夏春华；徐文炜；熊玉卿；章新晶
目的探讨ERK和JNK在沙土鼠脑缺血预处理中的表达及作用.方法采用沙土鼠前脑缺血再灌注损伤模型.随机分为假手术组(SH)、预处理对照组(IC)、预处理缺血组(IP)及脑缺血再灌注组(IR);各组根据再灌注15 min、2 h、4 h、6 h、1 d、3 d、5 d及7 d又分8个亚组.在预定时间点行开阔法行为学检查、TUNEL法海马CA1/3区凋亡细胞检测、免疫组织化学SP法测定p-ERK、p-JNK在海马区的变化.结果 IP可减少沙土鼠探索活动及海马CA1区凋亡锥体细胞数量(vs IR, P<0.01)各组CA1区p-ERK无表达,IR组海马CA1区p-JNK表达较强,再灌后1d为明显,IP可明显减弱CA1区p-JNK的表达 (vs IR, P<0.01),明显增强CA3区p-ERK的表达(P<0.05,P<0.01).结论脑缺血可导致ERK及JNK在海马各亚区的差异性表达.缺血预处理可能通过抑制CA1区JNK磷酸化、增强CA3区ERK活性而保护海马细胞.
作者：王耀岐；李军；曹红；李广明；曾因明 刊期： 2006年第03期
目的通过对老年大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及相关基因bcl-2、fas表达的观察,探讨天癸更年软胶囊所含沙棘脂肪酸对围绝经期女性卵巢功能的调节作用,推测沙棘脂肪酸治疗围绝经期综合征的作用机制.方法采用22个月龄的SD ♀大鼠,随机分为老年对照组、雌激素组、沙棘脂肪酸大、中、小剂量组,另设青年大鼠对照组.用TUNEL法研究各组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况,采用免疫组化法观察bcl-2及fas蛋白表达情况和原位杂交方法检测bcl-2 mRNA及fas mRNA表达情况,用Q55OCW图像分析系统进行灰度分析.结果大中小剂量组均可不同程度抑制卵巢颗粒细胞凋亡,增强bcl-2蛋白及mRNA表达,减弱fas蛋白及mRNA表达.结论沙棘脂肪酸通过调整bcl-2和fas表达,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,从而实现调节雌激素水平,改善围绝经期症状.
作者：赵丽梅；袁秉祥；魏霞蓁；胡锐；刘波；康军；陈东 刊期： 2006年第03期
目的探讨库容性Ca2+内流( capacitative Ca2+entry,CCE)是否参与大鼠远端结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程.方法利用器官离体装置、张力换能器、Powerlab 4/25T数据采集分析系统测定远端结肠平滑肌的张力.结果毒胡萝卜素(thapsigargin,TG,10 nmol·L-1～1 μmol·L-1)诱导结肠平滑肌条产生持续的张力性收缩,不同浓度TG所致的同步收缩反应张力不同.在无钙Krebs液(包含1 mmol·L-1 EDTA)中使用TG将肌条培养35 min后,再加入Ca2+ 2.5 mmol·L-1,比未使用TG处理的肌条产生的收缩张力明显提高(99%±28% vs 70%±8%).且TG耗竭胞内钙库后再复钙所致的收缩效应,不受L型钙通道阻断剂verapamil影响,但可被SOC通道阻断剂La3+减弱.结论 TG耗竭胞内钙库后再复钙诱导的大鼠远端结肠平滑肌收缩反应由CCE介导,提示CCE是提供大鼠远端结肠平滑肌收缩的激活信号Ca2+的来源之一,参与完成结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程.
作者：柯道平；周华；李忠稳；孔德虎；马嵘 刊期： 2006年第03期
白藜芦醇(Resveratrol,RVL)为多酚类物质,是广泛存在于水果、中药和葡萄酒中的一种植物抗毒素.随着对RVL研究的深入,人们发现它具有多种药理学活性,其中RVL的心血管保护作用逐渐成为研究热点,但其有关抗心律失常及抗心肌缺血作用鲜见报道.本文就RVL对实验性心律失常和急性心肌缺血的保护作用进行研究.
