学术投稿

乙型肝炎病毒(adr亚型)重组逆转录病毒包装及滴度测定

王岚;杨世忠;于志凤;赵颖

关键词:乙型肝炎病毒(adr), 重组逆转录病毒载体, 转染, 包装, 滴度测定
摘要:目的 包装乙型肝炎病毒(adr亚型)重组逆转录病毒并进行滴度测定,为下一步构建乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠奠定基础.方法 将乙型肝炎病毒(adr)全基因组插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了乙型肝炎(adr)重组逆转录病毒载体,鉴定正反向后,脂质体转染PA317包装细胞,G418抗性压力下进行筛选得到阳性细胞克隆,扩大培养后进行滴度测定,选取产毒率高细胞克隆株,然后扩大培养、浓缩,进行滴度测定.结果 分别获得HBV(adr)全基因组正向和反向插入的重组逆转录病毒.正连重组逆转录病毒载体经PA317细胞包装,经筛选、浓缩后滴度为106 CFU/ml,反连重组逆转录病毒载体经PA317细胞包装,经筛选、浓缩后滴度为105 CFU/ml.结论 PA317细胞包装了含乙型肝炎病毒(adr)全基因组的重组逆转录病毒.
中国老年学杂志相关文献
  • P53及增殖细胞核抗原在老年人胃癌及大肠癌中的表达及相关性分析

    目的 探讨P53、Ki-67、PCNA在老年人胃癌及大肠癌中的相互关系.方法 应用SP免疫组化方法(链霉菌抗生物蛋白-过氧化物酶连接法)对31例胃癌及44例大肠癌组织中的P53、Ki-67、PCNA蛋白进行检测.结果 P53、Ki-67、PCNA与老年人胃癌及大肠癌组织分化程度无关(P>0.05),相互之间呈正相关,但在胃癌中PCNA表达阳性率明显高于P53,P53、Ki-67、PCNA在老年人大肠癌的表达明显高于胃癌(χ2=3.91,P<0.05),但PCNA和Ki-67在老年人胃癌及大肠癌的表达中无明显差异(P>0.05).结论 抑癌基因的突变和增殖异常共同参与了老年人胃及大肠癌的发生及发展,检测上述蛋白可作为老年人胃肠肿瘤的早期诊断及判断预后的参考指标.

    作者:张继红;姜晶 刊期: 2006年第09期

  • 结肠癌组织中细胞周期蛋白E和增殖细胞核抗原表达的研究

    目的 研究细胞周期蛋白E(CyclinE)和增殖细胞核抗原(PCNA)在结肠癌组织中的表达及二者之间的关系.方法 采用原位杂交法和免疫组化S-P法,对40例结肠癌、10例结肠腺瘤和10例结肠正常黏膜组织进行CyclinE mRNA和PCNA的检测.结果 结肠癌组织中CyclinE mRNA的阳性表达率为62.5%,PCNA指数为(50.09±11.15),均显著高于结肠腺瘤和结肠正常组织(P<0.05);CyclinE mRNA表达阳性组的PCNA指数明显高于CyclinE mRNA阴性组(P<0.05);CyclinE mRNA与肿瘤的浸润深度、有无淋巴结转移密切相关(P<0.05),与肿瘤的分化程度、有无肝转移不相关(P>0.05);PCNA与肿瘤的浸润深度、分化程度及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05),与有无肝转移无明显相关(P>0.05).结论 CyclinE可作为结肠癌的又一细胞增殖指标,其对结肠癌的发生、发展起重要作用.

