学术投稿

褪黑素抑制肝星状细胞增殖的机制研究

谢园园;洪汝涛;汪玉荣

关键词:肝纤维化, 褪黑素, 肝星状细胞, 转化生长因子-β
摘要:目的 通过转化生长因子-β1(TGF-β1)激活肝星状细胞系(HSC-T6),探讨褪黑素对活化的肝星状细胞系HSC-T6的抑制作用及相关机制.方法 肝星状细胞被分为5组,分别为:对照组、模型组和3个不同剂量实验组,培养24h贴壁后换用无血清培养基,除对照组外均加入TGF-β1,在实验组加入不同浓度的褪黑素,培养48 h后,通过MTF实验检测褪黑素对肝星状细胞增殖的影响,通过细胞免疫组化方法检测褪黑素对肝星状细胞中Smad蛋白表达的影响.结果 与模型组相比,实验组中肝星状细胞的增殖明显被抑制(P<0.05);TGF-β1能明显刺激肝星状细胞中Smad2/3和p-Smad2/3的表达(P<0.叭),与模型组比较,实验组可以明显抑制Smad2/3和p-Smad2/3的表达(P<0.05).结论 褪黑素可显著抑制肝星状细胞的增殖,其作用机制可能与抑制TGF-β1/ Smad信号通路相关.
安徽医科大学学报杂志相关文献
  • miR-21诱导犬BMSCs骨向分化的体外实验研究

    目的 体外研究检测miR-21诱导拉布拉多犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用.方法 构建LentimiR-21-Luciferase与Lenti-LacZ-Luciferase慢病毒载体,分别转染犬BMSCs,将研究分为miR-21组与LacZ组.利用体外细胞划痕实验来比较转染后BMSCs的爬行迁移能力.在转染后的第0、1、4、7、14天分别提取miR-21组与LacZ组BM-SCs的mRNAs和蛋白.通过Real time-PCR技术和Westernblot检测成骨分化关键因子骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)的表达.结果 Lenti-miR-21-Luciferase与Lenti-LacZ-Luciferase慢病毒载体成功转入BMSCs后,miR-21组的BMSCs细胞爬行迁移能力显著增强(P<0.001);Real time-PCR和Western blot结果显示,miR-21可以显著上调BMSCs成骨分化关键因子OCN和OPN的表达(P<0.05).结论 miR-21可以显著促进BMSCs的成骨分化,为进一步的体内实验奠定基础.

    作者:王颖;张雷;周咏;张凯;王元银;何家才;邹多宏 刊期: 2017年第09期

  • 动脉粥样硬化中Toll样受体3上调β型干扰素的表达

    目的 观察动脉粥样硬化病变中Toll样受体3(TLR3)与β型干扰素(IFN-β)表达的关系及影响.方法 下肢动脉硬化性闭塞症(ASO)患者20例,健康对照组20例,通过流式细胞术检测外周血单核细胞TLR3及IFN-β的表达.高脂饮食喂养ApoE(-/-)小鼠,实验组使用聚肌胞苷酸Poly(I:C)腹腔注射,对照组注射等剂量生理盐水.两日注射一次,经10周后,生化分析仪检测血浆中低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油、总胆固醇、葡萄糖(Glu)水平,ELISA法检测血浆及动脉中TLR3、干扰素调节因子3(IRF3)、IFN-β及白介素-1β(IL-1β)水平.结果 下肢ASO患者外周血单核细胞TLR3及IFN-β在ASO组的表达阳性率均显著高于对照组;ApoE(-/-)小鼠中,实验组血浆中Glu水平较对照组显著降低;实验组血浆及动脉中TLR3、IRF3、IFN-β水平较对照组显著增加,IL-1β水平较对照组显著降低.结论 动脉粥样硬化病变中TLR3表达的增加诱导IFN-β,并通过下调IL-1β水平达到抗动脉粥样硬化的作用.

    作者:万立松;胡何节;方征东;王晓天;孙小杰;葛新宝;程灿 刊期: 2017年第09期

  • 间歇性低氧对离体小鼠胸主动脉舒张功能的影响

    目的 研究不同时间的间歇性低氧对离体小鼠胸主动脉舒张功能的影响.方法 将离体的胸主动脉分为对照组和间歇性低氧组(IH组),分别放入正常培养箱和IH培养箱内培养.应用血管张力测定技术,观察间歇性低氧6、12、24 h对离体培养的小鼠胸主动脉舒张功能的影响.结果 与对照组相比,间歇性低氧6h的血管内皮舒张功能差异无统计学意义;间歇性低氧12 h和24 h的血管内皮依赖性舒张明显减弱(P<0.01),内皮非依赖性舒张低浓度(1 ~10nmol/L)表现减弱,增大硝普钠浓度,内皮非依赖性舒张差异无统计学意义.结论 长时间间歇性低氧培养血管可以使离体血管内皮功能紊乱和血管平滑肌受损.