作者：张红雨；徐长庆；李宏霞；李鸿珠；韩丽萍；孙轶华；李宝馨；杨宝峰 刊期： 2006年第03期
目的建立一种HPLC检测法,以测定人体血浆中奥沙普秦的药物浓度,并对两种奥沙普秦肠溶片生物等效性进行评价.方法 18名健康受试者单剂量交叉口服400 mg奥沙普秦供试制剂或参比制剂后不同时间点采血,采用HPLC法测定其浓度,计算其药动学参数和相对生物利用度,评价两制剂的生物等效性.结果奥沙普秦供试制剂与参比制剂AUC0-240 h分别为(2852.86±871.00)和(2992.84±854.02) μg·L-1·h,实测Cmax分别为(33.48±11.36)和(32.70±7.30) μg·L-1,实测Tmax分别为(12.1±5.7)和(13.8±5.8) h,T(1)/(2)ke分别为(57.11±8.51) h和(60.98±7.97) h.两制剂主要药动学参数经统计学分析差异无显著性.结论该方法简便灵敏,两制剂具有生物等效性.
作者：夏春华；徐文炜；熊玉卿；章新晶 刊期： 2006年第03期
目的测定南瓜蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用.方法以MTT法测定南瓜蛋白对B16细胞的增殖抑制作用,并以形态学、黑色素含量及细胞周期变化为指标,观察南瓜蛋白诱导B16细胞分化的作用.结果南瓜蛋白对B16细胞具有明显的增殖抑制作用,并阻止B16细胞由G1期向S期过渡从而停滞于G1期;细胞形态向正常上皮样细胞分化,生长缓慢,平铺不重叠,甚至形成网状结构,胞质内细胞器丰富,黑色素小体明显增多;黑色素含量增加.结论南瓜蛋白对B16细胞具有明显的诱导分化作用.
作者：谢捷明；俞昌喜；陈明晃；许盈；赵蓉；吴国华；周琳瑛 刊期： 2006年第03期
双嘧达莫(dipyridamole,DIP)为扩张冠状动脉和抑制血小板聚集的药物,临床主要用于防治血栓栓塞性疾病.后来相继发现DIP具有抗病毒[1]、抗氧化[2]和抗肿瘤作用,能够逆转肿瘤细胞的多药耐药性[3-4].随着DIP新的药理作用和临床用途的不断被发现,对DIP新制剂的研制也日益受到重视[5],但未见DIP药动学研究报道.本文对DIP灌胃给药在大鼠体内的药物代谢动力学进行了研究.
作者：齐永秀；高允生；张颖；郝立勇；费洪荣；曲晓兰；朱玉云 刊期： 2006年第03期
目的探讨胍丁胺对大鼠海马神经前体细胞增殖的影响及可能的作用机制.方法分离新生24 h大鼠的海马组织,制成单细胞悬液后进行无血清条件培养;用CCK-8试剂盒和3H-胸腺嘧啶核苷参入法检测细胞增殖和胍丁胺的作用.结果从新生大鼠海马分离得到的细胞可以持续分裂增殖形成细胞克隆(神经球);胍丁胺1、10 μmol·L-1可以显著促进神经前体细胞的增殖,并且这种促增殖作用可以被依法克生所抑制.结论胍丁胺可以促进体外培养的新生大鼠海马神经前体细胞的增殖,其促增殖作用可能与咪唑啉Ⅰ(I1)受体有关.