    作者:金翠香;杨静;徐昌青 刊期: 2006年第09期

  • 99Tcm-甲氧基异丁基异腈(MIBI)显像与甲状腺癌远处转移的关系研究

    目的 探讨甲状腺癌原发灶摄取和清除99Tcm-MIBI的能力与其发生远处转移的关系.方法 80例甲状腺癌患者行99Tcm-MIBI双时相甲状腺局部静态显像,利用感兴趣区技术,分别计算MIBI早期、延迟肿瘤与正常组织的放射性计数比值(T/N)及洗脱率.根据临床检查结果,将患者分为远处转移组(31例)和无远处转移组(49例),并对两组结果进行统计学分析.结果 远处转移组MIBI早期、延迟T/N和洗脱率分别为(2.92 ±0.97)%、(1.99 ±0.99)%和(34 ±5.91)%;无远处转移组分别为(1.74 ±0.78)%、(1.97 ±0.86)%和(13 ±4.21)%,远处转移组MIBI早期T/N和洗脱率均高于无远处转移组(P < 0.05),两组间MIBI延迟T/N差异无显著性(P> 0.05).结论 99Tcm-MIBI显像早期T/N及洗脱率与甲状腺癌的远处转移关系密切,有进一步深入研究的价值.

    作者:高识;马庆杰;孙辉;温强;赵劼 刊期: 2006年第09期

  • 远隔预处理和后处理对兔急性心肌缺血再灌注损伤的作用

    目的 探讨远隔预处理和后处理是否具有减轻兔心肌缺血再灌注损伤的作用及其机制.方法 新西兰大白兔40只,随机平均分为4组:对照组、心肌缺血预处理组、肢体缺血预处理组和肢体缺血后处理组,分组进行干预.测定血浆磷酸肌酸激酶(CK)和丙二醛(MDA)活性及心肌梗死面积并检测组织髓过氧化物酶(MPO)活性.结果 心肌缺血预处理组、肢体缺血预处理组和肢体缺血后处理组心肌梗死面积、再灌注末MDA活性、缺血组织MPO活性均明显低于对照组(均P<0.01).结论 远隔预处理和后处理均有显著的心脏保护作用,其作用可能与减轻活性氧的损伤及抗氧化作用加强有关.

    作者:李春梅;张兴华;马晓静;罗曼;刘旭杰;王国栋 刊期: 2006年第09期

  • 老年与非老年阻塞性睡眠呼吸暂停患者Auto-CPAP疗效比较

    目的 老年与非老年阻塞性睡眠呼吸暂停患者Auto-CPAP疗效比较.方法 用多导睡眠监测系统通过7 h多导睡眠图确诊OSAHS患者35例,并对其进行单晚的Auto-CPAP治疗,按年龄分为老年组与非老年组,对比分析两组Auto-CPAP治疗前与治疗后各参数的变化.结果 Auto-CPAP治疗后与治疗前相比两组AHI、MAI、长暂停时间、低SaO2、平均SaO2、SaO2<90%比例均有显著改善(P<0.01或P<0.05),但对于睡眠结构影响仅非老年组慢波睡眠(SⅢ-Ⅳ/TST)的增加有统计学意义(P<0.05).结论 Auto-CPAP治疗老年组和非老年组OSAHS患者均有很好的疗效.

    作者:付柳英;汪晶;苏晶 刊期: 2006年第09期

  • 氯沙坦防治糖尿病肾病的比较研究

    目的 观察在微量白蛋白尿发生前后应用氯沙坦对糖尿病肾病(DN)的治疗作用及其机制.方法 单侧肾切除的链脲霉素(STZ)糖尿病大鼠,随机分为正常对照组、DN组、早期治疗组和晚期治疗组.早期治疗和晚期治疗组分别于糖尿病模型建立后即刻或第9周起开始给予氯沙坦20 mg·kg-1·d-1灌胃,疗程均为8 w.第16周时,观测肾组织形态学及肾功能变化,并采用荧光实时定量RT-PCR检测肾脏转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、;纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)等细胞因子的表达情况.结果 DN组大鼠尿微量白蛋白排泄率(UAER)持续上升;血肌酐(Scr)、肾脏肥大指数(KW/BW)、肾小球平均体积(MGV)、系膜面积比(FMA)以及肾脏TGF-β1、CTGF、PAI-1和纤维连接蛋白(FN)的mRNA表达均明显升高,而肌酐清除率(Ccr)已开始下降.早期治疗和晚期治疗组以上指标均明显改善,但两组之间无显著差异.结论 氯沙坦可通过下调肾脏细胞因子基因表达,起到肾脏保护作用;但在微量白蛋白尿出现之前进行干预并不比在微量白蛋白尿出现之后进行治疗的效果更好.

