPWV组.应用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)法确定基因型,分析比较两组MMP-9三种基因型的分布.结果 高baPWV组TT基因型频率(16.4%)明显高于低baPWV组(8.8%),两组差异有显著统计学意义(χ~2= 6.470,P= 0.008).两组T等位基因分布有显著统计学意义(χ~2= 7.929,P= 0.003 ).MMP-9三种基因型中以C/C型作为比较基线,C/T型和T/T型的OR分别为1.227(95%CI:0.793~1.899)和2.170(95%CI:1.184~3.976).以C等位基因作为比较基线,T等位基因的OR为1.550(95%CI:1.141~2.105).经单因素非条件Logistic回归分析后进行多因素非条件Logistic回归分析,结果显示年龄、体重指数、收缩压、脉压、平均动脉压、吸烟、高密度脂蛋白(HDL)及MMP-9 TT基因型为动脉僵硬度增加的危险因素.结论 老年动脉僵硬度与MMP-9基因多态性密切相关,MMP-9 基因1 562T等位基因可能是老年动脉僵硬增高的遗传基因标记之一.
作者:孙颖;路方红;温培娥;刘振东;孙尚文;赵颖馨;王淑建 刊期: 2010年第05期
目的 探讨行后路腰椎椎间融合术(PLIF)的高龄患者围手术期特点及临床疗效.方法 回顾性分析2004年1月至2006年9月间进行的PLIF手术107例,其中老年组(≥65岁)40例,青年组(<65岁)67例.随访时间13~37个月,平均19.6个月.对比术前合并症、美国麻醉医师协会(ASA)分级;对比术中出血量、术后引流量、术中术后异体血输入量、手术时间及术后住院日;对比腰痛视觉模拟疼痛评分(VAS)及日本矫形外科协会(JOA)下腰痛评分;观察并发症的发生及术后椎间融合情况.结果 老年组术前ASA病情分级(P=0.001)、内科合并症(P=0.02)与青年组间差异有统计学意义.手术时间、术中出血量、术后引流量、术中术后异体血输入量、术后腰痛VAS、术后优良率、椎间融合率、并发症发生率两组间差异无统计学意义(P>0.05).老年组并发症发生率为20.0%(8例),其中具有合并症的患者并发症发生率与无合并症患者间差异无统计学意义(P>0.05).结论 高龄并非融合内固定手术的禁忌证;高龄虽增加手术风险,但多科协作、及时纠正围手术期的病理状态,是可以安度围手术期的,且能够获得良好的骨性融合和神经功能改善.
作者:王运涛;吴小涛;陈辉;王宸;李永刚;洪鑫 刊期: 2010年第05期
据报道血浆溶血磷脂酸(LPA)及与LPA极性相似的磷脂(AP)检测对卒中发生有重要的预警作用~([1,2]).我科2004年从北京医科大学引进LPA和AP检测以及卒中预警评估软件,预测可能发生缺血性脑血管病的危险程度,并给予干预,从而起到早预防、早治疗、降低发病率的作用.
作者:金锋;袁淑霞 刊期: 2010年第05期
目的 制备水溶性CdTe量子点-广谱抗细胞角蛋白单克隆抗体(QDs-MAb)荧光探针,并对其特异免疫性识别能力和荧光稳定性进行检测.方法 在EDC偶联剂的作用下,将水溶性CdTe量子点与广谱细胞角蛋白单克隆抗体(Pan CK)进行了连接;对肝癌细胞HepG2采用免疫细胞化学法和QDs-MAb单抗荧光探针直接免疫荧光标记法观察比较Pan CK蛋白在细胞内的分布;将量子点与传统的荧光染料FITC的荧光强度和荧光稳定性进行了比较.结果 QDs-MAb单抗荧光探针对HepG2细胞内的Pan CK分子具有特异性的识别能力;与FITC相比,QDs-MAb荧光探针荧光度更强,光化学稳定性更好,激发光连续照射30 min及室温放置3 d后均未见明显淬灭.结论 本实验成功制备了QDs-MAb荧光探针,为半导体量子点用于上皮来源的肿瘤细胞内Pan CK分子的相关检测提供了科学依据.
作者:隋玉杰;王茜;王雅丽;吴枚;郑锦花;杜珍武;张玉成;张桂珍 刊期: 2010年第05期
环氧合酶-2(COX-2)是一种诱导酶,在正常情况下,体内仅表达微量COX-2,当机体受到致炎因子刺激时,某些细胞如单核-巨噬细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞等将被诱导产生大量COX-2,并催化合成大量促炎性前列腺素.以往被认为与炎症、发热和肿瘤等有密切关系,近年研究发现其在骨骼重建、骨质吸收以及成骨细胞转导等过程中扮演着重要角色.
作者:张陈彦;郭影 刊期: 2010年第05期
非酒精性脂肪肝(NAFLD)是肝细胞脂肪变之一.以糖脂代谢异常为特征的2型糖尿病(T2DM)患者NAFLD的发病情况如何?以及在不同性别、老年和非老年之间的发病是否有差别?NAFLD的主要危险因素是什么?均是需探讨的问题.本文分析263例新诊断的T2DM患者NAFLD的相关危险因素.