作者：刘莹；李云峰；张黎明；李锦 刊期： 2006年第03期
目的研究丹酚酸B镁(Magnesium lithospermate B,MLB)对去内皮离体血管舒缩反应以及对血管平滑肌细胞内游离钙浓度[Ca2+]i的影响.方法去内皮大鼠胸主动脉血管环等张收缩实验和采用钙离子荧光指示剂Fluo-3,运用F-4500阳离子测定系统动态检测胸主动脉平滑肌细胞[Ca2+]i.结果血管舒缩实验显示,无钙或常钙条件下MLB对血管基础张力均无作用.MLB 50～200 μmol·L-1预给药组抑制无钙条件下苯肾上腺素(PE) 1 μmol·L-1诱导的血管收缩以及常钙条件下KCl 60 mmol·L-1诱导的血管收缩,并呈浓度相关性.而钙离子通道阻滞剂维拉帕米(Ver) 10 μmol·L-1则完全阻断KCl诱导的血管收缩.在复钙实验中观察到,MLB 50～200 μmol·L-1不仅抑制PE 1 μmol·L-1诱导的内钙依赖性血管收缩,而且对复钙后外钙依赖性的血管收缩也有抑制作用.细胞内钙测定实验表明,MLB预孵育的AVSMCs静息态[Ca2+]i没有变化.无钙条件下,MLB 50、100和200 μmol·L-1抑制ATP 20 μmol·L-1诱导内钙释放引起的[Ca2+]i升高,抑制率分别为17.4%、32.4%和61.1%,显示较好的浓度相关性.AVSMCs于常钙条件下用Thapsigargin耗竭钙库后,KCl 60 mmol·L-1诱发外钙内流,引起[Ca2+]i升高,10 μmol·L-1的Ver则能完全阻断这种外钙内流.在MLB预给药组,KCl诱导的[Ca2+]i升高降低,抑制率分别为20.0%、32.8%和52.6%.结论 MLB能够抑制PE、高K+和复Ca2+诱导的血管收缩,并能抑制ATP和KCl诱导的血管平滑肌细胞内钙的升高,提示MLB对血管平滑肌细胞内钙的影响可能与抑制细胞内钙释放和电压依赖性钙通道有关.
作者：田霞；王逸平 刊期： 2006年第03期
目的建立特异性表达以Kir6.x和SUR亚单位组成的不同KATP通道亚型的细胞模型,研究KATP通道开放剂埃他卡林对KATP通道亚型的选择性作用特点.方法利用脂质体转染的方法将编码KATP通道亚单位Kir6.x-pcDNA3、SUR-pcDNA3基因和编码绿色荧光蛋白pEGFP-N1基因共同转染到HEK-293细胞中,免疫组化法鉴定细胞上Kir6.x和SUR蛋白的表达,并采用膜片钳全细胞记录技术,以KATP通道特异性激动剂吡那地尔和二氮嗪为对照,分析埃他卡林对特定刺激条件下对Kir6.x和SUR共同转染的细胞上诱发的钾电流的影响,并观察KATP通道特异性拮抗剂格列苯脲的阻断作用.结果在共同转入KATP通道两亚单位基因的HEK-293细胞上,有Kir6.x和SUR蛋白的表达.在共同表达Kir6.1/SUR2B的细胞上,埃他卡林(100 μmol·L-1)、吡那地尔(100 μmol·L-1)及二氮嗪(200 μmol·L-1)均具有增强诱发电流的效应,给药前后-100 mV时电流值由(-88.0±30.8) pA 分别增至(-2042.6±127.3) pA,(-1431.9±142.4) pA 及(-1104.7±228.9) pA,三者的作用均能被格列苯脲所阻断.相同条件下,在共同表达Kir6.2/SUR2A的细胞上,埃他卡林和吡那地尔能增强诱发电流,此作用对格列苯脲敏感;而二氮嗪对该电流无影响.相反,在共同表达Kir6.2/SUR1的细胞上,二氮嗪能增强诱发电流,此作用对格列苯脲敏感;而埃他卡林和吡那地尔对该电流无影响.结论不同结构钾通道开放剂对不同亚型KATP通道作用不同,埃他卡林与吡那地尔作用相似,能选择性作用于Kir6.1/SUR2B和Kir6.2/SUR2A型KATP通道,对Kir6.2/SUR1型无影响.