    作者:柳刚;关广聚;赵敬杰;吕学爱;陈兵;侯香华 刊期: 2006年第09期

  • 黄芪注射液对糖尿病肾病患者尿白蛋白及TGF-β1的影响

    TGF-β1作为一种多功能生长因子,与细胞外基质(ECM)的沉积密切相关,是肾小球硬化、肾小管间质纤维化疾病中的重要调节因子.近年动物实验发现黄芪可下调TGF-β1,从而减轻肾小球硬化程度[1].本文采用黄芪注射液治疗糖尿病肾病,并观察黄芪注射液对糖尿病肾病患者尿TGF-β1的影响.

    作者:邱若旗;王桂玲 刊期: 2006年第09期

  • 过氧化物酶体增殖物激活受体-α在肝病发病机制中作用的研究进展

    过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator activated receptors,PPARs)是一类由配体激活的核转录因子,属Ⅱ型核受体超家族成员,活化后可以调控多种核内靶基因的表达,具有多种生物学效应[1].近年来研究发现,作为PPARs的亚型之一,PPAR-α具有调节脂肪代谢和调节炎症、免疫以及细胞分化等作用,参与诸多肝脏疾病的发生及发展,本文结合相关文献做一综述.

    作者:孙龙;孙琳琳;杨世忠 刊期: 2006年第09期

  • 老年患者双极股骨头置换术的中远期疗效

    人工髋关节置换术被广泛应用老年股骨颈骨折病人,包括单极、双极全髋假体.然而,全髋假体有因髋臼假体松动、溶骨情况的发生[1],单极假体则有股骨头中心性脱位[2]的并发症.我院自1986~1998年应用双极股骨头置换术治疗老年股骨颈骨折病人,取得满意效果.

    作者:石聚颖;丁春发;周嗣盛;刘建文 刊期: 2006年第09期

  • MRI、CT诊断老年患者恶性梗阻性黄疸的差异

    目的 比较磁共振影像、CT两种影像学手段诊断恶性梗阻性黄疸的差异.方法 选择经过磁共振影像(MRI、MRCP)、CT检查并经过病理证实为恶性梗阻性黄疸患者42例,分析两种影像学对于梗阻部位和疾病定性判定的准确性.结果 MRI结合MRCP判定病变部位的准确率为:95.24%(40/42);CT的准确率为:78.57%(33/42).MRI(MRCP)、CT超判定疾病的准确率分别为:92.86%(39/42),83.33%(35/42).两种影像学在定位方面具有统计学差异(χ2定位=5.124,P<0.05),但在定性方面则不具有统计学差异(χ2定性=1.848,P>0.05).结论 MRI(结合2维、3维的MRCP)判定疾病部位的准确率高,CT则快速、方便,在临床上应结合不同的患者的实际情况进行不同的检查.如果二者结合判断梗阻性黄疸的病因十分精确.

    作者:刘云霞;李勇;李祎;杨海山 刊期: 2006年第09期

  • 改良法经第二三腰椎间隙行腰麻硬膜外联合阻滞的临床观察

    目的 探讨改良法经第二三腰椎间隙行腰麻硬膜外联合阻滞(腰硬联合阻滞)对腰麻针置入即刻出现神经刺激症状的发生率和硬膜外导管置入蛛网膜下腔可能性的影响.方法 ASAI或II级拟行全子宫切除术、经第三四腰椎间隙(L3,4)行腰-硬联合阻滞穿刺失败的患者100例,均改为经第二三腰椎间隙(L2,3)进行穿刺.根据穿刺手法不同,随机分为2组:传统方法组(C组)和改良法组(G组).观察两组腰麻针置入蛛网膜下腔即刻神经刺激症状的发生率和硬膜外导管置入蛛网膜下腔的发生率.结果 与C组相比,G组腰麻针置入蛛网膜下腔即刻出现神经刺激症状的发生率和硬膜外导管置入蛛网膜下腔的发生率均降低(P<0.05),但两组患者术后均未出现任何症状.结论 改良法经第二三腰椎间隙行腰硬联合阻滞可降低在该间隙穿刺腰麻针置入蛛网膜下腔即刻出现神经刺激症状的发生率和硬膜外导管置入蛛网膜下腔的发生率,从而可避免脊髓圆锥的损伤.