    作者:程文慧;范一菲;沈帆;沈兵;钟明奎 刊期: 2017年第09期

  • CBCT分析上颌后牙根折对上颌窦底黏膜的影响

    应用锥形束CT(CBCT)分析上颌后牙根折对上颌窦黏膜的影响,并对上颌窦黏膜炎症反应进行相关性研究.随机选取经CBCT扫描并诊断为一侧根折另一侧无症状的患者50例为实验组,对窦底黏膜厚度,根尖到上颌窦底的距离进行测量,并对数据进行统计学分析.实验组患者根折侧上颌窦黏膜存在增厚改变的发生率为88%,对照侧为2%,差异有统计学意义(P<0.05).在实验组中,根折伴根尖周炎组、根折伴牙周炎组、无其他症状根折组的黏膜厚度,差异无统计学意义.根折患者上颌窦底黏膜容易发生增厚样改变.根折后常伴有根尖周炎、牙周炎等症状,但不同临床症状对上颌窦黏膜厚度影响无差异性.根折牙根距上颌窦底越近,可能更容易对上颌窦黏膜产生影响.

    作者:焦连龙;闫波;王琦;王树斌;刘学军;刘孟哲;肖尧;曹选平 刊期: 2017年第09期

  • DNMT3A与CTGF在AAC致大鼠心肌纤维化中的表达及相关性研究

    目的 探讨经腹主动脉缩窄(AAC)导致大鼠心肌纤维化中DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)与结缔组织生长因子(CTGF)的表达及相关性.方法 将60只8周龄雄性SD大鼠随机分为模型组及对照组.模型组行AAC术,对照组行假手术,术后2周处死大鼠获取血液标本,并取心脏.同时测定心重指数,采用ELISA法测量Ⅰ型胶原和CTGF在心肌组织匀浆中的含量,HE和Masson染色法观察心肌组织病理学改变;Western blot法测定DNMT3A和CTGF的表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠的心重指数显著上升,且心肌组织中Ⅰ型胶原和CTGF的含量明显增加;HE和Masson染色显示,模型组心肌组织呈现明显的胶原沉积;Western blot检测表明模型组DNMT3A、CTGF的含量水平明显高于对照组;DNMT3A和CTGF在大鼠心肌纤维化组织中的表达呈正相关性(r--0.64,P<0.01).结论 DNMT3A参与心肌纤维化的形成过程,并在其中起到一定的促进作用,可能与CTGF的升高有一定的相关性.

    作者:杨健康;石开虎;陶辉;代晨;秦润禾;占红英 刊期: 2017年第09期

  • 不同扳机方案在卵巢储备功能减退患者中的应用

    目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)以及两者联合扳机方案在卵巢储备功能减退(DOR)患者中的应用效果.方法 回顾性分析和比较DOR患者微刺激方案912例和人工黄体期方案390例中采用GnRH-a、hCG以及两者联合双扳机的临床效果.结果 微刺激方案和人工黄体期方案中,hCG扳机组与双扳机组间获卵数差异均无统计学意义,但均高于GnRH-a组.微刺激方案中,hCG扳机组的受精率显著低于GnRH-a及双扳机组;人工黄体期方案中,hCG及GnRH-a扳机组的受精率显著低于双扳机组(P <0.017);两种方案中,hCG联合GnRH-a扳机组的优质胚胎率均显著高于hCG扳机组和GnRH-a扳机组(P<0.017);两种促排方案双扳机组的临床妊娠率均高于GnRH-a扳机组和hCG扳机组,但差异无统计学意义.结论 DOR患者的微刺激和人工黄体期方案中,hCG联合GnRH-a双扳机方案优于单纯hCG和GnRH-a扳机,可获得更多的卵母细胞和优质胚胎,改善临床妊娠率.

