学术投稿

人热休克蛋白110在毕赤酵母中的表达及鉴定

徐煌;韩冬;王芳;钟辉;周秋丽;颜炜群

关键词:重组人热休克蛋白110(rhHSP110), 基因表达, 毕赤酵母
摘要:目的 在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达人热休克蛋白110(hHSP110),制备具有与天然hHSP110相同生物活性的重组人HSP110(rhHSP110).方法 用PCR法自质粒pBacPAK中克隆hHSP110的DNA,构建真核表达载体pPICZα/hHSP110.经核酸测序确证后,电转化毕赤酵母菌株X-33.用PCR法筛选Zeocin抗性的转染阳性克隆,用Western blot法鉴定甲醇诱导的培养上清液中的rhHSP110,筛选高表达工程菌.结果 经PCR法克隆的hHSP110 DNA序列与GeneBank登录的cDNA序列一致.将hHSP110 DNA定向插入pPICZα,构建pPICZα/hHSP110真核表达载体并经电转化获得Zeocin抗性的阳性克隆.SDS-PAGE和Western blot分析显示了甲醇诱导的培养基上清中含有rhHSP110.rhHSP110表达量达120 mg/L.结论 克隆hHSP110基因并构建和筛选出高效表达rhHSP110的毕赤酵母工程菌,表达的rhHSP110具有天然rhHSP110相同的生物活性.
中国老年学杂志相关文献
  • 西安地区空军男性老干部的死因及其危险因素调查

    目前我国人口老龄化现象严重,恶性肿瘤和心脑血管疾病及呼吸系统疾病等慢性疾病的死亡率迅速升高[1].本研究通过随访研究西安地区空军老年人生存的重要相关因素,旨在为离退休老干部疾病预防与控制提供重要的信息资料.

    作者:许文娟;张磊;邵虹;金玫;门可;王振敏;王波;王芳莲;闫永平 刊期: 2007年第08期

  • 年龄、身高、体重、体重指数、体表面积对成都地区中老年人腰椎骨密度的影响

    目的 观察年龄、身高、体重、体重指数(BMI)、体表面积(BS)对成都地区中老年人腰椎骨密度的影响,为骨质疏松诊断、防治提供参考依据.方法 ①采用美国LUNAR公司的EXPERT-XL双能X线骨密度仪测定成都地区健康体检者705例,其中男271例,女434例,测量部位包括腰椎前后位1~4和腰椎侧位2~4骨密度;②结果用SPSS12.0统计软件处理,年龄、身高、体重、BMI、BS与腰椎正位(L1~4)及侧位(LL2~4)骨密度相关性用Spearson相关分析,不同BMI、BS组间用单因素方差分析和小差异法,组间年龄有差异用协方差分析.结果 ①身高、体重、BMI、BS与腰椎正位及侧位骨密度呈正相关(r=0.155~0.463,P<0.01),年龄与骨密度呈负相关(r=-0.365~-0.473,P<0.01);②按BS将人群分为3组:大体表面积组(LBSG),中体表面积组(IBSG),小体表面积组(SBSG),男性及女性腰椎正位及侧位骨密度均为:LBSG>IBSC>SBSG;③按BMI大小分成3组,BMI=23~25组腰椎骨密度大于BMI<23组,男性腰椎前后位、女性腰椎前后位及侧位骨密度在BMI=23~25组与BMI>25组腰椎骨密度差异无显著性.结论 年龄、身高、体重、BMI、BS均是影响腰椎骨密度的重要因素,对于BS、体重、BMI、身高低者应注意骨质疏松诊断、防治,中老年人尤其是女性注意预防骨质疏松.