    作者:刘玉福;王丽萍;刘铁成;刘昕宇 刊期: 2006年第09期

  • 20(S)-原人参二醇对肝癌生长的抑制作用及对癌细胞凋亡的影响

    目的 探讨原人参二醇(Ppd)抑制肿瘤生长和促进肿瘤细胞凋亡作用及其机制.方法 建立肝癌动物模型,将实验动物分为五组;对照组、阳性药组、Ppd低剂量组(Ppd 25 mg/kg)、Ppd中剂量组(Ppd 50 mg/kg)、Ppd高剂量组(Ppd 100 mg/kg),2 w后处死动物测定肿瘤的重量和体积并做组织切片进行原位末端标记染色(TUNEL).结果 Ppd给药组肿瘤生长被抑制,其肿瘤体积、重量均较对照组减小(P< 0.01),TUNEL 结果显示Ppd 100 mg/kg给药组细胞凋亡数量与对照组之间存在显著性差异(P< 0.01).结论 Ppd具有抑制肿瘤细胞的增殖的作用,其作用机制的可能是促进肿瘤细胞的凋亡.

    作者:秦俊杰;李永杰;付军;冷吉燕 刊期: 2006年第09期

  • 硫酸镁预处理对人脐静脉内皮细胞缺氧再复氧损伤的保护作用

    目的 探讨高浓度镁离子对培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用.方法 对培养的HUVECs传代并分组:对照组常规培养;缺氧再复氧组缺氧1 h,再复氧1 h;镁离子干预组分别将细胞加入镁离子终浓度为2、4、6、8、10 mmol/L的培养液中进行培养,12 h后进行缺氧再复氧,观察三组细胞形态学变化,测定培养液乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及内皮素(ET-1)的含量,并测定细胞内谷胱甘肽(GSH)含量并进行统计分析.结果 ①缺氧再复氧组细胞损伤严重,随镁浓度增加细胞形态结构趋于正常.②缺氧再复氧组培养液LDH、MDA及ET-1含量较对照组明显升高(P<0.001﹚,镁离子组较缺氧复氧组降低(P<0.05);缺氧复氧组NO及细胞GSH含量较对照组降低[(32.50±8.12)vs(96.46±8.77),P<0.001;(6.37±1.03)vs(16.01±2.41),P<0.001],镁离子组较缺氧复氧组升高(P<0.05).结论 高浓度镁离子能预防缺氧复氧损伤引起细胞结构改变,保护细胞膜和内皮功能.

    作者:李健;董果雄;冯义柏 刊期: 2006年第09期

  • 经腹手助胸腔镜手术治疗高龄食管癌

    电视辅助胸腔镜技术(VATS)近十年来发展迅速,已成为胸外科比较成熟的微创手术,在微创方面独具优势[1~6],尤其在高龄患者的手术治疗中具有极大的临床价值.但应用VATS进行食管、贲门癌的手术,手术适应证较局限,且存在争议[7].

    作者:谢春发;李章红;江柏青;罗志方;李树林;赖政洪 刊期: 2006年第09期

  • 老年急性胰腺炎102例临床分析

    为了探讨老年急性胰腺炎(AP)临床发病特点,治疗措施及其影响预后的因素.本文对老年AP102例,进行回顾性临床分析.

    作者:周波;于建勋;宋莹;于萌 刊期: 2006年第09期

  • 老年人睡眠呼吸暂停与血液流变学相关性研究

    目的 探讨老年睡眠呼吸暂停综合征(SAS)与血液流变学各项指标的相关性.方法 依据多导睡眠图监测结果,按睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)分为3组:正常对照组(AHI<5),轻度SAS组(5≤AHI<30),中重度SAS组(AHI≥30).对各组进行血液流变学检查、体重指数(BMI)测定.结果 中重度SAS组BMI大于正常对照组及轻度SAS组(P<0.05,P<0.01),AHI与BMI有明显的相关性,中重度SAS组的血液黏稠度、血细胞比容(VPRC)、红细胞聚积指数(RAI)、纤维蛋白原(FIB)明显高于轻度SAS组和正常对照组(P<0.05, P<0.01).结论 SAS与肥胖的严重程度及血液黏稠度增高有关.