    作者:张雨;刘雨生;张娱;栾红兵;卢芳汀 刊期: 2017年第09期

  • 左侧卧位下右支气管封堵器定位的应用

    选取电视胸腔镜下右进胸食管癌根治术患者40例,随机分为平卧位组(S组)和左侧卧位组(L组),每组20例.两组患者均在麻醉诱导后插入气管导管,然后在纤维支气管镜引导下置入右侧支气管封堵器.S组患者处于平卧位时由纤维支气管镜引导置手并定位,L组患者在左侧卧位时由纤维支气管镜引导下置入并定位.观察比较两组患者支气管封堵器移位情况、纤维支气管镜使用次数以及肺萎陷满意率.S组侧卧位封堵器移位次数以及平卧位时需用纤维支气管镜的次数较L组明显增多,而肺萎陷满意率两组相比差异无统计学意义.左侧卧位下纤维支气管镜引导右侧主支气管置入支气管封堵器,其具有减少侧卧位移位发生和减少纤维支气管镜的使用次数等优点,值得推荐于临床实践.

    作者:钱梅;李元海;宗志军 刊期: 2017年第09期

  • 小型猪非体外循环冠状动脉旁路移植模型的建立

    选取12头巴马小型猪,取下10 ~ 15 cm自体大隐静脉,远心端与主动脉端侧吻合,近心端与冠脉前降支中远段端侧吻合,存活4周,观察术中血流动力学及内环境的稳定性,观察术后4周的静脉桥内膜、中膜增生情况.12头小型猪经过试验后有11头存活,术中血流动力学稳定,内环境稳定,术后4周静脉桥内膜及中膜增生明显.自体大隐静脉远心端吻合至主动脉或左锁骨下动脉,近心端吻合至冠脉前降支中远段的小型猪冠脉旁路移植模型方法确实有效,具有可重复性及可操作性.

    作者:郑远彪;张锐;韦俊;彭素云;许盼盼;葛建军 刊期: 2017年第09期

  • 16型人乳头瘤病毒E5基因对永生化口腔上皮细胞EGFR、p21、p53和Rb基因表达的影响

    目的 分析16型人乳头瘤病毒E5基因(HPV 16 E5)对永生化口腔上皮细胞(HIOEC)肿瘤相关基因表皮生长因子受体(EGFR)、p21、p53和Rb表达的影响,探究HPV16 E5在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中的潜在作用机制.方法 将含有目的基因HPV16 E5的慢病毒载体pLOV-E5及对照病毒载体pLOV-N分别转染HIOEC细胞,并筛选出各自稳定转染的细胞株.RT-qPCR和Western blot法分别检测EGFR、p21、p53和Rb基因mRNA和蛋白表达水平的变化.MTT法分析HPV 16 E5对HIOEC细胞增殖活性的影响.结果 pLOV-E5转染的HIOEC细胞中,p21和p53的mRNA转录水平较对照组显著提高(P=0.00、0.02),但EGFR的mR-NA转录水平较对照组无明显变化;EGFR、p21和p53的蛋白表达水平较对照组均显著提高,Rb基因的mRNA和蛋白表达水平较对照组均无明显变化.MTT法检测结果表明,pLOV-E5转染HIOEC的增殖活力较对照组显著提高(P=0.00).结论 HPV16 E5可以促进HIOEC的增殖,同时上调EGFR、p21和p53在HIOEC中的表达水平.

    作者:李迪;江彤;陈传俊 刊期: 2017年第09期

  • 产科联合ICU救治232例危重孕产妇的资料分析

    目的 为探讨入住重症监护病房(ICU)孕产妇的临床特点及母儿预后.方法 对ICU的孕产妇的临床资料进行回顾性分析.根据入住ICU原因不同分为产科原因组及非产科原因组,比较两组间一般临床资料和母儿预后的差别.结果 232例患者正规产检的仅占34.5%.院内死亡7例.入住ICU的孕产妇疾病前3位的是:①妊娠期高血压疾病及相关并发症;②妊娠合并心脏病;③产后即时出血.232例产科患者中,产科原因组131例,占56.5%;非产科原因组101例,占43.5%.产科原因组的平均孕周明显小于非产科原因组(P <0.001).产科原因组的平均产后24 h出血量、子宫切除率、失血性休克发生率均明显高于非产科原因组(P<0.001).结论 为提高对危重孕产妇的诊治能力,产科医师需进一步加强重症监护的知识学习.建立专门的产科ICU,由同时具备产科及ICU知识的医师管理此类患者,必将是未来的一个发展趋势.