作者：陈玉萍；崔文玉；汪海 刊期： 2006年第03期
目的建立适合于临床发病机制研究和药物筛选的动物子宫肌瘤模型.方法取性成熟豚鼠,双侧摘除卵巢,以不同频率给予不同剂量雌激素(E2)诱导,使之形成子宫肌瘤,并于不同时间卒死动物,观察子宫形态的变化,计算成瘤率,并与人子宫肌瘤病理组织学特征相比较,确定E2诱导子宫肌瘤形成的佳剂量、给药频率和实验周期.同时测定血清中雌(E2)、孕激素(P)浓度及组织中雌、孕激素受体(ER、PR)的表达.结果皮下注射E2 100 μg/只,2次/wk,连续12 wk后,豚鼠子宫明显变形,肌层增生,肉眼可见浆膜下肌瘤或肌壁间瘤形成,并伴有继发性改变.病理组织学检查结果显示,肌瘤细胞呈长梭形,编织状或栅状排列,细胞核呈短棒状或卵圆形,显示明显的子宫肌瘤特征,与人子宫肌瘤病理组织学特征相似.血清E2浓度升高,组织中雌、孕激素受体表达明显增强.结论双侧摘除卵巢的豚鼠皮下注射E2 100 μg/只,2次/wk,连续12 wk后可建立与人类相似的动物子宫肌瘤模型,适合用于临床发病机制研究和药物筛选.
作者：朱焰；邱小燕；吴建辉；赵志芳；何桂林；刘桂明；蒋秀蓉；孙祖越；曹霖 刊期： 2006年第03期
目的探讨丹参注射液联合自杀基因系统对大鼠肝癌细胞和小鼠移植瘤的作用.方法①丹参注射液以不同浓度与GCV分别或共同作用于大鼠肝癌CBRH7919的tk-细胞,以及含5%tk+的tk+、tk-混合细胞,MTT法检测各组存活率,用Q值(实测药效与理论药效的比值)分析中药与自杀基因系统联合的相互作用是否有协同性,0.85≤Q<1.15为相加;Q≥1.15为协同.②把小鼠肝癌细胞H22/tk(tk+)与H22(tk-)细胞按1:4混合,再按2×106细胞/只接种到Balb/c纯系小鼠腋下皮下组织内,随机分为模型组、丹参(注射液)组、tk/GCV组、tk/GCV联合丹参注射液治疗的联合组,n=9～11;中药治疗从d 2起共15 d,自杀基因系统治疗从长出肿瘤后开始共10 d,进行疗效观察.结果①各组存活率tk/GCV组为63.10%±2.17%,GCV组为67.03%±2.81%,5 ml·L-1丹参联合tk/GCV组为26.67%±4.23%(Q=1.22),5 ml·L-1丹参+GCV组为42.17%±5.36%(Q=1.04);10 ml·L-1丹参联合tk/GCV组为18.10%±5.56%(Q=1.26),10 ml·L-1丹参+GCV组为33.84%±9.84%(Q=1.06).②接种后各组均在d 7触摸到肿瘤,成瘤率100%.联合组在治疗后肿瘤生长呈现明显抑制,终肿瘤体积(1.53±0.88) cm3,比模型组(3.19±1.76) cm3减少52.01%(P<0.05);肿瘤质量(1.32±0.80) g,比模型组(2.28±1.20) g减少42.11% (P<0.05),差异有统计学意义.丹参组、tk/GCV组肿瘤体积、瘤块质量与模型组比较差异均无统计学意义.结论丹参注射液能提高自杀基因系统对大鼠肝癌细胞的杀伤力和对小鼠肝癌细胞移植瘤的抑制作用,两者联合作用的协同性提示丹参注射液能增强自杀基因旁观者效应.
作者：谭宇蕙；吴映雅；王慧峰；岳文玲；杜标炎 刊期： 2006年第03期
目的探讨老龄大鼠海马结构trkB mRNA表达的变化,同时对比观察人参皂苷对其改变的影响,为人参皂苷抗脑衰老及提高老龄动物学习记忆能力提供可靠的实验依据.方法选用Wistar♀大鼠24只,随机分为青年组、老龄组、给药组(从第17个月始饲以人参皂苷至27个月龄).用原位杂交组化方法(ISH)结合图像分析技术对海马结构TrkB mRNA进行定性、定量分析. 结果老龄组CA3、CA1区及齿状回神经元TrkB mRNA表达明显下调,含量分别比青年组下降了24.2%、13.4%和50.6% (P<0.01);给药组CA3区和齿状回TrkB mRNA表达上调,含量分别比老龄组增加了12.7%(P<0.05)和17.9%(P<0.01),但给药组CA1区表达改变不明显(P>0.05). 结论 老龄大鼠海马结构3个脑区的TrkB mRNA表达明显下调,而人参皂苷具有上调CA3区和齿状回TrkB mRNA表达的作用.