    作者:金文敏;张莉 刊期: 2006年第09期

  • 褐藻多糖硫酸酯对老龄小鼠抗氧化酶活性的实验研究

    目的 研究褐藻多糖硫酸酯(APS)对老龄小鼠超氧化物歧化酶(SOD)谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)丙二醛(MDA)的影响.方法 化学发光法测定SOD活性,比色分析法测定GSH-px活性及MDA含量.结果 老龄小鼠多糖APS组脑、肾、心SOD、GSH-px活性升高,与对照组比较差异显著(P<0.01,P<0.05),肝组织无差异.多糖APS组脑、肾、心MDA含量降低,与对照组比较差异显著(P<0.05),肝组织无差异.结论 APS能够提高老龄小鼠SOD、GSH-px活力,降低MDA含量,具有一定清除自由基作用.

    作者:陆艳娟;李晓林;李晓梅;孙国光;马岩 刊期: 2006年第09期

  • 离休老人心理健康状况调查及心理问题分析

    目的 了解离休老人住院后心理健康状况,为患者住院后及时有效进行心理干预提供科学依据.方法 采用3种国内外通用量表SCL-90、SDS、SAS,对500例离休患者进行心理问卷调查研究,通过系统评分方法对此组调查对象心理问题进行分析.结果 住院1 w内心理问卷调查显示,50.6%的患者不同程度存在心理问题.结论 住院离休老人约半数患者存在不同程度的心理问题,应引起重视.

    作者:王桂贤;程秀丽;李修英;刘群 刊期: 2006年第09期

  • 农村老年人孤独感与生活状态的相关性研究

    研究显示较强的孤独感会对老年人生存质量(QOL)的评分产生不良影响[1],因此成为影响QOL不容忽视的健康问题[2].引起老年人孤独的原因是复杂的,而生活状态是其中的重要因素,但他们之间的关系目前尚缺乏深入的研究,特别是农村老年人作为一个庞大的群体,对他们的孤独感及其与生活状态的关系的研究仍不充分.

    作者:梁秋霞;李艳怡;杨思慧;周恒曦;王子文;黄俭强 刊期: 2006年第09期

  • 刺五加对大鼠脑出血病理变化及β-EP的影响

    目的 观察不同剂量的刺五加(AS)注射液对大鼠脑出血(ICH)病理变化及脑组织β-内啡肽(β-EP)含量的影响,为临床AS注射液治疗ICH 提供一定的理论依据.方法 采用胶原酶注入法建立大鼠ICH模型;干湿重法测定各组ICH大鼠脑组织含水量;电镜观察脑组织病理变化;放免法测定脑组织β-EP的含量.结果 (1)脑含水量:用药第3、7天,大、中剂量组均显著低于对照组(P<0.01);第7天,大、中剂量组显著低于小剂量组(P<0.01),小剂量组明显低于对照组(P<0.05).(2)电镜观察显示:第7天,对照组血肿旁脑组织普遍可见神经胶质细胞核染色质边集现象,神经细胞和神经胶质细胞线粒体显著肿胀、空泡样改变,线粒体嵴减少;中剂量组上述变化不明显.(3)脑组织β-EP含量:用药第1天,各治疗组显著高于对照组(P<0.01);第3、7天,大、中剂量组均显著低于对照组(P<0.01),大剂量组显著低于小剂量组(P<0.01).结论 (1)AS注射液能明显减轻ICH大鼠脑水肿并阻断ICH后脑细胞凋亡,对大鼠ICH有确切的治疗效果.在脑出血急性期即可开始应用AS注射液,在允许的范围内应用大剂量能达到佳治疗效果.(2)AS注射液可能具有β-EP受体阻断剂样作用.

    作者:黄良国;王东;葛正龙 刊期: 2006年第09期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