    作者:赵保静;杨媛媛;丛林 刊期: 2017年第09期

  • HIF-1α介导BMSCs复合PLGA修复大鼠颅骨标准骨缺损的研究

    目的 构建低氧诱导因子(HIF)-1α介导骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)支架材料血管化组织工程骨,观察其在大鼠颅骨标准骨缺损中的修复效果.方法 将目的基因HIF-1 α转染至BMSCs后,与支架材料PLGA复合,修复SD大鼠颅骨双侧直径5 mm的标准骨缺损(n=18),随机分为3组:实验组植入HIF-1 α-BM-SCs/PLGA复合体(n=6),对照组植入BMSCs/PLGA复合体(n=6),材料组仅植入PLGA支架材料(n=6).术后8周处死大鼠取材,分别行大体观察、X线片检查和HE染色观察缺损区骨形成情况.结果 大体观察、X线片检查和HE染色均显示实验组缺损区新骨形成量明显大于对照组及材料组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 体内研究表明HIF-1α能够介导BMSCs促进骨组织形成,PLGA是理想的支架材料,用其构建的血管化工程骨能够有效修复骨缺损.

    作者:朱艳秋;王默涵;周咏;许敏;何家才 刊期: 2017年第09期

  • 大鼠ALPPS术后残肝再生与Wnt2蛋白表达关系的研究

    目的 探讨大鼠联合肝脏分割和门静脉结扎分阶段肝切除术(A LPPS)后残余肝再生Wnt2蛋白的表达变化,进一步了解肝再生过程中的分子机制.方法 选取200 ~ 240g健康SD雄性大鼠40只,随机分为ALPPS组和假手术(Sham)组;Sham组仅游离出门静脉各分支,不结扎即关腹;ALPPS组行大鼠肝左外叶、左中叶、右叶门静脉分支结扎,切除尾状叶,保留肝右中叶分支,并行肝中叶实质离断.分别于术后1、2、4、7d处死5只大鼠,称取大鼠肝右中叶重量,计算肝再生率;光学显微镜下观察肝右中叶细胞的形态学变化,免疫组化法检测肝右中叶Ki-67和Wnt2蛋白表达变化,并进行统计分析.结果 ①ALPPS术后保留侧肝脏开始再生,第2天肝再生率升高快,随后肝再生率升高速度逐渐降低,第7天与Sham组相比肝再生率升高速度两者相近;②ALPPS术后Ki-67与Sham组比较,第1天开始升高,第2天达到高,此后逐渐降低,第7天有少量阳性细胞,与Sham组相比差异无统计学意义;③Wnt2阳性表达主要在中央静脉周围,可能与肝干细胞的产生相关;与Sham组相比,肝右中叶Wnt2蛋白在ALPPS术后第1天即开始升高,第2天达到高,然后逐渐降低,第7天时仅有少量表达,与Sham组相比差异无统计学意义;④大鼠肝脏ALPPS术后Wnt2的表达与术后Ki-67的表达呈正相关性.结论 Wnt2在ALPPS术后肝脏再生及肝干细胞表达过程中起重要的调控作用.

    作者:刘伟伟;余锋;刘洪;李福利;柏杨;罗昆仑 刊期: 2017年第09期

  • 重度稳定期慢性阻塞性肺疾病患者心理理论障碍的研究

    目的 研究重度稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的心理理论(ToM)障碍.方法 选择40例重度稳定期COPD患者(COPD组)以及29例同期年龄、文化水平相匹配的健康体检者(对照组),进行简明精神状态量表、汉密顿焦虑量表、汉密顿抑郁量表、失言察觉和眼区基本情绪识别测试,COPD组同时予以动脉血气分析、肺功能检查,收集两组间一般资料、测试结果并对比分析.结果 COPD组与对照组在失言识别和心理状态判断正确性评分方面差异均有统计学意义(P<0.05).COPD组与对照组在厌、恐、悲、惊、怒的眼区情绪测试正确性评分差异均有统计学意义(P<0.05);喜的评分差异无统计学意义.Pearson相关分析显示,动脉血PaCO2和Pa02、氧合指数(Pa02/FiO2)、气流受限严重程度分级与眼区基本情绪识别及失言察觉任务评分差异均无统计学意义.结论 重度稳定期COPD患者存在ToM障碍,主要表现在失言识别、心理状态判断以及眼区基本情绪(厌、恐、悲、惊、怒)正确性识别的障碍.