    作者:黄际远;宋文忠;陈明曦;史克俭;黄劲;钟兴华 刊期: 2007年第08期

  • 青龙木提取物对大脑离体脑片自发放电的影响

    目的 研究青龙木提取物(Amboyna preparation)对大鼠脑片缰核(habenular nucleus)和弓状核(arcuate nucleus)神经元自发放电的影响.方法 将大鼠丘脑制成薄片,记录到内侧缰核和弓状核神经元的自发放电,观察胰岛素和青龙木提取物对它们的影响.结果 对于内侧缰核神经元,青龙木提取物起兴奋作用,而胰岛素则起抑制作用.青龙木提取物对下丘脑弓状核神经元起兴奋作用.结论 缰核和弓状核可能参与青龙木提取物治疗糖尿病大鼠的作用.

    作者:章北林;黄民;李明娴;赵华 刊期: 2007年第08期

  • Tei指数评价老年2型糖尿病性心肌病变左室功能的临床研究

    目的 应用Doppler超声心动图检测左室Tei指数指标评价老年2型糖尿病性心肌病变致左心收缩与舒张的整体综合功能的改变.方法 受检对象为老年男性95例,其中无糖尿病史正常老年人30例[年龄(69.9±3.7)岁],组Ⅰ为34例无左室二维结构改变的老年2型糖尿病患者[年龄(69±4)岁],组Ⅱ为31例检出左室壁肥厚、左室扩大等二维结构改变的老年2型糖尿病性心肌病变患者[年龄(71.0±5.3)岁].Doppler超声心动图检测指标包括:左室壁厚度、左室内径及射血分数和主动脉瓣口、二尖瓣口Doppler血流速度及相应的时间测量并计算左室Tei指数.结果 组Ⅰ、组Ⅱ分别与正常对照组比较:A峰、E峰、E/A值和Tei指数均有显著性差异,均P<0.05.组Ⅱ分别与组Ⅰ、正常对照组比较:左室壁厚度差异均显著(均P<0.05).结论 左室Tei指数是反映老年2型糖尿病左心整体功能改变的较简便、无创、敏感及准确的指标,可为临床老年2型糖尿病性心肌病变的早期诊治及预后提供依据.

    作者:王新明;孙红;陶国枢;牟善初 刊期: 2007年第08期

  • 平板运动试验对经绝期女性冠心病的诊断意义

    运动心电图测试中1/3以上的女性受检者会出现假阳性反应[1],但以往的一些报道中并未对这部分受检者的年龄段做出明确的划分.2004年4月~2005年4月我们对1368例45~55岁经绝期前后(已闭经或月经紊乱)女性的平板运动试验结果进行了观察,从受试者中筛选出阳性者进行冠状动脉造影检查,并根据检查结果判定平板运动试验对经绝期女性冠心病(CAD)的诊断意义.

    作者:刘宏;杨晓村;吴维维 刊期: 2007年第08期

  • 旋覆花素抑制内皮剥脱诱导血管炎症反应的研究

    目的 探讨旋覆花素抑制血管内膜增生的药理学机制.方法 SD大鼠灌胃服用旋覆花素溶液,3 d后行球囊内皮剥脱术,术后继续给药,于不同时间处死大鼠后检测各指标变化.结果 和对照组相比,旋覆花素能显著抑制内皮剥脱术后血管新生内膜的增生,降低内皮剥脱术引起的血清C-反应蛋白(CRP)、前列腺素E2(PGE2)、丙二醛(MDA)水平的升高(P<0.05),同时增加总抗氧化能力(TAOC)(P<0.05).结论 旋覆花素通过发挥抗氧化与抗炎作用,减缓了内皮剥脱后血管新生内膜的增厚.