作者：赖红；赵海花；曾亮；杨吉平；方欣；吕永利 刊期： 2006年第03期
高脂饮食是2型糖尿病及胰岛素抵抗综合征发病的重要环境因素,以高脂饲料诱发实验动物产生胰岛素抵抗,建立稳定可靠而且经济实用的动物模型,成为2型糖尿病及胰岛素抵抗相关研究的重要内容.高脂饲料是否成功地诱发实验动物产生胰岛素抵抗,与饲料脂肪构成,高脂饲料的加工方式,动物摄入总热量,动物模型形成时间,实验动物品系、性别差异以及有无化学物质辅助诱导等诸多因素有关.
作者：田爱平；郭赛珊；申竹芳 刊期： 2006年第03期
目的制备姜黄素前体药物,使其在肿瘤细胞内高选择性活化,为进一步开展肿瘤靶向性化疗奠定基础.方法以姜黄素分子结构为基础,化学合成N-马来酰-L-缬氨酸酯姜黄素、N-马来酰-甘氨酸酯姜黄素,红外光谱法进行鉴定;MTT比色分析法比较两种姜黄素前体药物作用6～24 h后,人膀胱癌EJ细胞及肾小管上皮HKC细胞生长抑制的差异.结果 20～ 40 μmol·L-1的N-马来酰-L-缬氨酸酯姜黄素、N-马来酰-甘氨酸酯姜黄素作用6～24 h后,EJ细胞生长抑制率分别为6.71%～65.13%(P<0.05)、10.96%～73.01%(P<0.05),呈浓度、时间依赖性.与同浓度姜黄素比较,两种前体药物对HKC细胞生长的抑制作用均降低(P<0.01).结论本研究成功的合成了两种姜黄素的前体药物,N-马来酰-L-缬氨酸酯姜黄素、N-马来酰-甘氨酸酯姜黄素;二者均能体外抑制人膀胱癌EJ细胞增殖,其对人肾小管上皮HKC细胞的抑制毒性作用低于姜黄素.
作者：陆鹏；童强松；姜凤超；陈方敏；郑丽端；张胜民；曾甫清；董继华 刊期： 2006年第03期
目的在动物模型上研究皮内注药对内脏炎症痛的抗伤害作用及对其机制进行初步探讨.方法大鼠乙状结肠壁粘膜下定量注射福尔马林(5%,0.1 ml)制作急性内脏炎症痛模型,观察大鼠行为学表现并进行评分.分别在实验区(直肠、乙状结肠相应的脊神经体表分布区)及实验区外(远离直肠、乙状结肠相应的脊神经体表分布区)皮内多点注射0.125 %、0.25 %利多卡因或生理盐水,进行疼痛学评分;在利多卡因皮内注射组,采用高效液相色谱法测定血浆利多卡因浓度. 结果福尔马林注射组同皮内注药组在第一个时间段内疼痛分数差异无显著性(P>0.05).在实验区皮内注射0.25 %利多卡因和生理盐水均能减轻内脏痛反应(P<0.01),而0.125%利多卡因皮内注射对疼痛分数同福尔马林致炎组相比差异无显著性(P>0.05);在实验区外唯有0.25%利多卡因皮内注射有抗伤害效应.皮内注射0.25%利多卡因的血浆浓度高于0.125%利多卡因组(P<0.01).结论在内脏致痛器官的脊神经体表分布区皮内注射可降低动物的痛行为学评分,其作用可能与药物经皮内吸收入血和局部刺激激活末梢感受器有关.