    作者:董琳;桂淑玉;张欣欣;杨万春;汪凯;汪渊;王娟 刊期: 2017年第09期

  • MDCTE评分评价克罗恩病活度的临床应用

    收集临床确诊并行CT小肠检查的活动期克罗恩病患者50例.回顾性分析患者的CT表现,将患者的CT所见赋予一定的分值并进行综合评分,根据活动度指数将患者分为轻度活动期、中度活动期和明显活动期,比较CT评分与患者的活动度指数之间的相关性,结果显示CT评分与患者活动度明显相关(r=0.825,P<0.001).表明多排CT小肠成像评分可以用于临床评估克罗恩病患者的活动度..

    作者:吴兴旺;王侠;胡静 刊期: 2017年第09期

  • 结核杆菌耐热抗原对A549细胞分泌SP-B和凋亡的影响

    目的 探讨结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)刺激诱导人肺腺癌细胞系(A549)细胞后对其肺泡表面活性物质相关蛋白B(SP-B)的分泌和凋亡的影响.方法 用不同浓度的Mtb-HAg分别刺激诱导A549细胞,相同条件分别培养24、48 h,同时设置空白对照组(对照组1和对照组2)和阳性对照组[脂多糖(LPS)组和姜黄素组].运用ELISA法检测对照组1、LPS组和实验组1(2、3μg/ml Mtb-HAg分别诱导A549细胞培养24 h和48 h)培养上清液中的SP-B表达量;使用实时荧光定量PCR法检测对照组1、LPS组和实验组1中基因SFTPB的相对表达量;采用流式细胞技术检测对照组2、姜黄素组和实验组2(2、3 μg/ml Mtb-HAg分别诱导A549细胞培养24 h)中A549细胞的凋亡率.结果 刺激诱导相同时间,实验组1的SP-B表达量低于对照组1,差异有统计学意义(P <0.05);相同浓度刺激诱导随时间的延长,实验组1中SP-B表达量降低的不显著.相同培养时间,随着Mtb-HAg浓度的增加实验组1表达SP-B的基因SFTPB的相对表达量显著低于对照组1,差异有统计学意义(P<0.05);而在相同有效刺激浓度下,其相对表达量随作用时间变化不显著.姜黄素组和实验组2中的A549细胞凋亡率显著高于对照组2(P <0.05).结论 Mtb-HAg对A549细胞表达SP-B的抑制作用明显,并能诱导A549细胞发生凋亡.

    作者:孙志晓;沙泉 刊期: 2017年第09期

  • 老年患者远端缺血再灌注损伤对术后认知功能障碍发生率的影响

    目的 比较老年患者膝关节置换术后的认知功能障碍(POCD)发生率,探讨血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和S100β蛋白水平与POCD发生率的相关性.方法 40例60岁以上老年患者行择期膝关节置换手术,按阻断血流时间长短分为2组,包括限时阻断组(从截骨开始到假体安装结束,G1组)和全程阻断组(手术全程阻断血流,G2组).于术前1d和术后第4天检测患者血清中NSE、TNF-α及S100β蛋白水平.参照Murkin JM推荐的神经心理学测评方法,以及Z值计算公式,计算术后患者POCD的发生率.结果 术后第4天G2组血清NSE、TNF-α和S100β蛋白水平明显高于G1组(P<0.05).神经心理学测评结果显示,G1和G2组的POCD的发生率分别为10%和25%,G2组POCD的发生率明显高于G1组.相关性分析结果显示,G2组的POCD发生率与血清NSE、TNF-α及S100β水平具有相关性(P<0.05).结论 远端长时间缺血损伤可增加老年患者术后POCD的发生率,其发生率与血清NSE、TNF-α及S100β水平具有相关性.

    作者:王义桥;刘德宝;高培;李元海 刊期: 2017年第09期

  • 巨大左心室心瓣膜置换术后近中期的疗效以及危险因素分析

    目的 观察巨大左心室患者行心脏瓣膜置换手术后近中期的手术疗效以及探讨影响其预后的相关危险因素.方法 回顾性分析82例心瓣膜病合并巨大左心室患者行心瓣膜置换术的临床资料,比较术前术后近中期的心脏大小以及心脏功能的改变,并探讨影响其预后的相关危险因素.结果 术后近中期左心房内径、左心室舒张期末内径、左心室收缩期内径(LVESD)均较术前减小,差异有统计学意义(P<0.05),而术后左心室射血分数值、左心室缩短率值与术前比较差异无统计学意义,术后心功能分级(NYHA)与术前比较差异有统计学意义(P<0.05);影响患者预后的相关危险因素有术前LVESD值>6.0 cm、心功能NYHA分级在Ⅳ级、术后未使用血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)类药物或者β-受体阻滞剂(P<0.05).结论 心瓣膜病合并巨大左心室患者行心瓣膜置换术后围手术期死亡率低,且术后近中期心脏的形态大小发生了明显的逆重构过程,心功能同样明显改善,手术疗效满意.心功能Ⅳ级、LVESD≥6.0 cm、术后未使用小剂量的ACEI类药物或β-受体阻滞剂是影响预后的主要危险因素.