    作者:孙启玉;孟芳;韩梅;温进坤 刊期: 2007年第08期

  • 番茄红素对鹌鹑高脂血症性脂肪肝的影响

    目的 观察番茄红素(Lycopene)对鹌鹑高脂血症性脂肪肝的影响.方法 制备鹌鹑高脂血症性脂肪肝模型;测定肝组织胆固醇、甘油三酯、丙二醛及SOD含量以及血清生化学指标;观察鹌鹑肝组织病理学变化.结果 番茄红素用药4 w即可显著降低鹌鹑血浆中的TC、TG含量;用药8 w后可显著降低鹌鹑肝脏TC、TG和MDA含量,提高SOD活力,且呈剂量依赖关系.番茄红素组鹌鹑肝脂肪变程度减轻,肝细胞质内脂滴明显减少.结论 番茄红素具有防治鹌鹑实验性脂肪肝的作用.

    作者:马建慧;郑兴征;刘洪海 刊期: 2007年第08期

  • 升黄益智方对痴呆模型小鼠脑组织SOD活性的影响

    目的 探讨升黄益智方对痴呆模型小鼠脑组织氧化物歧化酶(SOD)活性影响及作用.方法 通过分光光度计检测正常组及痴呆模型小鼠脑组织SOD活性.结果 痴呆模型组小鼠脑组织SOD含量较正常对照组明显下降(P<0.001),中药治疗组较模型组显著升高(P<0.05),中药治疗组较西药治疗组明显提高(P<0.05).痴呆模型组及西药治疗组所测SOD含量低于中药治疗组.结论 升黄益智方可提高模型痴呆小鼠脑组织的SOD活性,该复方能够通过抗氧自由基、抗脂质过氧化等多种途径而保护脑组织免受损伤.

    作者:徐青;孙强三;王晓红;王道清;徐明 刊期: 2007年第08期

  • 生长激素和生长抑素对大鼠胰岛β细胞功能和糖代谢的影响

    目的 探讨生长激素(GH)和生长抑素(SS)对大鼠胰岛β细胞功能和糖代谢的影响.方法 分组给大鼠连续15 d皮下注射GH、SS,测定体内GH、胰岛素及血糖水平;镜下观察胰腺和胰岛β细胞形态.同时设立安慰剂对照组.结果 GH组GH水平及血糖水平较正常对照组升高(P<0.05);SS组GH水平及β细胞分泌功能指数较正常对照组降低(P<0.05);胰岛素水平及胰岛素敏感性指数各组间差异无显著性(P>0.05);光镜下胰岛β细胞染色GH组较正常对照组加深,SS组和正常对照组着色较淡.结论 GH可以诱导胰岛素抵抗(IR),SS可以改善IR.

    作者:杨萍;刘聪;祝金明;倪劲松;孟繁波 刊期: 2007年第08期

  • 加味厚朴三物汤治疗腹部术后麻痹性肠梗阻36例分析

    目的 观察加味厚朴三物汤治疗腹部术后麻痹性肠梗阻的临床疗效.方法 选择我院外科、妇产科腹部术后早期麻痹性肠梗阻病人66例,随机分为两组,均在胃肠减压,营养支持,纠正水、电解质紊乱基础之上,治疗组36例用加味厚朴三物汤治疗,对照组30例用马叮林20 mg,日三次口服.观察72 h总结疗效.结果 治疗组临床疗效,肠音出现时间、肛门排气时间、排便时间均明显优于对照组,均P<0.01.结论 加味厚朴三物汤行气消胀作用较强,治疗腹部术后早期麻痹性肠梗阻疗效明显.

    作者:李慎贤;于飞;田忠 刊期: 2007年第08期

  • 155例老年肺部感染患者痰液的细菌培养及药敏分析

    为及时了解老年人肺部感染细菌种类分布、耐药状况,收集本院老年肺部感染患者的痰液标本155份,进行了细菌培养及耐药性分析.