作者：王梅芳；曾因明；朱珊珊 刊期： 2006年第03期
目的观察非选择性一氧化氮合酶抑制剂L-硝基精氨酸(L-NA)对大鼠局灶性脑缺血诱导的神经元凋亡的影响,探讨L-NA对脑缺血的保护作用及其机制.方法健康♂SD大鼠,体重250～300 g,随机分为假手术组(SH组)、缺血组(IS组)、L-NA治疗组(L-NA组).IS和L-NA组按缺血后时间分为3个亚组:2 、6、12 h.每组6只大鼠.L-NA组每次按20 mg·kg-1,ip给药,每日2次,连续3 d.IS组给等容量的生理盐水.插线法制备大鼠大脑中动脉阻断模型.采用流式细胞仪(FCM)检测脑组织细胞凋亡率、Western blot法和免疫组化法检测caspase-3蛋白的表达、FCM和免疫组化法检测bcl-2和Bax蛋白的表达.结果大鼠脑缺血后,细胞凋亡率、caspase-3和Bax蛋白表达明显升高,bcl-2蛋白表达无差异,bcl-2/Bax降低,缺血12 h治疗3 d时,L-NA组中细胞凋亡率、caspase-3和Bax蛋白表达低于相应的IS组,bcl-2蛋白表达、bcl-2/Bax高于IS组,缺血2,6 h治疗3 d L-NA组中细胞凋亡率、caspase-3、bcl-2、Bax蛋白表达和bcl-2 /Bax与IS组比差异无显著.结论缺血后期应用L-NA对脑缺血有治疗作用,与降低caspase-3、增加bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白表达、调节bcl-2蛋白/Bax蛋白平衡有关.
作者：张建新；张会欣；李兰芳；李永辉 刊期： 2006年第03期
目的血管内皮细胞生长抑制因子(Vascular endothelial cell growth inhibitor,VEGI)是近年来发现的一类TNF家族新成员,具有抑制内皮细胞增殖与新生血管生成的作用.但目前其结构功能关系研究尚为空白,该文研究VEGI空间结构上重要残基的作用极其对生物活性的影响.方法采用定点突变技术突变了四个关键氨基酸E45R,G47A,Y111F,Y111T,构建了表达载体并在大肠肝菌中表达及纯化,采用人脐静脉内皮细胞增殖和鸡胚尿囊膜血管生成实验研究了四个突变体的活性.结果 E45R突变体的活性显著下降,G47A突变体的活性略低于野生型VEGI,Y111F,Y111T突变体的活性比野生型VEGI下降10倍以上.结论 VEGI的第111位氨基酸Y是发挥其功能的关键氨基酸,可能与受体形成直接结合,且氨基酸Y上的苯环与酚羟基均对其活性的发挥具重要作用;第45位氨基酸E对其活性的发挥也具重要作用,而第47氨基酸对其活性的发挥可能不具重要作用.
作者：张珉；姚静娟；潘欣；潘卫；戚中田 刊期： 2006年第03期
维甲酸及衍生物的抗肿瘤作用已在白血病及多种实体肿瘤的临床治疗及实验室研究中显示出其诱人前景.其中,较引人注目的是一系列新的维甲酸衍生物,如CD437,ST1926,MM002等.这些新发现的维甲酸衍生物较目前临床应用较广的全反式维甲酸(ARTA)有更强的凋亡诱导作用,更低的细胞毒性和更理想的药物代谢动力学指标,诱导凋亡途径也不同于传统维甲酸类药物作用依赖p53激活的途径.其作用的分子机制也完全有别于目前已知的化疗药物,可诱导对维甲酸和其它多种化疗药物耐药的肿瘤细胞发生凋亡.该文对目前维甲酸衍生物在肿瘤细胞中的凋亡诱导作用研究作一综述.
作者：梁斌；宋旭红；黄东阳 刊期： 2006年第03期
目的观察κ阿片受体激动剂U50488H对大鼠血压的影响并探讨其作用机制.方法监测正常大鼠心率(HR)、动脉压(ABP)、左心室内压(LVP)及左室的收缩(+dp/dtmax)和舒张功能(-dp/dtmax)等血流动力学指标和尿量的变化;分离正常大鼠腹主动脉,测定血管张力的变化.结果在整体水平,静脉注射U50488H可降低大鼠HR、ABP、LVP及±dp/dtmax;而且可增加大鼠的尿量.在离体水平,U50488H对大鼠腹主动脉具有明显的剂量依赖性舒张作用;以上效应均可被选择性κ阿片受体阻断剂nor-BNI所阻断.结论激动κ阿片受体可引起降压作用,抑制心肌收缩力、舒张血管和利尿是其降压的主要机制.
作者：郭海涛；槐勇；王跃民；毕辉；裴建明 刊期： 2006年第03期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