    作者:汤勇;樊扬名;葛建军 刊期: 2017年第09期

  • TGF-β1对口腔鳞癌相关成纤维细胞FAP表达的影响

    目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对癌相关成纤维细胞(CAFs)中成纤维细胞活化蛋白(FAP)表达的影响.方法 应用10 ng/ml的TGF-β1作用于CAFs细胞,设置正常成纤维细胞(NFs)和未经处理的CAFs细胞作为对照组,采用RT-PCR和Western blot法检测细胞中FAP的蛋白和mRNA表达情况.结果 FAP在NFs中几乎不表达,而在CAFs中FAP的mRNA和蛋白表达均增加.与NFs组和CAFs组相比,10 ng/ml的TGF-β1能够明显促进CAFs细胞分泌FAP,作用12、24 h后FAP mRNA和蛋白的相对表达量差异有统计学意义(P<0.05).且随着作用时间的延长,FAP的表达持续升高,24 h较12 h表达增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β1能够促进CAFs中FAP的表达,在肿瘤上皮-间质交互作用中扮演着重要角色.

    作者:唐婉容;李丽华;喻洁;马莹;刘英 刊期: 2017年第09期

  • 胃癌肿瘤引流淋巴结内Foxp3+调节性T细胞的分布

    采用免疫组织化学方法检测胃癌肿瘤引流淋巴结和第二站淋巴结内调节性T细胞(Treg细胞)的分布和细胞数量.结果显示Foxp3+ Treg细胞弥散地分布于胃癌引流淋巴结的副皮质区和髓质区.胃癌肿瘤引流淋巴结内Treg细胞数明显多于第二站淋巴结(P<0.01),进展期胃癌肿瘤引流淋巴结内Treg细胞数多于早期胃癌(P<0.01).Treg细胞聚集胃癌肿瘤引流淋巴结内可能通过形成免疫耐受环境而促进肿瘤淋巴转移的发生.

    作者:汪礼坤;袁笑;徐阿曼;孟刚;王岳君 刊期: 2017年第09期

  • TLR4表达水平与COPD大鼠肺动脉平滑肌细胞合成分泌功能的关系

    目的 探讨Toll样受体4(TLR4)表达水平与慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)合成分泌功能的关系.方法 建立大鼠COPD模型,HE染色判定模型建立,免疫组织化学染色观察对照组与COPD模型组肺组织动脉平滑肌层TLR4的表达.分离培养鉴定原代PASMCs,脂多糖(LPS)、TLR4的特异性抑制剂TAK-242干预细胞,实验分组:空白组、LPS组、TAK-242组、LPS+ TAK-242组,Western blot检测各组PASMCs中TLR4的表达,ELISA法检测各组细胞培养上清液中Th1细胞因子干扰素(IFN)-γ、Th2细胞因子白介素(IL)-6及血小板衍化生长因子(PDGF)的浓度;并将TLR4的表达水平与上清液中炎性因子的分泌水平进行相关性分析.结果 COPD模型组大鼠肺组织动脉平滑肌层TLR4的表达明显高于正常大鼠;与空白组比较,LPS组PASMCs中TLR4的表达明显升高(P<0.05);LPS组PASMCs中合成分泌IFN-γ、IL-6、PDGF的水平较对照组明显升高,TAK-242阻断TLR4,PASMCs中TLR4的表达明显降低(P<0.05);细胞培养上清液中IFN-γ、IL-6、PDGF的表达水平较空白组明显降低(P<0.05);TLR4表达水平与细胞培养上清液IFN-γ、IL-6及PDGF的浓度呈显著正相关性(r =0.95、0.87、0.83,P <0.05).结论 TLR4可能参与调控PASMCs的合成分泌功能.

    作者:韩旭惠;王昌明;蒋明;黄国锦;杨丹;刘宇娟;王鹏雁 刊期: 2017年第09期

安徽医科大学学报杂志

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