    作者:李燕子 刊期: 2007年第08期

  • 老年单纯收缩期高血压与血管活性物质对左室肥厚的影响

    目的 探讨老年单纯收缩期高血压(ISH)患者的血管活性物质与左心室肥厚(LVH)的相关性.方法 收集未用过降压药物的老年高血压患者67例,分为ISH及双期高血压(SDH)两组,同期健康老年人40例作为对照组.分别应用超声多普勒技术、放射免疫技术测定三组血管活性物质参数.结果 两个高血压组舒张功能受损指标与对照组有显著性差异(P<0.01),其中,ISH组更具显著性;心钠素(ANP),醛固酮(Aldo),血管紧张素(AngⅡ)水平两个高血压组明显升高而降钙素基因相关蛋白(CGRP)水平则较对照组下降(P<0.01).结论 ISH患者易出现舒张功能不全且同SDH患者一样存在血管活性物质的异常导致LVH.

    作者:王立新;赵俊峰;李建平;董丽萍;高云英;李天民;郑学军;张万森 刊期: 2007年第08期

  • 胃癌及其区域淋巴结中PTEN、IGF-1/IGF-1R mRNA的表达

    目的 探讨胃癌及其区域淋巴结中MMAC1基因(PTEN),胰岛素样生长因子1(IGF-1)/胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)mRNA的表达及其在胃癌发生和淋巴结转移中的作用.方法 RT-PCR方法检测胃癌组织、正常胃黏膜、胃癌区域淋巴结中PTEN,IGF-1/IGF-1R mRNA的表达.结果 胃癌组织中PTEN mRNA表达降低,IGF-1/IGF-1R mRNA表达增高,PTEN/IGF的表达与年龄,性别无关,与肿瘤的分期、分化程度及淋巴结转移明显相关.转移淋巴结中PTEN/IGF表达失衡,并且比原发灶中的失衡更加严重.结论 PTEN mRNA表达降低,IGF-1/IGF-1 RmRNA表达增高对胃癌的发生和转移起着重要作用.

    作者:赵雪峰;李勇;范立侨;赵群;李琰;宋振川;王力利 刊期: 2007年第08期

  • 氟伐他汀对动脉粥样硬化血管外膜炎症的影响

    目的 探讨氟伐他汀对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔血管外膜炎症的影响及其机制.方法 32只新西兰白兔随机分为3组:①对照组8只;②AS模型组12只;③氟伐他汀组12只,喂养12w后处死,取得主动脉标本,用HE染色观察形态学变化和血管外膜炎症细胞浸润情况,用免疫组化染色镜下观察血管外膜成纤维细胞NF-κB p65活性变化.结果 正常对照组胸主动脉外膜未见炎性细胞浸润,成纤维细胞胞核内未见NF-κB p65阳性表达.AS组血管外膜可见明显的炎性细胞浸润,成纤维细胞胞核中NF-κB p65阳性表达明显增加.氟伐他汀组血管外膜可见炎性细胞浸润,但较AS组明显减少[(0.17±0.02)与(0.43±0.19),P=0.003],成纤维细胞NF-κB p65有阳性表达,亦较AS组明显减少[(0.31±0.02)与(0.57±0.04),P=0.002].结论 氟伐他汀对AS血管外膜炎症的抑制作用可能与抑制成纤维细胞NF-κB p65活性有关.

    作者:鹿克风;吕琳;朱兴雷 刊期: 2007年第08期

  • 血红素氧化酶-1/一氧化碳在老年慢性喘息性支气管炎中的作用

    目的 探讨内源性一氧化碳(CO)在老年慢性喘息性支气管炎中的变化及临床意义.方法 选取39例老年慢性喘息性支气管炎患者,根据其预后分为好转组(30例)和死亡组(9例).分别于急性期和恢复期抽取静脉血,测定血浆CO、TNF-α、IL-6浓度,依据APACHE Ⅱ评分判断患者病情轻重.结果 (1)好转组急性期的CO、TNF-α、IL-6水平明显高于恢复期(P<0.001).CO、TNF-α、IL-6与APACHEⅡ评分两两之间均呈显著正相关(P<0.001).(2)死亡组的CO水平不升高.结论 (1)内源性CO在老年慢性喘息性支气管炎患者体内明显升高,在老年肺部炎症性疾病中起保护性作用.(2)CO与炎症反应、病情轻重程度有关,可以作为观察病情和判断预后的指标.