作者:苏宏业;潘海林;黄媛;黎英荣 刊期: 2010年第05期
血栓闭塞性脉管炎(TAO)主要累及下肢中小动脉和静脉.其病因复杂,发病机制不清,为目前各国血管外科难治性疾病之一.我院自2006年1月至2008年6月采用雷公藤多苷片免疫调节治疗TAOⅠ期及Ⅱ期患者30例,取得较好疗效.
作者:张建勇;于中丽 刊期: 2010年第05期
目的 观察气虚血瘀证大鼠血管平滑肌细胞的凋亡及bcl-2、bax相关凋亡因子的表达.方法 采用饥饿、疲劳、寒冷、惊吓等综合因素方法复制气虚血瘀证大鼠模型,观察大鼠胸主动脉血管内膜形态学,检测血管平滑肌细胞的凋亡指数及bcl-2、bax蛋白的表达.结果 气虚血瘀大鼠血管内膜明显增殖,血管平滑肌细胞bcl-2蛋白表达增高(96.15±0.02 vs 21.13±0.05);bax蛋白表达降低(1.05±0.12 vs 68.06±0.06);bcl-2/bax增高(2.92±0.67 vs 0.01±0.01)(P<0.05).结论 气虚血瘀证大鼠存在血管平滑肌细胞增殖和凋亡严重失调等病理生理基础.
作者:荣晓凤;李荣亨;王维 刊期: 2010年第05期
目的 应用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA,并检测其对DU145细胞株内源性survivin基因和蛋白表达的影响.方法 构建重组质粒shRNA-sur1和-sur2并分别转染 DU145细胞株,通过半定量 RT-PCR和Western印迹检测survivin mRNA转录水平和蛋白表达的变化.结果 成功构建针对survivin干扰的两种真核表达质粒;两种重组质粒shRNA-sur1和-sur2均能明显抑制内源性survivin基因表达,其抑制率分别为72%±8%和77%±5%;两种质粒均能明显抑制survivin蛋白的表达,其抑制率分别为75%±8%和80%±6%.结论 重组质粒shRNA-sur1和-sur2均可明显抑制DU145细胞内源survivin 蛋白表达和mRNA转录,为survivin介导的肿瘤基因沉默提供良好的基础.
作者:刘艳波;葛贺;卢丽莉;赵雪俭 刊期: 2010年第05期
环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)是一种重要的细胞核内转录因子,调节启动子中具有环磷酸腺苷反应元件(cAMP response element,CRE)的基因转录.环磷酸腺苷(cAMP)或钙浓度升高等多种信号转导通路可启动CREB的磷酸化并使其活化.CREB具有调节包括学习记忆在内的广泛的生物学功能.现就CREB的活性调控机制及其在血管性痴呆(VD)病理生理机制中的研究进展进行综述.
作者:李君;高维娟 刊期: 2010年第05期
目的 探讨大鼠局灶性脑缺血激活素A(Act A)及其受体ⅡA(ActRⅡ)的表达变化规律及意义.方法 线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,采用光镜、免疫组化方法检测大鼠局灶性脑缺血后梗死体积、病理变化,免疫组化染色观察Act A、ActRⅡA免疫阳性表达. 结果正常组织有极低水平的Act A、ActRⅡA表达,免疫组化显示缺血3 h后在周边区Act A、ActRⅡA阳性细胞数量显著高于假手术组(P<0.05),并随缺血时间延长而逐渐增高,于24 h达高峰.结论 局灶脑缺血损伤可诱导内源性神经元Act A高表达,并可能通过特异性跨膜信号受体ActRⅡA发挥靶源性作用.
作者:莽靖;何金婷;李宗树;胥桂华;郭洪亮;邵延坤;徐忠信 刊期: 2010年第05期
目的 观察高龄(≥75岁)急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者尿激酶减量溶栓治疗的疗效和安全性.方法 在82名高龄急性STEMI患者中随机选取39例作为尿激酶减量溶栓组,给予标准剂量75%的尿激酶溶栓治疗,其余43例作为高龄对照组仅给予保守治疗.同时选取低龄(<75岁)急性STEMI患者45例,作为低龄溶栓组,给予标准剂量尿激酶溶栓,临床特征(除年龄外)与高龄溶栓组无统计学差异.分别观察三组血管再通率,心源性死亡等心脏主要不良事件发生率及出血反应.结果 高龄溶栓组临床血管再通率(56.4%)高于高龄对照组(14%),心源性死亡有下降趋势,但无显著性差异,出血风险无显著增加,6个月内心脏主要不良事件显著性降低.上述指标与低龄溶栓组相比,均无显著性差异.结论 高龄急性STEMI患者尿激酶减量溶栓治疗安全、有效.
作者:赵竹;尹承华;张丽;刘同宝 刊期: 2010年第05期