    作者:曹若瑾;钱玉英;冯明;陈秉良 刊期: 2007年第08期

  • 老年肾脏移植的临床特点

    目的 探讨老年患者肾移植的风险、以及影响肾长期存活的因素.方法 对54例≥60岁老年肾移植病例(老年组)进行回顾性分析,并与同期305例<60岁肾移植病例(对照组)进行对比分析.结果 老年患者在术后1年,3年的人/肾存活率分别为92.6%/88.9%、79.6%/75.9%.老年组急性排斥反应发生率为7.4%,与对照组(8.9%)无显著性差异(P>0.05).结论 老年患者进行肾移植手术,需进行详实有效的术前检查(特别是心脑血管方面的检查),并积极运用个体化抗排斥药物.

    作者:彭龙开;姜奕;谢续标;彭风华;蓝恭斌 刊期: 2007年第08期

  • 老年人日常问题解决能力的评估方法

    有关老年心理或认知老化的研究中日常问题解决能力或日常认知受到越来越多的关注[1,2],对该研究主题日益重视的一大原因在于,研究者们不断认识到传统的在实验室中或者通过基本心理能力量表测量到的认知功能老化方面的结果通常是脱离情境的[1,3,4],往往否定或忽略了老年人从日常生活中积累的经验在问题解决中的作用,因而容易过高估计老年人随年龄增长出现的问题解决能力或认知功能下降的程度[1,5,6].

    作者:陈勃 刊期: 2007年第08期

  • 老年人健康行为与心理健康关系的调查

    目的 探讨老年人的健康行为与心理健康之间的关系.方法 采用候玉波等编制的健康行为量表和症状自评量表(SCL-90)对300名老年人进行测试,并进行相关分析.结果 不同年龄和文化程度老年人在健康行为与心理健康方面有显著性差异(P<0.05);参与活动与心理健康水平呈显著正相关(P<0.05);心理应激、不良生活习惯与心理健康呈显著负相关(P<0.05).结论 积极参与各项活动、减少各种心理应激和建立良好的生活习惯有利于提高老年人的心理健康水平.

    作者:张瑞芹;肖健 刊期: 2007年第08期

  • 经尿道钬激光前列腺剜除术治疗高龄高危良性前列腺增生25例

    1998年Fraundorfer等[1]首先报道使用经尿道钬激光前列腺剜除术(HoLEP)术联合组织粉碎器治疗良性前列腺增生(BPH).此项技术应用可避免产生电切综合征(TUR综合征),减少术中出血量,具有良好的临床应用前景.近来,国外有报道应用HoLEP术治疗前列腺重量达100~200 g的病人[2].2004年~2005年我科成功为25例高龄高危BPH患者实施HoLEP,现报告如下.

    作者:杜传军;张骁;经宵;白福鼎 刊期: 2007年第08期

  • 钩椎关节增生与颈性眩晕关系的研究

    目的 探讨钩椎关节增生与颈性眩晕发病的关系.方法 选取颈性眩晕患者32例及同年龄组的对照30例,所有受检者均排摄颈椎双斜位X光片,检测第3~6颈椎(C3~C6)钩突高度与宽度.在颈椎斜位片上以每个椎体上缘低点至椎体后缘与椎板上缘交点的连线为基线,再于钩突顶端向该基线引一垂直线,垂线的距离即钩突的高度.钩突外侧一点向基线引垂线与基线相交为A点,钩突前缘与基线相交处为B点,A、B两点之间连线距离为钩突的宽度.结果 颈性眩晕组与对照组同节段钩突高度及宽度均无显著差异.结论 颈性眩晕症状的出现与钩椎关节增生无明显相关性.

    作者:张春国;杨有庚 刊期: 2007年第08期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